Diagnóstico por amplificación isotérmica de ácidos nucleicos. Oportunidad para la farmacia comunitaria / Diagnosis by isothermal amplification of nucleic acids. Opportunity for community pharmacy

Esta revisión se centra en describir nuevos sistemas de diagnóstico molecular de tipo POC disponibles en el mercado que pueden implementarse fácilmente en farmacias comunitarias y tienen el potencial de ampliar la cartera de servicios farmacéuticos y hacer una contribución significativa a la mejora de la salud pública.El conocimiento de nuevas técnicas de diagnóstico molecular distintas de la PCR es relativamente desconocido. Sin embargo, las opciones disponibles son diversas y han alcanzado suficiente madurez tecnológica para su uso a gran escala. La pandemia de SARS-CoV-2 ha sacado al mercado pruebas de diagnóstico que, en algunos casos, se han utilizado exclusivamente en investigación durante décadas.La tecnología isotérmica de amplificación de ácidos nucleicos sigue evolucionando y es probable que en los próximos años seamos testigos de un aumento exponencial de su uso, así como del desarrollo de nuevas mejoras que simplifiquen y reduzcan aún más el coste de cada ensayo.Igualmente, no podemos obviar el hecho de que durante la pandemia de COVID-19, el público se ha habituado a autodiagnosticarse a través de canales de distribución masiva como las farmacias comunitarias, lo que puede abrir el sector a otras enfermedades —como las de transmisión sexual o salud animal—, el control de alimentos, la contaminación del agua y del aire (hongos) o la presencia de alérgenos.El conocimiento de estas nuevas tecnologías es esencial estrategia de vigilancia tecnológica e inteligencia competitiva del sector farmacéutico.(AU)

Detección y cuantificación de VHB y VHC en muestras de plasma mediante la utilización de diferentes ensayos moleculares: estudio comparativo / Detection and quantification of HBV and HCV in plasma samples by means of different molecular assays: Comparative study

Introducción: La carga viral es un marcador muy útil para realizar el seguimiento de los pacientes infectados por VHB y VHC. Este trabajo compara ensayos basados en amplificación mediada por transcripción y en PCR a tiempo real con el objetivo de comprobar si pueden ser intercambiables. Material y métodos: Estudio bicéntrico en el que se analizó la carga viral de 147 muestras de plasma de pacientes infectados por VHB y 229 por VHC, mediante ensayos basados en amplificación mediada por transcripción (Aptima® HBV Quant y Aptima® HCV Quant Dx, que utilizan el sistema Panther (Hologic®)) y PCR a tiempo real (COBAS® AmpliPrep / COBAS® TaqMan® y COBAS® 6800), calculando el grado de concordancia entre ellos. Resultados: Se detectó carga viral en ambos equipos en 60 (40,82%) muestras de VHB (mediana del log de la carga viral: COBAS®: 2,51UI/mL (RIC 2,20-3,17), Panther: 2,71UI/mL (RIC 2,21-3,22)) y en 39 (16,96%) muestras de VHC (mediana del log de la carga viral: COBAS®: 3,93UI/mL (RIC 2,24-6,01), Panther: 3,80UI/mL (RIC 1,99-6,14)). La concordancia entre ambos equipos fue de κ=0,943 para VHB y κ=0,925 para VHC. La comparación de las muestras con carga viral detectada mediante los 2 ensayos mostró una correlación alta tanto para VHB (R2=0,86) como para VHC (R2=0,97). Conclusiones: Los ensayos basados tanto en amplificación mediada por transcripción como en PCR a tiempo real pueden ser intercambiables para el manejo de pacientes infectados con VHB y VHC.(AU)

Introduction: Viral load is a very useful marker for monitoring patients infected with HBV and HCV. This work compares assays based on transcription-mediated amplification and on real-time PCR to verify whether they can be interchangeable. Material and methods: a bicentric study, in which 147 plasma samples from patients infected with HBV and 229 with HCV were analyzed, was carried out. Transcription-mediated amplification-based assays (Aptima® HBV Quant and Aptima® HCV Quant Dx, employing Panther system (Hologic®)) and on real-time PCR (COBAS® AmpliPrep / COBAS® TaqMan® and COBAS® 6800) were used and the degree of concordance between them was calculated. Results: Viral load was detected in both systems in 60 (40.82%) HBV samples (median log viral load: COBAS®: 2.51IU/mL (IQR 2.20-3.17), Panther: 2.71IU/mL (IQR 2.21-3.22)) and in 39 (16.96%) HCV samples (median log viral load: COBAS®: 3.93IU/mL (IQR 2.24-6.01), Panther: 3.80IU/mL (IQR 1.99-6.14)). The agreement between both systems was κ=0.943 for HBV and κ=0.925 for HCV. Comparison of viral load samples detected by both assays showed a hight correlation for HBV (R2=0.86) and for HCV (R2=0.97). Conclusions: Both transcription-mediated amplification and on real-time PCR based assays may be interchangeable for the management of patients infected with HBV and HCV.(AU)

