Abundance, distribution, and expression of nematicidal crystal protein genes in Bacillus thuringiensis strains from diverse habitats / Abundancia, distribución y expresión de genes de proteínas cristalinas nematicidas en cepas de Bacillus thuringiensis de diversos hábitats

Bacillus thuringiensis (Bt) is a Gram-positive bacterium that accumulates pesticidal proteins (Cry and Cyt) in parasporal crystals. Proteins from the Cry5, App6 (formerly Cry6), Cry12, Cry13, Cry14, Cry21, and Xpp55 (formerly Cry55) families have been identified as toxic to nematodes. In this study, a total of 846 Bt strains belonging to four collections were analyzed to determine the diversity and distribution of the Bt Cry nematicidal protein genes. We analyzed their presence by PCR, and positives were confirmed by sequencing. As a result, 164 Bt isolates (20%) contained at least one gene coding for nematicidal Cry proteins. The cry5 and cry21 genes were enriched in collection 1 and were often found together in the same strain. Differently, in collection 4, obtained from similar habitats but after 10 years, cry14 was the gene most frequently found. In collection 2, cry5 and app6 were the most abundant genes, and collection 3 had a low incidence of any of these genes. The results point to high variability in the frequencies of the studied genes depending on the timing, geographical origins, and sources. The occurrence of cry1A, cry2, and cry3 genes was also analyzed and showed that the nematicidal Cry protein genes were frequently accompanied by cry1A + cry2. The expression of the genes was assessed by mass spectrometry showing that only 14% of the positive strains produced nematicidal proteins. To our knowledge, this is the first comprehensive screening that examines the presence and expression of genes from the seven known Bt Cry nematicidal families.(AU)

Multicenter study of clinical non-Beta-lactam-antibiotic susceptible MRSA strains: Genetic lineages and Panton-Valentine leukocidin (PVL) production / Estudio multicéntrico de cepas clínicas de SARM sensibles a antibióticos no-Beta-lactámicos: líneas genéticas y producción de la leucocidina de Panton-Valentine

INTRODUCTION: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is considered a major cause of healthcare-associated (HA) and community-acquired (CA) infections. Considering non-β-lactam susceptibility as a potential marker for mecC-MRSA and CA-MRSA, the aim of this study was to determine the frequency and the associated genetic lineages of non-beta-lactam-antibiotic susceptible MRSA (NBLS-MRSA) strains in a multicenter study in Spain. METHODS: A collection of 45 NBLS-MRSA strains recovered in the period from January to June 2016 from 12 Spanish hospitals was analyzed. Molecular typing through spa-type characterization, agr group and multi-locus-sequence typing was performed. Methicillin-resistant genes (mecA and mecC) as well as immune evasion cluster (scn-chp-sak-sea-sep, considering scn gene as the marker of IEC system) and Panton-Valentine leukocidin (PVL) genes were determined with PCR/sequencing. RESULTS: The NBLS-MRSA phenotype was uncommon in the 12 hospitals analyzed (NBLS-MRSA/MRSA frequency: 0.3%-7.7%). All strains contained the mecA gene (and none contained mecC). Twenty-two different spa-types were detected among NBLS-MRSA strains, with spa-t008/agr-I the most prevalent (27%). The main clonal complexes were (CC/%): CC8/42.2%, CC5/33.3% and CC30/4.4%, with ST8 and ST5 as the main sequence types. The PVL toxin was present in 38% of strains (with spa-types t008, t024, t019, t044, t068, t318 and t3060). The IEC genes were detected in 78% of strains: IEC type-B (n = 17), type-F (n = 16), type-A (n = 1) and type-E (n = 1); 10 MRSA isolates were scn-negative. CONCLUSION: The NBLS-MRSA phenotype is uncommon in the analyzed hospitals; although no mecC-positive strains were detected, it could be a good marker for MRSA PVL-positive isolates (38%), frequently associated with CA-MRSA infections

