Rapid detection of KPC-producing Enterobacterales by using a modified Carba NP test with imipenem/relebactam / Detección rápida de Enterobacterales productoras de KPC mediante una modificación del test Carba NP utilizando imipenem/relebactam

Introduction: Here, we propose a novel modified Carba NP test for detecting KPC-producing Enterobacterales using imipenem/relebactam. Material and methods: The test performance was evaluated in a random selection of 160 previously molecularly characterized clinical isolates carrying the 110 blaKPC, 1 blaGES, 12 blaVIM, 4 blaIMP, 3 blaNDM and 42 blaOXA-48-like genes. The proposed method relies on the detection of imipenem hydrolysis in an imipenem/relebactam antibiotic solution and subsequent visual interpretation by color change. Results: All class A producing Enterobacterales (111/111) were detected using imipenem/relebactam as no visual appreciation of color change was perceived due to a nule hydrolysis of imipenem in the antibiotic solution. Overall, the assay showed 100% sensitivity (111/111) and specificity (69/69) for detecting class A KPC-producing Enterobacterales. Discussion: The biochemical assay provides very reliable results for detecting KPC-producing Enterobacterales, with a turnaround time of less than 1 hour, minimum handling and no specialized equipment required.(AU)

Introducción: En este manuscrito proponemos un novedoso ensayo basado en el Carba NP test para la detección de Enterobacterales productoras de KPC utilizando imipenem/relebactam. Material y métodos: La evaluación se realizó en una selección aleatoria de 160 aislados clínicos previamente caracterizados molecularmente que portaban los genes 110 blaKPC, 1 blaGES, 12 blaVIM, 4 blaIMP, 3 blaNDM y 42 blaOXA-48-like. El método propuesto se basa en la detección de la hidrólisis de imipenem en una solución de imipenem/relebactam y posteriormente su interpretación mediante un cambio de color. Resultados: El ensayo tiene una sensibilidad (111/111) y una especificidad (69/69) del 100% para detectar Enterobacterales productoras de KPC, de clase A. Discusión: Este ensayo bioquímico proporciona resultados muy fiables para la detección de Enterobacterales productoras de KPC, con un tiempo de respuesta inferior a 1 h, además de una manipulación mínima y sin necesidad de ningún equipamiento especializado.(AU)

Isolation and Characterization of Novel Lignolytic, Cellulolytic, and Hemicellulolytic Bacteria from Wood-Feeding Termite Cryptotermes brevis

In a natural ecosystem, various organisms digest and hydrolyze lignocellulose biomass efficiently. Termites are one of them. They digest lignocellulose biomass with the help of symbiotic microorganisms in their gut. Therefore, termites gut may harbor potential sources of microorganisms capable to degrade lignocellulose biomass. In this study, termite gut microbiomes of Cryptotermes brevis species were isolated and identified for their capability to degrade lignin and polysaccharides. Alkali lignin, carboxymethylcellulose, and xylan were used as the only carbon sources in the medium to isolate lignin-, cellulose-, and hemicellulose-degrading bacteria. By this method, two bacteria strains, Bacillus sp. BMP01 and Ochrobactrum oryzae BMP03 strain were isolated and identified. Bacillus sp. BMP01 strain has capabilities to hydrolyze carboxymethylcellulose and xylan to glucose and xylose, respectively. This strain showed high xylanase activity (about 0.21 U/ml) and carboxymethyl cellulase activity (about 0.25 U/ml). The ability to hydrolyze both carboxymethylcellulose and xylan makes it superior to other known cellulolytic bacteria. Ochrobactrum oryzae BMP03 strain showed laccase activity, which indicates its ability to depolymerize lignin. Lignocellulose-degrading bacteria play a vital role in the biological conversion of lignocellulose biomass to biofuel. Overall, this study shows that termite's gut microbiomes are potential sources of lignocellulose-degrading bacteria that can be cultured and used in the biological conversion of lignocellulose biomass to biofuel

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Efecto cicatrizante de fracciones peptídicas derivadas de la hidrólisis enzimática de proteínas de Phaseolus lunatus / Wound healing effect of peptide fractions from Phaseolus lunatus proteins by enzymatic hydrolysis

Introducción: los hidrolizados de proteína de semillas de plantas son una fuente de péptidos bioactivos. Sin embargo, no se han publicado estudios sobre la actividad cicatrizante de heridas. Objetivo: evaluar el efecto cicatrizante in vivo (en ratones) de hidrolizados enzimáticos de Phaseolus lunatus empleando pepsina, pancreatina, el sistema secuencial pepsina-pancreatina y las fracciones peptídicas de cada hidrolizado, mayores y menores de 10 kDa. Métodos: las pruebas de cicatrización se realizaron en ratones divididos en grupos de cinco ratones por tratamiento. Las heridas se observaron en un estereomicroscopio (Stemi(TM) DV4), midiendo el área con fotografías los días 0, 1, 3, 6, 8 y 10. Se calculó el tiempo transcurrido desde la formación de cada herida hasta el 80% de reducción de su área. Por último, los residuos aminoacídicos de la fracción o hidrolizado que mostró mayor actividad cicatrizante fueron identifi cados por cromatografía HPLC (Agilent 1100 series). Resultados: las heridas tratadas con hidrolizado de pancreatina (PanH) y su fracción mayor de 10 kDa (PanF1) mostraron un avance del 80% de cicatrización a los 2,86 y 3,03 días, respectivamente, mientras que con el control fueron 5,04 días. Estos representaron la mayor actividad cicatrizante de todos los tratamientos. El análisis de aminoácidos determinó una presencia importante de residuos hidrofóbicos y básicos que contribuyeron de manera notable a la cicatrización de heridas. Conclusión: el hidrolizado PanH, obtenido del concentrado proteico de Phaseolus lunatus, y su fracción mayor de 10 kDa podrían ser usados para favorecer la cicatrización de heridas

