First evidence for the existence of Simkania negevensis in the genitalia of human females / Primera evidencia de la existencia de Simkania negevensis en los genitales femeninos humanos

Introduction: Simkania negevensis has been linked to some respiratory and non-respiratory diseases. However, there is still a serious lack of clinical investigations that attempt to determine possible body sites that could be inhabited by this microorganism and evaluate its true pathogenic capacity. The goal of this study was to examine the potential presence of Simkania and its prevalence in the genital tract of human adult females. Methods: Lower vaginal swabs from 169 Jordanian adult females who attended Obstetrics and Gynecology clinic were collected and tested for Simkania DNA by PCR method. Results: The presence of bacterial nucleic acids was confirmed in the genital system of adult females with an overall prevalence of 24.26% (41/169). Interestingly, the positivity of Simkania DNA was significantly higher in women of reproductive age than females of non-reproductive age (28.03% versus 10.81%; p≤0.05). Moreover, the presence of S. negevensis was evident in approximately 43% of females suffering from vaginal itching and/or abnormal discharge, exhibiting about two-fold increase in the positivity rate compared to detection rates assessed for women who attended the clinic for routine checkup or menstruation problems. However, the current work failed to find any link between the bacterial agent and spontaneous abortion (miscarriage). Conclusions: This study showed for the first time the presence of S. negevensis in the genitalia of human females. These novel data could provide a basis to clarify the exact role of S. negevensis in the female genitalia and its potential involvement in genital system disorders.(AU)

Introducción: Simkania negevensis se ha asociado a algunas enfermedades respiratorias y no respiratorias. Sin embargo, todavía existe una importante carencia de investigaciones clínicas para intentar determinar posibles lugares del cuerpo que puedan ser colonizados por este microorganismo, y evaluar su auténtica capacidad patogénica. El objetivo de este estudio era examinar la potencial presencia de Simkania y su prevalencia en el tracto genital de mujeres adultas. Métodos: Se recogieron hisopos vaginales de 169 mujeres adultas de Jordania que acudieron a una clínica de obstetricia y ginecología y se analizaron para detectar ADN de Simkania mediante PCR. Resultados: Se confirmó la presencia de ácidos nucleicos bacterianos en el aparato genital femenino adulto, con una prevalencia global del 24,26% (41/169). Una observación interesante fue que la positividad a ADN de Simkania fue significativamente superior en mujeres en edad reproductiva en comparación con las mujeres en edad no reproductiva (28,03 frente al 10,81%; p≤0,05). Además, la presencia de S. negevensis era evidente en aproximadamente el 43% de las mujeres que sufrían picor vaginal y/o flujo vaginal anormal, mostrando un incremento cercano al doble en la tasa de positividad en comparación con las tasas de detección evaluadas para mujeres que acudían a la clínica para revisiones de rutina o por problemas menstruales. Sin embargo, la investigación no logró encontrar una asociación entre el agente bacteriano y el aborto espontáneo (aborto natural). Conclusiones: Este estudio mostró por primera vez la presencia de S. negevensis en los genitales femeninos humanos. Estos nuevos datos pueden sentar una base para clarificar con precisión el papel de S. negevensis en los genitales femeninos humanos y su potencial implicación en trastornos del aparato genital.(AU)

ONCOmicroARNs y sus futuras aplicaciones farmacológicas / OncomicroARNs and their future pharmacological applications

Desde el descubrimiento del dogma central de la Biología Molecular, el ácido ribonucleico (ARN) se postuló como una molécula mensajera, que transmitía la información de la síntesis de proteínas del ADN, en núcleo de la célula, al citoplasma. Sin embargo, trabajos de investigación, han puesto de manifiesto que el ARN también ejerce funciones más allá de la de actuar como mensajero. Así, hoy en día se conoce que existe una gran cantidad de moléculas de ARN no codificantes de proteína que ejercen un papel fundamental en la célula. Los microARNs (miARNs), pertenecen a este ARN no codificante de proteínas y su estudio ha revolucionado nuestro conocimiento sobre la funcionalidad de los ARNs.Los microARNs son moléculas reguladoras de la expresión de génica que colaboran para determinar cuando o donde los genes se traducen a proteína. Como su nombre indica estas moléculas están compuestas por ácidos nucleicos (ARN) y no por proteína, en contraste con los reguladores de la expresión génica previamente conocidos. Debido a su pequeño tamaño (los genes humanos están codificados por miles de nucleótidos y los microARNs por sólo una veintena) y su naturaleza peculiar, los microARNs fueron descubiertos una vez se secuenció el genoma humano .Los microARNs juegan un papel fundamental en el establecimiento de la identidad celular. Componentes de la maquinaria de síntesis de microARNs o microARNs per se, han sido asociados con patologías humanas. Se ha descubierto que los microARNs juegan un papel importante en muchos procesos celulares que están alterados en cáncer como: diferenciación, proliferación y apoptosis. (AU)