INTRODUCCIÓN: Staphylococcus aureus resistente a meticilina (SARM) es una de las principales causas de infecciones tanto relacionadas con la asistencia sanitaria como asociadas a la comunidad (AC). Considerando la sensibilidad a antibióticos no-β-lactámicos como marcador potencial de SARM-mecC y SARM-AC, el objetivo de este estudio fue determinar la frecuencia y líneas genéticas de cepas SARM sensibles a antibióticos no-β-lactámicos (SARM-SNBL) en un estudio multicéntrico en España. MÉTODOS: Se analizaron 45 cepas SARM-SNBL procedentes de 12 hospitales obtenidas durante enero-junio de 2016. El tipado molecular se realizó mediante caracterización del spa-tipo, grupo agr y multi-locus-sequence typing. Mediante PCR/secuenciación se determinaron los genes: de resistencia a meticilina (mecA y mecC), del sistema de evasión inmune humano (scn-chp-sak-sea-sep, usando scn como marcador del sistema IEC) y de la leucocidina de Panton-Valentine (LPV). RESULTADOS: El fenotipo SARM-SNBL fue infrecuente en los 12 hospitales analizados (frecuencia SARM-SNBL/SARM: 0,3-7,7%). Todas las cepas fueron mecA-positivas (ninguna mecC). Se detectaron 22 spa-tipos diferentes, siendo el spa-t008/agr-I el prevalente (27%). Los principales complejos clonales fueron (CC/%): CC8/42,2%, CC5/33,3% y CC30/4,4%, destacando las secuencias tipo ST8 y ST5 como mayoritarias. El 38% de las cepas fue LPV-positiva (spa-tipos t008, t024, t019, t044, t068, t318 y t3060). El 78% de las cepas fue IEC-positivo: tipo-B (n = 17), tipo-F (n = 16), tipo-A (n = 1) y tipo-E (n = 1); 10 aislados fueron scn-negativos. CONCLUSIÓN: El fenotipo SARM-SNBL es poco frecuente en los hospitales analizados; aunque no se detectaron cepas mecC-positivas, este fenotipo puede ser un buen marcador de aislados SARM LPV-positivos, frecuentemente asociados a infecciones por SARM-AC

Síndrome del shock séptico por Staphilococo de origen vaginal / Staphylococcus septic shock syndrome of vaginal origin

Presentamos el caso clínico de una paciente de 17 años, con el diagnóstico final de Síndrome del Shock Tóxico por Stafilococos, que es una enfermedad rara pero de consecuencias fatales causada por una toxina de una bacteriana. En la mayoría de los casos es producida por una toxina derivada de ciertos tipos de bacterias estafilocócicas (Staphylococcus aureus). En ocasiones, puede derivar del Streptococcus pyogenes. Clínicamente puede progresar rápidamente con altos índices de mortalidad. Por lo tanto, al ser una patología poco frecuente, es necesario tener un diagnóstico precoz y un tratamiento inmediato. Reflejaremos la aparición rápida en un breve periodo de tiempo y su curso fulminante

We present the clinical case of a patient with a final diagnosis of toxic shock syndrome. The toxic shock syndrome is a rare but fatal disease caused by a bacterial toxin. In most cases is caused by a toxin derived from certain types of staphylococcal bacteria (Staphylococcus aureus). Sometimes, it can be derived from Staphylococcus pyogenes. Clinically it may progress rapidly with high rates of mortality. Therefore, being a rare condition, it is necessary to have early diagnosis and immediate treatment. We emphasize the exceptional nature of the case, its appearance in a short period of time and fulminant course

Detección de Clostridium difficile toxigénico en pediatría / Detection of toxigenic Clostridium difficile in paediatric patients

