Membrana amniótica, aplicaciones clínicas e ingeniería tisular. Revisión de su uso oftalmológico / Amniotic membrane, clinical applications and tissue engineering. Review of its ophthalmic use

La utilización de la membrana amniótica en la oftalmología está en alza en los últimos años debido a: sus múltiples propiedades biológicas y tectónicas, la mejora en el proceso de su obtención, la facilidad de uso y el avance en la ingeniería tisular. La membrana amniótica se ha convertido en uno de los principales tratamientos coadyuvantes, tanto en la cirugía oftalmológica como en otras especialidades médico-quirúrgicas. El desarrollo de la ingeniería tisular ha permitido su utilización no solo en su forma clásica sino también mediante gotas y otras presentaciones. A lo largo del artículo hemos realizado un resumen de los distintos pasos previos a su uso (preparación y conservación), de las distintas técnicas quirúrgicas y de sus principales aplicaciones clínicas

The use of amniotic membrane in ophthalmology has been increasing in recent years due to its multiple biological and tectonic properties, improvement in the process of obtaining, ease of use, and advancement in tissue engineering. The amniotic membrane has become one of the main adjuvant treatments, in ophthalmic surgery as well as in other medical-surgical specialties. The development of tissue engineering has allowed it to be used, not only in its classic form, but also by the use of drops and other presentations. The different steps prior to its use (preparation and conservation), the different surgical techniques, and their main clinical applications are described throughout the article

Los reptiles en la historia de la oftalmología española: excrementos de lagarto ocelado y leucoma corneal / Reptiles in the history of Spanish ophthalmology: Ocellated lizard excrements and corneal leucoma

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Uromastyx acanthinura as a natural treatment in a mouse model of type 2 diabetes / Uromastyx acanthinura como tratamiento natural en un modelo murino de diabetes tipo 2

Aims: Oral testimonies from North Africa attribute anti-diabetic effects to medicinal preparations of the lizard Uromastyx acanthinura (UA). No scientific evidence of such effects is currently available. The acute effects of oral administration of UA to C57Bl/6J mice with diet-induced diabetes were tested and, if effectiveness was shown, the effect of subchronic UA administration was assessed in the same model. Methods: Mice were fed a diet containing 60% fat for at least 12 weeks. To assess acute effects, different doses of UA or saline were orally administered with 2 g of glucose/kg during an oral glucose tolerance test (OGTT) on different days in a randomised crossover design. The most effective dose was then fed together with the high-fat diet for 90 days and compared to high-fat diet alone in a parallel design. Body weight (BW), food consumption, welfare, and external appearance were assessed weekly. HbA1c, OGTT, and intraperitoneal insulin tolerance tests (IPITT) were performed at baseline and after treatment. Severity of neuropathy was evaluated by cold allodynia response in the acetone test. Results: UA significantly decreased glucose levels as compared to saline 15 min after administration. After 90 days of treatment, no differences were seen in OGTT or HbA1c between the groups, while IPITT showed higher glucose levels in UA-treated animals. Although weight increase was similar in both groups, weight tended to be higher in the treated group, which had a significantly higher daily food consumption. Cold allodynia response improved in frequency and intensity in the UA group. Conclusions: Orally administered UA acutely decreased blood glucose in diabetic mice. Paradoxically, long-term administration of UA increased food consumption, weight, and insulin resistance. Improved nociceptive response suggested an effect on pain and/or neuropathy. Although additional studies are needed to elucidate the properties and potential applications of UA, our results highlight the value of ethnomedical approaches to African traditional medicine as starting point to evaluate new bioactive components (AU)

