Osteomielitis por Klebsiella pneumoniae BLEE. Reporte de un caso y revisión de la literatura. / OSTEOMYELITIS DUE TO KLEBSIELLA PNEUMONIAE ESBL. REPORT OF A CASE AND LITERATURE REVIEW

Las betalactamasas de espectro extendido (BLEE) son enzimas producidas por bacilos gram negativos capaces de hidrolizar las cefalosporinas de amplio espectro y los monobactámicos. La mayoría pertenece a la familia de Enterobacteriae, tales como Klebsiella pneumoniae y Escherichia coli: Sin embargo, se asocian también con otras bacterias como Proteus, Serratia, Salmonella, Pseudomonas aeruginosa y Acinetobacter. Las enterobacterias productoras de carbapenemasas no sólo han sido aisladas en el ambiente hospitalario, sino que también provienen de la comunidad. Se presenta una paciente de sexo femenino con antecedentes de sida y osteomielitis secundaria a artritis séptica producida por una Klebsiella pneumoniae BLEE de la comunidad. Un tratamiento oportuno y eficaz puede evitar la opción quirúrgica, disminuyendo la morbimortalidad asociada con esta afección

Extended-spectrum beta-lactamases (ESBL) are enzymes produced by gram-negative rods capable of hydrolyzing broad-spectrum cephalosporins and monobactams. Most belong to the Enterobacteriae family, such as Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. However, they are also associated with other bacteria such as Proteus, Serratia, Salmonella, Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter. Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae have not only been isolated from the hospital environment, but also from the community. We present a female patient with a history of AIDS and secondary osteomyelitis to septic arthritis caused by a community Klebsiella pneumoniae ESBL. It is concluded that a timely and effective treatment can avoids the surgical option, reducing the morbidity and mortality of this condition.

A case of late-onset Klebsiella oxytoca keratitis treated with topical imipenem after deep anterior lamellar keratoplasty / Caso de ceratite de início tardio por Klebsiella oxytoca tratado com imipenem tópico após ceratoplastia lamelar anterior profunda

ABSTRACT The aim of this study was to discuss a case of late-onset Klebsiella oxytoca keratitis after deep anterior lamellar keratoplasty and its treatment. A 21-year-old female patient presented with redness and effluence in the left eye at 5 months after uncomplicated deep anterior lamellar keratoplasty surgery. In the examination, a single suture was loosened in the superior nasal region and there was an infiltration area and epithelial defect in the graft and recipient bed junction in the area of the loose suture. Topical fortified vancomycin and fortified ceftazidime treatment was started empirically hourly, but there was insufficient response. After K. Oxytoca growth in a swab and suture culture taken from the patient, fortified vancomycin was replaced with fortified imipenem. It was observed that the infiltration area rapidly regressed and the epithelial defect was closed after fortified imipenem treatment. Fortified imipenem may be considered as an alternative treatment, especially in cases in which there is no response to treatment and culture growth is detected.(AU)

RESUMO O objetivo deste estudo é discutir um caso de ceratite tardia por Klebsiella oxytoca, após ceratoplastia lamelar anterior profunda, bem como seu tratamento. Uma paciente de 21 anos apresentou vermelhidão e efluxo no olho esquerdo 5 meses após cirurgia de ceratoplastia lamelar anterior profunda sem complicações. Ao exame, havia uma única sutura solta na região nasal superior e uma área de infiltração com defeito epitelial no enxerto e na junção com o leito receptor na área da sutura solta. Iniciou-se empiricamente um tratamento tópico com vancomicina e ceftazidima fortificada de hora em hora, porém com resposta insuficiente. Após o crescimento de K. oxytoca a partir de cultura de swab e sutura retirados da paciente, a vancomicina fortificada foi substituída por imipenem fortificado. Observou-se que a área de infiltração regrediu rapidamente e que o defeito epitelial foi fechado com o tratamento com imipenem fortificado. O imipenem fortificado pode ser considerado um tratamento alternativo, especialmente nos casos sem resposta ao tratamento e detecção de crescimento na cultura.(AU)

