Virus orf en humanos, confirmación molecular de un caso clínico en Chile / Orf virus in human, confirmation in case report from Chile

Resumen La infección por el virus orf, también conocida como ectima contagioso, es reconocida una zoonosis ocupacional. Se diagnostica por lesiones cutáneas que evolu cionan rápidamente desde máculas a pápulas, vesículas y pústulas. Se presenta el caso clínico de una estudiante de medicina veterinaria que había tenido contacto con caprinos, clínicamente sanos y sin lesiones aparentes, hacía 19 días. Presentó dos lesiones vesiculares que coalescieron hasta formar una lesión de mayor tamaño rodeada por un halo eritematoso. Las lesiones fueron compatibles con la presentación clásica de las producidas por el virus orf en humanos. Se confirmó la presencia del virus orf mediante una RPC anidada del tejido de biopsia. Es uno de los primeros casos confirmados mediante técnicas moleculares en seres humanos en Chile.

Infection with the orf virus, also known as contagious ecthyma, is recognized as an occupational zoonosis worldwide. It is diagnosed by cutaneous lesions that progress rapidly from macules to papules, vesicles and pustules. The clinical case of a student of veterinary medicine who had had contact with goats, clinically healthy and without apparent lesions, which occured 19 days ago, is reported. She presented two vesicular lesions that coalesced to form a larger lesion surrounded by an erythematous halo. The lesions were compatible with the classical presentation of those produced by the orf virus in humans. The presence of the orf virus was confirmed by a nested PCR from biopsy tissue. It is one of the first cases confirmed by molecular techniques in humans in Chile.

Associação da ocorrência do ectima contagioso (ORF vírus) em ovinos com os cuidadores desses animais / Occurrence of the Association contagious ecthyma (ORF virus) in sheep with these animals' caregivers

A enfermidade ectima contagioso está difundida em todo o estado de São Paulo. Foram amostrados 42 (8,64%) cuidadores de animais e 444 (91,36%) ovinos (n=486). A prevalência de reagentes para vírus-neutralização foi de 67% (IC95%=62-71%) nos ovinos, e em seus cuidadores de 76% (IC95%=63-89%), sendo P=0,22, ou seja, não houve diferença estatística significativa entre as espécies. A distribuição dos títulos teve diferença estatística significativa entre as espécies, com P=0,0048. As variações de titulação foram de 0,6 a 2,1 tanto nos ovinos quanto nos seus cuidadores. Dentre os 42 cuidadores de ovinos participantes do estudo, 32 apresentaram títulos de anticorpos expressos por log10 acima de 0,6.(AU)

These diseases are all widespread in the State of São Paulo. 42 (8.64%) animal caregivers and 444 (91.36%) sheep (n=486) were sampled. The reagents Prevalence paragraph virus neutralization was 67% (95% CI = 62-71%) in sheep and 76% (95% CI = 63-89%) for caregivers, with P=0.22 not being a statistically significant difference between the species. One of the distribution titles had significant difference between statistics as species with P=0.0048. The titration variations were 0.6 to 2.1, both in sheep and their caregivers. Among the 42 sheep caregivers participating in the study, 32 had antibody securities denominated in log10 above 0.6.(AU)

Primeiro relato do vírus Orf em rebanhos caprinos do semiárido brasileiro / First report on the Orf virus infection in goat herds from Brazilian semiarid region