Introduction: protein hydrolysates from plant seeds are a source of bioactive peptides. However, no studies on wound healing activity have been published. Objective: to evaluate the healing effect in vivo (in mice) of enzymatic hydrolysates of Phaseolus lunatus using pepsin, pancreatin, the pepsin-pancreatin sequential system and the peptide fractions of each hydrolysate, greater and less than 10 kDa. Methods: the wound healing tests were performed on mice divided in groups of fi ve mice per treatment. The wounds were monitored with a stereomicroscope (Stemi(TM) DV4), measuring the area with photographs on days 0, 1, 3, 6, 8 and 10. The time elapsed from the formation of each wound to 80% reduction of its area was calculated. Finally, the fraction or hydrolysate amino acid residues that showed greater wound healing activity were identifi ed by HPLC chromatography (Agilent 1100 series). Results: the wounds treated with pancreatin hydrolysate (PanH) and with its fraction greater than 10 kDa (PanF1) showed 80% of healing at 2.86 and 3.03 days, respectively, while this occurred using the control at 5.04 days. These represented the greatest wound healing activity of all the treatments. The analysis of the amino acids determined an important presence of hydrophobic and basic residues that contributed significantly to wound healing. Conclusion: the PanH hydrolysate, obtained from the protein concentrate of Phaseolus lunatus, and its fraction greater than 10 kDa could be used to encourage wound healing

Fórmulas extensivamente hidrolizadas. Importancia del grado de hidrolisis / Extensively hydrolyzed formulas. Role of the protein hydrolysis degree

La alergia a las proteínas de la leche de vaca (APLV) es la alergia alimentaria más frecuente en lactantes y niños de corta edad, con una prevalencia de un 2-3%. Las recomendaciones para el tratamiento de la APLV se fundamentan en las guías de las sociedades médicas, como DRACMA (Diagnosis and Rationale for Action against Cow's Milk Allergy) de la World Allergy Organization, el Comité de Nutrición de la European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition (ESPGHAN) y el Comité de alergia alimentaria de la Spanish Society of Pediatric Allergy, Asthma and Clinical Immunology (SEICAP), basadas en 3 puntos fundamentales: evitación estricta de la proteína vacuna, mantenimiento del estado nutricional óptimo y adquisición de la tolerancia lo antes posible. Las fórmulas sustitutivas (cuando la lactancia materna no es posible) para nutrir a los niños afectados de APLV son las denominadas fórmulas hipoalergénicas: fórmulas a base de proteínas de leche de vaca extensivamente hidrolizadas (con/sin lactosa), fórmulas a base de proteínas de arroz hidrolizado, fórmulas de soja (aislado o hidrolizado) y fórmulas elementales a base de L-aminoácidos libres. Conocer la composición de cada una de estas fórmulas es importante para decidir qué tipo de alimentación está indicado en cada caso

Cow's milk protein allergy (CMPA) is the most frequent food allergy in infants and young children with a prevalence of 2-3%. The recommendations for the treatment of the CMPA are based on the guidelines of medical societies such as Diagnosis and Rationale for Action against Cow’s Milk Allergy (DRACMA) of the World Allergy Organization, Nutrition Committee of the European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition (ESPGHAN) and the Food Allergy Committee of the Spanish Society of Pediatric Allergy, Asthma and Clinical Immunology (SEICAP), are based on 3 basic points: Strict avoidance of the milk protein, maintenance of optimal nutritional status and acquisition of tolerance as soon as possible. Substitute formulas, when breastfeeding is not possible, to nourish children affected by CMPA are the so-called hypoallergenic formulas that are: formulas based on extensively hydrolyzed cow's milk proteins (with/without lactose), formulas based on hydrolyzed rice proteins, soy formulas (isolated or hydrolyzed) and elemental formulas based on free L-amino acids. Knowing the composition of each of these formulas is important to decide what type of food is indicated in each case

Doble resultado falso en el cribado de drogas en una intoxicación accidental / Double false result in a drug screen after accidental pediatric poisoning

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Flammulina velutipes: an option for 'alperujo' use / Flammulina velutipes: una opción para el aprovechamiento del alperujo

Background. Two-phase olive-mill wastes (or 'alperujo') exhibit highly phytotoxic properties, mainly due to phenols. A valuable option for alperujo is its agricultural use, provided that no phytotoxic effects occur. Aims. The present investigation was aimed at evaluating the efficacy of two strains of the lignin-degrading fungus Flammulina velutipes to colonize alperujo in order to produce edible mushrooms and to achieve its detoxification. Methods. Some important cultural characters related to mushroom production (earliness, biological efficiency and quality of basidiomes) were estimated. The production of lignocellulolytic enzymes, phenol removal and detoxification of the substrate was evaluated. Results. High biological efficiencies (70.8%) were obtained at 12°C with F. velutipes strain BAFC 670/06 in a substrate containing poplar wood shavings and 90% of alperujo. The nature of the substrate did not seem to exert an important influence on pileus and stem morphology; nevertheless shortest stems were observed at higher temperatures. Endo-β-1,4-glucanase, endo-β-1,4-xylanase, laccase and Mn-peroxidase activities were detected in the extracts recovered from the solid-state cultures. Both F. velutipes strains were effective in removing the phenolic compounds. The initial concentration in the substrate with 90% alperujo was reduced in the case of F. velutipes BAFC 1763 by 84.31%, and 40.15% by F. velutipes BAFC 670/06. Germinability experiments on Raphanus sativus, showed that alperujo phytotoxicity was significantly reduced by F. velutipes cultures. Conclusions. The experimented changes by the spent mushroom substrate resulting from F. velutipes cultivation with high amount of alperujo would allow its reuse for agricultural purposes (AU)