Objetivos: Testimonios orales Norteafricanos atribuyen efectos hipoglucemiantes a preparados medicinales del lagarto Uromastyx acanthinura (UA), para los que no existen evidencias científicas actualmente. El objetivo de este trabajo fue el de investigar los efectos agudos de UA administrado oralmente en ratones diabéticos C57Bl/6J inducidos por dieta grasa, y si se demostrase su efectividad evaluar el efecto de su administración subcrónica en el mismo modelo animal. Métodos: Fue administrada una dieta a los animales con un contenido graso del 60% durante al menos 12 semanas. Para evaluar los efectos agudos diferentes dosis de UA o suero salino fueron administrados conjuntamente con 2 g/kg de glucosa durante sobrecargas orales de glucosa (SOG), en diferentes días, siguiendo un diseño cruzado aleatorizado. La dosis más efectiva en esta fase fue entonces administrada mezclada en la dieta durante 90 días y comparada con dieta solo en un diseño paralelo. El peso corporal y el consumo de alimento fueron evaluados semanalmente. HbA1c, SOG, y test de tolerancia intraperitoneal a la insulina (TTIPI) fueron realizados al inicio y tras el tratamiento. La gravedad de la neuropatía fue determinada mediante la evaluación de la alodinia al frío. Resultados: El UA redujo significativamente las concentraciones de glucosa de manera aguda en comparación con el control a los 15 min tras su administración. Tras 90 días de tratamiento no se observaron diferencias en las SOG o HbA1c entre grupos, mientras que para los test de tolerancia intraperitoneal a la isulina valores más altos de glucosa fueron determinados en los animales tratados con UA. Aunque ambos grupos aumentaron su peso, este tendió a ser mayor en los tratados, que a su vez consumieron significativamente más comida por día. La respuesta a la alodinia al frío mejoró en frecuencia e intensidad en los tratados con UA. Conclusiones: El UA administrado oralmente redujo de manera aguda la glucosa en sangre en ratones con diabetes. Paradójicamente, su administración crónica aumentó el consumo de alimento, el peso y la resistencia a la insulina. La mejora en la respuesta nociceptiva sugiere un efecto en el dolor y/o la neuropatía. Aunque son necesarios más estudios para aclarar las propiedades y posibles aplicaciones de este producto, nuestros resultados subrayan el valor de los enfoques etnomédicos hacia la medicina tradicional africana como origen para la evaluación de nuevos compuestos bioactivos (AU)

Tolerancia oral en artritis experimental inducida por antígeno en conejos por administración de hidrolizado de cartílago articular / Oral tolerance in antigen induced arthritis (AIA) in rabbits by administration of articular cartilage hydrolysate

La artritis reumatoide es una patología autoinmune caracterizada por inflamación poliarticular, tumefacción e inflamación que afecta a más del 1% de la población mundial. La patobiología de la artritis reumatoide involucra varias poblaciones celulares como linfocitos T, B, macrófagos y fibroblastos, así como una compleja interacción de citoquinas proinflamatorias. Las actuales terapias convencionales y biológicas no siempre funcionan o producen solo una mejora parcial. La tolerancia inmunológica es un mecanismo por el cual el sistema inmune previene la autorreactividad. El objetivo de este estudio piloto fue evaluar la eficacia de péptidos provenientes de un hidrolizado enzimático de cartílago articular extraído del tarso bovino (HCA) para el tratamiento de artritis reumatoide en un modelo de artritis reumatoide (AAE) en conejos. Los animales AAE presentaron inflamación y dolor dentro del primer mes de la inmunización primaria que fue revertida en el grupo AAE+HCA. El grupo control mostró un tejido sinovial normal sin afecciones de ningún tipo. El grupo AAE reveló un proceso inflamatorio severo con hiperplasia sinovial, infiltrado de linfocitos y proliferación vascular. El grupo tratado redujo la inflamación, proliferación linfocítica y neoangiogénesis significativamente. Los conejos artríticos incrementaron significativamente los niveles marcadores inflamatorios como óxido nítrico, interferon γ (INF-γ) y factor de necrosis tumoral α (TNF- α) respecto del control y redujeron significativamente los niveles de interleukina 4 (IL-4). El tratamiento mostró una reducción significativa de óxido nítrico, IFN-γ y TNF-α y un aumento de IL-4. Este trabajo sugiere que esta terapia podría resultar útil en el aspecto clínico y en los parámetros bioquímicos y podría inhibir específicamente la respuesta inmune. Futuros estudios con mayor número de animales y otros parámetros de laboratorio complementarios podrán brindar evidencias en este sentido (AU)

Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease characterized by polyarticular inflammation, swelling and inflammation that affects more than 1% of the world population. The pathobiology of rheumatoid arthritis involves several cell populations as T lymphocytes, B, macrófagosy fibroblasts, and a complex proinflammatory cytokines interactions. Conventional and biologic therapies do not always work or produce only a partial improvement. Immunological tolerance is a mechanism by which the immune system prevents autoreactivity. The aim of this pilot study was to evaluate the efficacy of peptides from an from articular cartilage hydrolysate extracted of tarsus (HCA) for the treatment of rheumatoid arthritis in a model of rheumatoid arthritis (AAE) in rabbits. AAE animals showed inflammation and pain within de first month of the primary immunization that was reversed in the AAE + HCA group. The control group showed a normal unnaffected synovial tissue. The AAE group revealed an inflammatory process with synovial hyperplasia, filtering in lymphocytes and vascular proliferation. The treated group decreased significantly inflammation, lymphocyte proliferation and angiogenesis. Arthritic rabbits increased the levels inflammatory markers as nitric oxide, interferon gamma (INF-γ) and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) compared to control and significantly reduced levels of interleukin 4 (IL-4). The treatment showed a significant reduction of nitricoxide, IFN-gamma and TNF-alpha and an increase in IL-4. This work suggests that this therapy may be useful in the clinical aspect and the biochemical and immune parameters. Future studies with larger numbers of animals and other laboratory parameters may provide additional evidence in this regard (AU)

Helminth extracts inhibit eosinophilic inflammation in a murine model of allergic rhinitis

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Allergy to pine processionary caterpillar (Thaumetopoea pityocampa) in children / Alergia a la procesionaria del pino (thaumetopoea pityocampa) en niños

Contact with pine processionary caterpillar (Thaumetopoea pityocampa) induces dermatitis usually located in exposed areas through a toxic-irritative mechanism. Over the last few years an immediate hypersensitivity mechanism have mainly been demonstrated in adult patients. However, there are few studies carried out in children. Objective: To evaluate a group of 16 children who experienced allergic reactions after exposure to pine processionary caterpillar. Patients and methods: All patients underwent allergy testing through skin prick test. Serum specific IgE determination was performed by EAST technique. The molecular mass of the IgE ­binding bands was studied by SDS-PAGE Immunoblotting. Results: Skin prick test with the caterpillar extract was positive in all patients. Specific IgE was positive (higher than 0.35 kU/L) in 15 patients' sera. Western blotting showed several IgE-binding bands with molecular mass values ranging from 17.5 to 168 kDa. Electrophoretic mobility of some of the relevant allergens was related to the conditions of sample preparation (reduced or non-reduced). Conclusions: The results of this study demonstrate the existence of an allergic IgE-mediated mechanism caused by pine processionary caterpillar proteins. Airborne urticating hairs of this animal should be considered as seasonal inhalant allergen, which is able to induce allergic pathologies in children who frequent pine areas