Rapid antigen test for adenovirus in children: Age and onset of symptoms are important / Antígeno de adenovirus en niños: la edad y la aparición de los síntomas son importantes

Introduction: Respiratory infection is the most common human adenovirus (HAdV) disease accounting for 7–8% of viral respiratory diseases in children less than 5 years. Differentiation of bacterial infections and viral infections is a common clinical problem. Material and methods: One hundred oropharyngeal swabs obtained from October 2019 to November 2020 from patients attending the paediatric emergency room with suspicion of upper respiratory tract infection and negative results in influenza and RSV tests were included. Oropharyngeal swabs specimens were rapidly processed with STANDARD™ F Adeno Respi Ag FIA and the results were confirmed by RealStar® Adenovirus PCR Kit 1.0 (Altona diagnostics). Results: STANDARD™ F Adeno Respi Ag FIA had sensitivity and specificity values of 71.93% and 100% respectively. The performance of the test was higher in samples from children younger than 24 months and taken less than 72h since the beginning of symptoms. In this subgroup the test had 88.8% sensitivity and 100% specificity. Conclusion: STANDARD™ F Adeno Respi Ag FIA may improve the management of respiratory diseases in children younger than 24 months and less than 72h since the beginning of symptoms in paediatric emergency rooms.(AU)

Introducción: Las infecciones respiratorias son la enfermedad más común asociada a los adenovirus humanos (AdvH)y causan del 7 al 8% de las enfermedades respiratorias víricas en niños menores de 5 años. La distinción entre las infecciones bacterianas y las víricas constituye un problema clínico frecuente. Materiales y métodos: El estudio incluyó 100 hisopos orofaríngeos obtenidos entre octubre de 2019 y noviembre de 2020 de pacientes que habían acudido a los servicios de urgencias pediátricas con sospecha de infección de las vías respiratorias superiores y resultados negativos en las pruebas de gripe y VRS. Las muestras de los hisopos orofaríngeos se procesaron rápidamente con Standard™ F Adeno Respi Ag FIA y los resultados se confirmaron mediante RealStar® Adenovirus PCR Kit 1.0 (altona Diagnostics). Resultados: Standard™ F Adeno Respi Ag FIA tenía unos valores de sensibilidad y especificidad del 71,93% y el 100%, respectivamente. El rendimiento de la prueba fue superior en muestras de niños menores de 24 meses y tomadas menos de 72 horas después del inicio de los síntomas. En este subgrupo, la prueba tuvo una sensibilidad del 88,8% y una especificidad del 100%. Conclusión: Standard™ F Adeno Respi Ag FIA puede mejorar la gestión de las enfermedades respiratorias en niños menores de 24 meses con menos de 72 desde el inicio de los síntomas en servicios de urgencias pediátricas.(AU)

Aplicación de la PCR múltiple ALLPLEX TM ENTERO-DR en un protocolo de aislamiento por enterobacterias multirresistentes en el Complejo Hospitalario Universitario de Albacete / Multiple PCR ALLPLEX TM ENTERO-DR for multidrug- resistant Enterobacteriaceae management at Albacete University Hospita

Fundamentos: Las enterobacterias multirresistentes (EBMR) suponen una amenaza para la Salud Pública, siendo el cribado y aislamiento de pacientes colonizados importante para evitar su diseminación. La PCR múltiple es una técnica novedosa, capaz de proporcionar un diagnóstico rápido con sensibilidad y especificidad altas. El objetivo de este trabajo fue evaluar la aplicación de PCR múltiple en el protocolo de aislamiento por EBMR desde su implantación en nuestro centro. Métodos: Se realizó un estudio observacional descriptivo y retrospectivo. Se analizaron los resultados del estudio de colonización por EBMR a pacientes hospitalizados, mediante PCR múltiple ALLPLEX TM ENTERO-DR, entre noviembre de 2019 y mayo de2021. Se calcularon las frecuencias de resultado positivo, negativo, no interpretable o inválido, de microorganismos identificados, el motivo de petición y actuación posterior. Se calcularon la mediana y Rango Intercuartílico (R.I.) del tiempo desde el cribado hasta el resultado parcial y final. También se calcularon la mediana y R.I. desde el antecedente de colonización/infección según resultado de la prueba rápida. Resultados: Se detectó mecanismo de resistencia en el 31,47% de las pruebas, siendo más frecuentemente aislado E. coli BLEE (68,99%). La mediana de tiempo hasta el resultado parcial fue de 5,75 horas (R.I.: 2,67), existiendo diferencias estadísticamente significativas con el tiempo de cultivo teórico. El motivo principal de petición fue cribado por antecedente (80,12%) y la actuación más frecuente fue no aislar (41,70%). El 14,81% de las pruebas fue positivo si el antecedente de infección/colonización era mayor a cuarenta y nueve meses. Conclusiones: La PCR múltiple es una prueba útil para el control de la colonización por EBMR, que disminuye el tiempo hasta resultado y facilita la toma de decisiones rápidas, pudiendo contribuir a la adecuada gestión de recursos y comodidad de pacientes.(AU)