Since the discovery of the central dogma of Molecular Biology, ribonucleic acid (RNA) was postulated as a messenger molecule, which transmitted the information of protein synthesis from DNA, in the cell nucleus, to the cytoplasm. However, research work has shown that RNA also performs functions beyond that of acting as a messenger. Thus, today it is known that there is a large number of non-protein coding RNA molecules that play a fundamental role in the cell. MicroRNAs (miRNAs) belong to this non-protein-coding RNA and their study has revolutionized our knowledge about the functionality of RNAs.MicroRNAs are gene expression regulatory molecules that help determine when or where genes are translated into protein. As their name indicates, these molecules are composed of nucleic acids (RNA) and not protein, in contrast to previously known regulators of gene expression. Due to their small size (human genes are encoded by thousands of nucleotides and microRNAs by only twenty) and their peculiar nature, microRNAs were discovered in the human genome once it was sequenced.MicroRNAs play a fundamental role in establishing cell identity. Components of the microRNA synthesis machinery, or microRNAs per se, have been associated with human pathologies. MicroRNAs have been found to play an important role in many cellular processes that are altered in cancer, such as differentiation, proliferation, and apoptosis. Thus, genes that code for microRNAs have been found in chromosomal regions frequently gained or lost in cancer. Some microRNAs have altered expression levels in cancer and have demonstrated their ability to affect cell transformation, carcinogenesis, and metastasis by acting as oncogenes or tumor suppressors. These microRNAs that are involved in tumor development have been called onco-microRNAs, and their name gives the title to this work. (AU)

Urinary cell-free DNA as a prognostic marker for KRAS-positive advanced-stage NSCLC

Background. KRAS mutations are prevalent in non-small cell lung cancer (NSCLC) but its clinical implications remain to be determined. Continual profiling of KRAS mutations in patients is challenging, and the study aims to determine the potential use of urinary DNA in disease predictions. Methods. A total of 150 patients were recruited. To ascertain the clinical relevance of urinary DNA, matched tumor profiles were analyzed. Serial measurements were taken to gauge the reliability of the assay. These results were correlated to overall survival using the Kaplan-Meier estimate. Results. A good overall concordance of 93% (consolidated results from serial measurements) was achieved between tumor tissue and urinary DNA profiling. Of the discordant KRAS cases, we observed subsequent positive detection during monitoring and very low concentrations of mutant DNA. In addition, we noted that KRAS-positive patients detected using urinary DNA have good prognostic utility. Interestingly, we also observed that the trend is highly correlative of the rate of change in KRAS mutant DNA concentrations and the period of monitoring. Conclusions. Urinary DNA offered a non-invasive approach to probe NSCLC dynamics, and in our study we showed that it had predictive capabilities for KRAS-positive patients. Serial monitoring of urinary samples showed that it had a predictive role in identifying patients with worse outcome

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Estudio comparativo entre el método One step nucleic acid amplification y el método convencional en la estadificación en cáncer de mama: un aumento en la detección de micrometástasis / Comparative study of the One step nucleic acid amplification method and the conventional method in axillary staging in breast cancer: an increase in the detection of micrometastases

Objetivos. El método One step nucleic acid amplification (OSNA) se ha incorporado para el estudio del ganglio centinela (GC) en cáncer de mama como alternativa al estudio convencional histológico (MC). El propósito de nuestro estudio fue comparar la estadificación por ganglio centinela (EGC) obtenida por el método OSNA con la obtenida mediante MC. Material y métodos. Se seleccionaron pacientes con cáncer de mama y EGC recogidas durante los años 2009-2010 y 2012-2013, estudiadas con MC y método OSNA. Se analizaron diferentes parámetros clínico-patológicos. Resultados. Se incluyó a 1.124 pacientes, 590 estudiadas por MC y 534 por método OSNA. La EGC inicial fue: pN0: MC 349 (59,2%) y OSNA 335 (62,7%); pN0(i+): MC 74 (12,5%) y OSNA 14 (2,6%); pN1mi: MC 59 (10%) y OSNA 77 (14,4%); pN1: MC 108 (18,3%) y OSNA 108 (20,3%). Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre la EGC por método OSNA y MC (p<0,001), a expensas de las tasas de pN1mi y pN0(i+). Se seleccionó a 224 pacientes con EGC pN1mi y pN0(i+) para determinar si las diferencias encontradas podrían atribuirse a distintas características clínico-patológicas. El método OSNA detecta el doble de micrometástasis (84,6%). Conclusiones. En nuestra casuística, por el método OSNA se observa un incremento significativo de pN1mi (84,6% vs. 44,4%) y una disminución de pN0(i+) respecto al estudio convencional, diferencias que no están condicionadas por los parámetros clínico-patológicos. El 75% de casos con pN1mi por OSNA muestra un número de copias inferior a 1.000 (AU)

Objetives. The One Step Nucleic Acid Amplification (OSNA) method has been incorporated in the study of the sentinel lymph node (SLN) in breast cancer as an alternative to conventional histological study. The aim of our study was to compare sentinel lymph node staging (SLNS) obtained by the OSNA method with that obtained by the conventional method (CM). Material and methods. We identified patients with breast cancer and SLN study during the periods 2009-2010 and 2012-2013, who underwent the CM and by OSNA. We analysed different clinicopathological parameters. Results. A total of 1124 patients were studied, 590 by CM and 534 by OSNA. SLNS was: pN0: CM 349 (59.2%) and OSNA 335 (62.7%); pN0(i+): CM 74 (12.5%) and OSNA 14 (2.6%); pN1mi: CM 59 (10%) and OSNA 77 (14.4%); pN1: CM 108 (18.3%) and OSNA 108 (20.3%). Statistically significant differences were found between the SLNS by OSNA and CM (p <0.001), due to the rates of pN1mi and pN0(i+). To determine whether this statistical significance could be attributed to different clinicopathological features, 224 patients were selected from the initial series with SLN pN1mi and pN0(i+). In this subgroup, the OSNA method detected twice as many micrometastases (pN1mi) (84.6%). Conclusions. In our series, the OSNA method resulted in a significant increase in pN1mi (84.6% vs 44.4%) and a decrease in pN0(i+) compared with the conventional method. Those differences were not affected by clinicopathological parameters. Most cases (75%) with pN1mi by OSNA showed less than 1000 copies (AU)

