Neocuproine-Based Sensitive Flow Injection Method for Mefenamic Acid Determination in Aqueous Solutions and Pharmaceutical Formulations

Introducción: Se presenta un enfoque novedoso y preciso para la estimación del ácido mefenámico (MEF) en for-mulaciones farmacéuticas y soluciones acuosas, utilizando espectrofotometría de inyección de flujo. Del mismo modo, este método demuestra un alto nivel de sensibilidad y precisiónMétodo: Se basa en la reducción del complejo Cu (II)-2,9DMP a complejo Cu (I)-2,9DMP coloreado, mediante dos pasos de reacción. Sin embargo, en el primer paso se produce la reacción entre la neocuproína y el Cu (ΙΙ) para for-mar un complejo incoloro de Cu (II) -2,9DMP, y en el segundo paso el ácido mefenámico redujo el complejo incoloro formado a Cu (I) - 2,9DMP con color amarillo anaranjado, se desarrolló y validó el método de inyección de flujo.Resultados: La medición de la densidad óptica de las sustancias amarillo-naranja se realizó a una longitud de onda de 454 nm. Los gráficos de calibración muestran linealidad dentro de los rangos de concentración especificados de 1,00-80,00 μg / ml. El límite de detección (LOD) se determina en 0,360 μg/ml, mientras que el límite de cuantifi-cación (LOQ) se encuentra en 1.093 μg/ml.Conclusiones: la metodología propuesta exhibió atributos notables como rapidez, sensibilidad y confiabilidad, lo que la hace adecuada para la cuantificación precisa de (MEF) en formulaciones farmacéuticas y soluciones acuosas en diversas formulaciones disponibles comercialmente. (AU)

Introduction: A novel and precise approach is presented for the mefenamic acid (MEF) estimation in pharmaceuti-cal formulations and aqueous solutions, utilizing flow injection spectrophotometry. Similarly, this method demon-strates a high level of sensitivity and accuracy.Method: The suggested method is based on the reducing of Cu(II)-2,9DMP complex to coloured Cu(I)- 2,9DMP com-plex ,by two step of reaction. However, in the first step the reaction is occur between neocuproine and Cu(ΙΙ) to form colorless complex of Cu(II)-2,9DMP, then in second step mefenamic acid reduced the formed colorless complex to Cu(I)- 2,9DMP with yellow orange colour, Flow Injection Method were developed and validated.Results: The measurement of the optical density of the yellow-orange substances was conducted at a wavelength of 454 nm. The calibration graphs exhibit linearity within the specified concentration ranges of 1.00-80.00 μg/mL. The detection limit (LOD) is determined to be 0.360 μg/ mL, while the limit of quantification (LOQ) is found to be 1.093 μg/ mL.Conclusions: the proposed methodology exhibited notable attributes such as rapidity, sensitivity, and reliability, rendering it suitable for the accurate quantification of (MEF) in pharmaceutical formulations and aqueous solutions in various commercially available formulations. (AU)

The relation between serum vitamin D levels, viral infections and severity of attacks in children with recurrent wheezing

Introduction and Objectives: Vitamin D deficiency is associated with increased susceptibility to infections and wheezing. We aimed to evaluate the relation between vitamin D levels, viral infections and severity of attacks in children with recurrent wheezing. Materials and methods: A total of 52 patients who applied with wheezing, at the ages of 12-60 months with a history of three or more wheezing attacks in the last year and 54 healthy children were included. Sociodemographic data, risk factors for recurrent wheezing, and the severity of the wheezing attacks were recorded. 25(OH)D3, calcium, phosphor, alkaline phosphatase and parathormone levels of all children were measured. Nasopharyngeal samples of the patients for viruses were studied by multiplex polymerase chain reaction. Results: For the patient group, being breastfed for six months or less, history of cesarean section, cigarette exposure, humid home environment, and family history of allergic disease were significantly higher compared with the control group. Serum vitamin D levels in the patient group were significantly lower compared to the control group. There was no significant relationship between vitamin D levels and hospitalization, oxygen or steroid therapy. Virus was detected in 38 patients (73%). Rhinovirus (63.2%) was the most frequently detected virus. Coinfection was found in 14 (36.8%) patients. There was no statistically significant difference between detection of virus and vitamin D levels. Conclusions: Cigarette exposure, being breastfed six months or less, humid home environment, history of cesarean section, family history of allergic disease and vitamin D deficiency might be risk factors for recurrent wheezing

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Efecto antimicrobiano de la pasta 3-ATB y el hidróxido de calcio con distintos solventes / Antimicrobial effect of triple antibiotic paste and calcium hydroxide with different solvents

Objetivo: El objetivo de este estudio ha sido valorar cómo el hidróxido de calcio y la pasta triantibiótica (3-ATB) con agua destilada o propilenglicol actúan frente a una de las principales bacterias anaerobias facultativas presentes en dientes permanentes jóvenes con pulpa necrótica. Material y Método: Se llevó a cabo la siembra de la cepa bacteriana E.Coli (ATCC(R) 25922) en placas Petri para probar la susceptibilidad de los materiales mediante el método de difusión en agar. Se realizó la lectura de los resultados a las 48 horas mediante la medición de los halos de inhibición (mm) presentes en las placas. Resultados: La pasta tri-antibiótica mostró mayor inhibición que el hidróxido de calcio. Respecto a los solventes, la pasta 3-ATB ofreció mejor resultado combinada con propilenglicol, mientras que la respuesta del hidróxido de calcio fue más favorable al mezclar con agua destilada. Conclusiones: La pasta 3-ATB es más efectiva contra microorganismos anaerobios facultativos que el hidróxido de calcio, independientemente del solvente utilizado. En cuanto al solvente, el propilenglicol es más efectivo con pasta tri-antibiótica y el hidróxido de calcio lo es con agua destilada

Objective: The objective of this study was to assess how calcium hydroxide and triple antibiotic paste (3-ATB) with distilled water or propylene glycol act against one of the main facultative anaerobic bacteria present in young permanent teeth with necoritc pulp. Material and Methods: The seeding of the E.Coli (ATCC(R) 25922) was carried out in Petri dishes to test the susceptibility of the materials by the agar diffusion method. The results were read at 48 hours by measuring the inhibition zones (mm) present in the plates. Results: 3-ATB paste showed greater inhibition than calcium hydroxide. Regarding the solvents, 3-ATB paste offered better re-sults with propylene glycol, while the calcium hydroxide response was more favorable mixed with distilled water. Conclusions: 3-ATB paste is more effective against facultative anaerobic microorganisms than calcium hydroxide, regardless of the solvent used. As for the solvent, propylene glycol is more effective with 3-ATB paste while calcium hydroxide with distilled water