INTRODUCCIÓN: Nuestro objetivo principal fue revisar los aspectos clínicos, microbiológicos y epidemiológicos de la infección asociada a Clostridium difficile en pediatría (2010-2015), comparando los diagnósticos realizados por detección de toxinas en heces y por PCR a tiempo real del gen de la toxina B. MÉTODOS: Este estudio retrospectivo incluyó a 82 pacientes pediátricos. La detección de C. difficile toxigénico se realizó de manera secuencial, en heces diarreicas y bajo solicitud expresa. RESULTADOS: El 39% de los pacientes procedían de Hemato-Oncología y >50% recibió previamente cefalosporinas. La presencia de fiebre asociada a diarrea fue más frecuente en el grupo de detección positiva de toxinas y no recibir antibioterapia específica fue más frecuente en el grupo con PCR positiva, sin diferencias estadísticamente significativas. CONCLUSIÓN: Destacamos la presencia de infecciones en niños menores de 2 años. Sería recomendable realizar un diagnóstico de infección asociada a C. difficile en pacientes pediátricos, siempre que la sospecha clínica lo requiera

INTRODUCTION: Our main objective was a revision of clinical, microbiological and epidemiological results of Clostridium difficile-associated infection in paediatric patients (2010-2015). We compared the diagnoses performed by detection of toxins in feces and those performed by real-time PCR. METHODS: This retrospective study included 82 paediatric patients. Detection of toxigenic C. difficile was performed sequentially, in diarrheal feces and under clinical request. RESULTS: A total of 39% of the patients were attended at Haematology-oncology Unit and >50% of them had previously received cephalosporins. Fever associated with diarrhea was more frequent in the group of toxin detection, whereas not receiving specific antibiotic treatment was more frequent in the group of positive PCR, without statistically significant differences. CONCLUSIONS: We highlight the presence of C. difficile infection in children under 2 years old. A diagnostic testing in selected paediatric patients would be advisable when there is clinical suspicion of infection

Inyecciones intraprostáticas para los síntomas del tracto urinario inferior en varones: ¿realidad o ficción? / Intraprostatic injectables for male lower urinary tract symptoms: Reality or fiction?

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Biofilm formation in catheter-related infections by Panton-Valentine leukocidin-producing Staphylococcus aureus

The use of invasive techniques, such as intravascular catheter insertion, and the formation of biofilms in several devices by methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) have contributed to the increased number of septic patients, morbidity and mortality. This study aimed to evaluate the virulence of strains through catheter colonization and identification of microbial biofilm, as well as pathological changes on the colonized skin. An experimental biofilm formation model utilized catheter fragments implanted subcutaneously in 25 Swiss mice. The technique consisted of inoculating a catheter fragment on the back of each animal, followed by intradermal inoculation of 50 µl of bacterial suspension at 1.0 × 107 colony forming units/ml. After 96 h, catheters were removed for macroscopic analysis and evaluated through culture. Local skin fragments were also extracted for histopathology analysis. Staphylococcus aureus can adhere to catheters, colonize and form biofilms. The high amount of viable bacterial cells colonizing catheters and virulence factors can lead to severe infections of skin and adjacent tissues (AU)

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Perspectivas de futuro de la espectrometría de masas en microbiología / Future applications of mass spectrometry in microbiology

La espectrometría de masas (EM) MALDI-TOF (matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight) se ha introducido con fuerza en muchos laboratorios de microbiología clínica para la identificación rápida y precisa de bacterias y hongos. De hecho, podemos considerar la implementación de esta metodología como una revolución en dichos laboratorios. Además de la identificación microbiana, la EM MALDI-TOF se está utilizando para la detección de algunos mecanismos de resistencia a los antibióticos y para la tipificación molecular de bacterias. Sin embargo, existe una serie de aplicaciones actuales y futuras que aumentan la versatilidad de esta metodología. Entre estas cabe destacar la aplicación directa a partir de muestras clínicas; la detección de toxinas o de antígenos microbianos específicos, y las aplicaciones en el campo de la virología y de la parasitología

MALDI-TOF (matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight) mass spectrometry (MS) has been vigorously introduced in many clinical microbiology laboratories for the rapid and accurate identification of bacteria and fungi. In fact, the implementation of this methodology can be considered a revolution in these laboratories. In addition to microbial identification, MALDI-TOF MS is being used for the detection of some mechanisms of antibiotic resistance and for the molecular typing of bacteria. A number of current and future applications that increase the versatility of this methodology may also be mentioned. Among these are its direct application on clinical samples, the detection of toxins or specific microbial antigens, and its application in the fields of virology and parasitology