El contacto con la procesionaria del pino (Thaumetopoea pityocampa) produce diversos cuadros cutáneos, localizados, principalmente, en zonas expuestas, mediante un mecanismo tóxixo-irritativo. En los últimos años se ha demostrado un mecanismo de hipersensibilidad inmediata en pacientes generalmente adultos. Sin embargo, los estudios realizados en niños son escasos. Objetivo: Estudiar 16 casos de niños que sufrieron reacciones alérgicas tras exposición a procesionaria del pino. Material y métodos: En todos los pacientes se realizó estudio alergológico mediante pruebas cutáneas en prick y detección de IgE específica en el suero. Se estudió la masa molecular de las proteínas fijadoras de IgE específica mediante la técnica de SDS-PAGE Immunoblotting. Resultados: Las pruebas cutáneas con el extracto de procesionaria del pino fueron positivas en todos los pacientes. La detección de IgE específica fue positiva ( > 0,35 kU/L) en 15 pacientes. En el Immunoblotting se detectaron varias bandas fijadoras de IgE, con masas moleculares comprendidas entre 17.5 y 168 kDa. La movilidad electroforética de algunos de los alérgenos relevantes se modifica por la presencia de un agente reductor (β-mercaptoetanol). Conclusión: Los resultados de este estudio muestran un mecanismo alérgico de hipersensibilidad mediado por IgE en estas reacciones. Las espículas urticantes aerotransportadas de la procesionaria del pino deberían considerarse como potenciales neumoalérgenos estacionales, capaces de desencadenar patologías alérgicas en niños que frecuenten zonas próximas a pinares

Immunochemical comparison of the allergenic potency of spores and mycelium of cladosporium cladosporioides extracts by a nitrocellulose electroblotting technique / Comparación inmunoquímica de la potencia alergénica de los extractos de esporas y mecilio del cladosporium cladosporioides por una técnica de eletroblotting en nitrocelulosa

Background: The lack of well standardized or characterized extracts that contain the relevant allergens of the appropriate fungus is resulting in a high heterogeneity of the commercial preparation. Material and methods: Immunochemical detection of the allergens composition of spore and mycelium of C. cladosporioides was studied by electroblotting using sera from Cladosporium allergic patients and 125 I- anti- human IgE. A MW range of allergens between 16 to 88 KDa was identified. The most important with a MW of 16, 20,30, 39, 43, 50, 60 and 88 KDa. Results: The allergenic composition of spore and mycelium looked very similar. However, partial or total inhibition of the serum with a conidial or mycelial extract demonstrated that the total concentration of allergens (particulary 20 and 60 KDa molecules) was higher in the conidium than in the mycelium. Conclusions: These results indicated that conidium and mycelium contained the same allergenic determinants but at different concentration in the two propagule. Results with 50 % inhibited sera demonstrated also that the total concentration of allergens was higher in the conidium than in the mycelium

Antecedentes: La falta de extractos estandarizados o caracterizados que contienen alergenos relevantes de componentes fúngicos, da como resultado una elevada heterogeneidad de los preparados comerciales. Material and methods. La detección inmunoquímica de la composición alergénica de las esporas y del micelio de C. Cladosporioides ha sido estudiada por el método del electroblotting usando sueros procedentes de pacientes alérgicos a Cladosporium y anti-IgE humano marcado con Yodo 125. El peso molecular de los alergenos identificados fue situado entre 16 y 88 Kda. Los más importantes con un peso molecular de 16, 20, 30, 39, 43, 50, 60 y 88 Kda. Resultados: La composición alergénica detectada en las espora y el micelio ha sido idéntica. Sin embargo, la inhibición parcial o total del suero con extractos de esporas o micelios ha demostrado que la dosis de alergenos (especialmente de 20 y 60 KDa) ha sido más alta en las esporas que en el micelio. Conclusiones: Estos resultados indican que las esporas y los micelios contienen los mismos determinantes alergénicos pero a diferente concentración en ambos extractos. Con un 50% de inhibición sérica, la concentración de alergenos fue más elevada para las esporas que para los milecelios

Postnatal development of the rat cochlear nuclei. Qualitative study with the glial markers GFAP and vimentin