Pioderma gangrenoso ampollar como forma de presentación de leucemia mieloide agudo: informe de un caso / Acute myeloid leukemia presented in the form of bullous pyoderma gangrenosum: a case report

El pioderma gangrenoso ampollar es una variedad infrecuente de pioderma gangrenoso, que se asocia en el 50-70% de los casos con trastornos oncohematológicos. Se comunica el caso de una paciente de 59 años, que consultó por fiebre y ampollas purpúricas de rápida progresión, con compromiso cutáneo mucoso. Con sospecha de una enfermedad neutrofílica, ampollar, o infección por gérmenes oportunistas, se realizó biopsia de piel para estudio histopatológico, inmunofluorescencia directa y cultivo. Los cultivos y la inmunofluorescencia directa fueron negativos, y la anatomía patológica reveló un denso infiltrado inflamatorio con predominio neutrofílico en dermis. Ante el diagnóstico de pioderma gangrenoso ampollar, se realizó una punción-aspiración de médula ósea cuyo resultado fue compatible con leucemia mieloide aguda. Se instauró tratamiento con corticosteroides sistémicos, a pesar de lo cual la paciente evolucionó desfavorablemente y falleció a los 15 días de su ingreso hospitalario. Este caso ilustra la asociación de esta enfermedad cutánea con trastornos oncohematológicos y el mal pronóstico que esto implica a corto plazo. (AU)

Bullous pyoderma gangrenosum is an infrequent type of pyoderma gangrenosum, associated with onco hematological diseases in 50-70% of cases. We present the case of a 59-year-old patient with fever and mucocutaneous hemorrhagic bullous of rapid progression. A biopsy for histopathology, direct immunofluorescence (DIF) and skin culture was made, considering the possibility of neutrophilic dermatoses, bullous dermatosis or an opportunistic infection. The results of both the culture and the DIF were negative. The histopathological examination of the specimen revealed a dense dermal polymorphic infiltrate composed primarily of neutrophils. Considering bullous pyoderma gangrenosum as a potential diagnosis, a bone-marrow biopsy was performed. This study revealed an acute myeloid leukemia. Although systemic corticosteroid therapy was begun, the patient presented an unfavorable evolution that led to her death 15 days after her admission at the hospital. This case shows the association between bullous pyoderma gangrenosum and onco hematological diseases. In addition, it highlights the poor prognosis related to these diseases in the short term. (AU)

Resistência aos antimicrobianos e diversidade genética de variantes fenotípicas de Pseudomonas aeruginosa não sensíveis aos carbapenêmicos recuperadas de pacientes com fibrose cística com infecção pulmonar crônica: uma análise temporal / Antimicrobial resistance and genetic diversity of phenotypic variants of carbapenem non susceptible Pseudomonas aeruginosa recovered from patients with cystic fibrosis with chronic lung infection: a temporal analysis