Background: Multi-resistant Enterobacteriaceae (MRE) are a public health threat, with screening and isolation strategies beingimportant to stop its dissemination. Multiplex PCR is a novel method capable of rapid diagnosis with high sensitivity and specificity. In this study, our objective was to evaluate its application to multidrug-resistant Enterobacteriaceae management since its implementation in our hospital. Methods: An observational retrospective descriptive study of multiplex PCR ALLPLEX TM ENTERO-DR results to screen inpatients colonized by MRE took place from November 2019 to May 2021. We calculated the percentage of positive, negative, non-identifiable or invalid results, identified microorganisms, reason for requesting it and subsequent actions. Median and I.R. from sampling time to partial and theoretical culture time, and since last colonization/infection depending on test results were calculated. Results: Resistance mechanisms were detected in 31.47% of tests, being E. coli ESBL (68.99%) the most frequently isolated microorganism. Median time to partial result was 5.75 hours (I.R.: 2.67), having statistically significant differences with theoretical time. The most important reason to request the test was screening (80.12%) and the most frequent action taken was not to isolate (41.70 %). Whenever forty-nine months or more since last colonization/infection have passed, only 14.81% of the samples tested positive. Conclusions: Multiplex PCR is a useful test to manage colonized patients, capable of giving a rapid result and allowing for quicker decision-making, contributing to a good use of resources and patient comfort.(AU)

Comparative study on Saliva and Nasopharyngeal swabs and the outcome of RT-PCR test in patients with mild symptoms of SARS-CoV-2 / Estudio comparativo de muestras de saliva y nasofaríngeas y el resultado de la prueba RT-PCR en pacientes con síntomas leves de SARS-CoV-2

Aim A simple and reliable method for diagnosing COVID 19 infections is the needed. The role of saliva in the transmission of the infection has already been established. Method Saliva and nasopharyngeal swabs from patients suspected to have COVID 19 infections were taken simultaneously, and the results of the RT-PCR were compared. Result Total 405 samples were collected, of which 250 males and 155 females. In the 391 samples included for analysis, 370 (94.63%) samples were found to have concordance results, and 21 (5.37%) samples had discordant results. Conclusion The use of saliva to diagnose COVID 19 infection is reliable, and its use can be recommended. (AU)

Objetivo Un método simple y confiable para diagnosticar infecciones por COVID 19 es necesario. Ya se ha establecido el papel de la saliva en la transmisión de la infección. Método Se tomaron simultáneamente hisopos de saliva y nasofaríngeos de pacientes con sospecha de infección por COVID 19 y se compararon los resultados de la RT-PCR. Resultado Se recogieron 405 muestras, de las cuales 250 hombres y 155 mujeres. En las 391 muestras incluidas para el análisis, se encontró que 370 (94,63%) muestras tenían resultados de concordancia y 21 (5,37%) muestras tenían resultados discordantes. Conclusión El uso de la saliva para diagnosticar la infección por COVID 19 es confiable y se puede recomendar su uso. (AU)

Distrofia miotónica tipo 1: 13 años de experiencia en un hospital terciario. Estudio clínico y epidemiológico. Correlación genotipo-fenotipo / Myotonic dystrophy type 1: 13 years of experience at a tertiary hospital. Clinical and epidemiological study and genotype-phenotype correlation

Introducción: Se desconoce la incidencia de la distrofia miotónica tipo 1 (DM1), enfermedad con gran variedad fenotípica, en nuestra región. El objetivo de nuestro trabajo es estimar la incidencia de DM1 en nuestro centro (referencia en Aragón) e identificar las características propias de nuestra población (correlación genotipo-fenotipo). Métodos: Estudio descriptivo retrospectivo de 459 pacientes clasificados según número de repeticiones CTG en: normal (5-35), premutado (36-50), protomutado (51-80), pequeñas expansiones (81-150), intermedias (151-1.000) y grandes (> 1.000). Además, según el fenotipo mostrado, se categorizaron como: no afectos (5-50 CTG), forma leve o asintomática (51-150 CTG), clásica (151-1.000 CTG) y severa (> 1.000 CTG). Resultados: La incidencia de DM1 fue de 20,61 (IC 95%: 19,59-21,63) casos por millón de individuos-año. Se evidenció una correlación inversa entre el número de CTG y la edad al diagnóstico genético (ρ = −0,547; IC 95%: −0,610 a −0,375; p < 0,001). El CTG5 fue el alelo polimórfico más frecuente en sanos. Del total de afectos, el 28,3% presentaron la forma leve o asintomática, el 59,1% la forma clásica y el 12,6% la forma severa. El 35,1% presentaron herencia materna, el 59,4% herencia paterna y el 5,5% herencia incierta. En las formas leves la calvicie frontal en varones fue el rasgo fenotípico más prevalente, junto con miotonía y cataratas, mientras que en la clásica predominó la ptosis palpebral, la debilidad facial, las alteraciones en la voz y la pronunciación, la miotonía y la sensación de cansancio/somnolencia. Conclusiones: La incidencia de DM1 es relevante en Aragón. La revisión multidisciplinar del fenotipo de pacientes con DM1 es clave para un diagnóstico precoz y medicina personalizada.(AU)