Determinación de perfiles de producción de metabolitos secundarios característicos de especies del género Alternaria aisladas de tomate / Determination of the profiles of secondary metabolites characteristic of Alternaria strains isolated from tomato

Antecedentes. Muchas especies de Alternaria han sido estudiadas por su capacidad de producir metabolitos secundarios bioactivos como la tentoxina (TEN), algunos de los cuales tienen propiedades tóxicas. Las principales toxinas de Alternaria contaminantes de alimentos son el ácido tenuazónico, el alternariol (AOH), el alternariol monometil éter (AME), el altenueno y las altertoxinas i , ii y iii . Objetivos. Determinar los perfiles de metabolitos secundarios característicos de cepas de Alternaria aisladas de tomate para su clasificación quimiotaxonómica. Métodos. Los perfiles de metabolitos secundarios se determinaron por HPLC-MS. Resultados. Los aislamientos de Alternaria obtenidos a partir de tomates con «enmohecimiento negro» pertenecen, según sus características morfológicas, a los grupos especie Alternaria alternata, Alternaria tenuissima y Alternaria arborescens, siendo A. tenuissima el más frecuentemente aislado. Se determinaron los perfiles más característicos de metabolitos secundarios de los grupos especie A. alternata (AOH, AME, TEN), A. tenuissima (AOH, AME, TEN, ácido tenuazónico) y A. arborescens (AOH, AME, TEN, ácido tenuazónico), siendo algunas cepas de este último grupo especie capaces de sintetizar toxinas AAL. Conclusiones. Los perfiles de producción de metabolitos secundarios son una herramienta útil para la diferenciación de aislamientos de Alternaria pertenecientes a grupos especie de esporas pequeñas difícilmente identificables por sus características morfológicas (AU)

Background. Many Alternaria species have been studied for their ability to produce bioactive secondary metabolites, such as tentoxin (TEN), some of which have toxic properties. The main food contaminant toxins are tenuazonic acid, alternariol (AOH), alternariol monomethyl ether (AME), altenuene, and altertoxins i, ii and iii. Aims. To determine the profiles of secondary metabolites characteristic of Alternaria strains isolated from tomato for their chemotaxonomic classification. Methods. The profiles of secondary metabolites were determined by HPLC MS. Results. The Alternaria isolates obtained from spoiled tomatoes belong, according to their morphological characteristics, to the species groups Alternaria alternata, Alternaria tenuissima and Alternaria arborescens, with A. tenuissima being the most frequent. The most frequent profiles of secondary metabolites belonging to the species groups A. alternata (AOH, AME, TEN), A. tenuissima (AOH, AME, TEN, tenuazonic acid) and A. arborescens (AOH, AME, TEN, tenuazonic acid) were determined, with some isolates of the latter being able to synthesize AAL toxins. Conclusions. Secondary metabolite profiles are a useful tool for the differentiation of small spored Alternaria isolates not easily identifiable by their morphological characteristics (AU)

Fascitis necrosante por Staphylococcus aureus resistente a la meticilina adquirido en la comunidad productor de leucocidina de Panton-Valentine / Necrotizing fasciitis due to community-acquired panton-valentine leukocidin methicillin resistant Staphylococcus aureus

El Staphylococcus aureus resistente a la meticilina adquirido en la comunidad (SARM-AC) es actualmente un microorganismo emergente en todo el mundo, que puede producir infecciones cutáneas y de partes blandas, algunas de éstas graves, como la fascitis necrosante, además de neumonía y osteomielitis. A continuación se presenta un caso de fascitis necrosante en un niño de 14 meses de edad, que se confirmó mediante resonancia magnética, producido por SARM-AC productor de leucocidina de Panton-Valentine. La evolución clínica fue buena después del tratamiento quirúrgico precoz y de la administración de clindamicina por vía intravenosa durante 2 semanas. En este trabajo se revisan los aspectos microbiológicos y las pautas de tratamiento de estas infecciones (AU)

