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1.
Clín. investig. ginecol. obstet. (Ed. impr.) ; 50(1): 100798-100798, Ene-Mar. 2023. ilus
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-214988

RESUMO

Introducción: El herpes gestationis (HG) es una de las principales dermatosis del embarazo que debe ser reconocida y tratada oportunamente ya que se relaciona con un empeoramiento del pronóstico fetal. Aunque se ha investigado la afectación cutánea, hay escasez de estudios morfológicos y funcionales de la placenta en esta patología. Principales síntomas o hallazgos clínicos: Erupción vesicular eritematosa a las 32+1 semanas de gestación. Diagnósticos principales: HG. Intervenciones terapéuticas y resultados: Inmunogammaglobulina en casos graves refractarios a los corticoides por vía oral con desaparición completa de las lesiones. Conclusión: Hasta donde sabemos, este es el primer caso que reporta un análisis detallado de los depósitos de IgG y C3 en la membrana basal de las vellosidades de la placenta mediante un estudio de inmunofluorescencia. Estos hallazgos podrían relacionarse con el ligero mal funcionamiento de la placenta que puede explicar los efectos neonatales adversos.(AU)


Introduction: Pemphigoid gestationis (PG) is one of the main dermatoses of pregnancy that must be recognized and treated promptly, since it is related to worsening of foetal prognosis. Although skin involvement has been investigated, there is a lack of morphological and functional studies of the placenta in this pathology. Main symptoms and/or clinical findings: Erythematous vesicular rash at 32+1 weeks of gestation. Main diagnoses: PG. Therapeutic interventions and results: Immunogammaglobulin in severe cases refractory to oral corticosteroids with complete disappearance of the lesions. Conclusion: To our knowledge, this is the first case to report a detailed analysis of IgG and C3 deposits in the basement membrane of the placental villi by means of an immunofluorescence study. These findings could be related to a slight malfunction of the placenta that may explain the adverse neonatal effects.(AU)


Assuntos
Humanos , Feminino , Gravidez , Imunofluorescência , Placenta , Penfigoide Gestacional , Autoimunidade , Corticosteroides , Ginecologia , Obstetrícia
2.
Enferm. infecc. microbiol. clín. (Ed. impr.) ; 40(4): 1-4, Abril, 2022. mapas, tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-203481

RESUMO

IntroductionThe purpose of this study was to determine the prevalence of IgG antibodies against Bartonella sp. in a randomly selected sample from the population of the patients of North Sanitary District of Jaén.MethodsWe used a commercially available immunofluorescent test (Focus-Technology IFA Bartonella quintana and B. henselae test).ResultsSix hundred five healthy individuals were divided by sex into three age groups. We detected that 13.55% and 11.07% subjects were IgG seropositive to B. henselae and B. quintana, respectively.ConclusionsOur data show that the prevalence of both Bartonella species in Andalusia (Southern Spain) is relatively high. No statistical difference in the seropositivity was observed among these groups. In both cases, the IgG antibody titers ranged from 1/128 to 1/512.


IntroducciónEl propósito de este estudio fue determinar la prevalencia de anticuerpos IgG frente a Bartonella sp. en una muestra escogida al azar de la población de pacientes del Distrito Sanitario Norte de Jaén.MétodosSe ha utilizado una prueba de inmunofluorescencia disponible comercialmente (Focus-Technology IFA Bartonella quintana y prueba de B. henselae). Seiscientos cinco individuos sanos se dividieron por sexo en 3 grupos de edad.ResultadosDetectamos que el 13,55% y el 11,07% de los sujetos eran IgG seropositivos a B. henselae y B. quintana, respectivamente. En ambos casos, los títulos de anticuerpos IgG variaron de 1/128 a 1/512.ConclusiónNuestros datos muestran que la prevalencia de ambas especies de Bartonella en Andalucía (sur de España) es relativamente alta. No se observaron diferencias estadísticas en la seropositividad entre grupos de edad.


Assuntos
Humanos , Ciências da Saúde , Bartonella quintana , Espanha , Bacilos Gram-Negativos Anaeróbios Facultativos , Imunoglobulina G , Microbiologia , Doenças Transmissíveis , Estudos de Casos e Controles , Imunofluorescência
3.
Reumatol. clín. (Barc.) ; 18(1): 15-19, Ene. 2022. ilus, tab, graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-204776