Modulation of laccase transcriptome during biodegradation of naphthalene by white rot fungus Pleurotus ostreatus

Biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) using Pleurotus ostreatus was investigated in the current study along with the expression levels of laccase genes involved in biodegradation under variable conditions. Biodegradation of PAHs (naphthalene, anthracene, and 1,10-phenanthroline) was detected spectrophotometrically. Recorded data revealed that biodegradation of the tested PAHs was time dependent. Elevated level of naphthalene biodegradation (86.47%) was observed compared to anthracene (27.87%) and 1,10-phenanthroline (24.51%) within 3 days post incubation. Naphthalene was completely degraded within 5 days. Further incubation enhanced the biodegradation of both anthracene and 1,10-phenanthroline until reaches 93.69% and 92.00% biodegradation of the initial concentration within an incubation period of 11 and 14 days, respectively. Naphthalene was selected as a PAH model. HPLC and thin layer chromatography of naphthalene biodegradation products at time intervals proposed that naphthalene was first degraded to alpha- and ß-naphthol which was further metabolized to salicylic and benzoic acid. The metabolic pathway of naphthalene degradation by this fungus was elucidated based on the detected metabolites. The expression profile of six laccase isomers was evaluated using real-time PCR. The transcriptome of the fungal laccase isomers recorded higher levels of transcription under optimized fermentation conditions especially in presence of both naphthalene and Tween 80. The accumulation of such useful metabolites from the biodegradation of PAH pollutants recommended white rot fungus as a potential candidate for production of platform chemicals from PAH wastes

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Capacidad antiséptica del digluconato de clorhexidina 0.05% y cloruro de cetilpiridinio 0.05%. Estudio clínico prospectivo y microbiológico / Antiseptic capacity of 0.05% Chlorhexidine digluconate and 0.05% Cetylpyridinium chloride. A prospective and microbiological clinical study

Introducción: El objetivo de este estudio consiste en evaluar la eficacia clínica y microbiológica de un colutorio a base de digluconato de clorhexidina (CHX) 0,05% y cloruro de cetilpiridinio (CPC) 0,05%, y otro colutorio sin propiedades antisépticas, empleados como coadyuvantes de los métodos de higiene oral. Material y métodos: Se llevó a cabo un estudio microbiológico que evaluó la capacidad de los colutorios para inhibir la formación y adherencia de un biofilm bacteriano de Streptococcus oralis mediante espectrofotometría, y un ensayo clínico, aleatorizado y doble ciego sobre una muestra de 48 pacientes, los cuales fueron asignados aleatoriamente a cada colutorio. A: CHX 0,05%, CPC 0,05% y lactato de cinc 0,14% y B: permethol 0.10% y provitamina B5 0.50%. El índice de placa (IP), el índice gingival modificado (IGM) y el índice de sangrado (IS) fueron evaluados con periodicidad mensual y trimestral. Resultados: El colutorio a base de CHX 0,05% y CPC 0,05% evidenció una elevada capacidad para inhibir la formación (P=0,013) y adherencia (P=0,001) del biofilm bacteriano Se observaron diferencias estadísticamente significativas en el IP inter-grupos a los tres meses de observación (P<0,001). También se observaron diferencias en el IGM al mes (P=0,034) y a los tres meses de observación (P<0,001); y en el IS al mes (P=0,004) y a los tres meses de observación (P=0,002). Conclusiones: El colutorio a base de CHX 0,05% y CPC 0,05% posee una capacidad superior para reducir la placa bacteriana y la gingivitis

Introduction: The aim of this study was to evaluate the clinical and microbiological efficacy of a mouthrinse containing 0.05% chlorhexidine digluconate (CHX) and 0.05% cetylpyridinium chloride (CPC), and another mouthrinse without antiseptic properties, used as adjuvants to oral hygiene methods. Material and methods: First a microbiological study using spectrophotometry was done to assess the ability of both mouthrinses to inhibit the formation and adhesion of an Streptococcus oralis biofilm. Then, a randomised, double-blind clinical trial was performed on a sample of 48 patients, who were randomly assigned to each mouthrinse. A: 0.05% CHX and 0.05% CPC, and B: 0.10% permethol and 0.50% provitamin B5. Plaque index (PI), modified gingival index (MGI) and bleeding index (BI) were assessed at one and three months. Results: The 0.05% CHX and 0.05% CPC mouthrinse showed a high capacity to inhibit the formation (P=0.013) and adhesion (P=0.001) of the bacterial biofilm. Statistically significant differences were observed in the inter-group PI after three months of monitoring (P<0.001). Differences were also observed in MGI after one month (P=0,034) and after three months of monitoring (P<0,001); and in BI after one month (P=0,004) and after three months of monitoring (P=0,002). Conclusions: The 0.05% CHX and 0.05% CPC mouthrinse has a good capacity to reduce bacterial plaque and gingivitis

Evaluación de las condiciones de desamargado en húmedo de quinoa (Chenopodium quinoa Willd) / Evaluation of wet de-bittering conditions of quinoa (Chenopodium quinoa Willd)

Introducción: los granos de quinoa presentan en su episperma saponinas, compuestos con actividad antinutricional y que le otorgan sabor amargo al grano, por lo que deben desamargarse previo a su consumo. La falta de precisión acerca de las condiciones más adecuadas para realizarlo por método húmedo, evidencia la necesidad de contar con información que aporte claridad. Objetivo: el objetivo del trabajo fue evaluar las condiciones de desamargado vía húmeda en granos de quinoa, con el fin de comparar su efectividad con un método cuantitativo. Materiales y métodos: se evaluaron como variables el tiempo, relación agua/granos y temperatura. Para determinar el contenido de saponinas residuales, se utilizó el método de la espuma (estimación afrosimétrica) y se compararon los resultados con espectrofotometría. Resultados y discusión: todas las variables ejercieron un efecto significativo y una correlación negativa sobre el contenido de saponinas. La interacción de las variables permitió establecer las condiciones de extracción que tuvieron mayor eficiencia: 6 minutos, relación masa granos/solvente 10 mL/g, independientemente de la temperatura. Por espectrofotometría, se observó la misma tendencia. Conclusiones: la conjugación de estas condiciones permite realizar lavados en tiempos breves, con una cantidad de agua determinada y sin la necesidad de aplicar temperatura. El método demostró ser sencillo, práctico y eficiente para la remoción de las saponinas