Community-Acquired Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (CA-MRSA) is a worldwide emerging pathogen that is able to produce serious skin and soft- tissue infections such as necrotizing fasciitis, as well as pneumonia and osteomyelitis. We present a 14 month child with necrotizing fasciitis, confirmed by magnetic resonance imaging, produced by CA-MRSA Panton-Valentine leukocidin producer. The clinical outcome was good after early surgical treatment and the administration of intravenous clindamycin for two weeks. We review microbiological aspects and treatment guidelines of these infections (AU)

Lack of evidence in vivo for nitrergic inhibitionby Escherichia coli (STa) enterotoxin of fluidabsorption from rat proximal jejunum

Fluid absorption from the proximal jejunum of the anaesthetised rat was measuredin vivo by fluid recovery. As expected, heat stable (STa) enterotoxin fromE.coli reduced fluid absorption. Neither intraperitoneal L-NAME, thought to inhibita putative neurally mediated action of STa, nor similar doses of D-NAME,ameliorated the inhibitory effect on jejunal fluid absorption of STa. Luminally perfused10 mM sodium nitroprusside (SNP) had no effect on fluid absorption whenexpressed per gram dry weight per hour but reduced fluid absorption whenexpressed per cm length per hour. Similarly, 80 but not 40 mg/Kg of L-NAMEreduced fluid absorption when expressed per cm length per hour, while the samedose of D-NAME did not. L-NAME and SNP significantly increased the wet weightto dry weight and the length to dry weight ratio of perfused loops. We conjecturethat smooth muscle relaxation caused by these compounds increases interstitial fluidvolumes that can be misconstrued as changes in absorption when this is expressed percm length or per tissue wet weight. When fluid absorption is expressed per gram dryweight of tissue, there is no evidence for a role of nitric oxide in normal or STa inhibitedfluid absorption (AU)

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Infecciones cutáneas primarias por estafilococos y estreptococos / Primary cutaneous infections due to staphylococcus and streptococcus

Las piodermitis son un capítulo importante de la práctica dermatológica. La patogenia de las mismas, en especial la causada por Staphylococcus aureus, ha avanzado notablemente al conocerse el papel desempeñado por las defensinas del huésped, la señalización por densidad celular y el gen de la leucocidina Panton Valentine, entre otros. Asimismo se han clonado las exfoliatinas y enterotoxinas responsables del síndrome de las 4 S, y del síndrome del shock tóxico respectivamente. Se vio también que el impétigo ampolloso, el síndrome de las 4 S y el pénfigo foliáceo compartían una diana común, que era la desmogleína-1. El gen de la leucocidina Panton Valentine se ha relacionado con la aparición de abscesos, lesiones necróticas y forúnculos en personas jóvenes causados por S. aureus resistente a meticilina, con sus correspondientes implicaciones epidemiológicas. Finalmente, algunas formas atípicas de erisipela suponen un reto diagnóstico para el dermatólogo. Palabras clave: piodermitis, exfoliatinas, enterotoxinas, gen de la leucocidina Panton Valentine, SARM-AC, desmogleína-1, estafilococo y estreptococo (AU)

Pyodermitis constitutes a very important chapter in dermatological practice. Its pathogenesis, in special the one caused by S. aureus, has improved due to the knowledge of the role developed by the host defensins, quorum-sensing signaling and the Panton-Valentine leucocidin gene among others. As well, exfoliative toxins and enterotoxins responsible for the staphylococal scalded skin syndrome (SSSS) and toxic shock syndrome, respectively, have been cloned. Also, it has been seen that bullous impetigo, SSSS and pemphigus foliaceus share a common target: desmoglein-1. The Panton-Valentine leucocidin gene has been related to the appearance of abscesses, necrotic cutaneous lesions and furuncles in young persons caused by meticillin resistant S. aureus, with its epidemiological implications. Finally, some atypical forms of erysipela suppose a diagnostic challenge for the dermatologist (AU)

Harmful algal blooms, red tides and human health: Diarrhetic shellfish poisoning and colorectal cancer