Introduction: The incidence of myotonic dystrophy type 1 (DM1), a disease with great phenotypic variety, in our region is unknown. This study aims to estimate the incidence of DM1 at our hospital (a reference centre in Aragon, Spain) and to identify the characteristics of our population (genotype-phenotype correlation). Methods: Retrospective, descriptive study of 459 patients classified according to the number of CTG repeats, as follows: normal (5-35), premutation (36-50), protomutation (51-80), small expansions (81-150), intermediate expansions (151-1000), and large expansions (> 1000). Furthermore, according to clinical phenotype, patients were categorised as unaffected (5-50 CTG repeats), mild form or asymptomatic (51-150), classical form (151-1000), and severe form (> 1000). Results: The incidence of DM1 was 20.61 cases per million person-years (95% CI: 19.59-21.63). An inverse correlation was observed between the number of CTG repeats and the age at genetic diagnosis (ρ = −0.547; 95% CI: −0.610 to −0.375; P < .001). CTG5 was the most frequent polymorphic allele in healthy individuals. Of all patients with DM1, 28.3% presented the mild or asymptomatic form, 59.1% the classical form, and 12.6% the severe form. Inheritance was maternal in 35.1% of cases, paternal in 59.4%, and uncertain in 5.5%. In mild forms, frontal balding in men was the most prevalent phenotypic trait, as well as myotonia and cataracts, while in the classical form, ptosis, facial weakness, voice and pronunciation alterations, myotonia, and fatigue/sleepiness were most frequent. Conclusions: The incidence of DM1 in Aragon is significant. Multidisciplinary study of the phenotype of patients with DM1 is key to early diagnosis and personalised management.(AU)

Evaluation of epigenetic-related gene expression (DNMT, HDAC1) in Iranian patients with systemic lupus erythematosus / Evaluación de la expresión de los genes relacionados con la epigenética (DNMT, HDAC1) en pacientes iraníes con lupus eritematoso sistémico

Background: Systemic lupus erythematosus (SLE) is an autoimmune disease in which the immune system abnormally reacts against cells and tissues leading to inflammation. Epigenetic alterations, including DNA methylation and histone modification, have critical effects on autoimmune disease and SLE pathogenesis via dysregulation of critical genes. Aims: The purpose of this study was to evaluate the epigenetic-related gene expression of DNA methyltransferase (DNMT) and histone deacetylase 1 (HDAC1) in Iranian patients with SLE. Methods: This matched case–control study included 16 people with SLE and 16 healthy people who were referred to the Rafsanjani rheumatology clinic, in southeast Iran. The expression of DNMT and HDAC1 genes was measured through a real-time PCR assay of blood samples. Results: DNMT gene expression did not differ significantly between SLE and healthy groups (P=0.21). In contrast, HDAC1 gene expression was enhanced in the SLE group, but this enhancement failed to reach statistical significance (P=0.94). Conclusion: The results of this study suggest that overexpression of HDAC1 could serve as a diagnostic for SLE disease. Additional studies with larger sample sizes are required to confirm our findings. Evaluation of other genes related to SLE disease is essential and may help to make an accurate diagnosis of the disease.(AU)

Antecedentes: El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad autoinmune, en la cual el sistema inmunitario reacciona de manera anormal frente a las células y tejidos causantes de la inflamación. Las alteraciones epigenéticas, incluyendo la metilación del ADN y la modificación de la histona, tienen efectos críticos en la enfermedad autoinmune y la patogenia del LES, a través de la desregulación de los genes críticos. Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la expresión del gen relacionado con la epigenética de ADN metiltransferasa (DNMT) e histona deacetilasa 1 (HDAC1) en los pacientes iraníes afectados de LES. Métodos: Este estudio pareado caso-control incluyó 16 personas con LES y 16 personas sanas, derivadas a la clínica de reumatología de Rafsanjan, en el sudeste de Irán. La expresión de los genes DNMT y HDAC1 se midió mediante una PCR a tiempo real de muestras de sangre.Resultados: La expresión del gen DNMT no difirió significativamente entre los grupos de pacientes de LES y de controles sanos (p=0,21). Por contra, la expresión del gen HDAC1 se incrementó en el grupo LES, aunque dicho incremento no alcanzó significación estadística (p=0,94). Conclusión: Los resultados de este estudio sugieren que la sobreexpresión de HDAC1 podría servir para diagnosticar el LES. Son necesarios estudios adicionales con muestras de mayor tamaño para confirmar nuestros hallazgos. Es esencial la evaluación de otros genes relacionados con el LES, pudiendo ayudar a realizar un diagnóstico preciso de la enfermedad.(AU)