Pseudomonas aeruginosa, bactéria ubíqua e versátil, pode se comportar como um patógeno oportunista, com ampla capacidade adaptativa, por múltiplos fatores de virulência e resistência. Como agente patogênico nas infecções pulmonares em pacientes com fibrose cística (FC), é motivo de prognóstico ruim, aumento de hospitalizações e altas taxas de morbimortalidade, sendo quase impossível a sua erradicação, ao evoluírem para a cronicidade. Globalmente, é notável o aumento nos índices de amostras não sensíveis aos carbapenêmicos e a múltiplos antimicrobianos, essenciais à terapêutica. Assim, avaliamos temporalmente a susceptibilidade aos antimicrobianos e a presença de amostras hipermutáveis (HPM) em P. aeruginosa de diferentes morfotipos, não sensíveis aos carbapenêmicos (PANSC), obtidas de pacientes FC com infecção pulmonar crônica, acompanhados em dois centros de referência no Rio de Janeiro. De 2007 a 2016, a análise retrospectiva, através dos resultados obtidos no teste de disco-difusão (TDD), permitiu selecionar amostras de PANSC incluídas neste trabalho. Usando os resultados obtidos no TDD, foi definida a susceptibilidade a outros antimicrobianos, bem como os fenótipos de resistência, multi-(MDR), extensivo-(XDR) e pandroga resistentes (PDR). Adicionalmente, determinou-se a concentração inibitória mínima (CIM) para imipenem (IPM), meropenem (MEM), doripenem (DOR) e polimixina (POL). Através de teste fenotípico, foi calculada a frequência de mutação espontânea e as amostras hipermutáveis foram caracterizadas. O sequenciamento de genoma total (SGT) foi realizado em seis amostras de diferentes morfotipos, incluindo uma variante fenotípica rara, a small colony variant (SCV). Essas amostras foram recuperadas em dois episódios de exacerbação do paciente. Foram investigadas a clonalidade, resistência a antimicrobianos e virulência. Das 143 amostras, de 18 pacientes (9 pediátricos e 9 adultos), os resultados do TDD apontaram taxas de não susceptibilidade superiores a 44% para gentamicina, amicacina, tobramicina e ciprofloxacina, e maiores de 30 % para POL. Pela determinação da CIM, quase a totalidade (96%) das amostras foram não sensíveis a IMP, seguidos de 56% para MEM e 44% para DOR. Analisando-se a distribuição dos valores da CIM50 e CIM90 nos dois grupos de pacientes, os valores para IMP foram maiores entre as amostras dos pacientes pediátricos, equivalendo a 32 µg/mL e 64 µg/mL, respectivamente. Cerca de 25%, 37% e 6% eram MDR, XDR e PDR, respectivamente. Aproximadamente 12% eram HPM, e mais da metade destas foram XDR. Após o SGT, as seis amostras, recuperadas do caso clínico foram classificadas em um novo sequence type (ST2744), com a presença de genes de resistência adquiridos blaPAO, blaOXA-50, aph(3')-Iib, fosA, catB7 e crpP, apresentando mutações em genes codificadores de porinas e bombas de efluxo. Entretanto, não foram observados marcadores genéticos clássicos exclusivos para os fenótipos SCV e HPM. Este é o primeiro relato de P. aeruginosa SCV na FC, no Brasil. A vigilância epidemiológica de P. aeruginosa é crucial para a conduta terapêutica, bem como para o sucesso da resposta do paciente e erradicação da infecção pulmonar, justificando o uso de técnicas fenotípicas e moleculares na detecção dos mecanismos de resistência e virulência desse microrganismo na FC.