RESUMO

Introduction: Anti-neutrophil cytoplasmic autoantibodies (ANCA) associated vasculitis (AAV) is a small vessel vasculitis with insufficient epidemiological estimates in India. We aimed to determine demographic, clinical features, and laboratory diagnosis of AAV patients presenting to a large tertiary care centre in India. Material and methods: 1289 patient samples were screened for ANCA by indirect immunofluorescence test (IIFT) and confirmation of ANCA target antigens was done by line immunoassay. Association between IIFT and LIA was determined in AAV. Results: By IIFT, ANCA was detected in 13.0% (168 out of 1289), of which 23.8% (40/168) were positive with P-ANCA pattern, 25.0% (42/168) were positive with C-ANCA and 47.6% (80/168) showed an atypical pattern. On evaluation with a line immunoassay, 6.7% (86/1289) were positive out of which 52.3% (45/86), 41.9% (36/86), 8.8% (6/86) were positive for anti-MPO, anti-PR3, and anti-GBM respectively. In eosinophilic granulomatosis with polyangiitis (EGPA) 87.5% (7/8), and microscopic polyangiitis (MPA/RLV) 91.3% (21/23), anti-MPO was the predominantly observed antibody. In granulomatosis with polyangiitis (GPA) anti-PR3 antibody was predominant in 87.5% (28/32) cases. Out of 168 IIF positive samples 8, 32, and 23 cases of EGPA, GPA, and MPA/RLV were observed respectively. Conclusions: The primary aim of the study was to provide single-centre data to determine the laboratory diagnosis of AAV. A combination of IIFT and LIA was found to be an optimum testing strategy for the laboratory diagnosis of AAV.(AU)


Introducción: La vasculitis asociada a anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos –ANCA– (VAA) es una vasculitis de pequeños vasos con cálculos epidemiológicos insuficientes en India. Nuestro objetivo fue determinar las características demográficas y clínicas, y los diagnósticos de laboratorio de los pacientes con VAA que se presentaron en un gran centro de cuidados terciarios en India. Material y métodos: Se realizó un cribado de ANCA en 1.289 pacientes mediante test de inmunofluorescencia directa (IIFT), realizándose la confirmación de los antígenos diana de ANCA mediante inmunoensayo lineal. La asociación entre IIFT y LIA fue determinada en VAA. Resultados: Mediante IIFT, se detectó ANCA en el 13% de los pacientes (168 de 1.289), de los cuales, el 23,8% (40/168) fue positivo con el patrón P-ANCA, el 25% (42/168) fue positivo con C-ANCA y el 47,6% (80/168) reflejó un patrón atípico. En la evaluación con inmunoensayo lineal, el 6,7% (86/1.289) fue positivo, de los cuales, el 52,3% (45/86), 41,9% (36/86) y 8,8% (6/86) fueron positivos para anti-MPO, anti-PR3 y anti-GBM, respectivamente. En la granulomatosis eosinofílica con poliangitis (EGPA), en el 87,5% (7/8) de los casos, y en poliangitis microscópica (MPA/RLV) en el 91,3% (21/23), anti-MPO fue el anticuerpo predominantemente observado. En granulomatosis con poliangitis (GPA), el anticuerpo anti-PR3 fue predominante en el 87,5% (28/32) de los casos. De entre 168 muestras positivas de IIF, se observaron 8, 32, y 23 casos de EGPA, GPA y MPA/RLV, respectivamente. Conclusiones: El objetivo primario del estudio fue aportar los datos de un único centro para determinar el diagnóstico de laboratorio de VAA. El resultado fue que la combinación de IIFT y LIA es una estrategia óptima para el diagnóstico de laboratorio de VAA.(AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Vasculite Associada a Anticorpo Anticitoplasma de Neutrófilos/diagnóstico , Síndrome de Churg-Strauss , Técnicas de Laboratório Clínico , Imunofluorescência , Granulomatose com Poliangiite/diagnóstico , Índia , Imunoensaio , Anticorpos Anticitoplasma de Neutrófilos , Estudos Retrospectivos , Reumatologia
4.
Clin. transl. oncol. (Print) ; 23(9): 1827-1837, sept. 2021. graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-222182

RESUMO

Background Poly-(ADP-Ribose)-Polymerase inhibitors (PARPi) were reported as radiosensitizers in non-small cell lung cancer (NSCLC) with wide-type epidermal growth factor receptor (EGFR), but the effects of radiation combined with PARPi were not investigated in EGFR-mutated NSCLC. Moreover, the underlying mechanisms were not well examined. This study aimed to study the efficacy of radiation combined with niraparib in EGFR-mutated NSCLC and explore their influence on the immune system. Methods Clone formation and apoptosis assay were conducted to explore the effects of niraparib and radiation. Immunofluorescence was conducted to detect the double-strand DNA breaks. Real-time PCR and immunoblotting were employed to evaluate the activation of STING/TBK1/TRF3 pathway and the expression levels of interferon β, CCL5 and CXCL10. Immunocompetent mice model bearing with subcutaneous Lewis lung cancer was established to confirm the results in vivo. Results Niraparib and radiation were synergistic to inhibit tumor both in vitro and in vivo. Radiation plus niraparib could activate anti-tumor immunity, which appeared as increased CD8+ T lymphocytes and activated STING/TBK1/IRF3 pathway. Conclusion PARPi not only as a radiosensitizer inhibited EGFR-mutated NSCLC tumor growth, but also cooperated with radiation to promote anti-tumor immune responses (AU)