High performance of the automated ADVIA Centaur Systems SARS-CoV-2 Antigen Assay in nasopharyngeal samples with high viral load / Alto rendimiento del ensayo de antígeno ADVIA Centaur Systems SARS-CoV-2 automatizado en muestras nasofaríngeas con alta carga viral

ADVIA Centaur SARS-CoV-2 Antigen (COV2Ag) Assay (Siemens Healthineers) was evaluated for SARS-CoV-2 detection. A total of 141 nasopharyngeal samples were analyzed by this technique and results were compared with those obtained by quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The overall sensitivity and specificity of the test were 68.70% and 70%, respectively. Regarding cycle threshold (Ct) values, the COV2Ag test showed a sensitivity of 93.75% and 100% for nasopharyngeal samples with Ct < 25 and < 20, respectively. ADVIA Centaur COV2Ag Assay is a useful, automated, and rapid technique for early SARS-CoV-2 diagnosis and isolation of the infected individuals, avoiding its transmission.(AU)

Juvenile-onset systemic lupus erythematosus and MEFV polymorphism: A case–control association study among Iranian children / Lupus eritematoso sistémico de inicio juvenil y polimorfismo MEFV: un estudio de asociación de casos y controles entre niños iraníes

Introduction and objectives: This study is designed to evaluate the potential influences of Mediterranean fever gene (MEFV) gene polymorphism on systemic lupus erythematosus (SLE) in a cohort of juvenile patients. A case–control study was performed on Iranian patients with a mixed ethnicity population. Patients and methods: Genotypes of 50 juvenile cases, and 85 healthy controls were investigated for identifying M694V and R202Q polymorphism. Genotyping was done utilizing amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction (ARMS-PCR) and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) to detect M694V and R202Q mutations, respectively. Main findings: Our study indicates significant differences in the alleles and genotypes frequencies of MEFV polymorphism between SLE patients and healthy controls (P<0.05). Also, an association was found between renal involvement (50% vs. 8.3%, P=0.000, OR=0.91, 95% CI=0.30–0.278) in juvenile SLE patients and M694V polymorphism incident; But there was no association with other clinical manifestations. Principal conclusion: We found a significant association between R202Q and M694V polymorphism of the MEFV gene and susceptibility to SLE in the studied population; However, further studies on detailed characterization of these polymorphisms’ impacts on the key elements responsible for SLE pathogenesis is of great importance.(AU)

Introducción y objetivos: Este estudio está diseñado para evaluar las posibles influencias del polimorfismo del gen de la fiebre mediterránea (MEFV) en el lupus eritematoso sistémico (LES) en una cohorte de pacientes jóvenes. Se realizó un estudio de casos y controles en pacientes iraníes con una población de origen étnico mixto. Pacientes y métodos: Se investigaron los genotipos de 50 casos juveniles y 85 controles sanos para identificar el polimorfismo M694V y R202Q. El genotipado se realizó utilizando amplificación refractaria sistema de mutación-reacción en cadena de la polimerasa (ARMS-PCR) y reacción en cadena de la polimerasa-polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (PCR-RFLP) para detectar mutaciones M694V y R202Q, respectivamente. Hallazgos principales: Nuestro estudio indica diferencias significativas en las frecuencias de alelos y genotipos del polimorfismo MEFV entre pacientes con LES y controles sanos (p<0,05). Además, se encontró asociación entre compromiso renal (50% vs. 8.3%, p=0,000, OR=0.91, IC 95%=0,30–0,278) en pacientes con LES juvenil e incidente de polimorfismo M694V; pero no hubo asociación con otras manifestaciones clínicas. Conclusión principal: Encontramos una asociación significativa entre el polimorfismo R202Q y M694V del gen MEFV y la susceptibilidad a LES en la población estudiada; sin embargo, es de gran importancia realizar más estudios sobre la caracterización detallada de los impactos de estos polimorfismos en los elementos clave responsables de la patogénesis del LES.(AU)

Estudios de cribado en brotes poblacionales y situaciones especiales / Screening studies in population outbreaks and special situations

La pandemia SARS-CoV-19 se convirtió en un reto global para los sistemas sanitarios mundia-les. Una de las líneas estratégicas para el control de la trasmisión de esta enfermedad fue ladetección precoz de los casos de infección por COVID-19, a través de cribados poblacionales.En la Comunidad Foral de Navarra, a través de un engranaje de varios servicios, se realizaroncribados de detección precoz en diferentes ámbitos: penitenciario, laboral, sociosanitario,escolar, poblaciones con altas incidencias de casos y cualquier otra situación especial queimplicase un riesgo para la Salud Pública. La organización de los cribados en diferentes escenarios fue compleja y requirió una continuaadaptación de recursos materiales y personales.Los continuos cambios, debido a los picos de incidencia de la enfermedad, al aumento de lademanda asistencial y los cambios de protocolos dependiendo de la situación pandémica encada momento, dieron lugar a la incorporación de nuevos profesionales con diferentes perfilesy a la implantación de tareas que no existían. Podemos concluir, tras nuestra experiencia en estos años de pandemia, la importancia demantener un equipo especializado en organización y actuaciones en brotes epidémicos, quefacilitaría una gestión y actuación más eficaz para futuras situaciones, vistas las dificultadesque ha conllevado la escalada de medidas de control de los brotes epidémicos.(AU)

