Hemoglobina Yuda: primer caso descrito en España / Hemoglobin Yuda: First case reported in Spain

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Caracterización molecular de la betatalasemia en Lanzarote / Molecular characterization of heterozygous b-thalassemia in Lanzarote, Spain

Fundamento y objetivo: Caracterizar los defectos moleculares y estudiar su distribución en los portadores de betatalasemia de Lanzarote. Pacientes y método: El estudio molecular del gen beta de la globina se llevó a cabo con la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real (RT-PCR LyghtCycler, Roche), PCR con amplificación de alelos específicos (PCR-ARMS) y secuenciación automática del ADN del gen beta de la globina. Resultados: Se incluyó en el estudio a 243 portadores diagnosticados de betatalasemia heterocigota entre julio de 1991 y febrero de 2007. La RT-PCR identificó la lesión molecular en el 81% de los cromosomas [113 codón CD 39 (C * T); 41 IVS-1-nt-110 (G * A), 25 IVS 1-nt-1 (G * A) y 19 IVS 1-nt-6 (T * C)]. Las 12 alteraciones moleculares restantes incluyeron la deleción 619 bp (7,8%) y las mutaciones ­28 (A * G), IVS1-nt-2 (T * G), CD 41/42 (­TTCT), CD 8/9 (+G), CD 51 (­C), CD 22 (G * T), CD 24 (T * A), CD 67 (­TG), además de una nueva mutación CD 20/21-TGGA. Conclusiones: La distribución de las mutaciones de la betatalasemia heterocigota en Lanzarote es similar a la descrita en la zona mediterránea. El aumento de los flujos migratorios a la comunidad canaria puede explicar la presencia de mutaciones no descritas antes en nuestra comunidad

Background and objective: The aim of this study was to determine the molecular defects of heterozygous b thalassaemia and to ascertain their distribution in Lanzarote. Patients and method: Molecular characterization was achieved by real time polymerase chain reaction (RT-PCR LightCycler, Roche), PCR-ARMS (PCR-amplification reaction mutations system) and DNA sequencing on an automated DNA sequencer. Results: Two hundred forty-three heterozygous b thalassaemia carriers were included between July 1991 and February 2007. RT-PCR detected the molecular defect in 81% of the b thalassaemia chromosomes analyzed [113 codon CD 39 (C * T); 41 IVS-1-nt-110 (G * A), 25 IVS 1-nt-1 (G * A) and 19 IVS 1-nt-6 (T * C)]. The remaining 12 molecular defects included the deletion 619 bp (7.8%) and the mutations ­28 (A * G), IVS1-nt-2 (T * G), CD 41/42 (­TTCT), CD 8/9 (+G), CD 51 (­C), CD 22 (G * T) and CD 24 (T * A), CD 67 (­TG) and the novel mutation CD 20/21-TGGA. Conclusions: The distribution of the mutations is similar to that found in the Mediterranean area. The increasing migratory flow received in the Canary Islands may explain the emergence of new mutations not reported before in our area

Hemoglobina Fannin-Lubbock II [b111(G13)Val ->Leu y b119(GH2)Gly -> Asp]: descripción de 4 nuevos casos / Fannin-Lubbock II hemoglobin [b111(G13)Val -> Leu y b119(GH2)Gly -> Asp]: description of 4 new cases

Fundamento y objetivo: El objetivo de este trabajo es la caracterización molecular de 4 nuevos casos de hemoglobina Fannin-Lubbock II, que presenta la sustitución de 2 aminoácidos en la misma cadena beta de globina. Pacientes y método: Se han estudiado 4 casos pertenecientes a 3 familias de raza blanca y origen español. El análisis molecular se realizó con la secuenciación de los productos de amplificación por reacción en cadena de la polimerasa del gen beta. Resultados: El estudio molecular demostró la mutación GTC -> CTC en el codón 111, que determina un cambio de valina por leucina, y la mutación GGC -> GAC en el codón 119, que determina un cambio de glicina por aspártico, ambas en estado heterocigoto. Conclusiones: Hasta la actualidad se han descrito 17 hemoglobinopatías con 2 sustituciones de aminoácidos en la cadena beta de globina. La hemoglobina Fannin-Lubbock II había sido descrita en 5 familias españolas, por lo que la comunicación de estos nuevos casos indica que podría tratarse de una hemoglobinopatía relativamente frecuente y circunscrita a nuestra población

Background and objective: The aim of this work is the molecular description of a 4 new cases of the hemoglobin Fannin-Lubbock II, which presents the substitution of 2 amino acids in the same b globin chain. Patient and method: Four cases belonging to 3 families all of white race and from Spain are studied. The molecular analysis was done with the sequence of the products of amplification for polymerase chain reaction of the b globin gene. Results: The molecular study demonstrated the mutation GTC -> CTC in the codon 111 that determines a change of valine for leucine and the mutation GGC -> GAC in the codon 119 that determines a change of glycine for aspartic acid, both in heterozygote state. Conclusions: Until the present time 17 hemoglobin variants have been described with 2 subs-titutions of amino acids in the b globin chain. The hemoglobin Fannin-Lubbock II had been described in 5 Spanish families; therefore, the communication of these new cases suggests it could be a haemoglobin variant relatively frequent and circumscribed to our population