Las grandes proliferaciones de microalgas unicelulares se denominan mareas rojas cuando cambian el color del agua del mar. Algunas de estas especies fitoplanctónicas producen potentes toxinas y/o condiciones ambientales anóxicas que son capaces de provocar mortandades masivas de animales marinos. Los episodios de proliferaciones de microalgas tóxicas se conocen en el mundo entero como «harmful algal bloom» (HAB). La mayoría de las especies tóxicas y formadoras de mareas rojas forman parte del grupo de los dinoflagelados, los cuales presentan unas características nucleares fascinantes (cromosomas permanentemente condensados organizados en hileras amontonadas de arcos unidos en paralelo sin histonas). Se requiere un tiempo y un esfuerzo considerable para identificar las especies de algas peligrosas bajo el microscopio en los programas de monitorización. Por eso, en la actualidad, se está incrementando el uso de sondas moleculares (anticuerpos, lectinas, DNA) que marcan específicamente las células tóxicas diana de manera más eficaz. Estos organismos son el inicio de la cadena trófica en el mar, por tanto las toxinas producidas por las especies tóxicas son transferidas a la cadena alimenticia y causan numerosas intoxicaciones en seres humanos con diferentes perfiles clínicos como el envenenamiento por ciguatera (CFP), envenenamiento paralizante (PSP), envenenamiento neurotóxico (NSP), envenenamiento diarreico y envenenamiento amnésico (ASP). El DSP constituye quizá el principal problema de salud pública (y económico) en España. Las principales medidas para evitar proliferaciones de DSP son la monitorización de las áreas de producción de moluscos y el análisis de la toxina. La legislación europea permite 0,16 μg de toxina DSP por gramo de carne. Hoy en día el debate que se plantea es que el DSP es solamente una causa de diarrea. Sin embargo, nosotros pensamos que los niveles «legales» de toxinas DSP ingeridas al consumir moluscos pueden contribuir al incremento de la incidencia de cáncer colorectal (CRC). El estudio epidemiológico para correlacionar las costumbres dietéticas y la incidencia de tumores, muestra una correlación estadísticamente significativa (p < 0,001) entre el consumo de moluscos y la incidencia de cáncer colorrectal (coeficiente de determinación = 0,50). Un incremento de siete veces el consumo de moluscos duplicará el riesgo de sufrir CRC en la población española. Es necesario realizar más estudios para asegurar de forma concluyente la relación entre el consumo de moluscos y el CRC. En un contexto de cambio global que favorece las proliferaciones de microalgas tóxicas, deberíamos reducir a cero los niveles residuales de toxinas DSP en moluscos. Este punto de vista da lugar a un conflicto entre los intereses económicos del sector y la sanidad de los alimentos

Certain blooms of unicellular microscopic algae that change the colour of the seawater to a reddish tone are called red tides. Hundred kilometres of the sea seem blood during a red tide. In some cases the microalgal species of red tides produce toxins or/and anoxic conditions, causing massive mortalities of marine animals. The proliferation of toxic algae is denominated harmful algal blooms (HAB). The majority of the toxic and red tide species are dinoflagellates, which present fascinating nuclear features (permanently condensed chromosomes organized in stacked rows of parallel nested arches without histones). Considerable time and effort are required to identify a HABs species under light microscopy in monitoring programs. Nowadays, the use of alternative molecular probes (antibodies, lectins, DNA probes) that bind target harmful algae is an increasing procedure in monitoring programs. Toxins produced by harmful species are transferred to food chain and cause numerous human intoxications with different clinical profile such as ciguatera fish poisoning (CFP), paralytic shellfish poisoning (PSP), neurotoxic shellfish poisoning (NSP), diarrhetic shellfish poisoning (DSP), and amnesic shellfish poisoning (ASP). DSP is perhaps the main public health (and economic) problem in Spain and Europe 1. The principal measures to avoid DSP outbreaks are the monitoring of shellfish harvesting areas and toxin analysis. European legislation allows up to 0,16 μg of DSP toxins per gram of meat. Nowadays, the debate raised by DSP is only as a toxin causing diarrhoea. However, we think that the residual levels of DSP toxins ingested through shellfish consumption could contribute to increase colorectal cancer incidence (CRC). An epidemiological study to correlate dietary customs and tumour incidence shows a statistically significant correlation (p < 0.001) between consumption of molluscs and the incidence of colorectal cancer (coefficient determination = 0.50). An increase of 7 times in shellfish consumption produced duplication in the risk ratio of CRC in the Spanish population. Further analysis is necessary to conclusive association between shellfish consumption and CRC. In a context of global change that favours blooms of toxic microalgae a good approach for public health would be to change legislation to reduce the presence of residual levels of DSP toxins OA in shellfish. This point of view produces a conflict between the economic interests of the sector and public health