Assuntos
Humanos , Carcinoma Pulmonar de Células não Pequenas/terapia , Quimiorradioterapia/métodos , Genes erbB-1 , Neoplasias Pulmonares/terapia , Radiossensibilizantes/administração & dosagem , Carcinoma Pulmonar de Células não Pequenas/imunologia , Linhagem Celular Tumoral , Quimiocina CCL5/metabolismo , Quimiocina CXCL10/metabolismo , Imunofluorescência , Neoplasias Pulmonares/imunologia , Camundongos Endogâmicos C57BL , Reação em Cadeia da Polimerase , Ensaio Tumoral de Célula-Tronco
6.
An. R. Acad. Nac. Farm. (Internet) ; 87(1): 15-26, ene.-mar. 2021. ilus, graf
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-201631

RESUMO

La infección crónica por el virus de la hepatitis C (VHC) está asociada con la resistencia a la insulina y la diabetes tipo 2. El objetivo general de este estudio fue evaluar los efectos del sofosbuvir sobre la resistencia a la insulina inducida por el VHC. Para ello, se realizó un estudio clínico que incluyó 42 pacientes con VHC resistentes a la insulina, que fueron tratados con diferentes regímenes antivirales basados en sofosbuvir. Asimismo, se utilizó una línea de hepatocitos humanos que expresan un replicón del VHC de manera estable para determinar los mecanismos moleculares implicados en la acción de la insulina regulada por sofosbuvir. Todos los pacientes alcanzaron una respuesta virológica sostenida después del tratamiento con sofosbuvir y se observó una reducción significativa en los marcadores de daño hepático, así como en el estadio de fibrosis. El índice de resistencia a la insulina (HOMA) mejoró significativamente a lo largo del estudio. A nivel molecular, el tratamiento con sofosbuvir mejoró la activación de la cascada de señalización de la insulina tras la estimulación con dicha hormona en los hepatocitos con VHC, y, en consecuencia, revirtió la expresión elevada de genes gluconeogénicos, el aumento de la producción de glucosa y la deficiencia de la síntesis de glucógeno en estas células. En conclusión, estos resultados sugieren que el sofosbuvir mejora la respuesta deficiente a la insulina originada por la infección del VHC, proporcionando novedosas evidencias en cuanto a los mecanismos moleculares implicados en la sensibilización a la insulina inducida por este tratamiento


Chronic hepatitis C virus (HCV) infection is associated with insulin resistance and type 2 diabetes. The overall aim of this study was to evaluate the effects of sofosbuvir (SOF) on HCV-induced insulin resistance. Clinical parameters were recorded and insulin resistance index (HOMA) calculated from 42 insulin-resistant HCV-patients who underwent SOF-based regimens, at baseline, at the end of treatment (EoT), and at one year after the EoT. Likewise, Huh7 cells expressing full-length HCV replicons were used to elucidate the molecular mechanisms involved in insulin action regulated by SOF. All patients reached a sustained virological response after SOF treatment and, as expected, a significant reduction in liver damage markers and fibrosis stage was observed at the EoT that remained one year later. HOMA significantly improved throughout the study time period. Besides, an increase of total cholesterol, low-density lipoprotein cholesterol and apolipoprotein B levels were maintained over time after the EoT. At the molecular level, SOF treatment improved the activation of the insulin signalling cascade after stimulation with the hormone in HCV-hepatocytes and, accordingly, reversed the elevated expression of gluconeogenic genes, the increased glucose production and the impairment of glycogen synthesis induced by HCV. Furthermore, SOF challenge induced an increase of insulin receptor substrate 1 (IRS1) content parallel to a reduction in its serine phosphorylation in HCV-hepatocytes. These results provide novel evidence about the molecular mechanisms involved in the hepatic insulin sensitization induced by SOF treatment involving the recovery of IRS1 protein levels as a hallmark of SOF effects