Introduction: quinoa grains present in its episperm saponins, compounds with antinutritional activity that give bitter flavor to the grain. Therefore, they must be previously removed for their consumption. The lack of precision about the most appropriate conditions to perform it by wet method, demonstrates the need to have information that provides clarity. Aim: the aim of this work was to evaluate the conditions of wet de-bittering in grains of quinoa, in order to compare its effectiveness with a quantitative method. Materials and methods: Time, water/grain mass ratio and temperature were evaluated as variables. To determine the content of saponins, foam method (afrosimetric estimation) was used and the data obtained by spectrophotometric method was used to compare. Results and discussion: All the variables presented a significant effect and a negative correlation on the saponin content. The interaction between the variables allowed establishing the conditions of extraction that had greater efficiency: 6 minutes, solvent/grain mass ratio 10:1, independently of the temperature. The same tendency was observed by spectrophotometry. Conclusions: the conjugation of these conditions enables to carry out washes in short periods of time, with a certain amount of water and without the need to apply temperature. The method proved to be simple, practical and efficient for the removal of saponins

Comparación del efecto antibacteriano de tres tipos de miel sobre el Streptococcus mutans (ATCC(R) 25175(TM)) / Comparison about antimicrobial effects of three different cain of honey bee on Streptococcus mutans (ATCC(R) 25175(TM))

Objetivo: Comparar el efecto antibacteriano in vitro de muestras de miel de Apis mellifera producida en la Costa, Sierra y Selva contra Streptococcus mutans ATCC 25175. Material y métodos: Se evaluó el efecto en 3 grupos distribuidos en concentraciones de 100%, 50% y 25% para cada miel. Se hicieron 5 repeticiones por grupo experimental. La sensibilidad bacteriana se evaluó mediante el método de difusión en pozo. El espécimen bacteriano fue reactivado en caldo nutritivo, para inocularlo en cultivo Agar Cerebro Corazón. Resultados: Al enfrentar el microorganismo a las mieles de abeja, se obtuvo halos promedios de inhibición de 27,84 mm y 14,38 mm para las concentraciones de 100% y 50% de la miel de abeja de origen de sierra. Conclusión: sin embargo, las mieles de abeja de origen costa y selva no presentaron halos de inhibición. Se concluye que la miel de abeja de origen de Sierra al 100% y 50% tienen efecto antibacteriano sobre S. mutans ATCC 25175

Objective: To compare the in vitro antibacterial effect of samples of Apis mellifera honey produced in Costa, Sierra and Selva against Streptococcus mutans ATCC 25175. Material and methods: The effect was evaluated in 3 groups distributed in concentrations of 100%, 50 % and 25% for each honey. Five repetitions were made per experimental group. The bacterial sensitivity was evaluated by the well diffusion method. The bacterial specimen was reactivated in nutritious broth, to inoculate it in heart agar culture. Results: When facing the microorganism to the honeys of bee, average halos were obtained of inhibition of 27,84 mm and 14,38 mm for the concentrations of 100% and 50% of the honey of bee of origin of saw. Conclusion: nevertheless, bee honeys of coastal and jungle origin did not present inhibition halos. It is concluded that bee honey of Sierra origin at 100% and 50% have antibacterial effect on S. mutans ATCC 25175

The impact of obesity in the cardiac lipidome and its consequences in the cardiac damage observed in obese rats / El impacto de la obesidad sobre el lipidoma cardiaco y sus consecuencias en el daño cardiaco en ratas obesas

Aims: To explore the impact of obesity on the cardiac lipid profile in rats with diet-induced obesity, as well as to evaluate whether or not the specific changes in lipid species are associated with cardiac fibrosis. Methods: Male Wistar rats were fed either a high-fat diet (HFD, 35% fat) or standard diet (3.5% fat) for 6 weeks. Cardiac lipids were analyzed using by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Results: HFD rats showed cardiac fibrosis and enhanced levels of cardiac superoxide anion (O2), HOMA index, adiposity, and plasma leptin, as well as a reduction in those of cardiac glucose transporter (GLUT 4), compared with control animals. Cardiac lipid profile analysis showed a significant increase in triglycerides, especially those enriched with palmitic, stearic, and arachidonic acid. An increase in levels of diacylglycerol (DAG) was also observed. No changes in cardiac levels of diacyl phosphatidylcholine, or even a reduction in total levels of diacyl phosphatidylethanolamine, diacyl phosphatidylinositol, and sphingomyelins (SM) was observed in HFD, as compared with control animals. After adjustment for other variables (oxidative stress, HOMA, cardiac hypertrophy), total levels of DAG were independent predictors of cardiac fibrosis while the levels of total SM were independent predictors of the cardiac levels of GLUT 4. Conclusions: These data suggest that obesity has a significant impact on cardiac lipid composition, although it does not modulate the different species in a similar manner. Nonetheless, these changes are likely to participate in the cardiac damage in the context of obesity, since total DAG levels can facilitate the development of cardiac fibrosis, and SM levels predict GLUT4 levels (AU)

Objetivos: Explorar el impacto de la obesidad sobre el perfil lipídico cardiaco en ratas con obesidad inducida por dieta. Se evaluó, además, si estos cambios se asocian con fibrosis cardiaca. Métodos: Ratas macho Wistar fueron alimentadas con una dieta con alto contenido en grasa (HFD; 35% grasa) o con una dieta estándar (3,5% grasa) durante 6 semanas. El análisis del lipidoma cardiaco se realizó mediante cromatografía líquida en tándem con espectrofotometría de masas. Resultados: Las ratas HFD presentaron fibrosis cardiaca, estrés oxidativo y un aumento en el índice HOMA, adiposidad y los niveles circulantes de leptina así como una reducción en los niveles cardiacos del transportador de glucosa (GLUT 4) en comparación con las ratas controles. El análisis del lipidoma cardiaco mostró un aumento de los niveles de triglicéridos especialmente los que contenían ácido palmítico, esteárico o araquidónico, un incremento en los de diacilglicerol (DAG) aunque no cambios en los de diacilfosfatidilcolina y una reducción en los de diacilfosofatidiletanolamina, diacilfosfatidilinositol o de esfingomielinas (SM) en las ratas HFD en comparación con las control. Después del ajuste por otras variables (estrés oxidativo, hipertrofia cardiaca, índice HOMA), los niveles de DAG fueron predictores independientes de fibrosis cardiaca mientras que los de SM fueron de los de niveles de GLUT4. Conclusiones: La obesidad ejerce un impacto importante sobre el lipidoma cardiaco. Estos cambios parecen participar en el daño cardiaco en el contexto de la obesidad ya que los niveles de DAG podrían facilitar el desarrollo de fibrosis miocárdica y los de SM los de GLUT 4 (AU)