Antecedentes. El alperujo, subproducto de las almazaras durante la extracción del aceite de oliva, tiene propiedades fitotóxicas importantes debido a su alto contenido fenólico. Su utilización en la agricultura es una opción válida, pero deben eliminarse sus efectos fitotóxicos. Objetivos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la eficacia de dos cepas del hongo ligninolítico Flammulina velutipes de crecer en sustratos con alto contenido de alperujo, detoxificarlo y producir basidiomas comestibles. Métodos. Se estudiaron las principales características relacionadas con el cultivo para la producción de basidiomas: tiempo de aparición de primordios, eficiencia biológica y calidad. Se evaluó la producción de enzimas lignocelulolíticas, la remoción de compuestos fenólicos y la detoxificación del sustrato. Resultados. Se obtuvieron altos valores de eficiencia biológica (70,8%) a 12°C con la cepa BAFC 670/06 de F. velutipes en un sustrato compuesto de viruta de álamo y 90% de alperujo. La naturaleza del sustrato al parecer no ejerció influencias importantes en la morfología de los basidiomas, aunque a altas temperaturas los estípites presentaron una menor longitud. Se detectó actividad endo-β-1,4-glucanasa, endo-β-1,4-xilanasa, lacasa y Mn-peroxidasa en extractos recuperados de cultivos en estado sólido. Ambas cepas fueron efectivas en la reducción del contenido de fenoles del sustrato, reducción que alcanzó el 84,31% con F. velutipes BAFC 1763 y el 40,15% con F. velutipes BAFC 670/06. Los ensayos de germinación de semillas de Raphanus sativus mostraron una significativa reducción de la fitotoxicidad del alperujo. Conclusiones. Los cambios experimentados por el sustrato remanente del cultivo de F. velutipes con altas concentraciones de alperujo podrían permitir su reutilización con fines agrícolas (AU)

Revisión de los efectos beneficiosos de la ingesta de colágeno hidrolizado sobre la salud osteoarticular y el envejecimiento dérmico / An overview of the beneficial effects of hydrolysed collagen intake on joint and bone health and on skin ageing

Introducción: el colágeno hidrolizado (CH) es una mezcla de péptidos de colágeno con un peso molecular (PM) inferior a 5.000 Da. Se obtiene de la gelatinización y posterior hidrólisis enzimática de colágeno nativo procedente de tejidos animales ricos en esta proteína. Existe abundante evidencia científica sobre el efecto positivo que la toma de CH ejerce sobre las patologías osteoarticulares degenerativas y el envejecimiento dérmico. Objetivo: revisar los estudios científicos existentes actualmente sobre el CH y evaluar su acción terapéutica sobre algunos tejidos colaginosos como cartílagos, huesos y piel. Resultados: hasta la fecha se han realizado más de 60 estudios científicos (in vitro, in vivo, clínicos y de biodisponibilidad) sobre la efectividad del CH a la hora de reducir las consecuencias del deterioro y pérdida de colágeno tisular como son el dolor y el desgaste articular (artrosis), la pérdida de masa ósea (osteoporosis) y el envejecimiento dérmico. Conclusiones: los estudios preclínicos indican que el CH estimula la regeneración de los tejidos colaginosos, potenciando la síntesis de colágeno tisular y también de los restantes componentes minoritarios de dichos tejidos (proteoglicanos y ácido hialurónico). Los estudios clínicos demuestran que la ingesta continuada de CH ayuda a reducir el dolor articular de desgaste, a ralentizar la pérdida de masa ósea y a atenuar los signos de envejecimiento dérmico. Estos resultados, junto con su alto nivel de seguridad y tolerancia, hacen del CH un suplemento adecuado para tomar a largo plazo, indicado para prevenir y tratar enfermedades crónicas degenerativas (artrosis y osteoporosis), así como para prevenir y atenuar el envejecimiento dérmico (AU)

Introduction: hydrolysate Collagen (HC) consists of small peptides with a molecular weight lower than 5.000 Da. produced from gelatinization and subsequent enzymatic hydrolysis of native collagen which is found in rich collagenic animal tissues. There is much evidence about the HC ingestion positive effect over degenerative joint and bones diseases. Objective: the aim of this article is to review the present scientific studies about HC and to evaluate the HC ingestion therapeutical effects on some collagenic tissues as cartilage, bones and skin. Results: up to date, there are more than 60 scientific studies (in vitro, in vivo, clinics and on bioavailability) about HC ingestion efficacy on reducing collagen damage and loss consequences as joint pain and erosion (osteoarthritis), bone density loss (osteoporosis) and skin ageing Conclusions: preclinical studies show that HC stimulates collagenic tissue regeneration by increasing not only collagen synthesis but minor components (glycosaminoglycans and hyaluronic acid) synthesis as well. Clinical studies show that HC continual ingestion helps to reduce and prevent joint pain, bone density loss and skin ageing. These results as well as its high level of tolerance and safety make HC ingestion attractive for a long-term use in bone and joint degenerative diseases and in fight against skin ageing (AU)

Mecanismos y regulación de la hidrólisis enzimática de celulosa en hongos filamentosos: casos clásicos y nuevos modelos / Mechanisms and regulation of enzymatic hydrolysis of cellulose in filamentous fungi: classical cases and new models

La celulosa es la fuente de carbono renovable más abundante de la Tierra. Sin embargo, la estructura de este polímero constituye una barrera física y química para acceder al carbono, lo que ha limitado el aprovechamiento del mismo. En la naturaleza, un pequeño porcentaje de microorganismos pueden degradarla a través de la expresión de celulasas. Dentro de estos microorganismos, uno de los grupos más activos y eficientes son los hongos filamentosos. Esta revisión describe las similitudes y diferencias de los mecanismos de acción de las celulasas y los mecanismos de regulación de su expresión para 3 de los modelos de hongos filamentosos celulolíticos más estudiados: Trichoderma reesei, Aspergillus niger y Aspergillus nidulans, y para un modelo recientemente descrito, Neurospora crassa. Se encontró que los mecanismos de acción enzimática son muy similares en todos los modelos estudiados, no así los mecanismos de regulación génica. Entender las particularidades de cada sistema es fundamental en el desarrollo de estrategias para la mejora de la producción de celulasas, ya sea proporcionando el ambiente óptimo (condiciones de fermentación) o aumentando la expresión en estos microorganismos mediante ingeniería genética (AU)

