Peste, uma zoonose esquecida / Plague, a forgotten zoonosis

Objetivo: caracterizar aspectos epidemiológicos e clínicos fundamentais, discutir a metodologia do diagnóstico e tecer recomendações sobre as condutas perante a suspeição de casos de peste. Métodos: revisão bibliográfica e levantamento das internações e mortes por peste registradas no Sistema de Informações Hospitalares do Sistema Único de Saúde. Resultados e conclusões: a existência de diagnósticos equivocados de uma doença potencialmente fatal, além dos registros hipotéticos de internações e mortes, constitui um desafio a ser superado, pois espelha uma situação inaceitável, em que um possível e insólito diagnóstico não é investigado e acumula-se nos sistemas de informação.

Objective: to characterize ground epidemiological and clinical aspects of, discuss the methodology of diagnosis and draw recommendations about the management of suspect cases of plague. Methods: literature review and data collection of hospitalizations and deaths due to plague recorded in the Hospital Information System of the Unified Health System. Results and conclusions: the existence of mistaken diagnoses of a potentially fatal disease, as well as hypothetical records of hospitalization and deaths, is a challenge to be overcome, because it reflects an unacceptable panorama in which a possible and unusual diagnosis is not investigated and accumulates in the information systems.

Yersinia pestis detection by loop-mediated isothermal amplification combined with magnetic bead capture of DNA

ABSTRACT We developed a loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay for the detection of Y. pestis by targeting the 3a sequence on chromosome. All 11 species of the genus Yersinia were used to evaluate the specificity of LAMP and PCR, demonstrating that the primers had a high level of specificity. The sensitivity of LAMP or PCR was 2.3 or 23 CFU for pure culture, whereas 2.3 × 104 or 2.3 × 106 CFU for simulated spleen and lung samples. For simulated liver samples, the sensitivity of LAMP was 2.3 × 106 CFU, but PCR was negative at the level of 2.3 × 107 CFU. After simulated spleen and lung samples were treated with magnetic beads, the sensitivity of LAMP or PCR was 2.3 × 103 or 2.3 × 106 CFU, whereas 2.3 × 105 or 2.3 × 107 CFU for magnetic bead-treated liver samples. These results indicated that some components in the tissues could inhibit LAMP and PCR, and liver tissue samples had a stronger inhibition to LAMP and PCR than spleen and lung tissue samples. LAMP has a higher sensitivity than PCR, and magnetic bead capture of DNAs could remarkably increase the sensitivity of LAMP. LAMP is a simple, rapid and sensitive assay suitable for application in the field or poverty areas.

Humoral and cellular immune response of mice challenged with Yersinia pestis antigenic preparations

ABSTRACT Objectives: The plague, which is an infectious disease caused by Yersinia pestis, still threatens many populations in several countries. The worldwide increase in human plague cases and the potential use of the bacteria as a biological weapon reinforce the need to study the immunity that is induced by potential vaccine candidates. To determine the immunogenicity of antigenic preparations based on the F1 protein and the total extract from Y. pestis, we assessed the role of these antigens in inducing an immune response. Methods: The immunogenicity of antigenic preparations based on the Y. pestis (YP) total extract and the Y. pestis fraction 1 capsular antigen protein (F1) was determined in Swiss-Webster mice immunized with 40 µg or 20 µg for each preparation. Immunophenotyping was performed by flow cytometry. Results: Animals immunized with the YP total extract did not elicit detectable anti-F1 antibodies (Ab) in the hemaglutination/inhibition (HA/HI) test. Animals immunized with 40 µg or 20 µg of the F1 protein produced anti-F1 Abs, with titres ranging from 1/16 to 1/8132. The average of CD3+-CD4+ and CD3+-CD8+ T cells did not differ significantly between the groups. Neither YP total extract nor F1 protein induced a significant expression of IFN-γ and IL-10 in CD4+ T lymphocytes. In addition, F1 failed to induce IFN-γ expression in CD8+ T cells, unlike the YP total extract. Conclusion: The results showed that F1 protein is not an immunogenic T cell antigen, although the YP total extract (40 µg dose) favoured CD8+ T cell-mediated cellular immunity.