The cochlear nuclei are the first central step inthe ascending auditory pathway. Studies on thedevelopment of the cochlear nuclei have beendevoted to the histogenesis, neuronal maturationand migration, development and setting up ofprojections, and development of neurotransmitters.During postnatal maturation of the cochlearnuclei, neurons migrate to their definitive positionsand the connections of the nuclear complexare established and refined. However, in spite ofthe fundamental role of the glia during the morphogenesisof the central nervous system, littleattention has been paid to the presence and functionof the astroglial cells within the cochlearnuclei. In light of this, here we investigated thepresence, morphology and temporal patterns ofthe appearance of the astroglial cells of the cochlearnuclei. To identify the glial cells, monoclonalantibodies were used to detect glial fibrillary acidicprotein and vimentin. The immature intermediatefilament cytoskeleton of astrocytes it ismade up of vimentin, and that of radial glial cells,and, as development proceeds, glial fibrillary acidicprotein constitutes the intermediate filamentcytoskeleton in mature astrocytes.Our study revealed the presence of radialglial cells and astrocytes within the cochlearnuclei along postnatal development. A reciprocalrelationship in the distribution of glial fibrillaryacidic protein and vimentin during maturation ofthe cochlear nuclear complex is reported.The morphology, temporal patterns of appearance,and maturation of glial cells are discussed in relation to the morphogenesis and maturationof the cochlear nuclei, placing the possiblerole of radial glia in the migration of cochlearcells and in the guidance of the axons to theirfunctional targets

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Lesiones pulmonares y niveles de citoquinas tras la administración intraperitoneal de homogeneizado pancreático en ratas / Pulmonary injuries and cytokine levels after the intraperitoneal administration of pancreatic homogenates in rats

Introducción: nuestro objetivo es investigar, en animales sanos, los efectos de la administración de homogeneizado pancreático, con y sin activación enzimática, sobre los niveles séricos de citoquinas y el desarrollo de lesiones pulmonares. Material y métodos: se estudiaron 106 ratas Wistar macho divididas en 3 grupos: A: administración intraperitoneal de homogeneizado pancreático activado con enteroquinasa; B: homogeneizado sin enteroquinasa; y C: control, con la administración de suero fisiológico. Cada grupo fue dividido en 4 subgrupos de acuerdo al tiempo de sacrificio: 0, 2, 6 y 24 horas. Estudiamos la histología pancreática y pulmonar, parámetros séricos de función renal, hepática y los niveles séricos de IL-1Beta, IL-6 y TNF-alfa. Resultados: no hubo mortalidad en ningún grupo. Se observaron alteraciones pancreáticas en los grupos A y B a las 24 horas. Estos dos grupos presentaron niveles de transaminasas significativamente más elevados que aquellos del grupo control. Los niveles séricos de creatinina estaban más elevados en el grupo A. Los valores de IL-1Beta fueron significativamente más altos a las 6 horas en ambos grupos A y B, aunque mayor en el grupo A, el cual también presentó más lesiones histológicas pulmonares en relación con los controles a las 6 horas. Conclusiones: los niveles de IL-1Beta más elevados en el grupo A podrían deberse a la activación enzimática del homogeneizado que podría inducir la producción de esta citoquina por los macrófagos peritoneales, lo que a su vez podría ser el promotor de las lesiones pulmonares (AU)

Proteinase and gelatinolytic properties of a triatoma infestans extract

An extract of Triatoma infestans has previously been demonstrated to produce specific IgG and IgE both in animals and in atopic humans with rhinitis/asthma as well as hypersensitivity pneumonitis in guinea pigs aerosolized with T. infestans. We attempted to determine whether the antigen or antigens responsible belonged to the protease group, as occurs with other allergens such as house dust mites and cockroaches. To do this, T. infestans was studied by SDS-PAGE, Western blots and gelatinolysis with and without the use of specific protease inhibitors such as E-64, TLCK, TPCK, PMSF, leupeptin, o-phenanthrolene and pepstatin-A. These assays revealed serine-like proteolytic and gelatinolytic activities. The presence of 10 to 12 bands of between 14 and 100 kDa was detected. The proteolytic activity pattern of T. infestans was greatest at pH 8.5 and gelatinolytic activity was highly sensitive to PMSF, suggesting that this enzyme could be characterized as a serine protease. Western blots revealed that two bands of 17 and 58 kDA reacted with the sera of atopic humans with respiratory diseases and anti-IgE. However, whether these bands correlated with allergenicity is unclear since the presence of several proteins in each of these bands does not rule out the possibility that this correlation could exist, especially because cross-reactions with antigens from the cockroach Periplaneta americana and its specific antiserum in animals and atopic humans have been demonstrated. The role of proteases in the etiopathogenesis of perennial rhinitis and bronchial asthma in inhabitants of the area of Argentina infested by T. infestans requires further investigation (AU)