Determinación de los niveles de zinc urinarios en gestantes de bajo nivel socioeconómico del municipio de Baranoa del departamento del Atlántico / Determination of levels of urinary zinc in pregnant women of low socioeconomic level of the municipality of Baranoa of the Department of Atlantic

Introducción: El zinc es uno de los micronutrientes esenciales en el organismo por intervenir en numerosos procesos biológicos como el crecimiento y desarrollo, siendo de especial importancia durante el periodo de gestación. Objetivo: Determinar los niveles de zinc urinario en gestantes del municipio de Baranoa del (Atlántico) por el método colorimétrico utilizando zincon (MCZ) y el método de espectrofotometría de absorción atómica (MEAA) y comparar los niveles de zinc urinario por el método de MCZ y MEAA. Métodos: Se estudiaron 54 gestantes entre 24 y 30 años de edad, las cuales fueron atendidas en el Hospital José Gómez Heredia del municipio de Baranoa (Atlántico), entre los meses de enero a agosto del año 2008 cuando se encontraban en las semanas 8-15, 20-25 y 32-36 de la gestación. Las gestantes llenaron una encuesta acerca de datos generales que incluye edad e historia patológica y entregaron muestras de orina durante los tres trimestres de gestación. Las muestras fueron colectadas en ayuna de 12 horas y conservadas a -20°C. Luego se determinó el zinc urinario por el MEAA y MCZ. Resultados: Los niveles totales de zinc urinario fueron de 16.2±7 μg/dL por MCZ y 25±16 μg/dL por MEAA, se encontró que el zinc urinario fue de 17.81±5.20 μg/dL, 16±6.50 μg/dL y 14.30±9.05 μg/dL, para el primero, segundo y tercer trimestre de gestación por MCZ y 27.2 ± 16.8μg/dL, 19.8 ± 14.9b μg/dL, 27.3 ± 14.5a μg/dL, para el primero, segundo y tercer trimestre de gestación por MEAA. Los niveles de Zn determinados por MCZ y MEAA presentaron diferencias estadísticamente significativas (p≤0.05), indicando que el MEAA detecta mejor la excreción de Zn. Pero el MCZ propuesto se puede utilizar para estudios a largo plazo. Conclusiones: El comportamiento del zinc urinario en la gestación mostró variaciones, hallando las concentraciones de zinc urinario más bajo en el segundo y tercer trimestre de la gestación

Introduction: Zinc is one of the essential micronutrients in the organism for intervening in numerous biological processes such as growth and development, being of special importance during the gestation period. Objective: To determine the levels of urinary zinc in pregnant women of the municipality of Baranoa del (Atlántico) by the colorimetric method using zincon (MCZ) and the method of atomic absorption spectrophotometry (MEAA) and to compare the levels of urinary zinc by the MCZ method and MEAA. Methods: Fifty-four pregnant women between 24 and 30 years of age were studied, who were treated at the José Gómez Heredia Hospital in the municipality of Baranoa (Atlántico), between the months of January and August 2008 when they were found in weeks 8- 15, 20-25 and 32-36 of gestation. Participants completed a survey on general data including age and pathological history and delivery of urine samples during the three trimesters of pregnancy. Samples were collected in a 12-hour fast and stored at -20°C. Urinary zinc was then determined by the MEAA and MCZ. Results: The total urinary zinc levels were 16.2 ± 7 μg / dL per MCZ and 25 ± 16 μg / dL per MEAA, the urinary zinc was found to be 17.81 ± 5.20 μg / dL, 16 ± 6.50 μg / dL and 14.30 ± 9.05 μg / dL, for the first, second and third trimesters of pregnancy by MCZ and 27.2 ± 16.8μg / dL, 19.8 ± 14.9b μg / dL, 27.3 ± 14.5a μg / dL, for the first, second and third trimesters of gestation by MEAA. Zn levels determined by MCZ and MEAA showed statistically significant differences (p≤0.05), indicating that MEAA better detects Zn excretion. But the proposed MCZ can be used for long-term studies. Conclusions: The behavior of urinary zinc in pregnancy showed variations, finding the concentrations of urinary zinc lower in the second and third trimesters of gestation

Estudio prospectivo de ka pulxiometría en el menor de una año en Urgencias? ¿Cuál es la localización más adecuada? / A prospective study of pulse oximetry in children under one year of age in emergency admissions: which is the most accurate location?

Introducción. La pulsioximetría es una de las técnicas más empleadas en Urgencias por su sencillez y carácter no invasivo. Nuestro objetivo fue determinar cuál es la mejor región anatómica para realizar la toma de saturación en pacientes menores de un año. Materiales y métodos. Estudio prospectivo observacional realizado en Urgencias Pediátricas del Hospital Infantil La Paz durante el año 2015. Resultados. Se incluyeron en el estudio 196 pacientes, 82 mujeres (41.8 %) y 114 varones (58.2 %). Los valores medios de saturación encontrada fueron: 1.er dedo: 96.7 %; pie: 98.2 %; palma de la mano: 97.6 %; muñeca: 97 %. La saturación tomada a nivel del pie fue significativamente mejor en relación con las otras tres localizaciones (p < 0.001). Conclusión. En los pacientes menores de un año, en ausencia de patología cardiopulmonar severa de base, la localización anatómica de colocación del sensor del pulsioxímetro influye en los valores de saturación. En nuestro estudio, la mejor localización para la toma de saturación en este grupo de pacientes resultó ser el dorso del pie (AU)

Introduction. Pulse oximetry is an appreciated tool useful in emergency departments because of its simplicity and noninvasive character. Objective. To determine which is the best anatomical location for saturation readings in children aged between 0-12 months. Methods. We conducted a prospective and observational study at the Pediatric Emergency Department of La Paz Hospital during 2015. Patients with severe cardiopulmonary disease were excluded from the study. Results. A total of 196 patients were included, 82 females (41.8 %) and 114 males (58.2 %). The average saturation percentages were: 96.7 % first finger; 98.2 % foot side; 97.6 % hand palm; 97% wrist. Saturation taken at the foot was significantly better in comparison with the other three locations (p < 0.001). Conclusion. Provided absence of severe cardiopulmonary disease, the best sensor location for saturation readings in children under 1 year of age was the lateral side of the foot (AU)