Pseudomonas aeruginosa, a ubiquitous and versatile bacterium, can behave as an opportunistic pathogen, with strong adaptive capacity, due to multiple virulence and resistance factors. As a pulmonary infection pathogen in patients with cystic fibrosis (CF), it is related with poor prognosis, increased hospitalizations and high rates of morbidity and mortality, and the eradication is almost impossible, especially after chronicity. The increase rates of isolates non-susceptible to carbapenem and multiple antimicrobials, essentials to therapy, have been observed worldwide. Therefore, we assessed the antimicrobial susceptibility and the presence of hypermutability (HPM) in non-susceptible to carbapenem P. aeruginosa (PANSC) isolates from different morphotypes, obtained from CF patients with chronic pulmonary infection, followed at two reference centers in Rio de Janeiro. Using the results obtained by disk-diffusion test (DDT) between 2007 to 2016, we select 143 PANSC and susceptibility to other antimicrobials was defined, as well as the resistance phenotypes, multi- (MDR), extensive- (XDR) and pandrug resistant (PDR). Additionally, the minimum inhibitory concentration (MIC) for imipenem (IPM), meropenem (MEM), doripenem (DOR) and polymyxin (POL) was determined. Hypermutable isolates were characterized by determination of mutation frequency. Whole genome sequencing (WGS) was performed in six morphotypes isolates, including the small colony variant (SCV), a rare variant phenotype. These isolates were recovered in two exacerbation episodes. Clonality, antimicrobial resistance and virulence were investigated. Of the total (143 isolates) isolated from 18 patients (9 pediatric and 9 adults), non-susceptibility rates above than 44% for gentamicin, amikacin, tobramycin and ciprofloxacin, and more than 30% for POL were observed. Almost all (96%) of the isolates were non-susceptible to IPM by MIC determination, followed by 56% for MEM and 44% for DOR. MIC50 (32 µg/mL) and MIC90 (64 µg/mL) rates for IPM were higher among pediatric patient isolates and 25%, 37% and 6% were MDR, XDR and PDR, respectively. 12% of all isolates were classified as HPM and more than half were categorized as XDR. Using WGS, the six isolates recovered from the clinical case, were identified as a new sequence type (ST2744). Acquired resistance genes blaPAO, blaOXA-50, aph (3')-Iib, fosA, catB7 and crpP and mutations in encoding genes for porins and efflux pumps, was annotated. None exclusive classic genetic markers related to SCV and HPM phenotypes were not observed. This is the first Brazilian report of P. aeruginosa SCV in CF. Our results highlight the importance of epidemiological surveillance in P. aeruginosa. The application of phenotypic and molecular techniques to investigate resistance and virulence mechanisms, can contribute to therapeutic success in CF.

Expression analysis of drug-resistant gene (blaOXA-51) in carbapenemases producing Acinetobacter baumannii treated with imipenem/sulbactam combination

Drug-resistant Acinetobacter baumannii is a frightening reality. The aim of this study is to examine the expression profiles of blaOXA-51 gene in carbapenemases producing A. baumannii treated with imipenem/sulbactam combination. Carbapenemases producing A. baumannii was identified among clinical isolates of A. baumannii obtained from patients at Shahid Rajaee hospital, Gachsaran, Iran, from January to June 2018. Synergism testing of imipenem/sulbactam on carbapenemases producing A. baumannii was carried out by broth microdilution method. Eventually, the expression of blaOXA-51 gene was carried out to investigate the inhibitory properties of imipenem/sulbactam combination against carbapenemases producing A. baumannii using quantitative real time RT-PCR. Among A. baumannii isolates, 24% were carbapenemases producing A. baumannii. Imipenem/sulbactam combination revealed synergistic and partial synergistic effect for all tested isolates (FIC= 0.313-0.75). Finally, imipenem/sulbactam combination displayed significant down-regulation of blaOXA-51 gene in carbapenemases producing A. baumannii. Imipenem synergizes with sulbactam against carbapenemases producing A. baumannii by targeting of the blaOXA-51 gene.

Necrolisis epidérmica tóxica en el curso de un síndrome hemofagocítico secundario a linfoma de Hodgkin: caso clínico / Toxic epidermal necrolysis during a hemophagocytic syndrome secondary to Hodgkin lymphoma: report of one case

Toxic epidermal necrolysis (TEN) is a lethal entity, characterized by extensive epidermal necrosis and multiorgan failure. Hemophagocytic syndrome (HFS) is also a rare and lethal syndrome characterized by hyperinflammation that leads to the appearance of fever, pancytopenia, organomegaly and hemophagocytosis. The concomitance of these diseases is extremely uncommon. We report a 38 years old female, who during the course of a HFS secondary to Hodgkin Lymphoma (HL), presented a TEN secondary to antibiotics. She was admitted due to a consumptive syndrome, lymphadenopathy, visceromegaly and severe pancytopenia. Laboratory and bone marrow tests confirmed HFS. Due to constant fever, imipenem was indicated. On the third day she started with pain and skin rash. She evolved with positive Nikolsky sign. Cutaneous biopsy was concordant with extensive TEN, which was managed with intravenous immunoglobulin and dexamethasone. A complete response and normalization of the blood count were achieved. Finally, the lymph node biopsy showed HL of mixed cellularity type, which was managed with 8 cycles of ABVD chemotherapy, achieving complete remission.