Estimulación periférica del nervio trigémino mediante frotis nasofaríngeo como posible desencadenante de migraña / Peripheral stimulation of the trigeminal nerve by nasopharyngeal swabbing as a possible trigger of migraine attacks

Introducción: La implicación del sistema nervioso central y periférico en la generación de la migraña no se conoce bien. Nuestro objetivo fue determinar si estímulos periféricos sobre el nervio trigémino, como el frotis nasofaríngeo, podrían desencadenar ataques de migraña.Sujetos y métodos: Se envió una encuesta a 658 médicos, enfermeras y estudiantes de medicina, preguntando por la presencia de cefalea sugestiva de migraña tras la realización de un frotis para la determinación del SARS-CoV-2, su historia previa de migraña, y sobre características demográficas y relacionadas con la cefalea. Los que tenían resultado positivo o que asociaban sintomatología de COVID fueron excluidos.Resultados: Se reclutó a 377 personas y se incluyó a 309. Cuarenta y siete (15,2%) refirieron cefalea sugestiva de migraña tras la realización del frotis, de las cuales 42 (89,4%) tenían historia previa de migraña. El riesgo de desarrollarla fue mayor en el subgrupo de pacientes con cefalea sugestiva de migraña previa –razón de probabilidad: 22,6 (intervalo de confianza al 95%: 8,597-59,397); p < 0,001–. No hubo diferencias entre las características principales de los ataques sugestivos de migraña previos y los desencadenados tras la prueba, excepto un porcentaje menor de aura asociada tras el frotis (42,8% frente a 26,1%; p = 0,016). Los individuos con ataques sugestivos de migraña previos con frecuencia superior a dos episodios mensuales presentaron mayor riesgo de desarrollar una cefalea sugestiva de migraña tras el test –razón de probabilidad = 2,353 (intervalo de confianza al 95%: 1,077-5,145); p = 0,03–.Conclusiones: El frotis nasofaríngeo podría desencadenar ataques de migraña, más probablemente en individuos con mayor frecuencia de migrañas previas. Esto confirmaría que estímulos periféricos sobre el nervio trigémino pueden desencadenar ataques de migraña en individuos con migraña, de acuerdo con su grado de sensibilización trigeminovascular.(AU)

Introduction: The role of the central and peripheral nervous system in the generation of migraine is not well understood. Our aim was to determine whether peripheral trigeminal nerve stimuli, such as nasopharyngeal swabs, could trigger migraine attacks.Subjets and methods: survey was sent to 658 doctors, nurses and medical students, asking about the presence of headache suggestive of migraine after carrying out a SARS-CoV-2 swab test, their previous history of migraine, and demographic and headache-related characteristics. Those who tested positive or had associated clinical signs and symptoms of COVID were excluded.Results: total of 377 people were recruited, 309 of whom were included in the sample. Forty-seven (15.2%) reported headache suggestive of migraine after the swab test and 42 (89.4%) of them had a previous history of migraine. The risk of developing migraine was higher in the subgroup of patients with a history of headache suggestive of migraine – odds ratio: 22.6 (95% confidence interval: 8.597-59.397); p < 0.001. No differences were found between the main characteristics of attacks suggestive of migraine before and after the swab test, except for a lower percentage of associated aura afterwards (42.8% vs. 26.1%; p = 0.016). Individuals with previous attacks suggestive of migraine with a frequency of more than two episodes per month had a higher risk of developing a headache suggestive of migraine after the test – odds ratio = 2.353 (95% confidence interval: 1.077-5.145); p = 0.03.Conclusions: Nasopharyngeal swabbing may trigger migraine attacks, with a greater likelihood in individuals with a higher frequency of previous migraines. This would confirm the idea that peripheral stimuli on the trigeminal nerve can trigger migraine attacks in individuals with migraine, according to their degree of trigeminovascular sensitisation.(AU)

Evolución de marcadores de laboratorio en pacientes con detección persistente de SARS-CoV-2 / Laboratory markers evolution in patients with persistent detection of SARS-CoV-2