Seroprevalence and spatial distribution dynamics of Yersinia pestis antibodies in dogs and cats from plague foci in the State of Ceará, Northeastern Brazil

Abstract INTRODUCTION: In Brazil, the plague is established in several foci located mainly in the northeastern part of the country, where it alternates between active and quiescent periods. These foci in the State of Ceará have high epidemiological importance. In addition to other plague detection activities, plague areas can be monitored through serological surveys of dogs and cats (domestic carnivores), which, following feeding on plague-infected rodents, can develop mild to severe forms of the disease and produce long-lasting antibodies. This study aimed to characterize the circulation dynamics and spatial distribution of Yersinia pestis antibodies in dogs and cats in plague foci areas of Ceará. METHODS: An ecological study was conducted to analyze the temporal series and spatial distribution of secondary data obtained from domestic carnivore serum surveillance in Ceará's plague areas from 1990 to 2014. RESULTS: Joinpoint analysis revealed that the overall trend was a reduction in antibody-positive animals. The mean proportion of antibody-positivity during the whole study period was 1.5% (3,023/203,311) for dogs, and 0.7% (426/61,135) for cats, with more than 4% antibody-positivity in dogs in 1997 and 2002. Antibody titers ranging from 1/16 to 1/64 were frequent. Despite fluctuations and a significant reduction, in recent years, there were antibody-positive animals annually throughout the study period, and the localities containing antibody-positive animals increased in number. CONCLUSION: Yersinia pestis is actively circulating in the study areas, posing a danger to the human population.

A qualitative socio-ecological characterization of the plague threat at Hermelinda Market, La Libertad, Peru / Caracterización socioecológica cualitativa de la amenaza de peste en el mercado La Hermelinda, Departamento de La Libertad Perú / Caracterização socioecológica qualitativa do risco de ocorrência da peste no Mercado Hermelinda, La Libertad, Peru

Objective To identify 1) the main determinants of persistent Yersinia pestis circulation and the associated threat of plague at Hermelinda Market—a large farmers' market in the city of Trujillo, La Libertad, Peru—and the main actions taken against it, as perceived by local stakeholders; 2) the level of plague risk perception among local actors; and 3) recommended actions to solve the plague threat at the market. Methods A conceptual framework was developed combining a social determinants approach with a complex systems-thinking framework and a knowledge management perspective. A four-step qualitative protocol was carried out (literature review; stakeholder mapping; 37 semi-structured interviews; and coding/analysis). In the fourth step, the data collected in the semi-structured interviews were coded for eight social determinants of health (SDH) variables and analyzed with ATLAS.ti®, and an emerging category analysis was performed to identify risk perception levels. Results Based on analysis by SDH variable, the three main determinants of the plague threat at Hermelinda Market were: 1) local (Trujillo City) governance, 2) infrastructure and basic services, and 3) local culture. According to the same analysis, actions most frequently undertaken against plague involved 1) infrastructure and basic services, 2) social vigilance, and 3) communication. The emerging category analysis indicated local risk perception levels were low, with most of the data pointing to "unhygienic" ("naturalized") lifestyles and a general lack of awareness about the disease prior to plague-related health concerns at the market as the cause. Conclusions The results indicate that the persistent circulation of Yersinia pestis at Hermelinda Market is not simply a technical matter but more of a managerial and cultural problem. As local governance was found to be a main factor in the persistence of this public health threat, future efforts against it should focus on sustainable inter-sectoral planning and education. Actions taken exclusively by the health sector and the improvement of infrastructure and basic services alone will not be enough to reduce the threat of plague at the market.

RESUMEN Objetivo Establecer: 1) los principales determinantes de la circulación persistente de Yersinia pestis y la amenaza asociada de peste en el mercado La Hermelinda, un gran mercado de agricultores en la ciudad de Trujillo, Departamento de La Libertad en Perú, y las medidas más adecuadas para combatir la bacteria, según la percepción de los interesados directos locales; 2) el grado de percepción del riesgo de peste entre los actores locales; y 3) las medidas recomendadas para resolver la amenaza de peste en el mercado. Métodos Se elaboró un marco conceptual que combinaba un enfoque de determinantes sociales con un complejo marco de pensamiento sistémico y una perspectiva de gestión del conocimiento. Se llevó a cabo un protocolo cualitativo de cuatro pasos (revisión bibliográfica; mapeo de interesados directos; 37 entrevistas semiestructuradas y codificación y análisis). En el cuarto paso, los datos recopilados en las entrevistas semiestructuradas fueron codificados conforme a ocho variables de los determinantes sociales de la salud y analizados con el programa ATLAS.ti ®, y luego se realizó un análisis de las categorías emergentes para establecer los grados de percepción del riesgo. Resultados Sobre la base del análisis de las variables de los determinantes sociales de la salud, los tres principales determinantes de la amenaza de peste en el mercado La Hermelinda fueron: 1) la gobernanza local (Ciudad de Trujillo), 2) la infraestructura y los servicios básicos y 3) la cultura local. Según el mismo análisis, las acciones emprendidas con mayor frecuencia contra la peste se vincularon con 1) la infraestructura y los servicios básicos, 2) la vigilancia social y 3) la comunicación. El análisis de las categorías emergentes indicó que los grados locales de percepción del riesgo fueron bajos y la mayoría de los datos apuntaron como causas a los modos de vida "antihigiénicos" ("naturalizados") y a una falta general de concientización acerca de la enfermedad antes de la preocupación acerca de la salud relacionada con la peste en el mercado. Conclusiones Los resultados indican que la circulación persistente de Yersinia pestis en el mercado La Hermelinda no es sencillamente un asunto técnico sino sobre todo un problema cultural y de gestión. Como se encontró que la gobernanza local era un factor importante en la persistencia de esta amenaza a la salud pública, las actividades futuras para combatirla deben centrarse en la planificación y la educación intersectoriales sostenibles. Las medidas adoptadas exclusivamente por el sector de la salud y el mejoramiento de la infraestructura y los servicios básicos por sí solos no serán suficientes para reducir la amenaza de la peste en el mercado.