Cellulose is the most abundant renewable carbon source on earth. However, this polymer structure comprises a physical and chemical barrier for carbon access, which has limited its exploitation. In nature, only a few percentage of microorganisms may degrade this polymer by cellulase expression. Filamentous fungi are one of the most active and efficient groups among these microorganisms. This review describes similarities and differences between cellulase activity mechanisms and regulatory mechanisms controlling gene expression for 3 of the most studied cellulolytic filamentous fungi models: Trichoderma reesei, Aspergillus niger and Aspergillus nidulans, and the recently described model Neurospora crassa. Unlike gene expression mechanisms, it was found that enzymatic activity mechanisms are similar for all the studied models. Understanding the distinctive elements of each system is essential for the development of strategies for the improvement of cellulase production, either by providing the optimum environment (fermentation conditions) or increasing gene expression in these microorganisms by genetic engineering (AU)

Glycemic response to Carob (Ceratonia siliqua L) in healthy subjects and with the in vitro hydrolysis index / Respuesta glucémica de algarrobo (Ceratonia siliqua L) en sujetos sanos y con el índice de hidrólisis in vitro

The purpose of this study was to determine the in vivo glycemic index of carob tablets with healthy subjects and to determine the in vitro glycemic index of carob tablets and carob flour by the hydrolysis index. Seven healthy volunteers consumed portions of carob tablets containing 26g of available carbohydrate. Their capillary blood was taken at intervals after carob or glucose consumption. The glycemic hydrolysis index by an in vitro technique was based in the release of glucose after enzymatic treatment of carob tablets and carob flour. The determination of the fiber content was performed using the enzymatic- gravimetric method. By the in vivo determination, the estimated glycemic index of carob tablets could be considered low (≤ 55). By the in vitro determination, the estimated glycemic index ranged from 40.1+0.02 of carob tablets to 40.6+0.05 of carob flour. The total fiber values obtained for carob flour samples were from 42.6% ± 0.49 to 42.9% ± 0.68 with no statistical significant differences between samples. Carob tablets and carob flour could be classified as low glycemic index food and low glycemic load food. Carob flour is a high fiber food, containing mainly high levels of insoluble fiber (AU)

El presente estudio tuvo como objetivos determinar el índice glucémico in vivo de barras de algarroba en individuos saludables y determinar el índice glucémico in vitro de barras de algarroba y harina de algarroba, utilizando el índice de hidrólisis. Siete voluntarios saludables consumieron porciones de barras de algarroba conteniendo 26 g de carbohidratos. Se han recolectado muestras de sangre capilar tras la ingestión de barras de algarroba y de glucosa. El índice de glucosa in vitro se basó en la liberación de glucosa tras el tratamiento enzimático de barras de harina de algarroba. La determinación de fibras se realizó por el método enzimático-gravimétrico. Por la determinación in vitro, el índice glicémico estimado puede ser considerado bajo (≤ 55). Por la determinación in vitro, el índice glicémico varió entre 40.1±0.02 (barras) y 40.6±0.05 (harina). El tenor de fibra alimentaria encontrado fue del 42.6% ± 0.49 a 42.9% ± 0.68, sin diferencias estadísticas entre las uestras. Las barras de harina de algarroba pueden ser clasificadas como alimentos de bajo índice glicémico y de baja carga glucémica. La harina de algarroba presenta alto tenor de fibras alimentarias, sobre todo fibras insolubles (AU)

Quantitative determination of amino acids in earthworm meal (Eisenia andrei) by a Surveyor HPLC system in conjunction with pre-column 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate derivatization / Determinación de los aminoácidos en la harina de lombriz de tierra (Eisenia Andrei) mediante un sistema de derivatización en conjunción con el sistema de cromatografia Liquida de alta resolución Surveyor y la pre-columna 6-aminoquinolil-N-hidroxisuccinimidilo carbamato

Aim: The objective of this study was to evaluate the integration of the AccQ•Tag derivatization system with the Finnigan Surveyor Plus HPLC system to determine the amino acids (aa) composition of earthworm meal protein post-hydrolysis. Materials and Methods: In lab cultivated earthworms (Eisenia andrei) were reduced to flour which was then hydrolyzed with 6M HCl at 110 °C for 24 hours in a closed system. The hydrolysis product was neutralized and their aa were derivatized with 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC). The derivatized-aa were separated by RP-HPLC and detected by fluorescence. Results and Conclusion: The proposed integration makes optimal use of both the modular design of the Surveyor Plus HPLC for versatility and flexibility and the main features of the AccQ•Tag derivatization system in terms of stability and reproducibility. Analytical validation parameters were studied both before and after derivatization with AQC. The resulting data were within acceptable ranges for this type of analysis. Pre-column derivatization with AQC yielded appropriate sensitivities within the low pmol range per injection. Earthworm meal generated the following aa; the most abundant (w/w) being: Glu, Asp, Arg, Leu, and Lys (4 % - 10 %), whereas the lowest content corresponded to Met (< 1. 5%), which is comparable to fishmeal. The analytical proposal can be used with confidence in earthworm meal quality control to guarantee the appropriate aa content to create an optimum fish diet