Perfil de resistencia antimicrobiana en bacilos Gram negativos no fermentadores aislados en fuentes hídricas / Antimicrobial resistance profile in non-fermenting gram negative bacilli isolated in water resources

La amplia distribución de los bacilos gram negativos no fermentadores en medios ambientales como el agua y especies vegetales cobra importancia al ser reconocidos como agentes causales de enfermedades en pacientes inmunocomprometidos, de allí la relevancia del porque debemos conocer la prevalencia y perfil de susceptibilidad de estos microorganismos en ambientes no hospitalarios. Materiales y Métodos: Estudio transversal, realizado en muestras hídricas de fuentes naturales y artificiales de almacenamiento para el consumo humano en la ciudad de Bogotá y municipios aledaños. La identificación se realizó a través de pruebas IMVIC y el perfil de resistencia a través del método de kirby bauer o E-TEST®. Resultados: Se obtuvieron 42 muestras, 7 (16,6%) con aislamientos de interés: 3 (60%) Pseudomonas spp, 2 (20%) Acinetobacter spp, 1 (10%) Sphingomonas paucimobilis y 1 (10%) Pantoea spp. El 70% presento resistencia a la ceftriaxona, el 30% a cefoxitina, 20% a gentamicina, 10% a ciprofloxacina y 10% a piperacilina-tazobactam. No se presentó resistencia a imipenem. Conclusión: 5 de 7 aislamientos revelaron un BGNNF de importancia en infección en humanos, siendo importante la resistencia encontrada a la ceftriaxona.

The wide distribution of non-fermenting gram negative bacilli in environmental media such as water and plants becomes important as they are recognized a cause of diseases in immunocompromised patients, that’s the reason why we should to know the prevalence and the susceptibility profile of these microorganisms in non-hospital environments. Materials and Methods: Cross-sectional study done with samples of natural and artificial water storage for human consumption in the city of Bogotá and surrounding municipalities. The identification was made through IMVIC tests and the resistance profile through the kirby bauer or E-TEST® method. Results: 42 samples were obtained, 7 (16.6%) with isolates of interest: 3 (60%) Pseudomonas spp, 2 (20%) Acinetobacter spp, 1 (10%) Sphingomonas paucimobilis and 1 (10%) Pantoea spp. The 70% had resistance to ceftriaxone, 30% to cefoxitin, 20% to gentamicin, 10% to ciprofloxacin and 10% to piperacillin-tazobactam. No resistance to imipenem was shown. Conclusion: 5 of 7 isolates revealed a BGNNF of importance in infection in humans, with an important resistance to ceftriaxone.

Modulação in vitro da atividade antibiótica pelo óleo essencial dos frutos de Piper tuberculatum Jacq / Modulación in vitro de la actividad antibiótica por el aceite esencial de frutos de Piper tuberculatum Jacq / In vitro modulation of the antibiotic activity of essential oil from fruits of Piper tuberculatum Jacq