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Sofosbuvir/farmacologia , Antivirais/farmacologia , Resistência à Insulina , Hepacivirus/efeitos dos fármacos , Hepatite B Crônica/tratamento farmacológico , Estudos Retrospectivos , Amostragem Aleatória Simples , Diabetes Mellitus Tipo 2/metabolismo , Diabetes Mellitus Tipo 2/virologia , Hepatite B Crônica/metabolismo , Imunofluorescência , Imunoprecipitação , Western Blotting , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Células Cultivadas , Carga Viral , Glucose/metabolismo , Proteínas Substratos do Receptor de Insulina/análise , Proteínas Substratos do Receptor de Insulina/efeitos dos fármacos , Resultado do Tratamento , Resposta Viral Sustentada
10.
Arch. esp. urol. (Ed. impr.) ; 72(8): 723-728, oct. 2019. tab
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-189078

RESUMO

The trend towards the organ sparing and robotic assisted surgeries is clear and is going to expand in the future. Hence, the tools surgeons need to facilitate such minimallly invasive approaches are going to be even more important. The Indocyanine green (ICG) is a water-soluble, relatively hydrophobic dye which bounds to plasma protein and can be used intraoperatively as real time contrast agent. Near infrared fluorescence (NIRF) helps in differentiating the renal planes, and the most common reagent used for the NIRF is ICG. The combination is used frequently during nephron sparing surgery in urology to ensure the ischemia of the kidney after clamping the renal artery, moreover it can help to identify the arterial blood supply to the tumor allowing selective clamping and thus minimizing the ischemia time. Several studies assessed the role of ICG in nephron-sparing surgery and provided evidence that its use allows to improve perioperative and oncological outcomes. This review rovides an overview of the articles published`regarding the use of ICG during partial nephrectomy, about the oncological outcomes and safety


La tendencia hacia la cirugía conservadora y robótica es clara hoy en día y va a aumentar en el futuro. Por lo tanto, las herramientas que los cirujanos necesitan para facilitar dichos abordajes de cirugía mínimamante invasiva van a ser incluso más importantes. El verde de indocianina (ICG) es un tinte soluble en agua, relativamente hidrofóbico que se une a proteinas plasmáticas y puede usarse intraoperatoriamente como agente de contraste en tiempo real. La fluorescencia cercana al infrarrojo ayuda a diferenciar los planos renales, y el reactivo más utilizado es ICG. La combinación es utilizada frecuentemente en Urología durante la cirugía renal conservadora para asegurar la isquemia del riñón después del clampaje de la arteria renal; además, puede ayudar a identificar el riego arterial del tumor, permitiendo un clampaje selectivo y minimizando así el tiempo de isquemia. Varios estudios evalúan el papel de ICG en la cirugía renal conservadora y ofrecieron evidencias de que su utilización permite mejorar los resultados perioperatorios y oncológicos. Este artículo de revisión ofrece una visión general de los artículos publicados sobre el uso de ICG durante la nefrectomía parcial, sobre los resultados oncológicos y la seguridad


Assuntos
Humanos , Imunofluorescência , Neoplasias Renais/diagnóstico por imagem , Neoplasias Renais/cirurgia , Nefrectomia/métodos , Procedimentos Cirúrgicos Robóticos , Verde de Indocianina , Laparoscopia
12.
Cir. plást. ibero-latinoam ; 45(2): 107-114, abr.-jun. 2019. ilus, graf
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-184218

RESUMO

Introducción y objetivo. Las células madre son candidatas terapéuticas para una amplia gama de enfermedades. Resultan de gran interés en Cirugía Plástica para el tratamiento de heridas crónicas, transferencia de tejido adiposo y colgajos. El objetivo de este estudio es describir el método de aislamiento, cultivo y caracterización de células madre derivadas de tejido adiposo y cómo estas pueden precondicionarse con hipoxia y generar cambios in vitro en su capacidad proliferativa y migratoria. El trabajo es un complemento didáctico a otro publicado por nosotros en esta misma revista utilizando esta metodología en comparación al grupo de retardo de colgajo y grupo control en colgajos cutáneos aleatorizados en ratas. Métodos. Obtuvimos las células madre de tejido graso ínguino-abdominal de ratas adultas: 10 en el grupo de células madre derivadas de tejido adiposo y otras 10 en el grupo de células madre derivadas de tejido adiposo precondicionadas con hipoxia (2% O2 y 5% CO2). Realizamos análisis morfológico directo y con inmunofluorescencia con el marcador vimentina y CD90 y estudio de proliferación y migración celular in vitro. Resultados: Utilizamos en promedio 1.64 +/- 1.13 gr de tejido adiposo en el grupo sin precondicionamiento y 0.93 +/- 0.34 gr en el grupo con precondicionamiento con hipoxia para el aislamiento. Las células madre derivadas de tejido adiposo precondicionadas con hipoxia presentaron un aumento de la capacidad migratoria a las 24 horas de 2.44 +/- 0.85 mm frente a 2.24 +/- 0.82 mm (p ≤ 0.01) y proliferativa 5.42 x105 +/- 1.03 x105 céls/ml frente a 3.26 x105 +/- 8.61 x104 céls/ml) (p ≤ 0.001) de forma significativa en comparación a las sin precondicionamiento. Conclusiones. Describimos en detalle un método de precondicionamiento de células madre mediante hipoxia. Logramos potenciar el efecto de las células madre aumentando en forma significativa su capacidad migratoria y proliferativa de forma precoz