Fundamentos: El estudio de la evolución de algunos biomarcadores en pacientes con detección persistente de SARS-CoV-2permitiría determinar el perfil de las patologías que podrían padecer. El objetivo de este estudio fue describir la evolución de distintosmarcadores de laboratorio en pacientes con detección persistente de SARS-CoV-2 y estudiar los cambios en la proporción de pacien-tes con valores considerados como normales.Métodos: Los pacientes se dividieron en dos grupos: el grupo control (G0) incluyó pacientes con una prueba de detección de infec-ción activa positiva para SARS-CoV-2 seguida de dos negativas, mientras que el grupo problema (G1) incluyó pacientes con al menos trespruebas positivas consecutivas. El tiempo entre muestras consecutivas fue de cinco a veinte días, y se incluyeron solamente pacientescon serología negativa. Se recogieron datos demográficos, comorbilidades, sintomatología, radiología y hospitalización, así como los da-tos de las analíticas y las gasometrías. La comparación entre los grupos de estudio se realizó mediante el test t-student y U Mann-Whitneypara variables cuantitativas, y el test de χ2 para variables cualitativas. Se tomaron como significativos resultados con p<0,05. Resultados: Se incluyeron noventa pacientes, treinta y ocho en G0 y cincuenta y dos en G1. El dímero D descendió 10,20 vecesmás en pacientes G0, y los niveles normales de este parámetro en t1 fueron 1,46 veces más frecuentes en estos pacientes. El porcenta-je de linfocitos se elevó dieciséis veces más en G0, y los valores normales en t1 fueron 10,40 veces más habituales en estos pacientes.La proteína C reactiva descendió de manera importante en ambos grupos, y el lactato aumentó más en pacientes G1.Conclusiones: Los resultados del estudio sugieren que algunos biomarcadores evolucionan de manera diferente en pacientes...(AU)

B:ackground: The study of the evolution of certain biomarkers in patients with persistent detection of SARS-CoV-2 could determinethe profile of the pathology that these patients may suffer. The objective of this study was to describe the evolution of different laboratorymarkers in patients with persistent detection of SARS-CoV-2, and determining these parameters were into reference values.Methods: Patients were divided into two groups: the control group (G0) included patients with a positive direct test for SARS-CoV-2followed by 2 negative, while the problem group (G1) included patients with at least 3 consecutive positive tests. The time betweenconsecutive samples was five to twenty days, and only patients with negative serology were included. Demographic data, comorbidities,symptoms, radiology and hospitalization were collected, as well as data from analytic and blood gases. The comparison between thestudy groups was realized using the t-student and U Mann-Whitney test for quantitative variables, and the χ2 test for qualitative variables.Results with p<0.05 were taken as significant.Results: Ninety patients were included, thirty-eight in G0 and fifty-two in G1. D-dimer decreased 10.20 times more in G0 patients,and normal levels of this parameter at t1 were 1.46 times more frequent in these patients. The percentage of lymphocytes increasedsixteen times more in G0, and the normal values in t1 were 10.40 times more common in these patients. C-reactive protein decreasedsignificantly in both groups, and lactate increased more in G1 patients.Conclusions: The results of the study suggest that some biomarkers evolve differently in patients with persistent detectionof SARS-CoV-2, which may have significant clinical impact. This information could help to determine the main organs or systemsaffected, allowing to anticipate socio-sanitary measures to prevent or compensate these alterations.(AU)

Measurable residual disease study through three different methods can anticipate relapse and guide pre-emptive therapy in childhood acute myeloid leukemia

Purpose Although outcomes of children with acute myeloid leukemia (AML) have improved over the last decades, around one-third of patients relapse. Measurable (or minimal) residual disease (MRD) monitoring may guide therapy adjustments or pre-emptive treatments before overt hematological relapse. Methods In this study, we review 297 bone marrow samples from 20 real-life pediatric AML patients using three MRD monitoring methods: multiparametric flow cytometry (MFC), fluorescent in situ hybridization (FISH) and polymerase chain reaction (PCR). Results Patients showed a 3-year overall survival of 73% and a 3-year event-free survival of 68%. Global relapse rate was of 25%. All relapses were preceded by the reappearance of MRD detection by: (1) MFC (p = 0.001), (2) PCR and/or FISH in patients with an identifiable chromosomal translocation (p = 0.03) and/or (3) one log increase of Wilms tumor gene 1 (WT1) expression in two consecutive samples (p = 0.02). The median times from MRD detection to relapse were 26, 111, and 140 days for MFC, specific PCR and FISH, and a one log increment of WT1, respectively. Conclusions MFC, FISH and PCR are complementary methods that can anticipate relapse of childhood AML by weeks to several months. However, in our series, pre-emptive therapies were not able to prevent disease progression. Therefore, more sensitive MRD monitoring methods that further anticipate relapse and more effective pre-emptive therapies are needed (AU)

Appropriateness of routine pre-endoscopic SARS-CoV-2 screening with RT-PCR in asymptomatic individuals and its impact on delayed diagnosis / Idoneidad del cribado pre-endoscópico rutinario de SARS-CoV-2 con RT-PCR en individuos asintomáticos y su impacto en la demora diagnóstica