Diagnóstico e investigación epidemiológica de un brote de toxiinfección alimentaria causado por clostridium perfringens / Diagnosis and epidemiological investigation of an outbreak of Clostridium perfringens food poisoning

FUNDAMENTO. Aunque Clostridium perfringens es un agente clásico de toxiinfección alimentaria, la levedad y el carácter autolimitado del cuadro limita con frecuencia su confirmación microbiológica. Este estudio describe la investigación de un brote de diarrea por C. perfringens ocurrido en un establecimiento público de hostelería. MÉTODOS. Se realizó una encuesta epidemiológica y una inspección del establecimiento. Para los distintos alimentos consumidos se calcularon las tasas específicas de ataque. La causalidad independiente de cada plato se estableció calculando las odds ratio ajustadas mediante un modelo de regresión logística. La investigación de la toxina de Clostridium perfringens en heces de 4 enfermos y de un sujeto expuesto asintomático se realizó por aglutinación pasiva reversa por látex. RESULTADOS. La tasa global de ataque fue del 70,8 por ciento. La sintomatología consistió fundamentalmente en diarrea (100 por ciento) y dolor abdominal (94 por ciento). Se detectaron diferencias significativas en las tasas específicas de ataque para el consumo de diferentes platos. Sin embargo, la contribución independiente de cada uno de ellos sólo resultó significativa para el consumo de "ravioli con salsa de queso". La detección fecal de enterotoxina de C.perfringens resultó positiva en los 4 enfermos estudiados, pero no en el sujeto expuesto y asintomático. CONCLUSIONES. En este brote la tasa global de ataque fue alta. La sintomatología concuerda con los datos previamente publicados. El análisis epidemiológico implicó a los "ravioli con salsa de queso" como alimento responsable y la investigación clínica, junto con la detección de la toxina en heces, permitieron identificar a C.perfringens como el agente etiológico (AU)

Escherichia coli isolated from seafood: toxicity and plasmid profiles

Thirty-two Escherichia coli strains were isolated from red snapper (Lutjanus purpureus) and from seabob shrimp (Xiphopenaeus kroyeri). The strains were numbered S1-S16, and F1-F16, which corresponds to the isolation origin from shrimp (S) and fish (F). The isolates were biologically and antigenically characterized by agglutination tests with enteropathogenic E. coli (EPEC)-, enteroinvasive E. coli (EIEC)- and enterohemorrhagic E. coli (EHEC) O157-specific antisera. The ETEC enterotoxins were characterized by GMI-ELISA for enterotoxin LT-1 (thermolabile) and by inoculation of supernatants prepared from newly born mice for enterotoxin Sta. A total of 14 strains produced exotoxins, of which seven were thermolabile (LT) and seven were thermostable (ST). Antimicrobial susceptibility profiles were determined by disc diffusion in agar using ampicillin, cephalothin, cefoxitin, ceftriaxone, imipenem, nalidixic acid, ciprofloxacin, chloramphenicol, gentamicin, nitrofurantoin, sulfamethoxazole-trimethoprim, and tetracycline. Four isolates showed lower susceptibility to some antibiotics, two strains were resistant to ampicillin, tetracycline, and sulfamethoxazole-trimethoprim, and two were resistant to tetracycline and nitrofurantoin. Plasmids were extracted in the four resistant isolates; two of them contained plasmids whose molecular weight varied from low to high. The characterization of LT- and ST-toxin-producing E. coli strains displaying multiresistance and containing plasmids suggests the need for tightening current control measures for the use of antimicrobials (AU)