Nanopartículas sólidas lipídicas para terapia génica / Solid lipid nanoparticles for gene therapy

La terapia génica consiste en la administración de ácidos nucleicos con el fin de modular la expresión de proteínas específicas y revertir así una enfermedad. Es una nueva área de la medicina con gran potencial para el tratamiento de enfermedades tanto hereditarias como adquiridas. Hasta ahora, los sistemas virales de administración de ácidos nucleicos han resultado eficaces, pero presentan importantes problemas de seguridad. Los vectores no virales, en cambio, son más seguros pero menos eficaces, aunque su eficacia ha aumentado significativamente en los últimos años. Esta revisión recoge la contribución de nuestro grupo de investigación al diseño de vectores no virales basados en nanopartículas sólidas lipídicas (SLNs) para terapia génica. Hemos estudiado la relación entre factores de la formulación con los procesos de internalización y disposición intracelular del material genético, que condicionan la eficacia de transfección, y por primera vez demostramos la capacidad de las SLNs para inducir la síntesis de una proteína tras su administración endovenosa a ratones. Esta revisión también recoge nuestros trabajos sobre la aplicación de las SLNs en el tratamiento de enfermedades infecciosas y enfermedades raras, como la retinosquisis juvenil ligada al cromosoma X, enfermedad en la que la retina está desestructurada debido a la deficiencia de la proteína retinosquisina. La administración de SLNs con el gen que codifica esta proteína en un modelo animal de esta enfermedad indujo la recuperación estructural de la retina. Los trabajos aquí recogidos muestran el gran potencial de las SLNs como sistemas de administración de ácidos nucleicos (AU)

Gene therapy is a rapidly advancing field with great potential for the treatment of genetic and acquired systemic diseases. This therapy requires the introduction of foreign genetic material in the target cells to modify a genetic sequence. Viral vectors are the most effective, but their application is limited by their immunogenicity, oncogenicity and the small size of the DNA they can transport. Non-viral vectors, however, are safer, lowered cost, and more reproducible and do not present DNA size limit. The main problem of nonviral systems is their low transfection efficiency, although it has improved during the last years. This review presents the contribution of our research group to the design and evaluation of SLNs based non-viral vectors for gene transfer. We report our studies about the relationship between formulation factors and cell uptake and intracellular trafficking of the genetic material, very important for transfection. We have shown, for the first time, the ability to induce transgene protein expression of the SLNs after endovenous administration to mice. This revision also reports our work about the potential application of SLNs to the treatment of infectious and rare diseases, as the X-linked juvenile retinoschisis, a retinal disorder due to a deficiency in the protein retinoschisin, and characterized by poor eyesight and degeneration of the retina. The intraocular injection of SLNs bearing the gene that encodes retinoschisin to diseased mice led to the partial recovery of the retina. All together, our results show the potential of SLNs as a system for gene delivery (AU)

Prognostic value of circulating tumor cells in metastatic breast cancer: a systemic review and meta-analysis

Objective: Metastatic breast cancer (MBC) remains the main cause of cancer-related death, and the clinical significance and prognostic role of circulating tumor cells (CTCs) in metastatic breast cancer are still controversial. Here, we conducted a meta-analysis to clarify the correlation between CTCs and the clinicopathological features and prognosis of MBC. Methods: We performed a comprehensive search of Pubmed and the ISI Web of Science through December 2014. Only articles that focused on MBC patients and detected CTCs using the CellSearch system were included. The associations between CTCs and survival rate and clinicopathological parameters, including molecular pattern, metastatic region and treatment response, were evaluated. Results: This meta-analysis included 24 studies (3701 MBC patients), 13 prospective studies and 11 retrospective studies. We found that CTCs were more frequently detected with HER2 ? primary tumors (pooled RR = 0.73, 95 % CI = 0.63-0.84). Additionally, higher CTC numbers indicated a worse treatment response (RR = 0.56, 95 % CI = 0.40-0.79), poorer PFS (RR = 0.64, 95 % CI = 0.56-0.73) and poorer OS (RR = 0.69, 95 % CI = 0.64-0.75) in MBC patients. Conclusion: Based on these results, we propose that HER2 positivity could be a significant risk factor for the presence of CTCs. Additionally, CTCs have a significant prognostic value for MBC patients. Therefore, CTCs should be continually monitored to guide the treatment of MBC patients, especially those with HER2 ? primary tumors (AU)

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Variaciones fenotípicas en el síndrome de Aicardi-Goutières causado por mutaciones en el genRNASEH2B: presentación de dos nuevos casos / Phenotypic variations in Aicardi-Goutières syndrome caused by RNASEH2B gene mutations: report of two new cases