Background and objective. Stem cells are therapeutic candidates for a wide range of diseases. They are of great interest in Plastic Surgery for the management of chronic wounds, adipose tissue transfer and flaps. The objective of this study is to describe the method of isolation, culture and characterization of stem cells derived from adipose tissue and how these can be preconditioned with hypoxia and generate in vitro changes in their proliferative and migratory capacity. This study is a didactic supplement to a paper published by us in this same journal using this methodology in comparison to the group of flap delay and control group in skin flaps randomized in rats. Methods. Stem cells were obtained from inguinal-abdominal fatty tissue of adult rats: 10 in the group of stem cells derived from adipose tissue and another 10 in the group of stem cells derived from adipose tissue preconditioned with hypoxia (2% O2 and 5% CO2). Direct morphological analysis was carried out and with immunofluorescence (vimentin and CD90 marker). Study proliferation and in vitro cell migration was performed. Results. An average of 1.64 +/- 1.13 gr of adipose tissue of the inguinoabdominal area was used in the group of stem cells without preconditioning and 0.93 +/- 0.34 gr. in the group with hypoxic preconditioning for the isolation. Stem cells derived from adipose tissue preconditioned with hypoxia showed an increase in migratory capacity at 24 hours of 2.44 +/- 0.85 mm v/s 2.24 +/- 0.82 mm (p ≤ 0.01) and proliferative of 5.42 x105 +/- 1.03 x105 cells / ml v/s 3.26 x 105 +/- 8.61 x104 cells / ml) (p ≤0.001) significantly compared to those without preconditioning. Conclusions. A method of preconditioning stem cells by hypoxia is described in detail. It is possible to enhance the effect of the stem cells, significantly increasing their early migratory and proliferative capacity


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Células-Tronco/citologia , Tecido Adiposo/citologia , Hipóxia/veterinária , Tecido Adiposo/enzimologia , Movimento Celular , Ratos Sprague-Dawley , Técnicas In Vitro/instrumentação , Tecido Adiposo/metabolismo , Imuno-Histoquímica , Proliferação de Células , Imunofluorescência , Neovascularização Fisiológica
13.
Rev. osteoporos. metab. miner. (Internet) ; 11(2): 46-54, abr.-jun. 2019. graf, ilus
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-188336

RESUMO

Introducción: La artrosis (OA) es una enfermedad musculo esquelética degenerativa que afecta aproximadamente al13% de la población occidental. A día de hoy no existe un tratamiento eficaz que evite el progreso de la misma o facilite la regeneración del cartílago articular. La conexina43 (Cx43) es una proteína transmembrana que se encuentra en niveles elevados en el cartílago y en la membrana sinovial de pacientes con OA. Esta proteína forma canales que permiten el intercambio de moléculas e iones entre dos células en contacto o entre la célula y su entorno, denominados uniones co‐municantes (UCs) y hemicanales, respectivamente. En este estudio se investigó la función de la Cx43 y de las UCs en la degradación del cartílago articular de pacientes con OA. Material y métodos: Se han aislado condrocitos primarios del cartílago de donantes OA y sanos. Se evaluaron los niveles proteicos mediante Western blot, inmunofluorescencia y citometría de flujo. La expresión génica se ha evaluado mediante RT‐qPCR, mientras que la comunicación celular se estudió mediante el ensayo scrape loading/dye transfer. La senescencia celular se evaluó midiendo la actividad de la β‐galactosidasa mediante citometría celular o microscopía. Resultados: Los resultados obtenidos indican que la sobre actividad de la Cx43 y de la comunicación intercelular a través de UCs detectadas en OA están implicadas con el progreso de la enfermedad al activar procesos de desdiferenciación celular hacia un estado inmaduro y senescencia celular. Utilizando condrocitos en cultivo aislados del cartílago de donantes con OA hemos demostrado que el incremento de la Cx43 activa factores implicados en la transición epitelio‐me sénquima (TEM), como el factor de transcripción Twist‐1. El incremento en el número de células desdiferenciadas y con altos índices de proliferación celular desencadena en senescencia celular vía p53/p16INK4a, activando el fenotipo secretor asociado a senescencia (SASP, del inglés Senescence-Associated Secretory Phenotype) que incluye la síntesis y liberación de factores inflamatorios como la interleuquina 6 (IL‐6). La disminución de los niveles de la Cx43 utilizando pequeñas moléculas como la oleuropeína o técnicas de edición genética como CRISPR/Cas9 revirtió el proceso dando lugar a re‐diferenciación celular, mejorando el fenotipo celular con incremento en proteínas implicadas en formación del tejido y diminuyendo la síntesis de MMPs y del componente inflamatorio y senescencia. Conclusiones: La disminución de la Cx43 en condrocitos artrósicos restaura regeneración tisular, por activación de re‐diferenciación celular y disminución de senescencia. Estos resultados corroboran el uso de la Cx43 como una diana terapéutica eficaz para restaurar regeneración del cartílago en pacientes con OA y evitar la progresión de la enfermedad