Efecto protector de 2 presentaciones comerciales de Ginkgo biloba sobre las alteraciones motoras inducidas por el jugo de yuca (Manihot esculenta Crantz) en la rata Wistar / The protective effect of two commercial formats of Ginkgo biloba on motor alterations induced by cassava juice (Manihot esculenta Crantz) in Wistar rats

Introducción: Se evaluó el efecto protector de 2 presentaciones comerciales de Ginkgo biloba sobre las alteraciones motoras inducidas por el consumo de jugo de yuca (Manihot esculenta Crantz) en ratas macho Wistar. Método: Los efectos se evaluaron en las pruebas de campo abierto y nado a los 0, 7, 14, 21 y 28 días de tratamiento, una hora después de la administración correspondiente. Resultados: A partir del día 21 del consumo de jugo de yuca incrementó el número de cuadros cruzados en campo abierto y, en la prueba de nado, produjo el nado lateral a partir del día 7, con respecto al grupo control. Conclusión: Los extractos de Ginkgo biloba previnieron las alteraciones motoras asociadas al consumo de jugo de yuca, probablemente por el contenido de flavonoides presentes en ambas presentaciones de Ginkgo biloba (AU)

Introduction: This study evaluated the protective effects of 2 commercial formats of Ginkgo biloba on motor alterations induced by cassava (Manihot esculenta Crantz) juice consumption in male Wistar rats. Methods: The effects were evaluated with the open field and swim tests at 0, 7, 14, 21, and 28 days of treatment, one hour after administering the product. Results: Compared to controls, open field crossings increased after day 21 of cassava juice consumption, and lateral swimming in the swim test was reported after day 7. Conclusion: Ginkgo biloba extracts prevented motor alterations associated with cassava juice consumption, probably due to the flavonoid content in both formats of Ginkgo biloba (AU)

Comparison of Three Independent Methods of Cephalexin Determination by Means of Potassium Caroate / Comparación de tres métodos independientes para la detección de cefalexina usando el potasio de caroata

Aims.Three different assays for the quantity determination of Cephalexin in pure substance were developed and compared using potassium caroate as analytical reagent. Materials and Methods. Cephalexin pure substance was used and analytical reaction by means of KHSO5 as an oxidant was studied. Voltammetric, kinetic-spectrophotometric and iodometric methods were developed and validated. Results. The chemical reaction is finished with formation of the S-oxide of Cephalexin in the iodometric and voltammetric methods and the S-oxide hydrolysis product in the kinetic-spectrophotometric method. The reaction finishes in 1 min (observation time). The methods have been validated and good results including precision, accuracy and recovery were obtained. The recovery percent ranged from 98.7 to 101.4%, RSD from 1.42 to 3.0%. The methods proposed are linear in a wide range: voltammetry 2-45 μg mL-1, kinetic-spectrophotometry 1-16 μg mL-1, and iodometry 0.05-0.35 mg mL-1. LOD and LOQ were calculated. The kinetic-spectrophotometric method is the most sensitive (LOQ=1.0 μg mL-1). Conclusions. The methods proposed are rapid, simple and inexpensive and could be applied to pharmaceutical preparation

Objetivo. Se han desarrollado tres métodos diferentes para la detección cuantitativa de Cefalexina en producto puro, usando el caroata de potasio como un reactivo analítico. Materiales y métodos. Fue estudiada la reacción analítica de cefalexina con KHSO5 como oxidante. Se han desarrollado y validado los métodos de voltamperimetría, de espectrofotometría cinética y de iodometría. Resultados. La reacción química se completa con la formación de s-óxido de Cefalexina dentro de los métodos de iodometría y de voltamperometría, y con la formación del producto de hidrólisis de s-óxido en el método de espectrofotometría cinética. La reacción se completa en 1 minuto (tiempo de observación). Los métodos han sido validados, y se han obtenido resultados buenos, incluida la exactitud, la fiabilidad y la reproducibilidad. El contenido de la sustancia básica oscila desde 98,7% hasta 101,4%. El RSD está entre 1,42 y 3,0%. Los métodos propuestos son lineales en un amplio espectro: la voltamperometría 2-45 μg ml-1, la espectrofotometría cinética 1-16 μg ml-1, y la iodometría 0,05-0,35 mg ml-1. Han sido calculados el límite de detección y el límite de cuantificación. El método de espectrofotometría cinética es el más sensible (el límite de cuantificación = 1,0 mcg ml-1). Conclusiones. Los métodos propuestos son rápidos, simples y baratos, y pueden ser utilizados en las preparaciones farmacéuticas

Self-micro emulsifying drug delivery systems: a strategy to improve oral bioavailability / Sistema de administración de fármacos autoemulsionante: una estrategia para mejorar la biodisponibilidad oral

Aim: Oral route has always been the favorite route of drug administration in many diseases and till today it is the first way investigated in the development of new dosage forms. The major problem in oral drug formulations is low and erratic bioavailability, which mainly results from poor aqueous solubility, thereby pose problems in their formulation. For the therapeutic delivery of lipophilic active moieties (BCS class II drugs), lipid based formulations are inviting increasing attention. Methods: To that aim, from the web sites of PubMed, HCAplus, Thomson, and Registry were used as the main sources to perform the search for the most significant research articles published on the subject. The information was then carefully analyzed, highlighting the most important results in the formulation and development of self-micro emulsifying drug delivery systems as well as its therapeutic activity. Results: Self-emulsifying drug delivery system (SMEDDS) has gained more attention due to enhanced oral bio-availability enabling reduction in dose, more consistent temporal profiles of drug absorption, selective targeting of drug(s) toward specific absorption window in GIT, and protection of drug(s) from the unreceptive environment in gut. Conclusions: This article gives a complete overview of SMEDDS as a promising approach to effectively deal with the problem of poorly soluble molecules

Objetivo: La vía oral siempre ha sido la ruta preferida de administración de fármacos en muchas enfermedades y hasta hoy es la primera forma investigada en el desarrollo de nuevas formas de dosificación. El principal problema en las formulaciones de fármacos orales es la baja y errática biodisponibilidad, lo que resulta fundamentalmente por la escasa solubilidad en agua, con lo que plantean problemas en su formulación. Para la administración terapéutica de los grupos activos lipófilos (BCS clase II drogas), las formulaciones a base de lípidos están teniendo cada vez más atención. Métodos: Con ese objetivo, a partir de los sitios web de PubMed, HCAplus, Thomson, y sus registros se utilizaron como fuentes principales para llevar a cabo la búsqueda de los artículos de investigación más importantes publicados sobre el tema. A continuación, la información fue analizada cuidadosamente, poniendo de relieve los resultados más importantes en la formulación y desarrollo de sistemas de administración de fármacos auto-emulsionante micro, así como su actividad terapéutica. Resultados: El sistema de administración de fármacos autoemulsionante (SMEDDS) ha ganado más atención debido a la mejorada que permite la reducción de la biodisponibilidad oral en dosis, los perfiles temporales más consistentes de la absorción del fármaco, la orientación selectiva de fármaco (s) hacia la ventana de absorción específica en el tracto gastrointestinal, y la protección del fármaco (s) desde el entorno poco receptivo en el intestino. Conclusiones: Este artículo proporciona una visión completa de SMEDDS como un enfoque prometedor para abordar eficazmente el problema de moléculas poco solubles