Aims: Endoscopy units are considered to be at an increased risk of infection by SARS-CoV-2. Our aim is to assess the correlation between pre-endoscopic screening with reverse-transcription-polymerase-chain-reaction (RT-PCR) in asymptomatic individuals scheduled for elective endoscopy and the epidemiological data published by the local Health Administration. Patients and methods: Observational retrospective study collecting the results of our screening strategy spanning June/2020–June/2021, the effective potential growth (EPG), an index measuring the outbreak risk, and the 7 and 14-day cumulative incidence (CI). Indication, delay and the findings of the endoscopic examinations were registered for RT-PCR positive patients. Results: A total of 5808 tests were performed, yielding 125 positive results (2.15%). All positive tests occurred in weeks of high/very high risk (EPG>100) with the highest monthly rate being 9.36%, recorded in January/2021. A significant correlation (rho=0.796; p<0.001) between weekly positive rates and EPG was observed, and a significantly lower weekly number of positive tests was recorded when EPG<100. Planning the screening strategy one week ahead according to EPG>100 would have avoided up to 826 tests with only one positive result to account for. One hundred and thirteen individuals tested positive and 89 endoscopies were delayed. The most common findings were colon polyps, colorectal cancer and gastric metaplasia. Oncological diagnosis was delayed 50±3 days. Conclusions: No positive RT-PCR test were registered out of high-risk periods. Epidemiological administrative data in the preceding two weeks showed a significant correlation with screening results and could be useful to plan pre-endoscopic screening and avoid unnecessary tests.(AU)

Antecedentes: La actividad endoscópica comporta un riesgo elevado de transmisión de la infección por SARS-CoV-2. Nuestro objetivo es valorar la correlación entre el cribado pre-endoscópico con reverse-transcription-polymerase-chain-reaction (RT-PCR) en individuos asintomáticos programados para una endoscopia ambulatoria y los datos epidemiológicos publicados por el departamento de salud pública. Pacientes y métodos: Estudio observacional retrospectivo de los resultados del cribado realizado entre junio/2020 y junio/2021. Se registró el índice de crecimiento potencial (ICP) y la incidencia acumulada a 7 y 14 días. En los pacientes con RT-PCR positiva se registraron indicación, demora y hallazgos endoscópicos. Resultados: Se identificaron un total de 5.808 test con 125 resultados positivos (2,15%). Todos los resultados positivos se registraron en semanas consideradas de alto/muy alto riesgo (ICP>100), con una tasa máxima de positivos del 9,26% en enero/2021. Se observó una correlación significativa (rho=0,796; p<0,001) entre la tasa de positivos y el ICP, así como una diferencia estadísticamente significativa con la tasa de positivos en las semanas con el ICP<100. Planificar el cribado acorde al ICP>100 en la semana previa, habría evitado hasta 876 test, con un único resultado positivo. Ciento trece pacientes resultaron positivos y se demoraron 89 endoscopias; los hallazgos más frecuentes fueron pólipos, cáncer colorrectal y metaplasia gástrica. El diagnóstico oncológico se demoró 50±3 días. Conclusiones: No se registraron RT-PCR positivas fuera de los períodos de alto riesgo. Los datos epidemiológicos de las dos semanas anteriores mostraron una correlación significativa con los resultados del cribado y podrían ser útiles para planificar el mismo y evitar pruebas innecesarias.(AU)

MiR-328-3p promotes TGF-B1-induced proliferation, migration, and inflammation of airway smooth muscle cells by regulating the PTEN/Akt pathway

Background: Recent studies have shown that the up-regulation of microRNA miR-328-3p expression increases seasonal allergy and asthma symptoms in children, but the specific mechanism remains unclear. Therefore, the aim of this study was to explore the role and mechanism of -miR-328-3p in transforming growth factor (TGF)-β1-induced airway smooth muscle cells (ASMCs). Methods: The effect of TGF-β1 on the expression of miR-328-3p in ASMCs was examined by real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR). Cells proliferation, migration, and inflammatory factors in TGF-β1-induced ASMCs were measured by cell counting kit-8 (CCK-8), transwell, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), respectively. Besides, TargetScan was used to predict phosphatase and tensin homolog (PTEN), the downstream target of miR-328-3p; double-luciferase reporter assay, western blot, and qRT-PCR were used to verify the targeting relationship between miR-328-3p and PTEN; western blot was also used to examine the effects of PTEN and miR-328-3p knockdown on the expression levels of PTEN, Akt, and p-Akt proteins. Results: The expression of miR-328-3p was up-regulated in TGF-β1-induced ASMCs. Knockdown of miR-328-3p significantly inhibited proliferation, migration, and inflammation of ASMCs induced by TGF-β1 and decreased levels of tumor necrosis factor (TNF)-α and interleukin (IL)-1β. The dual--luciferase reporter assay results confirmed that PTEN was a target gene of miR-328-3p. Moreover, inhibition of PTEN expression reversed the inhibitory effect of low miR-328-3p expression on -TGF-β1-induced ASMC’s proliferation, migration, and inflammation (AU)