RESUMO Objetivo Identificar 1) os principais determinantes da circulação persistente de Yersinia pestis e o risco associado de ocorrência da peste no Mercado Hermelinda, um grande mercado de produtos agrícolas no município de Trujillo, La Libertad, Peru, e as principais medidas adotadas para enfrentar esta situação, segundo a percepção dos interessados diretos locais, 2) o nível de percepção do risco de ocorrência da peste entre os atores locais e 3) as ações recomendadas para eliminar o risco de ocorrência da peste no mercado. Métodos Foi desenvolvida uma estrutura conceitual formada pela combinação de um enfoque de determinantes sociais, um enquadramento complexo de reflexão sistêmica e uma perspectiva de gestão do conhecimento. Foi conduzido um protocolo qualitativo de quatro etapas (revisão literária, mapeamento de interessados diretos, 37 entrevistas semiestruturadas e codificação/análise). Na quarta etapa, os dados coletados nas entrevistas semiestruturadas foram codificados para oito variáveis de determinantes sociais da saúde (DSS) e analisados com o programa ATLAS.ti®. Uma análise de categorias emergentes foi realizada para identificar os níveis de percepção de risco. Resultados A partir da análise segundo as variáveis de DSS, os três principais determinantes do risco de ocorrência da peste no Mercado Hermelinda foram: 1) governança local (município de Trujillo), 2) infraestrutura e serviços básicos e 3) cultura local. Segundo a mesma análise, as medidas adotadas com maior frequência para evitar a peste foram: 1) infraestrutura e serviços básicos, 2) vigilância social e 3) comunicação. A análise de categorias emergentes indicou que o nível de percepção local do risco de ocorrência era baixo, sendo que a maioria dos dados apontou como causa hábitos de vida anti-higiênicos ("naturalizados") e falta geral de consciência da doença anterior às preocupações de saúde relacionadas com a peste no mercado. Conclusões Os resultados do estudo indicam que a circulação persistente de Yersinia pestis no Mercado Hermelinda não é simplesmente uma questão técnica, sendo mais um problema administrativo e cultural. Verificou-se que a governança local é um dos principais fatores para a persistência desta ameaça à saúde pública e os esforços futuros devem visar o planejamento intersetorial sustentável e a educação. Medidas adotadas exclusivamente pelo setor da saúde e a melhoria da infraestrutura e serviços básicos por si só não serão suficientes para reduzir o risco de ocorrência da peste no mercado.

Aplicação da técnica Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) no desenvolvimento de um teste para o diagnóstico da peste / Application of the technique Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) in developing a test for the plague diagnosis

A peste, infecção causada pela bactéria Yersinia pestis, é uma zoonose primária de roedores, geralmente transmitida por pulgas, que infecta humanos e outros mamíferos. O diagnóstico bacteriológico tradicional da peste pode ser comprometido pela qualidade das amostras coletadas em áreas remotas, transportadas inadequadamente e recebidas no laboratório semanas após a coleta. Técnicas de diagnóstico molecular dispensam o cultivo e são exequíveis quando as bactérias estão inviáveis ou em amostras multicontaminadas. Métodos moleculares convencionais (PCR, qPCR, Nested-PCR) requerem equipamentos sofisticados para amplificação e visualização dos resultados, impedindo seu uso em laboratórios menos equipados. A amplificação isotérmica mediada por loop (Loop-mediated isothermal amplification - LAMP), uma variação da PCR convencional, utiliza enzima que permite amplificação isotérmica, apresenta alta especificidade, sensibilidade, rapidez e custo reduzido, sendo utilizada na detecção de diversos patógenos. Esta técnica emprega de quatro a seis primers e a enzima Bst DNA polimerase, que além da atividade de síntese, atua abrindo a fita dupla de DNA. O resultado da amplificação é visualizado no próprio tubo, a olho nu. O objetivo deste projeto foi aplicar a técnica LAMP no desenvolvimento de um teste para o diagnóstico da peste. Foram construídos cinco primers específicos para amplificação do gene caf1, exclusivo de Y. pestis, utilizados em ensaios com o DNA da cepa Y. pestis A1122, para determinar as concentrações ótimas dos reagentes, temperatura de incubação (60°C, 63°C e 65°C) e tempo de duração da reação (15, 30, 45, 60 e 90 minutos). As reações foram incubadas em banho maria. A amplificação foi visualizada diretamente nos tubos contendo SYBR® Safe ou SYBR® Green I. Foi observado que a partir de 45 minutos de reação ocorre amplificação do gene caf1, nas três temperaturas testadas. Além disso, a técnica mostrou-se específica e sensível, detectando até 10 pg de DNA de Y. pestis.