O Ectima contagioso, popularmente conhecido como Boqueira, é uma doença causada pelo vírus Orf, que induz lesões pustulares agudas na pele de ovinos e caprinos. No presente trabalho, é relatada pela primeira vez a identificação e confirmação laboratorial do vírus Orf em rebanhos caprinos da Bahia. A Agência Estadual de Defesa Agropecuária da Bahia (ADAB) relatou a ocorrência de focos de uma doença epitelial nos caprinos das raças Canindé e Alpina Britânica nas localidades de Barreira e Pedra Alta, no município de Araci. Foram coletadas as amostras das lesões de crostas labiais do rebanho da localidade de Barreira e das crostas dos tetos do rebanho de Pedra Alta. Os materiais coletados foram submetidos à extração de DNA e posterior reação em cadeia da polimerase (PCR), para amplificação dos genes do vírus Orf: ORFV011 (B2L, 1022 pares de bases [pb]) e ORFV 059 (F1L, 1062 pb). Todas as amostras foram positivas na reação de PCR, confirmando-se a presença do vírus Orf nas lesões observadas nos rebanhos caprinos das comunidades de Barreira e Pedra Alta.

Vacina experimental produzida em cultivo celular confere proteção parcial contra o ectima contagioso em ovinos / Experimental vaccine produced in tissue culture confers partial protection against contagious ecthyma in sheep

O ectima contagioso (também conhecido como orf), é uma doença debilitante de ovinos e caprinos causada pelo vírus do orf (ORFV). A vacinação tem sido usada com relativo sucesso no controle da doença. No entanto, as vacinas atuais contêm amostras virulentas do agente, são produzidas por escarificação cutânea de animais, e apresentam eficácia questionável. Assim, o presente trabalho teve como objetivo produzir e testar a eficácia de uma vacina experimental produzida em cultivo celular. A cepa IA-82 do ORFV foi submetida a 21 passagens em cultivo de células BHK-21 e usada para vacinar ovinos jovens (n=30), por escarificação cutânea na face interna da coxa. A vacinação produziu pústulas e crostas em 16 dos 30 ovinos vacinados, indicando imunização adequada. Noventa dias após a vacinação, ovinos vacinados (n=16) e controles (n=16) foram inoculados com uma cepa virulenta do ORFV (10(6,9)DICC50/mL) após escarificação na comissura labial. Todos os animais desenvolveram lesões típicas de ectima, incluindo hiperemia, vesículas, pústulas e crostas. No entanto, os animais vacinados desenvolveram lesões mais leves e passageiras do que os controles, e os escores clínicos foram estatisticamente diferentes (p<0,05) entre os dias 10 e 22 pós-desafio. Além disso, o tempo de duração da doença foi significativamente inferior (p<0,05) nos animais vacinados. Os animais vacinados também excretaram menor quantidade de vírus (p<0,05) e por um período significativamente mais curto do que os controles (13 dias versus 22 dias, p<0,001). Esses resultados demonstram a proteção parcial conferida pela vacina experimental e, dependendo da melhoria dos índices de imunização e proteção, são promissores no sentido da utilização de vacinas contra o ORFV produzidas em cultivo celular.

Contagious ecthyma, also known as orf, is a debilitating disease of sheep and goats caused by the parapoxvirus, orf virus (ORFV). Vaccination has been used with relative success to reduce the losses caused by the disease, yet the current vaccines contain virulent virus, are empirically produced through skin scarification of live lambs, and present questionable efficacy. Therefore, the present study aimed at developing and testing an experimental ORFV vaccine produced in tissue culture. The ORFV strain IA-82 was submitted to 21 passages in BHK-21 cells and then used to immunize lam bs (n=30) through skin scarification of the internal face of the hind limb. Vaccination produced localized pustules and scabs lesions in 16 out of 30 animals, indicating an adequate replication of the vaccine virus. Ninety days after vaccination, vaccinated (n=16) and control lambs (n=16) were inoculated with a virulent ORFV strain (10(6,9)TCID50/ml) in the labial commissure. Vaccinated and control lambs developed typical orf lesions, characterized by hyperemia, vesicles, pustules and scab formation. Nonetheless, vaccinated animals developed milder lesions compared to controls and the clinical scores were significantly lower (p<0.05) between days 10 and 22 post-challenge. In addition, the mean duration of clinical disease was significantly reduced in vaccinated animals (p<0.05). Furthermore, vaccinated animals excreted much less virus (p<0.05) and for a significantly shorter period of time than did the controls (13 days versus 22 days, p<0.001). These results demonstrate partial protection by the experimental vaccine and, upon improvement of immunization and protection indices, are promising towards the use of tissue culture-based ORFV vaccines.