Introdução: Piper tuberculatum Jacq., popularmente conhecida como pimenta-longaou pimenta-d'Arda, é utilizada empiricamente no tratamento de doenças respiratórias (asma, bronquite e tosse) e digestivas (dores abdominais e diarreias). Na literatura é descrita com importantes atividades anti-inflamatória, antimicrobiana, antileucêmico e anti-helmíntica. Objetivos: avaliar a atividade moduladora do óleo essencial dos frutos de P. tuberculatum (OEPT) em associação com diferentes antibióticos frente à Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Pseudomona aeruginosa. Metodos: Os frutos (frescos) de P. tuberculatum foram coletados em Barbalha/CE e submetidos à hidrodestilação em aparelho tipo Clevenger para ser extraído o óleo essencial, após a extração o óleo essencial foi tratado com sulfato de sódio anidro para eliminação da umidade residual. A avaliação da atividade antibacteriana e modulação (em resistência bacteriana) frente às cepas de S. aureus (SA358), E. coli (EC27) e P. aeruginosa (PA03) foram determinadas pelo método de microdiluição para identificar a concentração inibitória mínima (CIM), realizada em triplicata. CIM de ≤ 256 µg/mL foi considerado clinicamente relevante. Resultados: a atividade antibacteriana do OEPT exibiu um CIM de ≥ 1024 µg/mL contra as cepas de bactérias de padrão resistente a múltiplas drogas. Na avaliação da atividade moduladora, o OEPT antagonizou o efeito da amicacina contra E. coli e S. aureus, mas teve efeito sinérgico contra P. aeruginosa. Combinado com a getamicina o óleo exibiu antagonismo frente a E. coli, no entanto não apresentou resultado relevante contra S. aureas e P. aeruginosa. A associação do OEPT com o antibiótico imipenem resultou efeito mais relevante, apresentando sinergismo para todas as bactérias avaliadas, por outro lado, em associação com ciprofloxacino não apresentou efeito significante em relação ao controle. Conclusão: O OEPT apresentou uma melhor atividade quando associado ao imipenem frente todas as bactérias avaliadas, mostrando ser uma possível alternativa no desenvolvimento de novos fármacos com atividade antibacteriana advindos de produtos fitoterápicos(AU)

Introducción: Piper tuberculatum Jacq. popularmente conocida como pimenta-longa o pimenta-d'Arda, se utiliza empíricamente en el tratamiento de enfermedades respiratorias (asma, bronquitis y tos) y digestivas (dolor abdominal y diarrea). En la literatura es describe con importantes actividades antiinflamatorias, antimicrobianas, antileucémicas y antihelmínticas. Objetivo: evaluar la actividad moduladora de los aceites esenciales de frutos de P. tuberculatum (AEPT) en asociación con diferentes antibióticos contra Staphylococcus aureus, Escherichia coli y Pseudomona aeruginosa. Metodología: los frutos (frescos) de P. tuberculatum fueron recolectados en Barbalha/CE y sometidos a hidrodestilación en un equipo Clevenger, para extraer el aceite essencial (AEPT), el cual, una vez extraído, fue tratado con sulfato de sodio anhidro para eliminar la humedad residual. Se evaluó su actividad antibacteriana contra las cepas de S. aureus (SA358), E. coli (EC27) y P. aeruginosas (PA03). Empleando el método de microdilución se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM), con tres réplicas por cada tratamiento. Un valor de CIM ≤ 256 µg/mL se considera clínicamente relevante. Resultados: la actividad antibacteriana del AEPT exhibió una CIM ≥ 1024 µg/mL contra las cepas estándar de bacterias resistentes a múltiples fármacos. En efecto, la actividad AEPT antagoniza el efecto de amikacina contra E. coli y S. aureus, pero tenía un efecto sinérgico contra P. aeruginosa. Combinado con la getamicina el aceite exhibió antagonismo contra E. coli, sin embargo no presentó resultado relevante ante S. aureus y P. aeruginosa. La asociación de AEPT con el antibiótico imipenem resultó el efecto más relevante, mostrando sinergismo frente a todas las bacterias evaluadas. Por el contrario, en asociación con ciprofloxacina no mostró ningún efecto significativo con respecto al control. Conclusión: el AEPT presentó una mejor actividad cuando se asoció a imipenem, frente todas las bacterias evaluadas, demostrando ser una posible alternativa en el desarrollo de nuevos fármacos con actividad antimicrobiana, a partir de productos herbarios(AU)