Habiendo demostrado previamente que un extracto del Triatoma infestans (Ti) era capaz de generar anticuerpos específicos IgG e IgE tanto en los animales como en los humanos atópicos con rinitis/asma al igual que la producción de una típica neumonitis por hipersensibilidad en cobayos aerosolizados con Ti intentamos analizar si el o los antígenos responsables pertenecían al grupo de las proteasas tal como sucede con otros alergenos, como los ácaros y los blátidos. Para ello el Ti fue estudiado por medio del SDSPAGE, Western blots y gelatinolisis con y sin el empleo de inhibidores específicos de las proteasas, tales como, el E-64, el TLCK, el TPCK, el PMSF, la leupeptina, la orto-fenantrolina y la pepstatina-A. Una vez comprobada la actividad proteásica y la gelatinolítica se destacó la presencia de 10 a 12 bandas entre los 14 y 100 kDa con un patrón proteolítico con una mayor actividad a pH 8,5 y con una gelatinolisis altamente sensible al PMSF revelando su posible actividad de serina. Por los Western blots se detectó que las bandas de 17 y 58 kDa eran reactivas con los sueros humanos de atópicos respiratorios y la anti-IgE aunque no queda muy clara su alergenicidad ya que la presencia de varias proteínas en cada una de estas bandas no excluye que dicha correlación pudiera existir más aún cuando se demuestran reacciones cruzadas con antígenos de la cucaracha Periplaneta americana y sus antisueros específicos en animales y en atópicos. Su papel en la etiopatogenia de la rinitis perenne y del asma bronquial de los habitantes de la zona endémica argentina para el Ti requiere de mayores investigaciones (AU)

Non-occupational allergy caused by the Pine Processionary Caterpillar (Thaumetopoea pityocampa)

Contact with the pine processionary caterpillar induces dermatitis, usually located in exposed areas, and, less frequently, ocular lesions through a toxic-irritative mechanism. Recently, the existence of an immediate hypersensitivity mechanism has been demonstrated, mainly in occupationally exposed patients. Objective: To present four patients who experienced allergic reactions (urticaria-angioedema and rhinitis-asthma) after non-occupational exposure to pine processionary caterpillar. Patients and methods: The four patients underwent allergy testing through skin prick tests (SPT), specific IgE detection and SDS-PAGE immunoblotting. One patient also underwent a specific bronchial challenge test with the pine processionary antigen. Results: In all patients, both SPT with the caterpillar extract and specific IgE were positive. Western blotting showed several IgE-binding bands with molecular mass values ranging from 18 to 107 kDa. A shift in the electrophoretic mobility of some of the relevant allergens occurred under the presence of a reductive agent (β -mercaptoethanol). The specific bronchial challenge test with pine processionary antigen performed in one of the patients also produced positive results. Conclusions: The results of this study show an immunologic IgE-mediated immediate hypersensitivity mechanism in these reactions. The processionary caterpillar's airborne urticating hairs or spicules should be considered, at least in some locations, not only as contact and occupational allergens, but also as seasonal aeroallergens (AU)