Introduction: Osteoarthritis (OA) is a degenerative musculoskeletal disease, which affects approximately the 13% of western population. Nowadays, there is no effective treatment for OA to avoid disease progression or to promote cartilage regeneration. Connexin43 (Cx43) is a transmembrane protein increased in cartilage and synovium from OA patients.Cx43 forms membrane channels that allow the exchange of molecules and ions between two adjacent cells through gapjunctions (GJs), or between a cell and its environment through hemichannels. In this study we investigated the involvement of Cx43 and GJ intercellular communication in the degradation of articular cartilage in chondrocytes from patientswith OA. Material and methods:Primary chondrocytes were obtained from cartilage from OA and healthy donors. Protein levelswere evaluated by western‐blot, immunofluorescence and flow cytometry. RNA expression was evaluated by RT‐qPCR.A scrape loading/dye transfer assay was used to evaluate cell communication. Cell senescence was analysed by flowcytometry or by light microscopy using β‐galactosidase assay.Results:Cx43 and GJs overactivities were correlated with the progression of OA, by promoting chronic cell dedifferen‐tiation and senescence in vitroassays. We found that Cx43 over expression activates factors involved in epithelial‐to‐me‐senchymal transition, such as Twist‐1. Increased levels of dedifferentiated cells, with high rates of cell proliferation, led to cell senescence via p53/p16INK4a, activating the senescence‐associated secretory phenotype (SASP) and promoting the synthesis and liberation of inflammatory factors, including the interleukin‐6 (IL‐6). Cx43 down regulation by using small molecules, such as oleuropein, or by genetic edition with CRISPR technology, led to the chondrocyte redifferentiation and an improved phenotype, with increased synthesis of extracellular matrix proteins such as Col2A1 and down‐regulating the synthesis of MMPs, inflammation and senescence. Conclusions: Down regulation of Cx43 in OA chondrocytes restores regeneration by activating chondrocyte re‐differentiation and decreasing cellular senescence. These results corroborate the use of Cx43 as an effective therapeutic target in order to restore cartilage regeneration and avoid OA progression


Assuntos
Humanos , Conexina 43/uso terapêutico , Artropatias/tratamento farmacológico , Artropatias/fisiopatologia , Plasticidade Celular/fisiologia , Senescência Celular/fisiologia , Condrócitos/fisiologia , Western Blotting , Imunofluorescência , Citometria de Fluxo , Progressão da Doença , Imuno-Histoquímica
14.
An Real Acad Farm ; 85(2): 189-197, abr.-jun. 2019. graf
Artigo em Inglês | IBECS | ID: ibc-186176

RESUMO

Previous studies have shown a key role of microglial cells in the neuroinflammatory processes associated with some neurodegenerative diseases, such as Alzheimer’s disease (AD). Microglia sense several types of diffusible molecules that regulate the multiple repertoire of microglial functions. Among them, extracellular nucleotides, acting on microglial P2 receptors, have central roles. In this sense, the ionotropic P2X7 receptor has gained recognition as a key regulator of microglial-mediated inflammatory responses. It is known that microglia releases ATP and other nucleotides to the extracellular medium. Although several mechanisms, such as release trough conexins or panexins, has been proposed, a vesicular origin for this released nucleotides, relying on the activity of the vesicular nucleotide transporter (VNUT), cannot be ruled out. In this work we evaluated whether the expression of VNUT and the P2X7 receptor, as well as the ATP release, could be modified in the reactive microglia. To achieve microglia activation we stimulated the cells with the lipopolysaccharide (LPS). Moreover, we analyzed the effect of the b-amyloid peptide b1-42, which is also able to activate the microglial cells, on the expression of VNUT and the ATP release in the microgli