Introducción. El síndrome de Aicardi-Goutières es un trastorno inmunitario raro debido a mutaciones en siete genes que codifican proteínas llamadas TREX1, el complejo ribonucleasa H2, SAMHD1, ADAR e IFIH1 (MAD5), las cuales están implicadas en el metabolismo de los ácidos nucleicos. A continuación se presentan dos nuevos casos por mutación en el gen RNASEH2B, uno de los cuales presenta una mutación no descrita hasta la fecha. Casos clínicos. Caso 1: varón que consultó porque desde los 5 meses, coincidiendo con cuadros febriles de repetición, presentaba pérdida de los ítems madurativos adquiridos hasta la fecha. Caso 2: niño de 4 meses que desde los 2 meses mostraba gran irritabilidad con dificultades en la alimentación, asociado a un grave retraso psicomotor. En ambos casos se constató un aumento de las pterinas en el líquido cefalorraquídeo, principalmente de la neopterina, con calcificaciones en los ganglios basales. El diagnóstico se confirmó mediante secuenciación del gen RNASEH2B; el caso 2 presentaba una mutación no descrita en la literatura médica. Conclusiones. Los casos corresponden a la descripción clásica realizada por Aicardi-Goutières. Debe tenerse en cuenta este síndrome ante un paciente con un cuadro de encefalopatía subaguda de comienzo en el primer año de vida, distonía/espasticidad en grado variable e importante afectación/regresión del desarrollo psicomotor, especialmente si asocia aumento de las pterinas (neopterina) en el líquido cefalorraquídeo y calcificaciones en los ganglios basales (AU)

Introduction. Aicardi-Goutières syndrome is a rare immune disorder due to mutations in seven different genes that encode proteins called TREX1, ribonuclease H2 complex, SAMHD1, ADAR and IDIH1 (MDA5), which are involved in acid nucleic metabolism. Two cases are described in detail below caused by RNASEH2B gene mutation, one of which displays a mutation no described to date. Case reports. Case 1: male consulting because from 5-month-old shows loss of maturity items acquired until then, coming with several fever episodes. Case 2: a 4-month-old boy showing since 2-month-old great irritability and oral-feeding trouble with severe psychomotor impairment. In both cases it was found an increase of pterines in the cerebrospinal fluid, mainly neopterine, with calcifications in the basal ganglia. The diagnosis was proved by sequencing RNASEH2B gene, founding in case 2 a new mutation not described previously. Conclusions. The reported cases belong to the description already done by Aicardi-Goutières, it should be noticed this syndrome in a patient with a subacute encephalopathy of debut in the first year of life, dystonia/spasticity in variable degree and important affectation/regression of psychomotor development, particularly in those with increase of pterines (neopterine) in the cerebrospinal fluid and calcifications in the basal ganglia (AU)

Marcadores séricos no-PSA en el diagnóstico del CaP / Non- PSA serum markers for the diagnosis of PCa

El cáncer de próstata (CaP) es la neoplasia del varón más común en nuestra población. Durante las dos últimas décadas, el antígeno específico prostático (PSA) se ha utilizado ampliamente para el cribado, diagnóstico y seguimiento del CaP. El uso rutinario de PSA ha sido objeto de continua controversia debido a su limitada especificidad, que se deriva del hecho de que los niveles séricos de PSA elevados se producen en una variedad de condiciones no neoplásicas. Las carencias en sensibilidad y especificidad del PSA han promovido la búsqueda de nuevos biomarcadores para mejorar el rendimiento diagnóstico. El objetivo final es conseguir el diagnóstico de aquéllos tumores de próstata clínicamente significativos y poder individualizar el tratamiento en esta enfermedad. Dentro de los biomarcadores estudiados en cáncer de próstata encontramos biomarcadores tisulares, séricos y urinarios. En el siguiente trabajo procedemos a una revisión pormenorizada de aquellos marcadores séricos no relacionados con PSA que se han publicado en la literatura

Prostate cancer (PCa) is the most common male malignancy in our population. Over the past two decades, the prostate specific antigen (PSA) has been widely used for screening, diagnosis and monitoring of prostate cancer. Routine use of PSA has been continuing subject to controversy due to its limited specificity, which is derived from the fact that serum PSA levels are produced in a variety of non-neoplastic conditions. The shortcomings in sensitivity and specificity of PSA have promoted the search for new biomarkers to improve diagnostic performance. The ultimate goal is to get those diagnosing clinically significant prostate tumors and to individualize treatment in this disease. Among the biomarkers studied in prostate cancer we could found tissue biomarkers as well as serum or urine biomarkers. In this paper we proceed to review those serum biomarkers not related to PSA that have been published in the literatura

Infecciones producidas por Clostridium difficile / Infections caused by Clostridium difficile

La epidemiologia de la infección por Clostridium difficile ha sufrido importantes cambios en la última década, tanto en Estados Unidos como en Europa, con un incremento del número y severidad de los casos, peor respuesta clínica a los tratamientos habituales y mayor porcentaje de recaídas. Estos cambios fueron atribuidos a la aparición y diseminación de una cepa epidémica conocida como cepa B1/NAP1/027 que se convirtió en endémica en determinadas áreas, aunque también han sido descritos otros clones epidémicos (pe: los pertenecientes al ribotipo 078). Ante esta situación, las guías de diagnóstico y tratamiento de la enfermedad han sido recientemente actualizadas y nuevos métodos diagnósticos han sido implementados. El objetivo de esta revisión es presentar una revisión sobre la situación actual de la infección producida por Clostridium difficile, su patogenia, los métodos diagnósticos existentes, las opciones de tratamiento y las medidas de prevención y control de casos (AU)