Infecção por Yersinia pestis, no Estado da Bahia: controle efetivo ou silêncio epidemiológico? / Yersinia pestis infection in the State of Bahia: effective control or epidemiological silence?

INTRODUÇÃO: A peste, doença infectocontagiosa milenar, continua sendo considerada da maior importância do ponto de vista epidemiológico devido ao alto potencial epidêmico, estando inclusive sujeita ao Regulamento Sanitário Internacional. Apesar da ausência de casos humanos da doença no Brasil, seu agente etiológico, a bactéria Yersinia pestis, permanece firmemente arraigado em seus focos naturais. A ocorrência de sorologia positiva em carnívoros domésticos de regiões pestígenas da Bahia, nos últimos anos, objetivou a realização deste estudo, que se propõe a verificar a existência de circulação do agente no estado, tendo em vista que fatores condicionantes para a doença são mantidos, oferecendo riscos à população. MÉTODOS: Trata-se de um estudo para verificação da presença de infecção por Y. pestis através do inquérito de soroprevalência em humanos, cães e roedores; e pesquisa da bactéria em roedores e pulgas. Utilizou-se de questionário estruturado para avaliação da associação existente entre fatores ambientais, sócioeconômicos e biológicos e a soroprevalência da infecção em humanos. RESULTADOS: Os 630 soros examinados (88 de humanos, 480 de cães, 62 de roedores) apresentaram-se não reagentes para peste e as análises bacteriológicas realizadas em 14 roedores e dois lotes de pulgas não identificaram a bactéria. CONCLUSÕES: Os resultados não configuram erradicação da doença no estado, pois sua natureza cíclica indica que pode passar longos períodos silente e depois ressurgir acometendo um grande número de pessoas. Portanto, a manutenção da vigilância ativa e permanente se faz necessária para a detecção precoce da doença e desenvolvimento oportuno das medidas de controle pertinentes.

INTRODUCTION: From an epidemiological point of view, the plague is still being considered of great importance, because of its high epidemic potential. Despite the absence of cases of human plague in Brazil, its etiologic agent, the bacteria Yersinia pestis, is still deep rooted in its natural environment. The occurrence of positive serology for plague in domestic carnivores in plague areas in Bahia in the past few years implies the need for a more rigorous evaluation in order to verify whether the bacillus of the plague is still active in these areas. METHODS: In this study, the presence of infection caused by Y. pestis was analyzed by seroprevalence tests on humans, dogs and rodents and by the detection of the bacteria in rodents and fleas. A structured questionnaire was used to analyze the association between environmental, socioeconomic and biological factors and seroprevalence in humans. RESULTS: Of the 630 serum samples examined (88 from humans, 480 from dogs and 62 from rodents), all were nonreactive for plague and bacteriological analyses performed on 14 rodents and 2 flea lots showed no signs of the bacteria. CONCLUSIONS: These results cannot confirm the eradication of the disease in the entire State, since the cyclic nature of the plague indicates that it can go silent for long periods and then resurge, affecting large numbers of people. Thus, maintenance of active, permanent surveillance is required for early detection and the development of adequate control measures.

Peste, uma doença ocupacional / Plague: an occupational disease

A peste é uma zoonose causada pela bactéria Yersinia pestis, transmitida principalmente por picadas de pulgas infectadas. Distribuída mundialmente, constitui perigo potencial para as populações humanas por causa da persistência da infecção em roedores silvestres e de seu potencial epidêmico.Considerando as mudanças no perfil epidemiológico das doenças infecciosas, bem como as mudanças socioculturais, é imprescindível que os profissionais expostos ao risco de infecção adotem medidas de biossegurança para assegurar sua proteção e evitar a disseminação da doença.

Plague is a zoonosis caused by the bacterium Yersinia pestis, transmitted mainly by the bites of infected fleas. Distributed worldwide, it is a potential threat to human populations due to the persistence of the infection among wild rodents and to its high potential for epidemics. In view of the changes in the epidemiological profiles of infectious diseases and socio-cultural changes in different parts of the world, an accurate perception of the professionals at risk of contamination is essential, in order to protect themselves and to prevent the spread of the disease and subsequentmorbidity and mortality among human populations.