Infecciones virales en piel y mucosas / Cutaneous viral diseases

Diversos virus pueden infectar la piel y las mucosas de los seres humanos, manifestándose en diferentes patologías, de acuerdo a la edad, género y estado inmunológico. Un grupo importante de éstos tiene capacidad de replicar en células epiteliales, originando cuadros clínicos en los cuales se evidencia la destrucción celular o bien la hiperplasia del tejido infectado. Gran parte de estos virus persisten en células infectadas por años y tienen la capacidad de reactivarse y de manifestar nuevamente enfermedades cutáneas o mucosas. En algunos casos, ésta sólo se expresa de manera subclínica en una excreción del virus por secreciones que son fuente de infección. En los últimos años, los avances en técnicas moleculares han permitido contar con metodologías diagnósticas cada vez más sensibles, específicas y rápidas. Así como también el progreso en el área de vacunas y antivirales nos entrega mayores herramientas profilácticas y terapéuticas.

Various viruses can infect the skin and the mucous membranes of human beings, manifesting itself in different diseases, according to age, gender and immune status. An important group has the ability to replicate in epithelial cells, causing clinical manifestations which evidenced the cell destruction either infected tissue hyperplasia. Much of these viruses persist in cells infected by years and have the ability to reactivate and again express cutaneous or mucosal diseases. In some cases, it is only asymptomatically shred in secretions that are a source of infection. In recent years, advances in molecular techniques have allowed to have increasingly sensitive, specific and rapid diagnostic methodologies. As well as, the progress in the area of vaccines and antivirals also gives us greater prophylactic and therapeutic tools.

Estandarización de una técnica molecular para el diagnóstico de virus orf útil en la ganadería ovina / Standardization of a molecular technique for the diagnosis of orf virus, useful in sheep raising

Orf o Ectima contagioso, enfermedad producida por virus DNA perteneciente a la familia poxviridae género parapoxvirus; se caracteriza por producir enfermedad vesicular en ganado, principalmente en rumiante menores. Personas que tengan contacto con animales u objetos contaminados con el virus pueden desarrollar la enfermedad, la cual es catalogada como la zoonosis de mayor diagnóstico en países donde la industria ovina se desarrolla a gran escala. Las lesiones más comunes se ubican en la zona bucal y ventanas nasales de animales y en dedos y manos en ser humano. En Chile existe la enfermedad y se han reportado casos en personas relacionadas a la industria ovina. No existe en el país método de diagnóstico, por lo cual se estandarizó una prueba de diagnóstico molecular (PCR) a partir de un oligonucleótido sintetizado y posteriormente se reprodujo la técnica a partir de un especimen biológico clínicamente positivo.

Orf or contagious Ectima, a disease produced by virus DNA belonging to the family poxviridae genus parapoxvirus is characterized by generating vesicular disease in cattle, specially in minor ruminants. Persons having contact with virus contaminated animals or objects might develop the disease, which is classified as the most frequently diagnosed zoonosis in countries where the sheep industry is developed on large scale. Most common lesions are located in the mouth zone and nasal windows of animals and in fingers and hands in the human being. The disease is present in Chile and cases related to persons working in the sheep industry have been reported. There is not a diagnosis method in the country, for which reason a molecular diagnosis test (PCR) was standardized from a synthesized oligonucleotid and subsequently the technique was reproduced from a clinically positive biological specimen.