El contacto con la procesionaria del pino produce cuadros cutáneos, localizados generalmente en zonas expuestas, y, con menos frecuencia, oculares por un mecanismo toxico-irritativo. Recientemente, se ha demostrado un mecanismo de hipersensibilidad inmediata fundamentalmente en trabajadores expuestos ocupacionalmente. Objetivo: Presentar cuatro casos de pacientes que sufrieron reacciones alérgicas (urticaria-angioedema y rinitis-asma bronquial) tras exposición no ocupacional a procesionaria del pino.Material y métodos: En los cuatro pacientes se realizó estudio alergológico mediante pruebas cutáneas en prick, detección de IgE específica y SDSPAGE inmunotransferencia; siendo sometido, además, uno de los enfermos a prueba de provocación bronquial específica. Resultados: En todos los pacientes tanto la prueba cutánea con el extracto de oruga como la detección de IgE específica fueron positivas. En la inmunotransferencia se detectaron varias bandas fijadoras de IgE, con masas moleculares comprendidas entre 18 y 107 kDa. La movilidad electroforética de alguno de los alergenos relevantes se modifica por la presencia de un agente reductor ( Beta-mercaptoetanol). La prueba de provocación bronquial específica con Ag.de procesionaria del pino realizada en uno de los pacientes resultó, igualmente, positiva. Conclusiones: Los resultados del estudio efectuado muestran un mecanismo inmunológico de hipersensibilidad inmediata mediado por IgE en estas reacciones. Las espículas urticantes aerotransportadas de la procesionaria deberían considerarse, al menos en algunas localizaciones, como neumoalergenos estacionales y no sólo desde el punto de vista ocupacional (AU)

Estimación fluorimétrica del clorhidrato de doxorubicina en plasma, sangre entera y tejidos de ratas / Fluorimetric estimation of doxorubicin hydrochloride in plasma, whole blood and tissues of rat

Se ha desarrollado un método fluorimétrico rápido y sensible para la estimación del clorhidrato de doxorubicina (DH) en sangre entera y tejidos de ratas. También se ha desarrollado un método relativamente más simple y sensible para la estimación en plasma. Los parámetros analíticos se establecieron y compararon en ambos métodos. Los datos de intensidad de fluorescencia relativa (IFR) de los métodos de estimación de DH en plasma y en sangre entera indican la elevada sensibilidad del método anterior. La comparación de los valores de IFR de la sangre entera y de los tejidos indican una baja extracción de DH de la sangre entera. Los valores bajos de IFR se observaron en tejidos que contienen elementos formadores de sangre, tales como el bazo y el hígado, mientras que en pulmones, riñones y corazón los valores de IFR detectados fueron elevados. La incubación de DH con diversas concentraciones de ADN in vitro mostró una reducción de la IFR del DH en comparación con la IFR inicial, lo que indica una fuerte interacción dependiente de la concentración. Se observaron coeficientes de correlación elevados en pulmones (0,9996), sangre entera (0,9985) y corazón (0,9991). La prueba de interceptación realizada para el método de estimación de DH en plasma y el método de estimación en sangre entera y tejidos indica que no se producen interferencias de blancos en las estimaciones. La prueba `t' realizada para las concentraciones estimadas en los estudios de recuperación no indican ninguna diferencia significativa entre las concentraciones añadidas y estimadas que demuestran la exactitud, y el bajo coeficiente de variación ( por ciento) y los límites de confianza indican la precisión de los métodos (AU)

Estandarización biológica del extracto alergénico de Anisakis simplex / Biologic standarization of the allergenic extract of Anisakis simplex