Avaliação dos locos CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) em estudos epidemiológicos de cepas de Yersinia pestis / Evaluation of CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) loci in epidmiologic study of strains of Yersinia pestis

Yersinia pestis é o agente causador da peste, doença primária de roedores, transmitida por pulgas infectadas, podendo infectar o homem e outros mamíferos. A maioria dos estudos de genotipagem realizada em cepas brasileiras de Y. pestis demonstrou baixo poder discriminatório, revelando padrões genotípicos semelhantes para cepas com diferentes características epidemiológicas. A análise do clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) vem sendo utilizada para genotipagem e estudos filogenéticos em diferentes gêneros bacterianos, inclusive de Y. pestis. Neste estudo foi realizada a genotipagem de cepas de Y. pestis da coleção de cultura do Serviço Nacional de Referência em Peste do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães - CPqAM/FIOCRUZ, isoladas nos três focos de peste do Estado de Pernambuco, pela análise dos locos CRISPR. Para as amplificações das 51 amostras, foram utilizados primers dirigidos às sequências CRISPR descritas na literatura (YPa, YPb e YPc). Os amplicons obtidos, após PCR, foram sequenciados, a fim de analisar a estrutura de cada loco CRISPR. Dois locos se apresentaram polimórficos: YPa, com alelos de 150pb a 570pb e YPb, com alelos de 330pb a 331pb. O loco YPc se mostrou monomórfico com alelos de 208pb. Os padrões CRISPR obtidos para cepas de Y. pestis de focos de outros países foram os mesmos observados nas cepas brasileiras. Diferentes arranjos dos espaçadores (YPa, YPb e YPc) foram observados e possibilitou que as cepas fossem agrupadas em 12 perfis genotípicos (PG1-PG12). Dois perfis foram distribuídos nos três focos estudados: PG1 perfil mais frequente (38 cepas) e PG3 (seis cepas). Os demais perfis foram específicos de uma determinada região de isolamento: PG2 para o foco de Triunfo e PG4-PG7 para o foco de Araripe. Os perfis PG8 a PG12 representaram o restante das cepas de focos de outros países. As mesmas cepas foram analisadas, anteriormente, através de onze locos VNTR (MLVA), e foram agrupadas em 35 perfis genotípicos

A menor diversidade observada no CRISPR ocorre, provavelmente, devido à região estar envolvida na codificação gênica e com maior pressão seletiva, portanto, com menor risco de sofrer mutação decorrente de estocagem. A análise dos locos CRISPR, complementar ao uso do MLVA, será útil na identificação e rastreamento de novas cepas, contribuindo para o estabelecimento de medidas de controle adequadas nas áreas de foco para prevenção da peste e na investigação de novos casos que possam surgir no Brasil

Peste neumónica primaria con transmisión intrahospitalaria en La Libertad, Perú 2010 / Primary pneumonic plague with nosocomial transmission in La libertad, Peru 2010

La peste neumónica es una forma clínica de peste, de baja frecuencia y alta letalidad, transmitida por la inhalación directa de Yersinia pestis proveniente de un animal o de persona a persona. Objetivo: Describir las características clínicas y epidemiológicas de los casos de un brote de peste neumónica primaria humana en el norte de Perú. Materiales y Métodos. Se revisaron las historias clínicas de los casos confirmados de peste neumónica primaria presentados en un brote ocurrido en la región de La Libertad, en el mes de julio de 2010, asimismo, se efectuó la búsqueda e investigación de contactos. Resultados: Se identificó el caso Índice y tres casos adicionales, de estos últimos, dos fueron infecciones intrahospitalarias relacionadas con el caso índice. La presentación clínica inicial se caracterizó por fiebre de inicio súbito, escalofríos, mialgias y dolor torácico y evolución en menos de 24 horas a hipotensión arterial y cianosis. El inicio del tratamiento específico varió de 2 a 12 días, observándose que los casos con inicio precoz de tratamiento tuvieron un mejor resultado clínico. La lealtad fue de 50 por ciento (2/4). Conclusión: Se evidenció la transmisión intrahospitalaria de peste neumónica en el Perú con manifestaciones graves y alta letalidad.

Pneumonic plague is one of the clinical forms of plague, of low frequency and high mortality, transmitted by direct inhalation of Yersinia pestis coming from an animal or from person to person. Objective. To describe the clinical and epidemiological characteristics of the cases of primary pneumonic plague in an outbreak in the north of Peru. Materials and methods. The clinical records of the confirmed cases of primary pneumonic plague presenting in an outbreak occurring in La Libertad, in July 2010, were reviewed, also the search and contact investigation was performed. Results. The index case was identified, as well as three additional cases, out of these, two were nosocomial infections related to the index case. The initial clinical presentation was characterized by sudden onset of fever, chills, myalgia and chest pain, which in less than 24 hours evolved to hypotension and cyanosis. The initiation of specific treatment varied from 2 to 12 days, and cases with prompt initiation of treatment had a better clinical outcome. The lethality was 50 percent (2/4). Conclusion. Nosocomial transmission of pneumonic plague in Peru is evidenced, with severe clinical manifestations and high lethality.