Ectima contagioso em ovinos e caprinos no semi-árido da Paraíba / Contagious echtyma in sheep and goats in the semiarid of Paraíba, Brazil

Descrevem-se dez surtos de ectima contagioso em caprinos e dois em ovinos no semi-árido da Paraíba. Os animais jovens foram os mais afetados, mas em oito surtos animais adultos também foram afetados, principalmente cabras lactantes que apresentavam lesões no úbere. Em nenhum dos rebanhos afetados havia antecedentes de vacinação contra ectima contagioso. Histologicamente a epiderme apresentava acantose com hiperplasia pseudoepiteliomatosa e com múltiplos focos de degeneração hidrópica formando vesículas ou pústulas. Inclusões intracitoplasmáticas eosinofílicas foram observadas em queratinócitos. Havia restos celulares necróticos formando crostas, hiperqueratose e microabscessos intracorneais ou extensas áreas ulceradas. Na derme observou-se infiltrado inflamatório mononuclear difuso. Também foi registrado um caso humano em um pesquisador que tinha administrado planta por via oral a um caprino que, posteriormente, apresentou lesões de ectima contagioso. Neste caso, também foram observadas lesões características em uma biopsia e o vírus foi identificado por microscopia eletrônica. Conclui-se que a doença é endêmica no semi-árido e que é necessária a vacinação sistemática dos rebanhos para diminuir os prejuízos econômicos causados pela mesma. A utilização de luvas para o manuseio de animais afetados é necessária para evitar casos humanos da enfermidade.

Ten outbreaks of contagious ecthyma in goats and two in sheep in the semiarid of Paraíba State are reported. Young animals were more frequently affected, but in 8 outbreaks adult animals were also affected, mainly lactating goats which developed udder lesions. None of the affected flocks had been vaccinated. Upon histologic examination the epidermis showed acanthosis with pseudoepitheliomatous hyperplasia and multifocal ballooning degeneration forming vesicles or pustules. Eosinophilic inclusion bodies were observed in keratinocytes. Crust of necrotic cells, hyperkeratosis, and intracorneal microabscesses or large ulcerated areas were also observed. Severe diffuse infiltration by mononuclear cells was observed in the dermis. A human case was observed in an investigator that was feeding a goat that later appeared with lesions of the disease. In this case, the virus was identified by electron microscopy of a skin biopsy. These results show that contagious ecthyma is endemic in Northeastern Brazil and therefore systematic vaccination of the flocks is necessary to control the disease. The use of gloves to handle affected animals is advisable to minimize the risk of human exposure.

Ectima contagioso: una enfermedad ocupacional en la industria ovina / Contagious ecthyma: an occupational disease in the sheep industry

Ectima contagioso, enfermedad producida por virus perteneciente a la familia poxviridae; se caracteriza por producir enfermedad vesicular en ganado, principalmente en rumiante menores. Personas que tengan contacto con animales u objetos contaminados con el virus pueden desarrollar la enfermedad, la cual es catalogada como la zoonosis de mayor diagnóstico en países donde la industria ovina se desarrolla a gran escala. Chile apunta al bicentenario triplicando la masa ovina existente en el país, por lo mismo, es necesario tomar en cuenta esta enfermedad que podría constituirse como problema en la producción ovina y en la salud ocupacional. Se analiza la posibilidad de realizar algunas pruebas de laboratorio para el diagnóstico precoz de la enfermedad y así estar preparados para los nuevos escenarios que se presenten.

Contagious ecthyma, a disease produced by a virus of the poxviridae family, characterized by producing vesicular disease in cattle, specially in small ruminants. People having contact with animals or objects contaminated with the virus may develop the disease, whichis classified as the principal diagnosed zoonosis, in countries where the sheep industry is developed in large scale. Chile aims at tripling the sheep mass existing in the country for the bicentennial. For this reason it is necessary to take into account that this disease might become a problem in sheep production and occupational health. The possibility of making some laboratory tests for the early diagnosis of the disease is discussed and thus be prepared to meet the new scenarios that might be encountered.