Introduction: Piper tuberculatum Jacq., commonly known as pimenta-longa or pimenta-d'Arda, is empirically used to treat respiratory conditions (asthma, bronchitis and coughing) and digestive disorders (abdominal pain and diarrhea). Reference may be found in the literature to outstanding antiinflammatory, antimicrobial, antileukemic and antihelmintic activity. Objective: Evaluate the modulatory activity of essential oils from fruits of P. tuberculatum (AEPT) combined with various antibiotics againstStaphylococcus aureus, Escherichia coli and Pseudomona aeruginosa. Methods: Fresh fruits of P. tuberculatum were collected in Barbalha, CE, and subjected to hydrodistillation in a Clevenger set to extract the essential oil (AEPT). The oil extracted was then treated with anhydrous sodium sulfate to eliminate residual humidity. Antibacterial activity was evaluated against strains of S. aureus (SA358), E. coli (EC27) and P. aeruginosas (PA03). Minimum inhibitory concentration (MIC) was determined by the microdilution method, with three replications for each treatment. A MIC ≤ 256 µg/mL was considered to be clinically relevant. Results: Antibacterial activity of AEPT displayed a MIC of ≥1024 µg/mL against standard strains of multi-drug resistant bacteria. In fact, activity of AEPT antagonized the effect of amikacin against E. coli and S. aureus, but had a synergic effect against P. aeruginosa. Combined with gentamicin, the oil exhibited antagonism against E. coli, but no relevant result was obtained against S. aureus and P. aeruginosa. Combination of AEPT with the antibiotic imipenem had the most relevant effect, displaying synergism against all the bacteria evaluated. However, in combination with ciprofloxacin it did not show any significant effect with respect to the control. Conclusion: AEPT displayed better activity against all the bacteria evaluated when combined with imipenem, proving to be a possible alternative for the development of new herbal drugs with antimicrobial activity(AU)

The challenge of managing extensively drug-resistant tuberculosis at a referral hospital in the state of São Paulo, Brazil: a report of three cases / O desafio do tratamento da tuberculose extensivamente resistente em um hospital de referência no estado de São Paulo: um relato de três casos

ABSTRACT Here, we report the cases of three patients diagnosed with extensively drug-resistant tuberculosis and admitted to a referral hospital in the state of São Paulo, Brazil, showing the clinical and radiological evolution, as well as laboratory test results, over a one-year period. Treatment was based on the World Health Organization guidelines, with the inclusion of a new proposal for the use of a combination of antituberculosis drugs (imipenem and linezolid). In the cases studied, we show the challenge of creating an acceptable, effective treatment regimen including drugs that are more toxic, are more expensive, and are administered for longer periods. We also show that treatment costs are significantly higher for such patients, which could have an impact on health care systems, even after hospital discharge. We highlight the fact that in extreme cases, such as those reported here, hospitalization at a referral center seems to be the most effective strategy for providing appropriate treatment and increasing the chance of cure. In conclusion, health professionals and governments must make every effort to prevent cases of multidrug-resistant and extensively drug-resistant tuberculosis.

RESUMO Relatamos aqui os casos de três pacientes portadores de tuberculose extensivamente resistente, internados em um hospital de referência no estado de São Paulo, e mostramos sua evolução clínica, radiológica e laboratorial pelo período de um ano. O tratamento instituído foi baseado nas diretrizes da Organização Mundial da Saúde, com a inclusão de uma nova proposta de uso de uma associação de drogas antituberculose (linezolida e imipenem). Nos casos estudados, demonstrou-se o desafio de construir um esquema terapêutico aceitável e eficiente com drogas mais tóxicas, mais dispendiosas e que foram utilizadas por períodos mais prolongados. Mostramos também o importante acréscimo nos custos do tratamento desses pacientes, com possíveis impactos no sistema de saúde mesmo após a alta hospitalar. Ressaltamos que, em casos extremos como os apresentados neste estudo, a hospitalização em centros de referência mostrou-se o caminho mais efetivo para oferecer tratamento adequado com possibilidade de cura. Em conclusão, todos os esforços dos profissionais da saúde e do poder público devem ser direcionados a evitar casos de tuberculose multirresistente e extensivamente resistente.