Prevalência de anticorpos contra Yersinia pestis em carnívoros domésticos nos focos pestosos, do Estado do Ceará / Prevalence of antibodies against Yersinia pestis in domestic carnivores, in plague foci in the State of Ceará

Analisou-se a prevalência de anticorpos contra Yersinia pestis em carnívoros domésticos (cães e gatos) nas áreas pestígenas do Estado do Ceará, visando estabelecer a importância do monitoramento desses animais na rotina do Programa de Controle da Peste. No decênio 1997-2006, analisaram-se 146.732 amostras de soros (95.883 cães e 50.849 gatos), das quais 2.629 (2.234 cães e 395 gatos) revelaram-se positivas. A prevalência entre os cães (85 por cento) foi superior a dos gatos (15 por cento) em todo o decênio e locais, exceto em Ibiapina, em 1998. O significado desses achados ainda não foi determinado. Os estudos sobre a zoonose no Brasil pautaram-se por paradigmas que não contemplavam todos os elementos envolvidos na zoonose, impossibilitando a devida elucidação do papel desses carnívoros. O monitoramento da atividade pestosa, realizado exclusivamente por inquéritos caninos, pode redundar no desconhecimento progressivo da situação epidemiológica da peste, caso não sejam desenvolvidas pesquisas interinstitucionais suplementares.

The prevalence of antibodies against Yersinia pestis in domestic carnivores (dogs and cats), in plague areas in the State of Ceará, was analyzed to establish the importance of monitoring these animals within the routine practice of the plague control program. Over the decade 1997-2006, 146,732 serum samples were examined (95,883 from dogs and 50,849 from cats), of which 2,629 (2,234 from dogs and 395 from cats) proved to be positive. The prevalence among dogs (85 percent) was higher than among cats (15 percent) throughout the decade and in all places, except in Ibiapina in 1998. The significance of these findings has not yet been determined. Studies on this zoonosis in Brazil have been based on paradigms that did not cover all the elements involved in the zoonosis, thus making it impossible to properly understand the role of these carnivores. Monitoring of plague foci conducted exclusively by means of dog surveys may result in progressive lack of knowledge of the epidemiological situation of plague, if supplementary inter-institutional research is not developed.

Sifonápteros de roedores no foco de peste da Chapada do Araripe, Pernambuco, Brasil, 2002-2008 / Siphonaptera in rodents in the plague focus in Chapada do Araripe, Pernambuco, Brazil: 2002-2008

Analisou-se, neste estudo, a ocorrência das espécies de sifonápteros, insetos conhecidos vulgarmente por pulgas, que parasitam roedores no foco de peste da Chapada do Araripe, localizada no sertão de Pernambuco, Brasil. A investigação teve como objetivo subsidiar as atividades de controle da peste no Brasil. No período de 2002 a 2008, coletaram-se 1.719 espécimes de pulgas de roedores em nove municípios da área de foco. Foram identificadas quatro espécies de pulga - Polygenis (Polygenis) bohlsi jordani, Polygenis (Polygenis) tripus, Xenopsylla cheopis e Ctenocephalides felis felis - que parasitavam os roedores Necromys lasiurus, Cerradomys spp, Thrichomys apereoides, Galea spixii, Rattus rattus e Mus musculus. O sifonáptero Polygenis (P.) b. jordani foi encontrado em todas as espécies de roedores, exceto em M. musculus; Polygenis (P.) tripus em N. lasirus, T. apereoides e R. rattus; X. cheopis, em R. rattus e M. musculus e, finalmente, C. felis felis, em R. rattus. Nas pulgas analisadas, não foi isolada Yersinia pestis, bacteriologicamente por cultivo e/ou técnicas moleculares. A existência de vetores competentes e de reservatórios naturais evidencia a potencialidade de transmissão da bactéria e, por conseguinte, a necessidade de manutenção e aperfeiçoamento do Sistema de Vigilância da Peste nas áreas de foco. Também justifica a estruturação de um programa de pesquisas com o objetivo de desenvolver, sistematicamente, estudos sobre as pulgas e roedores.

Epidemiologia molecular das cepas de Yersinia pestis isoladas no Nordeste do Brasil pela análise do número variável de repetições em Tandem (MLVA) / Molecular epidemiology from Yersinia pestis strains isolated in Brazil for Multiple Locus Variable Analisys (MLVA)