The epidemiology of Clostridium difficile infections (CDIs) has dramatically changed over the last decade in both North America and Europe, and it has become more frequent, more severe, more refractory to standard therapy, and more likely to relapse. These changes have been associated with the emergence of a “hypervirulent” strain known as BI/NAP1/027 which has become endemic in some areas, although, other hypervirulent genotypes (e.g. PCR ribotype 078) have also been described. To reduce the incidence of CDIs, the diagnostic guidelines on diagnosis and treatment methods have been recently updated. The aim of this review is to highlight the recent epidemiological data on CDIs and to provide an overview of the pathogenicity of the infection, diagnostic approaches, old and new treatment options, and current knowledge of infection control measures (AU)

Detección de ácidos nucleicos fetales en plasma materno: hacia un diagnóstico prenatal no invasivo / Detection of fetal nucleic acids in maternal plasma: toward a non-invasive prenatal diagnosis

A partir del descubrimiento de la presencia de ácidos nucleicos fetales libres circulantes en el plasma materno se ha generado un gran interés sobre su origen, naturaleza y posibles usos médicos. En este artículo de revisión realizamos un amplio y conciso resumen sobre los resultados de los estudios de ADN y ARN fetal libre en plasma materno, sus perspectivas futuras, principalmente orientadas hacia el diagnóstico prenatal no invasivo, área donde se espera un impacto importante en el futuro inmediato. También se reportan resultados prometedores en la evaluación de la función placentaria y como marcadores predictores y de severidad en complicaciones del embarazo (AU)

The discovery of circulating free fetal nucleic acids in maternal plasma has sparked wide interest in their origin, characteristics and possible medical uses. This review provides a comprehensive and concise summary of the results of studies of free fetal DNA and RNA in maternal plasma and discusses future possibilities for their use, mainly aimed at non-invasive prenatal diagnosis, an area where this discovery is expected to have a major impact in the very near future. Promising results have been reported in the assessment of placental function and in the use of these nucleic acids as predictive markers of the severity of pregnancy complications (AU)

Terapia génica no invasiva en enfermedades neurológicas / Non invasive gene therapy in neurological diseases

Introduction. Brain gene therapy consists of introducing nucleic acids into nerve tissue whose expression may prove to betherapeutically useful. This genetic material is indirectly introduced by means of non invasive gene therapy into the bloodthereby avoiding its direct injection into the brain and the damage to the blood brain barrier.Aim. The different non invasive vectors and means of gene transfer to the central nervous system will be discussed.Development. There has been a remarkable breakthrough in recent years in non invasive gene transfer strategies into thecentral nervous system. The development of new serotypes of adenoassociated vectors, such as AAV9, and of functionalizednanoparticles, such as pegylated immunoliposomes, polymeric nanoparticles, pegylated nanoparticles, dendrimers, fullerens,as well as specific transporters specific to the low density lipoprotein receptor family, means that it is now possible tointroduce and express gene material in nerve tissue following peripherical administration of the above mentioned vectors.Conclusions. Non invasive gene therapy entails exciting new perspectives for the treatment of the numerous neurologicaldiseases for which there are no effective pharmacological treatments. Studies already performed on animals have provedto be highly promising and it is likely that, in the next few years, they will give rise to non invasive gene therapy procedureswhich will be useful and safe for treating patients (AU)

Introducción. La terapia génica cerebral consiste en la introducción de ácidos nucleicos en el tejido nervioso cuya expresiónpueda resultar de utilidad terapéutica. Mediante la terapia génica no invasiva, este material genético es introducido indirectamentepor vía sanguínea, evitando su inyección directa en el parénquima cerebral y el daño de la barrera hematoencefálica.Objetivo. Discutir los diferentes vectores y vías no invasivas de transferencia génica al sistema nervioso central.Desarrollo. En los últimos años se ha producido un giro espectacular en las estrategias para la transferencia génica no invasivadel sistema nervioso central. El desarrollo de nuevos serotipos de vectores adenoasociados, como AAV9, de una gama denanopartículas funcionalizadas, como inmunoliposomas pegilados, nanopartículas poliméricas, nanopartículas pegiladas,dendrímeros, fulerenos, así como de transportadores específicos de la familia de receptores de lipoproteína de baja densidad,permite introducir y expresar material génico en el tejido nervioso tras la administración periférica de dichos vectores.Conclusiones. La terapia génica no invasiva supone nuevas y excitantes perspectivas para el tratamiento de las numerosasenfermedades neurológicas para las cuales no existen tratamientos farmacológicos efectivos. Los estudios ya realizadosen animales resultan altamente prometedores y es probable que, en los próximos años, den lugar a procedimientos de terapia génica útiles y seguros para su uso en pacientes (AU)

Recomendaciones sobre el diagnóstico de la enfermedad fúngica invasora de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica (SEIMC). Actualización 2010 / Spanish Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (SEIMC) guidelines for the diagnosis of invasive fungal infections. 2010 update