Objetivo. Evaluar la integración del sistema de derivatización AccQ•Tag en conjunción con el sistema de cromatografía CLAR Finnigan Surveyor Plus en la determinación de la composición de aminoácidos (aa) de las proteínas de harina de lombriz posterior a la hidrólisis. Material y Método: Las lombrices de tierra (Eisenia andrei) fueron criadas en condiciones de laboratorio, reducidas a harina e hidrolizadas con HCl 6 M a 110ºC por 24 horas en un sistema cerrado. El producto de la hidrólisis se neutralizó y los aa se derivatizaron con 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate (AQC). Los aminoácidos derivatizados se separaron por cromatografía liquida de alta resolución (CLAR) en FR y se detectaron por fluorescencia. Resultados y Conclusiones: La integración propuesta conformada por el diseño modular del sistema CLAR Surveyor Plus (versatilidad y flexibilidad) y las principales características del sistema de derivación AccQ•Tag (estabilidad y reproducibilidad) resultó óptima. Los parámetros analíticos de validación fueron estudiados antes y después de la derivatización con AQC originando datos dentro de los intervalos aceptables, incluyendo un límite de cuantificación en el orden de pmol por inyección. Los aminoacidos más abundantes (m/m) en la harina de lombriz fueron: Glu, Asp, Arg, Leu y Lys (4 % - 10 %), mientras que el contenido más bajo correspondió a Met (< 1,5 %), pero comparable a la harina de pescado. La propuesta de análisis se puede utilizar con seguridad en el control de calidad de la harina de lombriz de tierra con el fin de garantizar el contenido apropiado de aa para crear una dieta óptima para peces

Excreción de fármacos. El proceso farmacocinético: ¿Llega el fármaco al sitio de acción? / Pharmacokinetic process: does the site of drug action? Excretion of drugs

El riñón constituye la vía principal de excreción de fármacos fuera del organismo. Junto con el aparato urinario, los fármacos se excretan a través de otras vías como los pulmones, la leche materna, el sudor, la secreción lagrimal y genital (la rifampicina produce una coloración rojo anaranjada), la bilis y la saliva. La excreción de algunos compuestos por via biliar (p.ej. cloranfenicol), puede dar lugar a un fenómeno de recirculación entero-hepática como consecuencia de la reactivación mediante hidrólisis intestinal de los metabolitos y su posterior reabsorción. Además de cloranfenicol, otros fármacos excretados a través de la bilis son la morfina, la rifampicina, las tetraciclinas y la digoxina. La saliva puede ser útil para la monitorización de fármacos que se concentran especialmente en este medio. Tres procesos determinan la excreción renal: la filtración glomerular, la reabsorción tubular pasiva y la secreción tubular activa. La excreción total de un fármaco en la orina es la resultante de dichos procesos, de forma que excreción renal= filtración + secreción – reabsorción. Si un compuesto farmacológico es inactivado, principalmente a través del metabolismo, la función renal no es un factor relevante en su eliminación. Sin embargo, la alteración de la función renal (p.ej. en la insuficiencia renal crónica) constituye un factor relevante en la eliminación de fármacos cuando éstos, o sus metabolitos activos, se expulsan principalmente por el riñón, sin transformación metabólica previa. En esta situación es recomendable ajustar la dosis en el paciente(AU)

The main route of excretion of drugs is the kidney. Other routes include the lungs; breast milk; sweat; tears, and genital secretions (alarming if the patient is not expecting the orange-red discoloration caused by rifampicin); bile (leading to recirculation of some compounds, for example chloramphenicol, whose inactive metabolites are reactivated by hydrolysis in the gut, morphine, rifampicin, tetracyclines, and digoxin); and saliva (sometimes used in monitoring drug concentrations in body fluids). Three processes determine the renal excretion of drugs: glomerular filtration, passive tubular reabsorption and active tubular secretion. Thus, total renal excretion= excretion by filtration + excretion by secretion – retention by reabsorption. If an active drug is metabolized mainly to inactive compounds, renal function will not greatly affect elimination of the parent compound. However, if the drug or an active metabolite is excreted unchanged via the kidneys, changes in renal function (i.e. chronic renal failure) will influence its elimination. Therefore, dose adjustment of the drug should be recommended(AU)

Synthesis and characterization of novel dextran-conjugated macromolecules of aceclofenac

The study involves the condensation of acylimidazole derivatives of acaclofenac (AC) with dextran 10,000 and 20,000 to obtain aceclofenac-dextran prodrugs AC10 and AC20 respectively with an aim to improve aqueous solubility, increase therapeutic efficiency and reduce the gastrointestinal side effects. The structure of synthesized prodrugs was confirmed by IR and NMR spectroscopy. The molecular weight was determined by Mark-Howink Sakurada equation and the degree of substitution was obtained as 13.3 and 16 % for the prodrugs. In vitro hydrolysis carried out in simulated gastric fluid (SGF), simulated intestinal fluid (SIF) and simulated colonic fluid (SCF) showed faster hydrolysis in SIF and SCF. The percentage anti-inflammatory activity of AC was found as 49.56 whereas an improved value of 56.44 and 61.82 % were obtained for AC10 and AC20 respectively. The prodrugs showed improved analgesia and reduced ulcerogenicity than aceclofenac, thereby proving to be better in action than the parent drug(AU)

El estudio se centra en la condensación de acilimidazoles derivados de aceclofenaco (AC) con dextrano 10.000 y 20.000 para obtener los profármacos de aceclofenaco-dextrano AC10 y AC20, respectivamente, con el objetivo de mejorar la hidrosolubilidad, aumentar la eficacia terapéutica y reducir los efectos secundarios gastrointestinales. La estructura de los profármacos sintetizados se ha confirmado a través de espectroscopia IR y RMN. El peso molecular ha sido determinado a través de la ecuación de Mark-Houwink-Sakurada y se ha obtenido un grado de sustitución de 13,3 y 16% para los profármacos. La hidrólisis in vitro llevada a cabo en fluido gástrico simulado (FGS), fluido intestinal simulado (FIS) y fluido colónico simulado (FCS) ha mostrado una hidrólisis más rápida en FIS y FCS. De ello ha resultado un porcentaje de actividad antiinflamatoria de AC de 49,56, mientras que para AC10 y AC20 se ha obtenido un valor aumentado de 56,44 y 61,82% respectivamente. Los profármacos han mostrado una mejor analgesia y una menor ulcerogenicidad que el aceclofenaco, por lo que se demuestra que su acción es mejor que la del fármaco base(AU)