Utilidad de la tomografía computarizada de doble energía con un programa específico para la identificación de litiasis renales de ácido úrico / Usefulness of dual-energy computed tomography with and without dedicated software in identifying uric acid kidney stones

Objetivo. Valorar de manera prospectiva e in vivo la identificación de litiasis renales de ácido úrico con tomografía computarizada (TC) de doble energía (TCDE) con y sin software específico. Material y métodos. Se estudiaron 65 litiasis de 63 pacientes analizadas ex vivo con espectrofotometría y que habían sido estudiadas con una TCDE. Se valoró el rendimiento diagnóstico en identificar litiasis de ácido úrico con TCDE mediante el análisis de las densidades radiológicas de las litiasis utilizando el software específico, o sin utilizarlo (midiéndolo manualmente), y mediante el análisis de las ratios de densidad de las litiasis en ambas energías con o sin el software específico. Resultados. Las seis litiasis de ácido úrico incluidas fueron correctamente identificadas mediante la valoración de la ratio de densidades con un punto de corte de 1,21, tanto con el software específico como sin él, con un rendimiento diagnóstico perfecto, sin presencia de falsos positivos ni negativos. El estudio de densidades de las litiasis obtuvo valores de las curvas COR en clasificación de litiasis de ácido úrico de 0,92 para medición con la aplicación informática y de 0,89 para las mediciones manuales y una precisión diagnóstica del 84% (42/50) con el software y del 83,1% (54/65) para las mediciones manuales para un punto de corte de 538 UH. Conclusiones. El estudio de litiasis con TCDE permite identificar correctamente las litiasis de ácido úrico mediante el cálculo de la ratio de densidades en ambas energías. Los resultados obtenidos con y sin software específico son similares (AU)

Objective. To prospectively evaluate the usefulness of dual-energy computed tomography (DECT) with and without dedicated software in identifying uric acid kidney stones in vivo. Material and methods. We studied 65 kidney stones in 63 patients. All stones were analyzed in vivo by DECT and ex vivo by spectrophotometry. We evaluated the diagnostic performance in identifying uric acid stones with DECT by analyzing the radiologic densities with dedicated software and without using it (through manual measurements) as well as by analyzing the attenuation ratios of the stones in both energies with and without the dedicated software. Results. The six uric acid stones included were correctly identified by evaluating the attenuation ratios with a cutoff of 1.21, both with the dedicated software and without it, yielding perfect diagnostic performance without false positives or false negatives. The study of the attenuations of the stones obtained the following values on the receiver operating characteristic curves in the classification of the uric acid stones: 0.92 for the measurements done with the software and 0.89 for the manual measurements; a cutoff of 538 HU yielded 84% (42/50) diagnostic accuracy for the software and 83.1% (54/65) for the manual measurements. Conclusions. DECT enabled the uric acid stones to be identified correctly through the calculation of the ratio of the attenuations in the two energies. The results obtained with the dedicated software were similar to those obtained manually (AU)

Antioxidants, reactive oxygen species and oxidative damage associated to the presence of organochlorine pesticides in breast milk / Antioxidantes, especies reactivas de oxígeno y daño oxidativo asociado a la presencia de plaguicidas organoclorados en la leche materna

Introduction: Organochlorine pesticides (OCPs) can increase the production of reactive oxygen species (ROS), the effects of which can be countered by the antioxidant system, also present in breast milk. Objective: To evaluate the indicators of oxidative stress in breast milk associated to the presence of OCPs, and their relationship with seafood intake. Methods: Breast milk was collected from 108 lactating women. Indicators of oxidative stress (antioxidant enzyme activity, glutathione concentration, superoxide radical [O2 •-] production, lipid peroxidation and carbonylated protein concentration) were analyzed by spectrophotometry. OCPs concentrations were measured by gas chromatography. Results and discussion: O2 •- production had no significant relationship with OCPs concentrations. Significant correlations between OCPs concentrations and antioxidant enzyme activities (glutathione reductase [GR] activity and aldrin concentration [r = - 0.5], superoxide dismutase [SOD] activity and α-HCH concentration [r = 0.45]) were found. Oxidative damage had a low correlation with OCPs content (r < 0.30, p < 0.05). It is possible that OCP’s levels are not sufficient to increase O2 •- production, that production of ROS other than O2 •- is increased, or that the antioxidant capacity is sufficient to avoid oxidative damage in breast milk. Conclusion: Results from this study suggest that marine diet is not a determinant factor in the level of contamination by OCP’s or in the oxidative damage in breast milk (AU)

Introducción: los plaguicidas organoclorados (POC) pueden incrementar la producción de especies reactivas de oxígeno (ERO). Tales efectos pueden ser contrarrestados por el sistema antioxidante, el cual se encuentra también en la leche materna. Objetivo: evaluar los indicadores de estrés oxidativo en leche materna asociados a la presencia de POC y su relación con la ingesta de alimentos marinos. Métodos: la leche materna fue colectada de 108 mujeres lactantes. Los indicadores de estrés oxidativo (actividad enzimática antioxidante, concentración de glutatión, producción de radical superóxido [O2 •-], concentración de peroxidación de lípidos y carbonilos proteicos) se analizaron por espectrofotometría. Las concentraciones de POC se midieron por cromatografía de gases. Resultados y discusión: la producción de O2 •- no presentó relación significativa con las concentraciones de POC. Se encontraron correlaciones significativas entre las concentraciones de POC y la actividad de las enzimas antioxidantes (actividad de glutatión reductasa [GR] y concentración de aldrín [r = - 0,5], actividad de superóxido dismutasa [SOD] y concentración de α-HCH [r = 0,45]). El daño oxidativo mostró baja correlación con el contenido de POC (r < 0,30, p < 0,05). Es posible que los niveles de POC no sean suficientes para incrementar la producción de O2 •-, ya sea que el incremento en la producción de ERO se deba a especies reactivas diferentes a O2 •- o debido a que la capacidad antioxidante es suficiente para evitar el daño oxidativo en leche materna. Conclusión: los resultados de este estudio sugieren que la dieta marina no es un factor determinante en el nivel de contaminación por POC, ni en el daño oxidativo presente en leche materna (AU)

