Changes in MAP-2 and GFAP immunoreactivity in pup hippocampus during prepubertal and pubertal periods caused by maternal subclinical hypothyroidism

An absence of the thyroid hormone during the critical period of brain development causes delayed maturation of glial cells and neurons and decreases the number of hippocampal cells. This study aims to examine the impact of maternal subclinical hypothyroidism (SCH) on pup hippocampus during the prepubertal and pubertal periods by means of assessing the histopathological changes in astrocytes and neurons.Twelve Wistar albino pregnant rats were divided into two groups, Group H and Group C. Group C was designated as the control group and nothing was added to their drinking water. SCH was induced in Group H by administering 6-propyl-2-thiouracil (PTU) at a final concentration of 0.01% in the drinking water of pregnant rats for 21 days. Male pups for each group were divided evenly and evaluated on either day 15 (prepubertal) or 60 (pubertal) (7 pups in each group). At the end of the experimental period, the rats were sacrificed for analysis of brain tissue. Immunoreactivity intensities of MAP-2 and GFAP were evaluated in hippocampus tissue. Thyroid function was determined using ELISA. The structure of hippocampus was evaluated by hematoxylin-eosin staining. Finally, the TUNEL method was utilized to show apoptosis of hippocampus tissue. The results were analyzed statistically.The findings show that maternal SCH causes disruption in hippocampal cytoskeleton and dendritic organization, especially during the pubertal period, as well as a decrease in MAP-2 expression. We observed structural deformation in astrocytes, reduced astrocyte survival and GFAP expression. Finally, we found that the number of neuronal apoptotic cells tended to increase in the pubertal period

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Enhanced utilization of glycerol for glyceride synthesis in isolated adipocytes from early pregnant rats

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Adipose tissue normally has low glycerol kinase activity, but its expression is enhanced under conditions of augmented insulin sensitivity and/or obesity. Since these conditions occur during early pregnancy, the comparative utilization of glucose or glycerol by isolated adipocytes from rats at 0, 7, 14, or 20 days of pregnancy was studied. Incubations were carried out in the presence of [U14C]-glucose or -glycerol in medium supplemented or not with 5 mM glucose and 100 nM insulin. The conversion of glucose into esterified fatty acids and glyceride glycerol was greatest in adipocytes from 7-day pregnant rats, the effect being further enhanced by insulin. Both the amount of aquoporin 7 and the in vitro conversion of glycerol into glyceride glycerol were greatest in adipocytes of 7-day pregnant rats, the later being unaltered by insulin. In the presence of glucose, the overall glycerol utilization was lower than in its absence and glycerol conversion into glyceride glycerol was further decreased by insulin, the effect only being significant in adipocytes from 7-day pregnant rats. It is proposed that the enhanced utilization of glycerol for glyceride glycerol synthesis in adipose tissue contributes to the net accumulation of fat depots that normally takes place in early pregnancy (AU)

Body weight increase in expectant males and helpers of cotton-top tamarin (Saguinus oedipus): A sympton of the Couvade syndrome? / Aumento de peso corporal en machos expectantes y cooperantes de tití de cabeza blanca (Saguinus oedipus): ¿un síntoma del Síndrome de Couvade?

In the cooperative breeding system of cotton-top tamarin (TCB; Saguinus oedipus) «expectant» males gain weight during the last months of pregnancy of their partners as a way to cope with energy costs of reproduction. This phenomenon was described only in humans as a symptom of «Couvade syndrome». As after infants’ birth, TCB male and female helpers lose weight, the same as fathers do, it might be expected that previously, they also gain weight. In 8 groups of TCB, we explored body weight changes of the three categories of individuals, in periods of six months, under three different reproductive conditions: control (no pregnancy and without offspring), pregnancy (pregnancy and without offspring), and raising (with offspring). We found that across pregnancy, TCBs increase their weight in the last trimester of that period while across breeding TCBs reduce their weight in the first trimester. Expectant males and also helpers could be preparing during pregnancy in relation to the weight losses they experience when raising their young

En el sistema de crianza cooperativa del tití de cabeza blanca (TCB; Saguinus oedipus) los machos «expectantes» aumentan de peso durante los últimos meses de la preñez de sus parejas como una forma de enfrentarse a los costos energéticos de la reproducción. Este fenómeno se había descrito únicamente en humanos como un síntoma del «síndrome Couvade». Puesto que los cooperantes macho y hembra de TCB asumen costos reproductivos, cabría esperar que previamente también ellos aumentaran de peso. Hemos explorado en 8 grupos de TCB el cambio de peso de las tres categorías de individuos, en períodos de seis meses en tres condiciones reproductoras diferentes: control (sin preñez y sin crías), preñez (preñez y sin crías) y crianza (con crías). Hemos encontrado que durante la preñez los tamarines aumentan de peso en el último trimestre de ese período, mientras que en la crianza reducen su peso en el primer trimestre. Los machos expectantes y también los cooperantes podrían prepararse durante la preñez en relación a las pérdidas de peso que experimentan durante la crianza

Evaluación de la especificidad de anticuerpos policlonales aviarios y mamíferos anti-Factor Precoz de Preñez porcino / Specificity evaluation of polyclonal avian and mammalian anti-porcine early pregnancy factor antibodies