Análisis de la actividad paraoxonasa (PON1) y de los polimorfismos PON1 192 y PON1 55 en la población prepuberal del Estudio Cuatro Provincias / Serum paraoxonase activity and PON1 192 and PON1 55 polymorphisms in prepuberal children. The Four Provinces S

Introducción. La paraoxonasa 1 (PON1) es una éster hidrolasa presente en las lipoproteínas de alta densidad (HDL), relacionada con la eliminación de componentes oxidados de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) y por ello con el riesgo cardiovascular. Nuestro estudio analiza la actividad PON1 y los polimorfismos 192 y 55 del gen PON1 en los niños de edad prepuberal integrantes del Estudio Cuatro Provincias. Métodos. La población de estudio la constituyen 1.275 niños de 6 a 8 años. La actividad PON1 en suero se determinó mediante la hidrólisis de paraoxon. Los polimorfismos genéticos PON1 192Q/R y PON1 55M/L se analizaron mediante amplificación por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y posterior análisis de restricción. Resultados. En nuestra población la frecuencia de los alelos PON192R y PON55M es del 30 y el 38%, respectivamente, sin diferencias significativas entre provincias. La actividad PON1 es más elevada en Orense y más baja en Murcia, tanto en la población total como para cada uno de los genotipos. En la provincia de Orense se observaron correlaciones significativas entre la actividad PON1 y los valores plasmáticos de colesterol total (CT), colesterol unido a HDL (cHDL) y apolipoproteína AI (apo AI). El análisis de regresión muestra que el polimorfismo PON1 192Q/R es el principal determinante de la actividad PON1 en nuestra población. Conclusiones. La frecuencia de los polimorfismos PON192 y PON55 no difiere significativamente entre provincias. Sin embargo, a pesar de que el polimorfismo PON192 es el principal determinante de la actividad PON1, Orense presenta la actividad PON1 más alta y Murcia la más baja, lo que sugiere que ya a esta edad existen factores que regulan esa actividad dentro de cada genotipo (AU)

Background. Paraoxonase (PON1) is an ester hydrolase related to the elimination of oxidized compounds of low-density lipoprotein (LDL) particles and therefore to cardiovascular risk. The aim of the present study was to analyze the relationship between serum PON1 activity and PON1 192 and 55 polymorphisms in the prepuberal children included in the Four Provinces Study. Methods. The study population included 1,275 children aged 6 to 8 years old. Serum PON1 activity was measured by paraoxon hydrolysis. PON1 192Q/R and PON1 55M/L polymorphisms were analyzed by polymerase chain reaction and restriction analysis. Results. In the population as a whole, the prevalence of the less common PON192R allele was 30% and that of the PON55M allele was 38%, without significant differences in the frequencies between provinces. PON1 activity was highest in Orense and lowest in Murcia, both in the group as a whole and within each genotype. In Orense, significant correlations between PON1 activity and plasma total cholesterol, high-density lipoprotein cholesterol and apolipoprotein AI levels were found. Regression analysis showed that the PON1 192Q/R polymorphism is the main determinant of PON1 activity in our population. Conclusions. No significant differences between provinces in the frequencies of the PON192 and PON55 polymorphisms were found. However, although the PON192 polymorphism is the main determinant of PON1 activity, Orense showed the highest activity and Murcia the lowest for all the genotypes, suggesting that already at this age some factors are regulating PON1 activity for each genotype (AU)

Esterase activity of Candida species isolated from immunocompromised hosts

Se ha evaluado la actividad esterasa de 149 aislamientos clínicos de Candida procedentes de pacientes inmunodeficientes, mediante el test de opacidad del Tween 80, prueba bioquímica utilizada principalmente para diferencias entre Candia albicans y Candida dubliniensis. Nuestros resultados muestran que C. albicans (92.3%), Candida tropicales (92,3%), Candida parapsilosis (25%), C. dubliniensis (16,6%), Candida inconspicua (100%) y Candia lipolytica (100%) produjeron halos de opacidad durante un periodo de 10 días post-inoculación. Por el contrario, elresto de las especies de Candida no produjeron una respuesta positiva. Estos hallazgos indican que el test de opacidad del Tween 80 no puede ser utilizado como el único rasgo fenotípico para diferenciar C. albicans y C. dubliniensis(AU)

A total of 149 clinical isolates of Candida species isolated from immunocompromised patients were examined to ascertain their esterase activity by the Tween 80 opacity test, which is a biochemical test used mainly to differentiate between Candida albicans and Candida dubliniensis. Our results showed that C. albicans (92.3%), Candida tropicalis (92.3%), Candida parapsilosis (25%), C. dubliniensis (16.6%), Candida inconspicua (100%), and Candida lipolytica (100%) produced opacity halos through the 10-day post-inoculation period. The remaining Candida species did not produce a positive test response. These findings indicate that Tween 80 opacity test cannot be used as the sole phenotypic trait in the differentiation of C. albicans and C. Dubliniensis(AU)

Síntesis y evaluación de los ésteres de doble acción del ketorolaco y de la aspirina / Synthesis and evaluation of dual acting esters of aspirin and ketorolac