Valores de referencia de la actividad enzimática alfa-glucosidasa ácida linfocitaria / Reference values of intralymphocyte acid alpha-glucosidase activity

Introducción. La enfermedad de Pompe, también denominada déficit de maltasa ácida o glucogenosis tipo ii, es un trastorno metabólico autosómico recesivo caracterizado por un acúmulo anormal de glucógeno lisosomal, causado por la deficiencia de la enzima α-glucosidasa ácida (GAA). Según la edad de inicio y el grado de afectación orgánica, la enfermedad de Pompe se suele subdividir en 2 tipos: neonatal (infantile-onset) y tardío (late-onset). El diagnóstico clínico se confirma mediante la ausencia virtual (forma infantil) o marcada reducción (forma del adulto) de la actividad enzimática GAA en diferentes muestras biológicas. Material y métodos. El objetivo de este trabajo consiste en establecer los valores de referencia para la actividad enzimática GAA intralinfocitaria que constituye el método gold standard para el diagnóstico de la enfermedad. Resultados. Los resultados obtenidos en una población de sujetos control difieren de los publicados en otros trabajos, lo que refleja la importancia de establecer valores de referencia dentro de cada laboratorio (AU)

Introduction. Pompe disease also called acid maltase deficiency or glycogenosis type ii is an autosomal recessive metabolic disorder characterized by an abnormal accumulation of lysosomal glycogen caused by deficiency of the enzyme acid α-glucosidase (GAA). According to the age of onset and the extent of organ involvement, Pompe disease is usually divided into 2 subtypes: Neonatal (infantile-onset) and adult (late-onset). The clinical diagnosis is confirmed by the virtual absence (infantile form) or markedly reduced (adult form) GAA enzyme activity in different biological samples. Material and methods. The aim of this work is to establish reference values for intralymphocyte alpha-glucosidase acid activity, which is the 'gold standard' method for the diagnosis of Pompe disease. Results. The results obtained in a population of control subjects are different from those published in other studies. This reflects the importance of establishing reference values within each laboratory (AU)

Stability of spray-dried chitosan salts derived from lobster chitin as a raw material / Estabilidad de las sales de quitosana, obtenidas por secado de aspersión, derivadas de quitina de langosta

Aim. The objective of this work was to develop and validate a method for determining the degree of molar deacetylation of chitosan acetate and chitosan lactate, as well as to study the stability of both salts. Materials and Methods. A spectrophotometric method was validated according to internationally-established quantitative techniques. Three industrial batches of chitosan acetate and chitosan lactate, obtained by spray drying, were stored under shelf life conditions for twelve months. Organoleptic characteristics, the degree of molar deacetylation, pH, loss on drying and microbiological count were determined at the beginning and end of the study. Results and Discussion. The statistical data proved that the two methods complied with international standards for the validation of analytical techniques. It was shown that the procedures developed were linear, specific, precise and accurate, so they can be used for the purposes of quality control and stability study of the polymer salts. Salts remained in powder form, with a light-yellow to dark-yellow coloration. Values of loss on drying (2.5 - 5.2 %) of chitosan salt using acetic or lactic acid, as a solvent, indicated the good quality of spray-dried particles of chitosan. Similar behavior was obtained regarding pH. The two salts stayed within the parameters that determine their quality, both in the initial stage and after twelve months at room temperature. Conclusion: Spray drying chitosan acetate and chitosan lactate, stored at room temperature in a dry place, in double polyethylene bags and multilayer paper bags, kept their physical, chemical and microbiological characteristics for a period of twelve months

Objetivos. Desarrollar y validar un método para la determinación del grado de desacetilación molar del acetato de quitosana y lactato de quitosana, y realizar el estudio de estabilidad de ambas sales. Material y Métodos. Un método espectrofotométrico fue validado según lo establecido internacionalmente para técnicas cuantitativas. Tres lotes industriales de acetato de quitosana y lactato de quitosana, obtenidos mediante secado por aspersión, fueron almacenados bajo condiciones de vida de estante durante doce meses. Se determinaron las características organolépticas, grado de desacetilación molar, pH, pérdida por desecación y el conteo microbiológico al inicio y final del estudio. Resultados y Discusión. El análisis estadístico demostró que ambos métodos cumplieron con los parámetros internacionales establecidos. Se demostró que los procedimientos desarrollados fueron lineales, específicos, precisos y exactos, por lo que pueden ser empleados en el control de calidad y estudio de estabilidad. Las sales se mantuvieron en forma de polvo de coloración amarillo claro u oscura. Los valores de pérdidas por desecación (2,5 - 5,2 %), para el acetato y lactato de quitosana, demuestran la calidad de las partículas de quitosana obtenidas por secado por aspersión. Un comportamiento similar fue obtenido para el pH. Las dos sales mantuvieron los parámetros que determinan su calidad, transcurridos los doce meses a temperatura ambiente. Conclusión: El acetato y el lactato de quitosana, almacenados a temperatura ambiente y en lugares secos, en bolsas dobles de polietileno y sacos de papel multicapas, conservan durante doce meses sus características físicas, químicas y microbiológicas

Influencia de un observador en la hemólisis producida durante las extracciones de muestras sanguíneas en atención primaria / Influence of an observer in the haemolysis produced during the extraction of blood samples in primary care

Objetivo. Comprobar si una intervención basada en una observación directa, acompañada de información al personal de enfermería encargado de la extracción de sangre, contribuye a disminuir la hemólisis. Material y métodos. Muestreo aleatorio ponderado en centros de atención primaria del área de gestión sanitaria de la serranía de Málaga y diseño de estudio longitudinal transversal pre y postintervención. Período de estudio: desde agosto de 2012 a enero de 2015. Se determinó el nivel de hemoglobina libre en las muestras extraídas por espectrofotometría directa, y si la intervención realizada influía en el nivel de hemólisis y si esta se mantenía en el tiempo. Resultados. Partiendo de un porcentaje de muestras hemolizadas del 17% preintervención, tras la misma se obtuvo una reducción hasta de 6,1%. Un año más tarde, y en las mismas condiciones, se volvió a medir el porcentaje de hemólisis en las muestras analizadas y el porcentaje se situó en el 9%. Este resultado es superior al obtenido tras la intervención, pero inferior al obtenido antes de la misma. Las condiciones del transporte y del análisis fueron las mismas. Conclusiones. Una intervención basada en la observación directa e informativa en el proceso de extracción de muestras sanguíneas contribuye de manera significativa a reducir el nivel de hemólisis. Este efecto se mantiene en el tiempo, aunque es necesario repetirlo para mantener la efectividad del mismo. Las auditorías y los programas de formación continuada son útiles para asegurar la calidad de los procedimientos y mantener el nivel de atención necesario para un buena calidad asistencial (AU)