A Yersinia pestis é o agente etiológico da peste, uma doença primária de roedores, transmitida por pulgas infectadas e que pode infectar o homem e outros mamíferos. O objetivo do trabalho foi realizar a tipagem de 63 cepas de Y. pestis de três focos de peste do PE. As cepas foram isoladas de diferentes fontes e períodos. Das 63 cepas, 20 foram isoladas de um epizootia, em agosto de 1967, na Chapada do Araripe-PE. Também foram estudadas oito cepas de Y. pestis isoladas em outros países, cinco cepas de Y. pseudotuberculosis e nove de Y. enterocolitica. Foram utilizados onze VNTRs pela técnica do MLVA. Dos onze VNTRs para as cepas da epizootia apenas um revelou-se polimórfico apresentando diferentes alelos. Os demais VNTRs revelaram-se monomórficos. Entre os onze VNTRs analisados para as 51 cepas de Y. pestis (43 brasileiras e 8 estrageiras) dois se revelaram monomórficos gerando amplicons com 7 e 2 unidades repetitivas (UR). Os outros nove VNTRs analisados revelaram-se polimórficos gerando dois a oito alelos. As cepas de Y. pseudotuberculosis apresentaram-se polimórficas para 10 VNTRs gerando amplicons de tamanhos diversos, o VNTR ms09 foi o único monomórfico gerando um amplicon de 700 pb com 28 UR. Das nove cepas de Y. enterocolitica analisadas com os onze locos, sete apresentaram-se monomórficos com amplicons de 700, 250, 270, 690, 231 e 379 pb. Os outros quatro VNTRs analisados apresentaram um padrão de amplificação polimórfico com amplicons de tamanhos diferentes para o mesmo loco. O padrão de amplificação gerado com as cepas de Y. pestis possibilitou distribui-las em 35 perfis genotípicos. A análise das cepas pelo dendrograma permitiu agrupá-las em cinco clados, onde no clado I ficaram agrupadas a maioria das cepas brasileiras de Y. pestis, as cepas estrangeiras de Y. pestis ficaram agrupadas nos clados II e IV, enquanto que Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis ficaram nos clados III e V respectivamente. Diante dissso pode-se considerar que o MLVA mostrou-se uma ferramenta útil em estudos filogenéticos e epidemiológicos das cepas brasileiras de Y. pestis, além de estudos intraespecíficos com as espécies de Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis. As análises revelaram diversidade genética entre as cepas de Y. pestis isoladas de diferentes fontes e períodos e sua continuação poderá gerar dados importantes para estabelecer relações filogenéticas entre as cepas, contribuindo para um melhor entendimento da disseminação e transmissão do agente etiológico da peste na natureza e a dinâmica da epidemiologia no Brasil.

Tendência secular da peste no Estado do Ceará, Brasil / Secular plague trend in Ceará State, Brazil

Após a sua introdução no Ceará, Brasil, em 1900, a peste focalizou-se em sete complexos ecológicos: Chapada do Araripe e Serras da Ibiapaba, do Baturité, do Machado, das Matas, da Pedra Branca e de Uruburetama. As atividades de vigilância nesses focos no período de 1935/2004 foram desenvolvidas sucessivamente pelo Departamento Nacional de Saúde, Serviço Nacional de Peste, Departamento Nacional de Endemias Rurais, Superintendência de Campanhas de Saúde Pública, Fundação Nacional de Saúde e finalmente pela Secretaria de Vigilância em Saúde. A análise dos dados levantados sobre a ocorrência de casos humanos nesses 70 anos permite identificar diferentes padrões de circulação da enfermidade na população humana, caracterizados pela alternância de momentos de elevadas incidências e de silêncio, possibilitando estabelecer uma periodização cronológica com características epidemiológicas próprias. Conclui-se desses resultados que a peste ainda deve ser considerada uma ameaça potencial, o que justifica revitalizar as ações de vigilância epidemiológica, o que só ocorrerá com o fortalecimento de todas as instâncias do Sistema Unico de Saúde.

After its introduction into the State of Ceará, Brazil, in 1900, the plague was established in seven ecological complexes: Chapada do Araripe and the Ibiapaba, Baturité, Machado, Matas, Pedra Branca, and Uruburetama mountains. These natural foci were monitored successively from 1935 to 2004 by the National Health Department, National Plague Service, National Department of Rural Endemics, Superintendency of Public Health Campaigns, National Health Foundation, and finally by the National Health Surveillance Secretariat. Data analysis on human cases during these 70 years allowing identifying different plague circulation patterns in the human population, alternating high incidence with silent periods and characterizing a chronological periodicity with unique epidemiological characteristics, besides concluding that plague should still be considered a potential threat, thus justifying the revitalization of surveillance measures by strengthening all levels in the Unified National Health System.

Contribuição para o diagnóstico de peste / Contribution towards plague diagnosis

Apesar de sua fundamentação clínico-epidemiológica, numerosos casos suspeitos de peste nos focos brasileiros têm sido descartados por serem negativos pelo teste de hemaglutinação para detecção de anticorpos contra o antígeno F1 da Yersinia pestis. A transcendência da peste justifica estudar se tais resultados decorrem da falta de resposta ao F1, e se outras proteínas da Yersinia pestis poderiam ser reconhecidas nos soros suspeitos, sendo desta forma candidatas como alvo diagnóstico alternativo ao F1. Assim sendo, cepas de Yersinia pestis e de Yersinia pseudotuberculosis, uma proteína YopH recombinante e a F1 foram utilizadas para analisar soros de pacientes e soros imunes de coelhos. A F1 e a YopH não foram reconhecidas pelos soros humanos HA- e nenhuma proteína majoritária, comum a todos os soros humanos e coelhos, foi identificada, o que permite concluir que os casos suspeitos devem ser submetidos a uma avaliação clínico-laboratorial mais rigorosa, aprofundando a investigação epidemiológica em busca de outras etiologias.