Este texto incluye una actualización de las recomendaciones sobre el diagnóstico de la infección fúngica invasora de la Sociedad Española de Microbiología Clínica y Enfermedades Infecciosas (SEIMC) elaboradas en 2004 (Enferm Infecc Microbiol Clin. 2004, 22:32-9). En la actualización de 2010 se incluye una revisión exhaustiva de las novedades tecnológicas de los últimos años, así como los niveles de evidencia para recomendar cada una de las técnicas de diagnóstico. En primer lugar, se analizan los métodos convencionales, examen microscópico y cultivo, con sus limitaciones, lo que ha llevado a desarrollar métodos alternativos como la cuantificación de antígenos y de ADN fúngico. Las indicaciones de los métodos alternativos se analizan para las diferentes infecciones fúngicas, candidiasis, aspergilosis y micosis invasoras por otras especies. Por último, se incluye una breve descripción de los métodos de identificación molecular y se revisan las pruebas para realizar estudios de sensibilidad a los antifúngicos, los procedimientos de referencia, las técnicas comerciales y sus indicaciones (AU)

These guidelines are an update of recommendations for the diagnosis of invasive fungal infections by the Spanish Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases (SEIMC) published in 2004 (Enferm Infecc Microbiol Clin. 2004, 22:32-9). In this updated version of the guidelines, a comprehensive review of the most recent diagnostic innovations and levels of evidence to recommend those diagnostic procedures are included. We first analyse conventional diagnostic methods, microscopic examination and culture, underlining their limitations which have led to the development of alternative methods, such as fungal antigen and DNA quantification. Those alternative methods of diagnosis are analysed by fungal infection. We also briefly review the methods for molecular identification of fungal species and recommendations for carrying out susceptibility tests for antifungal drugs, including reference procedures, commercial techniques and their indications (AU)

Asociación de la deficiencia de cinc con factores inmunológicos y clínicos / Association between zinc deficiency and immunological and clinical factors

INTRODUCCIÓN: El cinc es un elemento imprescindible para el buen funcionamiento del organismo en todas las etapas de la vida, tanto para la síntesis celular, la reparación de tejidos y el desarrollo cerebral como para el crecimiento. Es cofactor de numerosas enzimas (lactato deshidrogenasa, fosfatasa alcalina, anhidrasa carbónica, carboxipeptidasa, SOD, etc.), siendo muy importante para el funcionamiento de la próstata, desarrollo de los órganos de reproducción, para buen funcionamientode la retina, y está involucrado en la regeneración de rodopsina. El sistema inmune requiere de Zn y es necesario para el mantenimiento de la integridad estructural del ADN y la síntesis de ácidos nucleicos y proteínas. OBJETIVO: El objetivo es estudiar el estado nutricional del cinc en una población sana y establecer la relación con otros factores como ejercicio físico, consumo de alcohol, y otros parámetros bioquímicos como GOT, FA, CPK, ASLO Inmunoglobulina G, Inmunoglobulina A, Alfa 1 anti tripsina, LDH, factor reumatoide. METODOLOGÍA: El estudio se realizó en un colectivo de personas de 21 a 59 años, 56 hombres y 61mujeres. Los criterios de inclusión se basaron en la aceptación de los sujetos a participar en el estudio y en que dichos sujetos no presentaran ningún tipo de patología que pudiera afectar su situación nutricional. El Zn se analizó mediante Espectrofotometría de Absorción Atómica (AAS) en muestras de eritrocitos y plasma mineralizadas por vía húmeda. Se aplicó un cuestionario de frecuencia de consumo, y mediante programa informático Nutriber® (Mataix, y Garcia Diz, 2006) se obtuvo el % RDA. Se contó con la aceptación del Comité ético y el consentimiento informado. Los parámetros clínicos analizados se determinaron en un equipo autoanalizador Hitachi mediante método colorimétrico(AU)

RESULTADOS: La recomendación de ingesta de Zn en la población adulta es de 7 a 15 mg/d. Nuestros resultados muestran una ingesta de Zn por debajo de los 2/3 de las RDA en un 56% de los individuos estudiados. En plasma, aparece deficiencia de Zn en el 17%, y en eritrocitos en un 35%. Se encontró una correlación significativa positiva entre los niveles de Zn y el consumo de alcohol, los niveles de GOT, FA, CPK, ASLO, IgG, IgA y α-1-Antitripsina, y negativa con la intensidad de ejercicio, LDH y factor reumatoide CONCLUSIÓN: según los resultados obtenidos, se hace necesario controlar tanto la ingesta como los niveles plasmáticos y eritrocitarios de Zn para que la población no sufra carencias en este mineral que derivan en el desarrollo de numerosas enfermedades, tal y como se demuestra con las asociaciones encontradas con los parámetros clínicos inmunológicos y enzimáticos que afectan a la integridad celular(AU)