Estudios previos han mostrado un papel clave de las células microgliales en los procesos neuroinflamatorios asociados con algunas enfermedades neurodegenerativas, como la enfermedad de Alzheimer (EA). La microglía detecta varios tipos de moléculas difusibles que regulan el múltiple repertorio de funciones microgliales. Entre ellos, los nucleótidos extracelulares, actuando sobre los receptores P2 microgliales, llevan a cabo un papel central. En este sentido, el receptor P2X7 ionotrópico ha sido reconocido como un regulador clave de las respuestas inflamatorias mediadas por la microglia. Se sabe que la microglía libera ATP y otros nucleótidos al medio extracelular. Aunque se han propuesto varios mecanismos, tales como la liberación a través de conexinas o panexinas, no se puede descartar un origen vesicular para estos nucleótidos liberados, basándose en la actividad del transportador vesicular de nucleótidos (VNUT). En este trabajo hemos analizado si la expresión de VNUT y el receptor P2X7, así como la liberación de ATP, podrían modificarse en la microglía reactiva. Para lograr la activación de la microglía estimulamos las células con el lipopolisacárido (LPS). Además, analizamos el efecto del péptido (R)1-amiloide, (R)1-42, que puede activar también las células microgliales, sobre la expresión de VNUT y la liberación de ATP en la microglía


Assuntos
Humanos , Peptídeos beta-Amiloides/fisiologia , Microglia/metabolismo , Microglia/patologia , Degeneração Neural/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Western Blotting , Imunofluorescência , Células Cultivadas , Transdução de Sinais
17.
Nefrología (Madrid) ; 38(4): 386-393, jul.-ago. 2018. graf, tab
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-177517

RESUMO

ANTECEDENTES: La presencia y patrón morfológico del compromiso renal afecta el pronóstico del lupus eritematoso sistémico, información que puede ser indispensable para tomar decisiones terapéuticas apropiadas. OBJETIVO: Evaluar relación estadística entre datos clínicos e histológicos en pacientes con nefropatía lúpica biopsiada. MÉTODOS: Revisión de información clínica en solicitudes de biopsias renales de adultos, informadas entre 2002 y 2014, con diagnóstico clínico e histopatológico inequívoco de compromiso renal por lupus eritematoso sistémico. RESULTADOS: Ciento treinta y cuatro casos (86% mujeres), edad 15-59 años. Cuadro clínico: 30% alteraciones urinarias asintomáticas, 9% proteinuria nefrótica sin hipoalbuminemia, 19% síndrome nefrótico y 40% por insuficiencia renal, existiendo 2 casos sin manifestaciones clínicas renales. Las lesiones más frecuentes fueron proliferativas puras (68%). De los que tenían alteraciones urinarias asintomáticas, 35% eran clase IV, 30% clase III, 23% mixtas, 10% clase V y 2% clase II. Entre los de proteinuria nefrótica, 75% clase IV, 17% mixtas y 8% III. De los de síndrome nefrótico, 46% clase IV, 27% V, 19% mixtas y 8% clase III. Entre los de insuficiencia renal, el 67% eran IV, 22% mixtas, 7% III y 4% V. Estas proporciones no fueron estadísticamente diferentes. Aunque la peor función renal fue observada en la clase IV, casi la mitad (44%) de aquellos sin insuficiencia renal eran de esta misma clase. CONCLUSIÓN: No se demuestra una relación clínico-histológica consistente que permita predecir los patrones ni la gravedad de los hallazgos histológicos a partir del cuadro clínico en el lupus eritematoso sistémico con manifestaciones renales. Esos resultados refuerzan la importancia de la biopsia como herramienta diagnóstica fundamental en esta enfermedad


BACKGROUND: The existence and type of renal involvement influences the prognosis of systemic lupus erythematosus and this information may be critical when it comes to taking appropriate therapeutic decisions. OBJECTIVE: To evaluate statistical correlations between clinical and histological data in patients with biopsied lupus nephropathy. METHODS: Review of clinical information in adult kidney biopsy requests reported between 2002 and 2014 with a definitive clinical and histopathological diagnosis of renal involvement in systemic lupus erythematosus. RESULTS: 134 cases (86% women), aged 15-59 years. Indication for renal biopsy: asymptomatic urinary abnormalities (30%), nephrotic proteinuria without hypoalbuminaemia (9%), nephrotic syndrome (19%), renal failure (40%) and two cases without clinical renal manifestations. The most common lesions were purely proliferative (68%). In patients with asymptomatic urinary abnormalities, 35% were class IV, 30% class III, 23% mixed, 10% class V and 2% class II. In subjects with nephrotic proteinuria, 75% were class IV, 17% mixed and 8% class III. In nephrotic syndrome patients, 46% were class IV, 27% class V, 19% mixed and 8% class III. In renal failure subjects, 67% were class IV, 22% mixed, 7% class III and 4% class V. These proportions were not statistically different. Although class IV showed the worst renal function, almost half (44%) of those without renal failure belonged to this class. CONCLUSION: We could not demonstrate a consistent clinical-pathological relationship that predicts patterns or severity of histological findings based on the clinical profile in patients with systemic lupus erythematosus and renal manifestations. These results highlight the importance of biopsy as a key diagnostic tool in this disease