Se sintetizaron y evaluaron cinco ésteres aminoetílicos N,N-disustituidos derivados del ketorolaco y la aspirina paraeliminar su toxicidad gástrica. Se diseñaron especialmente ésteres intactos para satisfacer el requisito estructural dedisponer de una actividad anticolinérgica antes de la separación. Además de bloquear el grupo carboxilato ácidomediante esterifi cación, esta actividad se incorporó a los ésteres sintetizados, con el benefi cio adicional esperadode la reducción de la secreción de ácido gástrico y la consecuente eliminación de la irritación local mediante unmecanismo dual. En este estudio se describen la síntesis, la cinética de la hidrólisis y la actividad biológica de estosésteres. Todos los ésteres derivados permanecieron estables en tampones(pH 2,0 y 7,4) durante un período de tiemposufi ciente, lo que aseguró su absorción en estado intacto y la eliminación de la irritación gástrica local producidapor el fármaco principal. Se observó una rápida hidrólisis enzimática de todos los derivados en un 80% de suerohumano combinado. Se descubrió que los ésteres sintetizados poseían la actividad anticolinérgica propuesta. Elpotencial ulcerogénico de los derivados evaluados se redujo de forma signifi cativa. Sin embargo, la actividad antiinflamatoria en el caso de los derivados de la aspirina fue mucho menor

To overcome the gastric toxicity of aspirin and ketorolac fi ve different N,N-disubstitutedaminoethyl ester derivatives for each were synthesized and evaluated. The intact esters were specially designed to satisfy the structural requirement for possessing the anticholinergic activity before cleavage. Besides blocking the acidic carboxyl group by esterifi cation this activity was incorporated into the synthesized esters with an expected additional benefi t of having reduced gastric acid secretion and thereby abolishing the local irritation by a dual mechanism. This report describes the synthesis, hydrolysis kinetics and the biological activity of these esters. All the ester derivatives were found to be stable in buffers (pH 2.0 and 7.4) for suffi cient time period, assuring them to be absorbed intact and to successfully overcome the local gastric irritation of the parent drug. A fast enzymatic hydrolysis was observed for all the derivatives in 80% pooled human serum. The synthesized esters were found to possess the proposed anticholinergic activity. The ulcerogenic potential of the evaluated derivatives was signifi cantly reduced. However, the anti-infl ammatory activity in case of aspirin derivatives was much lower

Efectos de la sal sobre la solubilidad y las propiedades emulsionantes de la caseína y sus hidrolizados trípticos / Effect of salt on the solubility and emulsifying properties of casein and its tryptic hydrolysates

En este trabajo se presentan los resultados de una investigación sobre los efectos de la adición de NaCl (0,02 mol/L) sobre algunas propiedades funcionales de la caseína (CA) y de sus hidrolizados trípticos (TH). Se determinaron la solubilidad, la capacidad emulsionante (CE), el índice de actividad emulsionante (IAE) y la estabilidad de la emulsión (EE) con dos valores de pH (4,0 y 5,0). Los resultados demostraron que el procedimiento era benefi cioso para la solubilidad de CA y TH, siendo más intensa con pH 5,0 y 4,0, respectivamente. También se observó un efecto positivo de la adición de NaCl en CA y TH, con ambos valores de pH, consiguiéndose los mejores resultados con pH 5,0. La EE se vio ligeramente afectada por la presencia de sal, y sólo aumentó en algunas muestras de CA y TH. Por el contrario, los valores del IAE de la caseína se redujeron al añadir NaCl con pH 4,0 y 5,0, mientras que las de TH se vieron afectadas positivamente por este tratamiento con ambos valores de pH

This work reports an investigation about the effect of NaCl addition (0.02 mol/L) on some functional properties of casein (CA) and its tryptic hydrolysates (TH). The solubility, the emulsifying capacity (EC), the emulsifying activity index (EAI) and the emulsion stability (ES) were determined at two pH values (4.0 and 5.0). The results showed that this procedure was benefi cial for the solubility of CA and TH, being more intense at pH 5.0 and 4.0, respectively. Also, a positive effect of NaCl addition was observed for CA and TH, at both pH values, and the best results for both samples were achieved at pH 5.0. The ES was slightly affected by the presence of salt and only for some samples of CA and TH it was increased. Contrarily, the EAI values of casein were reduced with the addition of NaCl at pH 4.0 and 5.0, while those of TH were positively affected by this treatment at both pH values

Susceptibilidad a la degradación de un material de obturación de conductos radiculares basado en una policaprolactona. I. Hidrólisis alcalina / Susceptibility of a polycaprolactone-based root canal filling material to degradation. I. Alcaline hydrolisis

La policaprolactona, unpoliéster alifático termoplástico, se ha mostrado susceptible tanto a la hidrólisis alcalina y enzimática. Este estudio de screening examinó la susceptibilidad a la hidrólisis alcalina del Resilon, un composite de obturación de conductos basado en policaprolactona. se prepararon discos de 15 mm de diámetro de Resilon y gutapercha Obtura, preparadas por compresión en moldes y sumergidas en etóxido de sodio de 20 a 60 minutos. Los discos de control se sumergieron en etanol durante 60 minutos. Estos discos se examinarion empleando microscopia electrónica de barrido de campo de emisión y análisis de rayos X de energía dispersiva. Para el Resilon, el componente resinoso de superficie se hidrolizó tras 20 minutos de inmersión en etóxido de sodio, exponiendo el polímero esferulítico y los rellenos de oxicloruro de bismuto y vidrio subsuperficial. Se produjo una erosión más severa tras 60 min de tratamiento con etóxido de sodio. La gutapercha no se afectó tras la inmersión en el etóxido de sodio. como el Resilon es susceptible con la hidrólisis alcalina, es posible que se produzca la hidrólisis enzimática. La biodegradación del Resilon por enzimas bacterianos/salivales y bacterias relevantes en endodoncia requiere más investigación

Polycaprolactone, a thermoplastic aliphatic polyester, is reportedly susceptible to both alkaline and enzymatic hydrolyzes. This screening study examined the susceptibility of Resilon, a polycaprolactone-based root filling composit, to alkaline hydrolisis. There were 15 mm diameter disks of Resilon and Obtura gutta-percha prepared by comprenssive molding and immersed in 20% sodium ethoxide for 20 or 60 min. Control disks were immersed in ethanol for 60 min. These disks were examined using field-emission scanning electron microscopy and energy dispersive X-ray analysis. for Resilon, the surface resinous component was hydrolyzed after 20 min of sodium ethoxide immersion, exposing the spherulitic polymer structure and subsurface glass and bismuth oxyclorhide fillers. More severre erosion occurred after 60 min of sodium ethoxide treatment. Gutta-percha was unaffected after immersion in sodium ethoxide. As Resilon is susceptible to alkaline hydrolysis, it is possible that enzymatic hydrolysis may occur. Biodegradation of Resilon by bacterial/salivary enzymes and edodontically relevant bacteria warrants further investigation