INTRODUCTION: Zinc is an essential element for the proper functioning of the body at all stages of life, both for cell synthesis, tissue repair and brain development to growth. Cofactor of numerous enzymes (lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase, carbonic anhydrase, carboxypeptidase, SOD, etc.), being very important for the functioning of the prostate, development of reproductive organs for proper functioning of the retina, and is involved in the regeneration of rhodopsin. The immune system requires Zn and is necessary for maintaining the structural integrity of DNA and the synthesis of nucleic acids and proteins. OBJECTIVE: The objective is to study the nutritional status of zinc in a healthy population and establish relationship with other factors such as exercise, alcohol consumption, and other biochemical parameters such as GOT, ALP, CPK, ALSO immunoglobulin G, immunoglobulin A, alpha 1antitrypsin, lactate dehydrogenase, rheumatoid factor. METHODS: The study was conducted in a group of people from 21 to 59 years, 56 men and 61women. Inclusion criteria were based on the acceptance of subjects to participate in the study and that these subjects did not display any pathology that could affect their nutritional status. Zn was analyzed by Atomic Absorption Spectrometry (AAS) in blood cells and plasma samples mineralized by wet. We applied a food frequency questionnaire, and through software Nutriben (Mataix, and Garcia Diz, 2006) won the% RDA. It was accepted by the Ethics Committee and informed consent. The clinical parameters analyzed were determined on a computer Hitachi autoanalyzer using a colorimetric method. RESULTS: The recommended intake of Zn in the adult population is 7 to 15 mg/d. Our results show that Zn intake below 2 / 3 of the RDA in 56% of individuals studied. In plasma, Zn deficiency occursin 17%. There was a significant positive correlation between Zn levels and alcohol consumption, levels of GOT, ALP, CPK, ASO, Immunogen, Inmuno A and alpha-1-antitrypsin, and negative with exercise intensity, LDH and rheumatoid factor CONCLUSION: According to the results, it is necessary to control both the intake and plasma and cellular levels of Zn for the population are deficient in this mineral that lead to the development of numerous diseases, as demonstrated by the association found with immunological and clinical parameters that affect enzymatic cell integrity (AU)

Diversity of the nitrite reductase gene nirS in the sediment of a free-water surface constructed wetland

The diversity of the nitrite reductase gene nirS was studied in the bulk sediment of a free-water surface constructed wetland (FWS-CW) located next to the Empuriabrava wastewater treatment plant (WWTP), in Castelló d'Empúries (Girona, NE Spain). The study period extended from the inception of the treatment wetland, in June 1998, until March 1999 and comprised periods of relatively high nitrate and ammonium concentrations at the influent and low nitrate-removal efficiencies. To evaluate nirS diversity, partial gene sequences were obtained by cloning of the respective PCR products. Rarefaction curves based on DOTUR analyses of the deduced amino-acid sequences predicted a greater diversity of nirS genes in samples containing higher ammonium concentrations. Estimated Shannon-Weaver indices of the four cloned samples showed a positive relationship with the N-NH4 +/N-NO3 - ratios measured at the FWS-CW inlet. Identities between the deduced amino-acid sequences and those previously deposited in public databases ranged from 72 to 97%. Phylogenetic analysis based on these deduced sequences grouped 165 nirS clones in seven main clusters according to high similarity indices. Up to 60% of the clones clustered together in a highly homogeneous group with little homologies to any sequence retrieved from cultured representatives. Moreover, prevailing environmental conditions appeared to select for particular denitrifying populations, e.g., with respect to ammonium load and nitrogen removal efficiencies. This observation is of particular interest for the management of treatment wetlands, in which only slight variations in the theoretical denitrification potential of the system can occur (AU)

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Characterization of the promoter region of ftsZ from Corynebacterium glutamicum and controlled overexpression of FtsZ

Of the five promoters detected for the ftsZ gene in Corynebacterium glutamicum, three were located within the coding region of the upstream ftsQ gene and two within the intergenic ftsQ-ftsZ region. The most distant ftsZ promoter showed activity in Escherichia coli and controlled high-level transcriptional expression of ftsZ in C. glutamicum. Quantitative Western blotting showed that all five promoters were active during the exponential growth phase and down-regulated during stationary phase. This tightly controlled expression of ftsZ in C. glutamicum indicated that small changes in the amount of FtsZ protein strongly affect bacterial cell viability. The controlled overexpression of ftsZ in C. glutamicum, using the promoter of the gntK gene (PgntK), resulted in approximately 5-fold overproduction of FtsZ, an increase in cell diameter, and a highly variable localization of the protein as spirals or tangles throughout the cell. These results suggest that the intracellular concentration of FtsZ is critical for productive septum formation in C. glutamicum. Our observations provide insight into the mechanisms used by the coryneform group, which lacks actin homologs and many regulators of cell division, to control cell morphology (AU)

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Utilidad diagnóstica de la detección de ácidos nucleicos mediante la reacción en cadena de la polimerasa realizada en tiempo real / Diagnostic utility of nucleic acid detection by real-time polymerase chain reaction

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Evaluación de la capacidad invasiva de las micobacterias no pigmentadas de crecimiento rápido mediante el estudio de la morfología de las microcolonias en fibroblastos / Assessment of the invasiveness of rapidly-growing nonpigmented mycobacteria with the fibroblast microcolony assay

Objetivos. Se evaluó la capacidad invasiva de aislamientos clínicos y de colección de varias especies de micobacterias no pigmentadas de crecimiento rápido mediante el análisis de las microcolonias en cultivo de fibroblastos diploides humanos, y se comparó la misma con el fenotipo de colonias en medio de Middlebrook 7H11 y con el significado clínico de los aislamientos. Métodos. Se analizaron 29 cepas de: Mycobacterium chelonae (8), M. fortuitum (6), M. peregrinum (5), M. abscessus (5), M. mucogenicum ( 4) y M. septicum (1), tanto clínicamente significativas como de colección. Se evaluó el fenotipo liso o rugoso de las colonias en Middlebrook 7H11. Se evaluó la capacidad de invasión intracelular mediante el ensayo de microcolonias en fibroblastos descrito por Shepard. Las características cuantitativas se compararon con el test de la t de Student y las características cualitativas con el test exacto de Fisher. Resultados. No se encontraron diferencias significativas entre colonias de fenotipos distintos o cepas con diferentes significados clínicos, excepto en dos aislamientos de M. chelonae de bacteriemia relacionados con catéteres, que presentaron microcolonias alargadas en el cultivo celular. Las cepas de M. fortuitum y M. peregrinum presentaron microcolonias más grandes y de apariencia desflecada, mientras que las de M. chelonae, M. abscessus o M. mucogenicum, presentaron unas colonias más pequeñas y de apariencia redondeada. Conclusión. La capacidad invasiva está presente solamente en unas pocas cepas de micobacterias, y esta característica no aparece en la mayoría de las cepas aisladas de infecciones en humanos y en ninguna de las que no fueron clínicamente significativas, por lo que no sería una característica esencial para que los diversos aislamientos sean causa de enfermedad en humanos (AU)