Fundamento: Este trabajo tiene como objetivo la estandarización biológica del extracto alergénico de Anisakis simplex. Métodos: Se seleccionaron 21 pacientes específicamente sensibilizados a A. simplex, se realizó la determinación de IgE específica por ELISA y CAP System y prueba cutánea. Se obtuvo la potencia del extracto por inhibición de la IgE, mediante ELISA de competición y absorción y se calculó la concentración necesaria para producir el 50 por ciento de inhibición de los valores de IgE específica. Se realizó una prueba cutánea sobre los 21 pacientes y se calculó el valor SPT (Skin Prick Test) del extracto de A. simplex. Resultados: Mediante ELISA de competición y absorción con 1, 5, 10, 20 y 40 µg de antígeno se observó un descenso en los valores de IgE proporcional a la concentración de antígeno utilizada, que fue mayor en el caso de la absorción, en que se llegó al 100 por ciento con 40 µg. Al realizar el ELISA de absorción con los sueros de cada paciente con 1 y 5 µg de antígeno se observó un descenso en el 80 por ciento de los mismos. Con los valores obtenidos con una mezcla de todos los sueros se calculó la concentración necesaria para producir el 50 por ciento de inhibición (2,79 µg/absorción - 8,35 µg/inhibición). El valor SPT del extracto alergénico de A. simplex fue de 0,9. Conclusiones: Arbitrariamente se ha fijado que a un valor SPT de 1 mg/ml de alergeno se le asigna una actividad de 10.000 UBE (Unidades Biológicas Equivalentes), por lo que un SPT de extracto de A. simplex equivale a 9.000 UBE. (AU)

Ensayo clínico diagnóstico en niños con extracto alergénico de blomia tropicalis / Clinical diagnostic test in children with Blomia tropicalis allergenic extract

Antecedentes: la Blomia tropicalis es una de las especies de ácaros que según estudios realizados en zonas tropicales y subtropicales, constituye una de las causas más importantes de sensibilización alérgica. No obstante ello, no existen estudios publicados de sensibilidad y especificidad en niños a los extractos de este ácaro.Método: se realizó un ensayo clínico abierto no aleatorizado en 205 niños asmáticos de entre uno y 14 años y en 205 sanos de la misma edad. A todos se les realizó la prueba por punción cutánea en duplicado con extractos alergénicos estandarizados en unidades biológicas y controles positivos y negativos.Se consideró la prueba positiva cuando el diámetro medio del habón fue 3 mm y negativa cuando fue < 3 mm. Se estimó la validez del test, calculando las medidas de asociación de sensibilidad y especificidad y los valores predictivos positivos y negativos.Resultados: el test cutáneo fue positivo en el 82,92 por ciento de los enfermos y en el 10,7 por ciento de los sanos para una sensibilidad de 82,9 por ciento, IC de 95 por ciento 76,9; 87,7 y una especificidad de 89,3 por ciento. IC de 95 por ciento 84,0; 93,0; el valor predictivo positivo fue de 88,5 por ciento, IC de 95 por ciento; 83,0; 92,5 y el negativo de 83,9 por ciento, IC de 95 por ciento 78,2; 88,4.Conclusión: la Blomia tropicalis es una causa importante de asma bronquial en niños de la región norte de Camagüey (AU)

Background: Blomia tropicalis is a mite that is one of the most important causes of allergic sensitization in studies of tropical and subtropical regions. Nonetheless, there are no published studies of the sensitivity and specificity of B. tropicalis extracts. Method: an open, non-randomized study was carried out in 205 asthmatic children and in 205 non-asthmatic children, both groups with an age range of 1 to 14 years. Duplicate skin prick tests were made using allergen extracts standardized by biological units and positive and negative controls. The test was considered positive when the average diameter of the wheal was >= 3 mm and negative when it was < 3 mm. The validity of the test was estimated by calculating sensitivity, specificity, and the positive and negative predictive values. Results: the skin prick test was positive in 82.92% of the asthmatic children and in 10.7% of the non-asthmatic children, yielding a sensitivity of 82.9%, 95% CI 76.9; 87.7 and a specificity of 89.3%, 95% IC 84.0; 93.0. The positive predictive value was 88.5%, 95% IC 83.0; 92.5 and the negative predictive value was 83.9%, 95% IC 78.2; 88.4. Conclusions: Blomia tropicalis is an important cause of bronchial asthma among the children of the northerm Camagüey región (AU)