Diseases caused by poxvirus - orf and milker's nodules - a review

Sheep and cattle parapoxviruses cause in human beings diseases of very similar aspect, named orf and milker's nodules, respectively. These infections are generically called farmyard pox. In the present article, we show the epidemiological, clinical, and histopathological aspects, as well as the treatment of these two viral diseases that are very similar, being differentiated only by their epidemiological aspects

Caracterización antigénica de cepas del virus del ectima contagioso (orf), sus interacciones y sus relaciones con parapoxvirus bovinos de México / Antigenic characterization of contagious ecthyma virus (orf) in Mexico, their relationships and interactions with bovine parapoxvirus samples

Treinta y tres muestras de costra positivas a ectima contagioso (orf) (19 de caprino y 14 ovinas) y dos de parapoxvirus bovinos (una de estomatitis papular y otra de seudoviruela) fueron analizadas antigénicamente y comparadas por doble inmunodifusión (DD) y contrainmunoelectroforesis (CIE). Las muestras bovinas fueron obtenidas de animales que convivían con rebaños de borregos y cabras. La presencia de partículas virales fue confirmada por microscopía electrónica en todos los casos. Las pruebas fueron corridas usando un suero policlonal antiectima preparado en conejo. En la prueba de DD la muestra homóloga produjo tres líneas de precipitación, las otras muestras variaron entre dos y una líneas de precipitación y algunas muestras no formaron ninguna, se observaron diferentes resultados con las pruebas de DD y CIE. Las cepas bovinas formaron dos líneas de precipitación, una de identidad entre ellas y otra en identidad con la muestra homóloga de orf caprino y con una de orf ovino, por DD. La composición de 15 muestras de orf (6 ovinas y 9 caprinas) y dos bovinas fueron examinadas por electroforesis, y 7 de ellas evaluadas antigénicamente por inmunotransferencia, usando el suero policlonal de conejo. La muestra homóloga fue más compleja, pues mostró 12 proteínas. La mayor variación en los corrimientos electroforéticos de las muestras se observó entre las proteínas de los pesos de 37 kd a 44 kd. Una proteína de 55 kd se identificó en todas las muestras, mientras que una de 9.5 kd se evidenció en 13 muestras y otra de 17 kd en 12, incluyendo las bovinas. Por inmunotransferencia fueron reconocidas dos proteínas comunes en las siete muestras analizadas con pesos de 55 y 54 kd, otras dos proteínas de 45 y 35 kd fueron reconocidas por el suero de conejo en cinco de las muestras. Estas proteínas pueden explicar las reacciones cruzadas observadas entre las muestras, en las pruebas de DD y CIE y ser de importancia en el reconocimiento inmune de estos virus.

Lesiones por parapoxvirus en veterinarios de México / Parapoxvirus infection in veterinary practitioners of México

Se describen tres casos de lesiones en las manos médicos de veterinarios, producidas por parapoxvirus. En dos de los casos, las lesiones pudieron atribuirse al virus del ectima contagioso, tomando en cuenta la historia clínica. En todos los casos el diagnóstico se confirmó mediante la observación por microscopía electrónica de las partículas virales características (Tipo 2 o C)

ORF: Un Brote en Cabras Importadas / ORF: An Outbreak Among Imported Goats

Se describe un brote de orf en 94 cabras importads de EUA, destinadas a Lebrija y Floridablanca (Santander). Enfermaron 38 animales. No se presentaron complicaciones ni mortalidad. El diagnostico clinico se confirmo por la histopatologia, cultivo del virus en huevos embrionados y microscopia electronica con tincion negativa del macerado de las costras. No se comprobaron casos de infeccion humana. Dos de seis vacas ordenadas por un empleado a cargo de las cabras, presentaron papulas en la ubre pero no se realizaron en ellas ni en el trabajador, estudios virologicos. Se revisaron las caracteristicas de esta zoonosis que dentro de la poblacion animal tiene una distribucion amplia en Colombia, asi como sus implicaciones en la medicina humana y veterinaria. Se enfatiza sobre la necesidad de comprobar el diagnostico clinico por metodos virologicos y de microscopia electronica