Objective. To check whether an intervention based on direct observation and complementary information to nurses helps reduce haemolysis when drawing blood specimens. Material and methods. Random sampling study in primary care centres in the serrania de Málaga health management area, using a cross-sectional, longitudinal pre- and post-intervention design. The study period was from August 2012 to January 2015. The level of free haemoglobin was measured by direct spectrophotometry in the specimens extracted. It was then checked whether the intervention influenced the level of haemolysis, and if this was maintained over time. Results. The mean haemolysis measured pre-intervention was 17%, and after intervention it was 6.1%. A year later and under the same conditions, the frequency of haemolysis was measured again the samples analysed, and the percentage was 9% These results are low when compared to the level obtained pre-intervention, but are higher when compared to the levels obtained immediately after the intervention. The transport and analysis conditions were the same. Conclusions. An intervention based on a direct and informative observation in the process of collecting blood samples contributes significantly to reduce the level of haemolysis. This effect is maintained in time. This intervention needs to be repeated to maintain its effectiveness. Audits and continuing education programs are useful for quality assurance procedures, and maintain the level of care needed for a good quality of care (AU)

Propuesta de un procedimiento de validación de un método para la determinación de cinc sérico: cumplimiento de los requisitos de la ISO 17025 / Validation of an in-house method for the determination of zinc in serum: Meeting the requirements of ISO 17025

Objetivo. Elaborar un esquema de validación de una técnica analítica siguiendo los requisitos de la ISO 17025. Material y métodos. Teniendo en cuenta la ISO 17025, los parámetros verificados fueron: selectividad, modelo de calibración y linealidad, precisión, exactitud, incertidumbre de medida e interferencias analíticas. Resultados. El procedimiento desarrollado fue aplicado satisfactoriamente para cuantificar cinc en suero por espectrofotometría de absorción atómica. Conclusión. Finalmente, se ha demostrado que nuestro método cumple con los requisitos exigidos de selectividad, linealidad, exactitud y precisión, haciéndolo adecuado para el fin requerido (AU)

Objective. The aim of this report is to propose a scheme for validation of an analytical technique according to ISO 17025. Material and methods. According to ISO 17025, the fundamental parameters tested were: selectivity, calibration model, precision, accuracy, uncertainty of measurement, and analytical interference. Results. A protocol has been developed that has been applied successfully to quantify zinc in serum by atomic absorption spectrometry. Conclusion. It is demonstrated that our method is selective, linear, accurate, and precise, making it suitable for use in routine diagnostics (AU)

Determination of cholesterol in human milk: an alternative to chromatographic methods / Determinación del colesterol en leche humana: una alternativa a los métodos cromatográficos

Introduction: human milk (HM) is considered the best option for feeding healthy infants. Cholesterol (CHOL) is important for proper development of the nervous system, and for hormone and vitamin synthesis in growing infants. Breastfeeding and dietary CHOL intake during infancy have been suggested to affect blood lipid levels and the risk of cardiovascular disease in adulthood. Gas chromatography is the technique most widely used to determine CHOL in HM. Chromatographic methods are specific for the determination of CHOL and other sterols present in HM, but are extremely time consuming, and the costs and equipment requirements mean that they are not accessible to all laboratories. Aim: the present study describes the optimization and validation of an enzymatic-spectrophotometric method for CHOL determination in mature HM. Method: determination of CHOL involves fat extraction with chloroform:methanol, hot saponification and extraction of the unsaponifiable fraction with diethyl ether. CHOL was determined by an enzymatic method in which the concentration of the lutidine dye formed is stoichiometric to the amount of CHOL, and is measured by the increase in light absorbance at 405 nm. Results: human milk fat (mg/mL) (27.5 ± 1.3) and CHOL (0.113 ± 0.004) in analyzed HM were within the ranges reported by others authors. Analytical parameters of the proposed method were assessed: The precision values (%) (expressed as the relative standard deviation (RSD)) were: 3.5 and 6.7 for intra- and inter-day, respectively. Accuracy, estimated by recovery assays, was 110 ± 1.6%. Conclusion: the validated enzymatic-spectrophotometric method for determining CHOL in HM constitutes an alternative for fast and simple analysis of CHOL with equipment requirements accessible to any laboratory (AU)

Introducción: la leche humana (HM) se considera el modo óptimo de alimentación en lactantes sanos. El colesterol (CHOL) es importante para el correcto desarrollo del sistema nervioso y la síntesis de hormonas y vitaminas en el crecimiento del lactante. Se ha constatado que la lactancia materna y la ingesta dietética de CHOL durante la infancia influye en los niveles de lípidos en sangre, así como en el riesgo de enfermedad cardiovascular en la edad adulta. La técnica más utilizada para determinar el CHOL en HM es la cromatografía de gases. Los métodos cromatográficos son específicos para la determinación del CHOL y otros esteroles presentes en la HM, pero el elevado tiempo consumido, los costes y la necesidad de una instrumentación específica hacen que no sea accesible para cualquier laboratorio. Objetivo: el presente estudio describe la optimización y validación de un método enzimático-espectrofotométrico para la determinación del CHOL en HM madura. Métodos: la determinación del CHOL requiere una extracción lipídica con cloroformo:metanol, saponificación en caliente y extracción del insaponificable con dietil éter. El CHOL fue determinado por un método enzimático en el que la concentración de lutidina formada es estequiométrica a la cantidad de CHOL, y se mide a 405 nm. Resultados: la cantidad de grasa (mg/mL) (27,5 ± 1,3) y de CHOL (0,113 ± 0,004) en la HM analizada se halla en el intervalo indicado por otros autores. Se evalúan parámetros analíticos del método propuesto: la precisión (expresada como desviación estándar relativa en %) fue de 3,5 y 6,7 para intra- e interdía, respectivamente. La exactitud, estimada mediante ensayos de recuperación, fue de 110 ± 1,6%. Conclusión: el método enzimático-espectrofotométrico validado para determinar el CHOL en HM constituye una alternativa para el análisis rápido y sencillo de CHOL empleando equipos accesibles para cualquier laboratorio (AU)