Evaluación de un inmunoensayo para la medida de anticuerpos anti-tiroglobulina y anti-tiroperoxidasa / Evaluation of an immunoassay for the antithyroglobulin and antithyroperoxidase measuring

Introducción: La medición de los anticuerpos frente a tiroglobulina (ATG) y peroxidasa tiroidea (ATPO) es de interés para identificar pacientes con tiroiditis autoinmune.Este estudio pretende evaluar un inmunoensayo comercial de electroquimioluminiscencia para ATG y ATPO, estudiando la imprecisión, la linealidad, sensibilidad analítica, evaluación del arrastre, e influencia de interferentes endógenos.Material y métodos: La imprecisión se evaluó usando tres soluciones con diferentes concentraciones de analitos, analizándose 20 veces en la misma serie analítica y durante 20 días consecutivos, calculando el coeficiente de variación. Para el estudio de linealidad se combinaron una muestra con elevada concentración de analitos y un diluyente, obteniéndose concentraciones intermedias que se analizaron por triplicado. El límite de detección se calculó haciendo 20 determinaciones de una muestra de diluyente. El arrastre se evaluó analizando una muestra con alta concentración de anticuerpos seguida por otra con concentraciones muy bajas. El estudio de interferencias se realizó añadiendo a mezclas de suero hemolizado, Intralipid 30% y bilirrubina.Resultados: Las imprecisiones totales obtenidas (%) fueron 26,63, 9,53, y 14,9 para ATG y 21,19, 14,82 y 5,77 para ATPO. La linealidad queda definida por las ecuaciones de regresión: Y=6.61+1.01X(ATG) y Y=16.37+0.97X(ATPO). El límite de detección fue 17,17 para ATG y 5 para ATPO. El arrastre no fue significativo. La hemólisis produjo interferencia significativa en ambos ensayos.Conclusiones: Las imprecisiones obtenidas son comparables a las declaradas por el fabricante. La sensibilidad analítica cumple las especificaciones del fabricante. El comportamiento de ambos ensayos es lineal y no se halla arrastre significativo. La hemólisis interfiere ambos ensayos. (AU)

Introduction: The measuring of antibodies against thyroglobulin (ATG) and thyroperoxydase (ATPO) is useful for identifying patients with autoimmunethyroiditis. This study tries to assess an electrochemiluminescent immunoassay for ATG and ATPO, evaluating imprecision, linearity, analytic sensitivity, carry-over and the influence of endogenous interferents.Material and methods: Imprecision was assessed using three pools with different analytes concentrations, performing within run and between run 20 times. Fort the linearity study a sample containing high analyte concentration and a solvent devoid of analyte were combined, obtaining intermediates concentrations, which were analyzed by triplicate. The limit of detection was calculated analyzing 20 times a sample devoid of analyte. Carry-over was evaluated analyzing a sample with a high antibody concentration followed by other one containing low antibody concentration. The interference study was carried-out adding hemolyzed, Intralipid 30% and bilirubin into sera pool.Results: Total imprecision obtained (%) were 26.63, 9.53, and 14.9 for ATG and 21.19, 14.82, and 5.77 for ATPO. Linearity was defined for the following regression equations: Y=6.61+1.01X (ATG) and, Y=16.37+0.97X (ATPO). The limit of detection was 17.17 for ATG and 5 for ATPO. Carry-over was not significant. Hemolysis caused significant interference in both assays.Conclusions: Imprecision obtained were similar to the manufacturer declared ones. Analytic sensibility complies the manufacturer’s specifications. The behavior of both assays was linear and significant carry-over was not found. Hemolysis interferes in both assays. (AU)

Utilidad del valor Ct en las infecciones respiratorias agudas causadas por el virus respiratorio sincitial A y B y los virus gripales A (H1N1)pdm09, A (H3N2) y B / Usefulness of Ct value in acute respiratory infections caused by respiratory syncytial virus A and B and influenza virus A (H1N1)pdm09, A (H3N2) and B

INTRODUCCIÓN: Las infecciones respiratorias agudas de causa viral son unas entidades muy frecuentes. La dificultad para valorar la detección de un determinado virus en estas entidades podría solucionarse con la determinación de la carga viral. MÉTODOS: Se ha realizado un estudio prospectivo sobre el valor medio de los Ct (cycle threshold value) detectados frente al VRS-A, VRS-B y los virus gripales A (H1N1)pdm09, A(H3N2) y B en pacientes de diferente procedencia y edad. La detección se ha realizado mediante una técnica de amplificación molecular (RT-PCR) comercial. RESULTADOS: Se han detectado valores medios de Ct distintos para cada virus. En las infecciones por VRS, no se han observado diferencias entre las causadas por el VRS-A o VRS-B en pediatría. De acuerdo con la edad de los pacientes solo se ha observado significación estadística en los incluidos en los grupos de 0-4 meses para el VRS-A y este grupo y el de 5-12 meses para el VRS-B (valores más elevados). En los pacientes adultos se ha detectado una carga viral menor que en los pediátricos. En las infecciones gripales no se ha observado significación estadística en los valores medios detectados en los pacientes procedentes de la Red Centinela, en los diagnosticados en las urgencias de adultos ni en los ingresados hospitalarios. En los pacientes adultos ingresados en la UCI solo se ha observado un valor medio algo más bajo en los infectados por el virus gripal A (H1N1)pdm09 pero sin significación estadística. No hubo ningún paciente ingresado en la UCI con infección por gripe B. CONCLUSIÓN: La detección de la carga viral podría ser una buena herramienta para la evaluación, seguimiento y pronóstico de las infecciones respiratorias agudas víricas. A excepción de las causadas por el VRS, no se han observado diferencias significativas en las infecciones gripales, salvo en los pacientes pediátricos de menor edad

INTRODUCTION: Acute respiratory infections of viral cause are very frequent entities. The difficulty in evaluating the detection of a virus in these entities could be solved by determining the viral load. METHODS: A prospective study on the mean Ct value (cycle threshold value) detected against RSV-A, RSV-B and influenza A (H1N1)pdm09, A (H3N2) and B viruses in patients of different origin and age was performed. Detection was performed using a commercial molecular amplification (RT-PCR) technique. RESULTS: Different mean Ct values were detected for each virus. In RSV infections, no differences were observed between those caused by RSV-A or RSV-B in children. Depending on the patient's age, the only statistical significance was observed in those included in the 0-4 month groups for RSV-A and this group and the 5-12 months group for RSV-B (higher values). A lower viral load was detected in adult patients than in paediatric patients. In influenza infections, no statistical significance was observed in the mean values detected in patients from the Red Centinela ("sentinel network", a Spanish network of doctors aimed at research and surveillance of diseases), those diagnosed in the adult emergency room or in hospital admissions. In the adult patients admitted to the ICU, only a slightly lower mean value was observed in those infected with influenza A (H1N1)pdm09, but without statistical significance. There were no patients admitted to the ICU with influenza B infection. CONCLUSION: The detection of viral load could be a good tool for the evaluation, monitoring and prognosis of acute viral respiratory infections. With the exception of those caused by RSV, no significant differences were observed in influenza infections except in younger paediatric patients