Timoma e inmunodeficiencia en un niño / Thymoma and immunodeficiency in an infant

Las inmunodeficiencias primarias más frecuentes son las humorales, en las que predominan las deficiencias de anticuerpos, y entre éstas las inmunodeficiencias con timoma son raras. En este trabajo se presenta un paciente masculino de 3 años de edad, sin antecedentes familiares de inmunodeficiencia, que a los 21 días de nacido presentó varicela afebril. A partir de un año de edad comenzó a presentar episodios frecuentes de infecciones de vías respiratorias altas (faringoamigdalitis, rinitis purulenta), y bajas como neumonías, o reacciones alérgicas a las picadas de insectos que se infectaban secundariamente. Los estudios inmunológicos revelaron una disminución de las concentraciones séricas de IgG, IgA, (IgG 7.4 g/l, IgA 0.52 g/l), IgM normal (IgM 1g/l) y niveles elevados de IgE (>200u/ml). El estudio radiológico mostró en el mediastino anterior una masa relacionada con el timo. El paciente recibió tratamiento con factor de transferencia, gammaglobulina y se realizó la timectomia por videotoracoscopía. El estudio histológico evidenció un timoma linfocítico benigno. Los linfocitos T CD2+, CD3+, CD8+ estaban disminuidos en el preoperatorio, mientras que en el post operatorio los linfocitos CD2+, CD4+ estaban disminuidos y los CD8+ aumentados

The most frequent primary immunodeficiency is the humoral, where the deficiency of antibodies prevails; among these, the immunodeficiency with thymoma is rare. In this work, a 3- yearold male is presented, without family antecedents of immunodeficiency, which 21 days after birth presented Chicken pox without fever. In the first year of age, he began to present frequent episodes of infections of the upper and the lower respiratory tract: tonsillitis, purulent rhinitis, and pneumonias. He also presented an allergic reaction to insect bites that became infected secondarily. The immunologic studies revealed a decrease of the seric concentrations of IgG, IgA (IgG 7.4 g/l, IgA 0.52 g/l), normal IgM values (IgM 1 g/l) and high levels of IgE (> 200u/ ml). The amount of CD2+, CD3+ and CD8+ T lymphocytes were diminished pre surgery. After surgery, the levels of CD2+, and CD4+ lymphocytes were diminished and those of CD8+ lymphocytes increased. The radiological study showed an anterior, mediastinal mass related to the thymus. The patient received treatment with transfer factor, gammaglobulin and underwent resection of the thymoma for videothoracoscopy. The histology study evidenced a benign lymphocytic thymoma

Efecto de la fijación en la calidad del ADN: estudio controlado con cinco fijadores / Effect of fixation on DNA quality: controlled study with five fixatives

Antecedentes: Los tejidos fijados y embebidos en parafina son una fuente importante de material para diagnóstico e investigación. La amplificación de ADN desde este tipo de tejidos, mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), es afectada por el tipo de fijador y los tiempos de fijación empleados. Para determinar el parámetro que mejor se adecue a las condiciones de trabajo de nuestro laboratorio de Patología Molecular, evaluamos el efecto de cinco fijadores sobre la calidad del ADN bajo condiciones controladas. Material y Método: Muestras de mucosa gástrica fueron fijadas, embebidas en parafina y luego procesadas para extracción de ADN empleando un protocolo basado en digestión con proteinasa K. La calidad del ADN se evaluó mediante amplificación de tres fragmentos del gen β-globina (268, 536 y 989 pb). Resultados: No observamos mayores diferencias entre fijadores ni tiempos de fijación en la amplificación de ADN de 268 y 536 pb. No obstante, la amplificación del fragmento mayor (981 pb) se vio alterada al aumentar el tiempo de fijación, a excepción de aquellas muestras fijadas en etanol 70% que presentaron una banda de similar intensidad a la obtenida para muestras control (tejido fresco congelado). Conclusiones: Estos resultados nos proporcionan una pauta para el diseño de experimentos de acuerdo a la calidad del material archivado, optimizando recursos humanos e insumos

Background: Fixed and paraffin-embedded tissues from pathological archives are an important source for research. DNA amplification by polymerase chain reaction (PCR) from those materials is affected by fixatives and fixation time. In order to determine the best condition for our laboratory work, we evaluated the effect of five different fixatives on DNA quality under controlled conditions. Material and Method: Gastric mucosa samples from two patients were fixed, embedded in paraffin and then processed for DNA extraction using a routine method based on proteinase K digestion. DNA quality was evaluated by amplifying three Beta-globin gene fragments (268, 536 and 989 bp). Results: We did not observe major differences among fixatives nor fixation times for 268 and 536 bp fragments but the amplification of the greatest fragment was altered by increasing the fixation time, by excepting those samples fixed in 70% ethanol which present a similar band intensity than control samples (snap-frozen tissue). Conclusions: These results give us a good guideline to design experiments considering the quality of our archival material