Alteración funcional de la F0F1-ATPasa en partículas submitocondriales obtenidas de plaquetas de pacientes con diagnóstico de enfermedad de Alzheimer probable / Functional disorders of fof1-atpase in submitochondrial particles obtained from platelets of patients with a diagnosis of probable alzheimer’s disease

Introducción. Los estudios recientes indican que una disminución en la generación de energía de la mitocondria es una característica que unifica a las enfermedades neurodegenerativas. Pacientes y métodos. Para obtener evidencia directa que la función mitocondrial se altera, cuantificamos en 29 pacientes diagnosticados con probable enfermedad de Alzheimer (EA) la actividad hidrolítica de la F0F1-ATPasa y su capacidad para generar un gradiente estable de protones en partículas submitocondriales. Las partículas submitocondriales se obtuvieron de plaquetas de pacientes con diagnóstico probable de EA y de controles clínicamente sanos. Resultados. Los datos revelaron que la actividad hidrolítica de la F0F1-ATPasa se incrementa de manera significativa en los pacientes con la probable EA -41,7 ± 4,3 nmol PO4 min-1(mg proteína)-1, con n = 29- en comparación con los controles -29,1 ± 1,9 nmol PO4 min-1 (mg proteína)- 1, con n = 29-. De manera importante, encontramos que en la población masculina con probable EA, la actividad hidrolítica de la F0F1-ATPasa aumenta conforme progresa el deterioro cerebral. También detectamos un gradiente de pH menor en las partículas submitocondriales de los pacientes con probable EA (0,28 ± 0,08 unidades de pH, n = 25) comparados con los controles (0,5 ± 0,1 unidades de pH, n = 20). Conclusión. Estos datos, en conjunto, indican una alteración funcional en la enzima

Introduction. Recent studies indicate that decreased energy generation by mitochondria is a feature that is common across neurodegenerative diseases. Patients and methods. In order to obtain direct evidence that mitochondrial functioning is altered, we measured the hydrolytic activity of F0F1-ATPase and its capacity to generate a stable proton gradient in submitochondrial particles in 29 patients diagnosed with probable Alzheimer’s disease (AD). Submitochondrial particles were obtained from platelets of patients with a diagnosis of probable AD and from clinically healthy controls. Results. Data revealed that the hydrolytic activity of F0F1-ATPase increases significantly in patients with probable AD (41.7 ± 4.3 nmol PO4 min-1[mg protein]-1, n = 29) as compared to the control subjects (29.1 ± 1.9 nmol PO4 min-1 [mg protein]-1, n = 29). It is important to note that, in the male population with probable AD, we found that hydrolytic activity of F0F1-ATPase increased as cerebral deterioration progressed. We also detected a lower pH gradient in the submitochondrial particles of patients with probable AD (0.28 ± 0.08 pH units, n = 25) as compared to the controls (0.5 ± 0.1 pH units, n = 20). Conclusions. Overall, these data point to an alteration in the functioning of the enzyme

Una nueva aproximación a la optimización terapéutica del diclofenaco / A novel approach towards therapeutic optimization of diclofenac

Con objeto de obtener compuestos con menor toxicidad gástrica que el diclofenaco, se sintetizaron y evaluaron cinco ésteres derivados aminoetílicos N,N-sustituidos derivados del diclofenaco. Estos ésteres se diseñaron para satisfacer el requisito estructural de disponer de una actividad anticolinérgica intacta antes de la separación. Además de bloquear el grupo carboxilo ácido mediante esterificación, esta actividad se incorporó a los ésteres sintetizados, con el beneficio adicional esperado de la reducción de la secreción de ácido gástrico y la consecuente eliminación de la irritación local mediante un mecanismo dual. En este estudio se describen la síntesis, la cinética de la hidrólisis y la actividad biológica de estos ésteres. Todos los derivados de éster permanecieron estables en tampones de pH 2,0 y 7,4 durante un período de tiempo suficiente, lo que aseguró su absorción en estado intacto y la eliminación de la irritación gástrica local producida por el fármaco principal. Se observó una rápida hidrólisis enzimática de todos los derivados en un 80% de suero humano combinado. Se descubrió que los ésteres sintetizados poseían la actividad anticolinérgica propuesta. Se mantuvo la actividad antiinflamatoria en la mayoría de los compuestos y se logró una significativa reducción del potencial ulcerogénico en comparación con el diclofenaco

In an effort for obtaining compounds with lower gastric toxicity than diclofenac, five different N,Ndisubstitutedaminoethyl ester derivatives of diclofenac were synthesized and evaluated. These esters were designed so as to satisfy the structural requirement for them to possess the anticholinergic activity in intact form before cleavage. Besides blocking the acidic carboxyl group by esterification this activity was incorporated into the synthesized esters with an expected additional benefit of having reduced gastric acid secretion and thereby abolishing the local irritation by a dual mechanism. This report describes the synthesis, hydrolysis kinetics and the biological activity of these esters. All the ester derivatives were found to be stable in buffers (pH 2.0 and 7.4) for sufficient time period, assuring them to be absorbed intact and to successfully overcome the local gastric irritation of the parent drug. A fast enzymatic hydrolysis was observed for all the derivatives in 80% pooled human serum. The synthesized esters were found to possess the proposed anticholinergic activity. The anti-inflammatory activity for most of the compounds was retained with a significant reduction in the ulcerogenic potential compared to diclofenac