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adolescente , Adulto Jovem , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Nefrite Lúpica/patologia , Imunofluorescência , Microscopia Eletrônica , Taxa de Filtração Glomerular , Índice de Gravidade de Doença , Proteinúria/etiologia , Proteinúria/patologia , Albuminúria/etiologia , Albuminúria/patologia , Biópsia , Microscopia de Fluorescência
19.
Nefrología (Madrid) ; 38(2): 213-219, mar.-abr. 2018. tab, graf
Artigo em Espanhol | IBECS | ID: ibc-171090

RESUMO

Introducción: La glomerulonefritis extracapilar (GNEC) pauciinmune o de tipo III es una de las causas más comunes de glomerulonefritis rápidamente progresiva y suele estar asociada con la presencia de anticuerpos antineutrófilos citoplasmáticos (ANCA). Están reportándose evidencias sobre la importancia de la activación del complemento en la patogénesis de la GNEC. El objetivo de nuestro estudio fue evaluar el papel pronóstico del depósito de C3 en las GNEC de tipo III. Métodos: Se estudió a pacientes diagnosticados de GNEC de tipo IIIentre 1995 y 2015 (n=72). Comparamos a pacientes con tinción positiva para C3 en el estudio de inmunofluorescencia con aquellos con tinción negativa. Se analizaron variables clínicas e histológicas y se relacionaron con progresión a enfermedad renal terminal. Resultados: Se encontró tinción positiva para C3 en 22 pacientes de un total de 72 (30,5%). Basalmente los pacientes con depósitos de C3 tenían peor función renal que aquellos sin depósitos (creatinina sérica 5 vs. 3,85mg/dl; p=0,050). La supervivencia renal a los 10 años fue del 36,9% en los pacientes con tinción positiva para C3 frente al 64,4% en los pacientes con tinción negativa (p=0,005). La supervivencia a los 10 años fue peor en los pacientes con depósitos de C3 (77 vs. 49,3%). Conclusiones: Nuestro estudio revela que la presencia de depósito de C3 en la GNEC de tipo III se asocia a un peor pronóstico renal y de la supervivencia del paciente. Estos resultados son compatibles con la hipótesis de que la activación de la vía alternativa del complemento contribuye al daño renal asociado a la GNEC de tipo III (AU)


Introduction: Type III extracapillary glomerulonephritis (PEGN) is a common cause of rapidly progressive glomerulonephritis and it is usually associated with circulating anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCAs). Recent evidence points to complement activation as an important factor in the pathogenesis of PEGN. The aim of the present study was to assess the value of C3 deposits in the prognosis of PEGN. Methods: All patients diagnosed of PEGN from 1995 to 2015 (n=72) were included in this study. Progression of renal disease in patients with positive staining for C3 by immunofluorescence was compared with those with negative staining. Mean follow up was 73 months. Progression to end-stage renal disease in relation to clinical and histological variables was analyzed. Results: Positive staining for C3 was observed in 22 out of the 72 patients (30.5%). At the time of diagnosis, patients with C3 deposits had higher serum creatinine concentration than those without C3 staining (5.00 vs. 3.85mg/dl, P=0.050). Renal survival at 10 years was 36.9% in patients with positive C3 staining vs. 64.4% in patients with negative staining (P=0.005). Mortality at 10 years was higher in patients with C3 deposits than in patients without deposits (77 vs. 49.3%). Conclusions: Thus, our study shows that PEGN with deposits of C3 is associated with worse renal prognosis and greater mortality. These results would support the hypothesis that activation of the alternative pathway complement may play an important role in the generation of renal injury associated with PEGN (AU)


Assuntos
Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Complemento C3/análise , Glomerulonefrite/diagnóstico , Glomerulonefrite/patologia , Prognóstico , Anticorpos Anticitoplasma de Neutrófilos/análise , Nefropatias/diagnóstico , Estudos Retrospectivos , Imunofluorescência/métodos
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