Objective. The invasive capacity of rapidly-growing nonpigmented mycobacteria strains was evaluated by means of a fibroblast microcolony assay and related to the colony phenotype on Middlebrook 7H11 and to the clinical significance of the isolates. Methods. Twenty-nine strains [Mycobacterium chelonae (8), M. fortuitum (6), M. peregrinum (5), M. abscessus (5), M. mucogenicum ( 4) and M. septicum (1)], proceeding from a bacterial collection and clinical isolates, were evaluated. The smooth or rough phenotype of the colonies was assessed in Middlebrook 7H11 medium. Intracellular invasiveness was determined by the fibroblast-microcolony assay described by Shepard. Quantitative culture characteristics were compared with Student's t-test, and qualitative characteristics with Fisher's exact test. Results. No significant differences were found between colonies with different phenotypes or strains having a different clinical significance, except for two strains of Mycobacterium chelonae isolated from cases of catheter-related bacteremia, which showed elongated microcolonies. M. fortuitum and M. peregrinum strains showed larger microcolonies than M. chelonae, M. abscessus and M. mucogenicum, and displayed a fluffy appearance, while the latter two strains showed rounded colonies. Conclusion. Very few strains of mycobacteria had invasive capacity and the majority of strains isolated from human infections do not show this characteristic; hence this trait is not essential for mycobacteria to cause infection in humans (AU)

Diagnóstico etiológico de las infecciones respiratorias agudas de origen vírico en un hospital pediátrico de Gran Canaria / Etiology of acute viral respiratory tract infections in children from Gran Canaria, the Canary Islands (Spain)

Objetivo. Las infecciones respiratorias agudas (IRA) de origen vírico son una causa frecuente de consulta y hospitalización pediátrica. El objetivo de este estudio fue conocer la etiología de dichas infecciones en la isla de Gran Canaria. Métodos. Durante 3 años (de mayo de 2002 a mayo de 2005) se recogieron 1957 lavados nasofaríngeos de 1.729 niños atendidos en Urgencias con síntomas compatibles con IRA. En todas las muestras se realizó una técnica rápida de detección de antígeno de virus respiratorio sincitial (VRS) y, en las que se obtuvo resultado negativo, inmunofluorescencia (IF) y cultivo celular (CC). Resultados. La mediana de edad fue de 2 meses (intervalo: 0,03-119). Se identificó el agente causal del cuadro respiratorio en 1.032 niños (59,7%). El VRS se detectó en 769 niños (74,5%). Los demás virus identificados, por orden de frecuencia, fueron: virus parainfluenza, rinovirus, adenovirus, virus de la gripe, enterovirus y coronavirus. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas al comparar la edad y el tipo de virus detectado: los adenovirus fueron responsables de cuadros en niños de mayor edad (mediana: 6 meses; intervalo: 1-74). Hubo 6 casos de infección mixta. La sensibilidad de la IF en relación con el CC fue del 55,8%, y la especificidad del 99,2%. Conclusiones. Los virus respiratorios son responsables de un alto número de casos de IRA, principalmente el VRS. Su identificación es determinante en el tratamiento clínico de los pacientes y en el empleo adecuado de antibacterianos y antivirales (AU)

Objective. Acute respiratory tract infections (ARTI) of viral origin are a frequent cause of pediatric consultations and hospital admissions. The aim of this study was to investigate the etiology of these infections in Gran Canaria, the Canary Islands, (Spain). Methods. From May 2002 through May 2005, 1957 nasopharyngeal washings were collected from 1729 children presenting with ARTI to the Pediatric Emergency Unit. A rapid antigen detection method was performed in every sample to identify respiratory syncytial virus (RSV). An immunofluorescence assay (IFA) and cell culture (CC) was used in RSV-negative samples. Results. Median age was 2 months (range, 0.03-119). A viral agent was identified in 1032 children (59.7%). RSV was detected in 769 children (74.5%). Other viruses identified, in order of frequency, were parainfluenza viruses, rhinoviruses, adenoviruses, influenza viruses, enteroviruses, and coronaviruses. Statistical differences were found between age and the type of virus detected: Adenoviruses caused respiratory infections in older children (median age: 6 months; range: 1-74). There were 6 mixed infections. Sensitivity of IFA as compared to CC was 55.8%, and specificity was 99.2%. Conclusions. Respiratory viruses are responsible for a large number of ARTI cases in children from Gran Canaria, RSV being the major cause. Viral identification is determinant for managing these patients and making a proper use of antibacterial and antiviral drugs (AU)