Despite the clinical-epidemiological features of plague, numerous suspected cases in Brazilian outbreaks have been discarded because of negative results from the hemagglutination test for antibodies against the Yersinia pestis F1 antigen. The transcendence of plague justifies studying whether such results are due to unresponsiveness to F1, and whether other Y. pestis proteins might be recognized in suspect serum. These would therefore be candidates to be alternative diagnostic targets to the F1 antigen. Thus, strains of Y. pestis and Y. pseudotuberculosis, a recombinant YopH protein and the F1 antigen were used to analyze serum from patients and immune serum from rabbits. F1 and YopH were not recognized by HA-negative human serum and no major protein common to all the human and rabbit serum samples was identified. This allows the conclusion that suspected cases must be subjected to more rigorous clinical-laboratory evaluation, with strengthening of epidemiological investigations in the search of other etiologies.

Análise do contexto, estrutura e processos que caracterizaram o Plano Piloto de Peste em Exu e sua contribuição ao controle da peste no Brasil / Analysis of the context, structure and processes that characterized the Pilot Plan of Plague in Exu and its contribution to the control of plague in Brazil

A exacerbação da atividade pestosa no início dos anos 1960 e o desconhecimento de aspectos da epidemiologia levaram o Governo Brasileiro, através do Departamento Nacional de Endemias Rurais (DNERu), a convidar Marcel Baltazard, do Instituto Pasteur de Paris, para elaborar um projeto de pesquisa visando a elucidação da conservação, focalização, epizootização e epidemização da peste no Brasil, com vistas à implementação de atividades eficazes de controle. O projeto, denominado Plano Piloto de Peste em Exu, foi executado na Chapada do Araripe-PE de 1966 a 1974. Apesar de toda a sorte de óbices, dificultando o desempenho da equipe, composta basicamente por dois técnicos brasileiros, auxiliares semi-analfabetos e consultores dos Institutos Pasteur de Teerã e de Paris, foi desenvolvido um amplo programa de pesquisas elucidando a maioria das questões propostas. A compilação das atividades jamais foi publicada, mas registros isolados permitem listar os principais resultados obtidos: a) a comprovação da infecção natural de roedores silvestres e de outros pequenos mamíferos e suas pulgas; b) o papel do Bolomys lasiurus (Zygodontomys lasiurus pixuna) na epizootização; c) a capacidade vetora da Polygenis bolhsi jordani e o seu papel na transmissão da infecção ao homem, com um desempenho superior aos de Xenopsylla cheopis e Pulex irritans; d) a participação da P. irritans na epidemização; e) a sensibilidade dos sigmodontinos e equimídeos e a relativa resistência do Ratus rattus; f) a resistência dos cavídeos, decorrente da sua asparaginasemia; g) a resistência da X. cheopis e P. irritans aos inseticidas organoclorados; h) o descarte das pestes endógena e crônica como mecanismos responsáveis pela conservação; i) a redução dos prazos para confirmação diagnóstica; j) o isolamento de 719 cepas, que deram origem à maior coleção brasileira de culturas de Yersinia pestis; k) a definição de um programa de controle baseado na vigilância contínua e sistemática, privilegiando a participação comunitária e contemplando a pesquisa da Y. pestis nos roedores e suas pulgas e pesquisa de anticorpos contra o antígeno F1 em animais-sentinela, o que ensejou a estruturação de uma rede nacional de laboratórios, bem como a intervenção imediata nas ocorrências, com diagnóstico precoce, pronto tratamento, quimioprofilaxia e despulização.

The pgm locus and pigmentation phenotype in Yersinia pestis

The pigmentation (pgm) locus is a large unstable area of the Yersinia pestis chromosome composed of a segment of iron acquisition (HPI) linked to a pigmentation segment. In this work we examined the mobility of HPI and the pigmentation segment in three Y. pestis isolates using successive subcultures on Congo red agar (CRA) plates. Strain P. CE 882 was shown to be highly stable while strains P. Exu 340 and P. Peru 375 dissociated into several phenotypes, PCR analysis showing evidence of changes in the pgm locus of the derived cultures. Strains P. Exu 340 and P. Peru 375 produced previously unreported cultures positive for the pesticin/yersiniabactin outer membrane receptor (psn+) but negative for the iron-regulated protein (irp2-), suggesting the occurrence of rearrangements in this chromosomal region and either a sequential loss or the loss of separated segments. These results provide evidence that besides deletion en bloc, specific rearrangements are also involved in the deletion events for that locus.