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Efecto de tobramicina más diclofenaco tópico sobre el ácido araquidónico en la uveítis inducida por endotoxina / Effect of tobramycin with topical diclofenac on the arachidonic acid in endotoxin-induced uveitis

Objetivo: Estudiar si la asociación de tobramicina al diclofenaco sódico modifica el efecto de este fármaco sobre el metabolismo del ácido araquidónico en la uveítis experimental. Material y método: Desarrollamos la uveítis experimental en el ojo derecho del animal de experimentación mediante la administración intravítrea de 10 ng de lipopolisacárido A de Salmonella typhimurium disueltos en 5 µl de suero salino. Hemos utilizado 48 animales (4 grupos de 12); al grupo control (G-I) se le inyectó en vítreo 5 µl de suero salino; al grupo de endotoxina (ET) (G-II) se le inyectó 5 µl de solución de ET; a los grupos III y IV se les inyectó la ET y se les aplicó diclofenaco sódico (0,1 per cent) (al grupo III) y diclofenaco sódico (0,1 per cent) asociado a tobramicina (0,3 per cent) (al grupo IV) dos horas antes de la endotoxina y cada 2 horas hasta las 24 horas, determinándose la concentración de prostaglandina E2 y leucotrieno B4 en humor acuoso, obtenido por paracentesis de la cámara anterior. Resultados: Observamos cómo, en los dos grupos de tratamiento se reduce la concentración de prostaglandina E2 respecto al grupo de endotoxina (p0,01). En ambos grupos de tratamiento hay un ligero incremento de la concentración de leucotrieno B4, sin que existan diferencias significativas respecto al grupo de endotoxina (p>0,01). No existen diferencias entre los dos grupos de tratamiento (p>0,01). Conclusión: La asociación de tobramicina no modifica la acción del diclofenaco sódico en el metabolismo del ácido araquidónico en la uveítis anterior experimental (AU)

Evaluación de cuatro métodos rápidos para la investigación de la capacidad toxigénica de las cepas de clostridium difficile aisladas en un medio selectivo / Evaluation of four rapid methods for the investigation of the toxigenic capacity of Clostridium difficile strains isolated in a selective medium

Fundamento: El diagnóstico por cultivo de la enfermedad asociada a Clostridium difficile requiere confirmar la capacidad toxigénica de los aislamientos. La técnica de referencia es la detección de la citotoxina por cultivo celular tras el crecimiento del microorganismo durante 3-5 días en medio líquido, implicando una demora en el diagnóstico final. En este estudio, se comparan de forma retrospectiva 4 métodos rápidos para la investigación de la toxigenicidad in vitro de las cepas de C. difficile. Métodos: Se han utilizado 106 aislamientos clínicos de C. difficile (72 toxigénicos y 34 no toxigénicos), y 16 de otras especies de Clostridium. Los cuatro métodos se llevaron a cabo directamente a partir de las colonias aisladas en medio sólido. Los métodos evaluados fueron: a) detección directa de la citotoxina; b) dos técnicas de amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) de los genes codificantes de toxina A y B, respectivamente, y c) detección de la toxina A por enzimoinmunoanálisis (VIDAS CDA2). En todos ellos, el tiempo total de procesamiento fue inferior al de una jornada laboral. Resultados: Sólo las 72 cepas de C. difficile toxigénicas mostraron resultados positivos por cultivo celular y por las técnicas de PCR (sensibilidad y especificidad del 100 por ciento). En cuanto a la técnica de VIDAS, hubo 14 resultados falsos negativos entre las 49 cepas de C. difficile toxigénicas investigadas, aunque todas estas cepas fueron positivas en pruebas repetidas. Conclusiones: Aunque todos los métodos fueron eficaces, la detección de citotoxina directa de colonias es una técnica sencilla, rápida y adecuada para aquellos laboratorios que dispongan de cultivos celulares (AU)