El EPF es una proteína con propiedades inmunomoduladoras y reguladoras del crecimiento, presente en el suero de los animales durante la gestación. Es un marcador temprano de viabilidad embrionaria durante la fase peri-implantacional. La obtención de anticuerpos(Acs) anti-EPF nos permitiría contar con una valiosa herramienta para investigar las funciones biológicas de este factor. No se ha logrado obtener Acs monoclonales anti-EPF debido a su función como factor de crecimiento autócrino para los hibridomas. La distancia filogenéticaque existe entre las aves y los mamíferos resulta potencialmente ventajosa para la producción de un alto porcentaje de Acs específicos contra antígenos mamíferos. El objetivo de este trabajo fue laobtención de Acs policlonales anti-EPF porcino aviarios y de mamífero, comparando la producción y la especificidad de cada lote de anticuerpos. Se inmunizaron gallinas y conejos con un péptido sintéticode EPF o con la banda de 29 kDa aislada por SDS-PAGE proveniente de suero de una cerda de 7 días de gestación. Las IgY aviarias anti-EPF se purificaron por el método de precipitación con ácido caprílico y polietilenglicol 6000, y las IgG anti-EPF de conejo por precipitación salina con sulfato de amonio. El rendimiento proteico fue evaluado por Bradford y la especificidad de los Acs por “Dot Blot” eInmunoblot. El rendimiento proteico fue satisfactorio en todos los lotes de Acs. El lote de Acs obtenidos en conejos inmunizados con el péptido sintético presentó especificidad satisfactoria. Los lotes obtenidosen conejos y gallinas inmunizadas con la banda de SDS-PAGE de 29 kDa presentaron baja especificidad, mientras que el lote obtenido en gallinas inmunizadas con el péptido sintético presentó nula especificidad. El péptido sintético de EPF indujo la producción deAcs más específicos en conejos, pero la banda de 29 kDa de SDS-PAGE no es adecuada para obtener Acs específicos contra este factor dado que además del EPF reconoce otras proteínas presentes en el suero

Early Pregnancy Factor (EPF) is a secreted protein with known functions as immunomodulator and growth factor, released very early in mammalian gestation. EPF represents an early marker of gestationand a very useful tool to supervise embryonic viability during the peri-implantational period. Obtaining anti-EPF antibodies (Abs) would mean having a valuable tool to investigate the biological functions ofthis factor, but it has failed so far due to EPF´s function as an autocrine growth factor for hibridomas. The phylogenetic distance between birds and mammals is potentially advantageous for the efficientproduction of specific Abs against mammalian antigens. Thus, the objective of this work was to obtain avian and mammalian polyclonal anti-porcine EPF Abs and to evaluate the protein yield and the specificity of each batch of antibodies. Hens and rabbits were immunizedwith a synthetic EPF peptide, or with EPF isolated and purified from porcine serum of 7 days of gestation by SDS-PAGE (29 kDa band). IgY anti-EPF antibodies from hens were purified by combined caprylic acid and polyethylene glycol 6000 precipitation, and rabbitanti-EPF IgG by sulphate ammonium precipitation. Protein yield was evaluated by Bradford, and Ab specificity by Dot Blot and Immunoblot. The protein yield was satisfactory in all batches of Abs. The specificity of Abs obtained from rabbits immunized with the syntheticEPF peptide was satisfactory. Batches of immunoglobulins obtained from rabbits and hens immunized with the SDS-PAGE 29 kDa band displayed low specificity, whereas the batch obtained from hens immunized with the synthetic peptide presented null specificity. The synthetic peptide induced the production of more specific Abs whenthey were raised in rabbits. In contrast, the SDS-PAGE 29 kDa band is not useful to obtain specific Abs against this factor, since in addition to EPF it recognizes other proteins present in the serum

Uso del protocolo Ovsynch en vaquillonas lecheras con o sin cuerpo lúteo funcional al inicio del tratamiento / Use of the Ovsynch protocol in dairy heifers with or without a functional corpus luteum at the initiation of treatment

Con el objetivo de comparar la respuesta ovárica y el porcentaje de preñez de vaquillonas lecheras que recibieron dos tratamientos con doble dosis de prostaglandina, separadas por 11 días, para generar presencia o ausencia de cuerpo lúteo funcional al inicio del protocolo Ovsynch., 22 vaquillonas Holando Argentino fueron distribuidas en dos grupos para recibir dos dosis de 750 µg de tiaprost, los días -22 y -11 (grupo CLF+, n=11) o los días -14 y -3 (grupo CLF-, n=11). La presencia o no de cuerpo lúteo funcional fue confirmada por ecografía y medición de progesterona plasmática, con lo cual dos vaquillonas CLF+ y una CLF- fueron eliminadas. El día 0 ambos grupos recibieron 8 mg de buserelina; el día 7, 750 mg de tiaprost y el día 9, 8 mg de buserelina. El servicio se realizó por inseminación artificial a tiempo fijo a las 15 horas post-tratamiento. El porcentaje de animales con un folículo > = 8 mm al día 0 y su tamaño fueron similares entre grupos (P>0,05). Estos folículos ovularon (94,1 por ciento) o se luteinizaron (5,9 por ciento) luego de la primera inyección de buserelina (P>0,05). El porcentaje de animales con cuerpo lúteo funcional al día 7 fue de 100 por ciento y 90 por ciento, para CLF+ y CLF- (P>0,05), mientras que la concentración de progesterona de los mismos fue superior en CLF+ (3,5 ñ 0,7 vs 2,2 ñ 1,2 ng/ml; P0,05). El diámetro del folículo dominante fue superior en CLF-, tanto al día 7 (P=0,05) como al día 9 (P0,05). Los porcentajes de preñez fueron similares entre grupos (66,7 por ciento y 70 por ciento; P>0,05). En conclusión, la utilización de dos tratamientos con doble dosis de prostaglandina separadas por 11 días, para generar presencia (11 días post-segunda PGF2alfa) o ausencia (3 días post-segunda PGF2alfa) de cuerpo lúteo funcional al inicio del protocolo Ovsynch en vaquillonas lecheras produce respuestas ováricas similares (ovulación, sincronización de la fase luteal y luteólisis), lo que explicaría la similitud entre los porcentajes de preñez de ambos grupos (AU)