Avaliações comparativas da associação entre antibióticos frente à Pseudomonas aeruginosa / Evaluación comparativa del uso asociado de antibióticos frente a Pseudomonas aeruginosa / Evaluation of the association antibiotics against Pseudomonas aeruginosa

Introdução: Pseudomonas aeruginosa caracteriza-se como bastonete gram-negativo reto ou ligeiramente curvo, aeróbio estrito, podendo ser encontrado na água, solo, vegetais, esgoto e animais. É um patógeno nosocomial com envolvimento em infecções hospitalares provocando infecções oportunistas em pacientes, principalmente naqueles imunocomprometidos. Uma das características de P. aeruginosa é seu alto nível de resistência intrínseca a agentes antimicrobianos estruturalmente diferentes. Objetivo: avaliar as atividades microbiológicas e comparar as atividades decorrentes da associação entre antibióticos que atuam no mesmo alvo e também em alvos diferentes frente às cepas bacterianas de Pseudomonas aeruginosa. Métodos: a Concentração Inibitória Mínima (CIM) foi realizada pelo método de microdiluição em caldo. Foi realizada modulação com bactérias associando os antibióticos. Resultados: as associações claritromicina‒imipenem e claritromicina ‒ciprofloxacina apresentaram sinergismo frente à P. aeruginosa, porém a associação claritromicina‒gentamicina demonstrou indiferença. Por outro lado as associações imipenem‒claritromicina, ciprofloxacino‒claritromicina e gentamicina ‒claritromicina apresentaram antagonismo. Conclusão: o resultado deste ensaio sugere que a associação de dois antibióticos testados aumenta o seu potencial antimicrobiano, podendo ser usado em combinação mediante investigações posteriores que comprovem a segurança de tal uso(AU)

Introduction: Pseudomonas aeruginosa is an anaerobic and gramnegative rod, they can be isolated from water, soil, vegetables, waste and animals. This microorganism is a nosocomial opportunistic infectious agent, mainly for immunocompromised patients. One of the main traits of P. aeruginosa is its intrinsic drug resistance to structurally different antibiotics. Objective: to evaluate the microbiological effect and to compare the activities derived from the antibiotic association s acting on the same target and on different targets against P. aeruginosa strains. Methods: the Minimun Inhibitory Concentration (MIC) was determined by broth microdilution method. The modulation of the activity on the bacteria was based on the antibiotic association. Results: the association of clarithromycin-imipenem and of clarothromycin-ciprofloxacin demonstrate synergism against P. aeruginosa. However, the association of clarithromycin?gentamycin did not show differences. On the other hand, the association of imipenem-clarihtromycin, of ciprofloxacine-clarithromycin and of gentamycin-clarithromycin showed antagonistic effect. Conclusions: the results of this study indicated that the association of two antibiotics enhances the antimicrobial potential of these drugs, and that they can be used in combination whenever other research studies confirm the safety of such use(AU)

Introducción: la Pseudomonas aeruginosa se caracteriza por ser gramnegativos con imagen de bastones rectos o ligeramente curvos, aeróbios, se pueden encuentrar en el agua, el suelo, en plantas, animales y aguas residuales. Es un patógeno nosocomial implicado en infecciones hospitalarias, causando infecciones oportunistas en pacientes, especialmente en aquellos inmunocomprometidos. Una de las características de la P. aeruginosa es su alto nivel de resistencia intrínseca a agentes antimicrobianos estructuralmente diferentes. Objetivo: evaluar las actividades microbiológicas y comparar las actividades derivadas de la asociación de antibióticos que actúan sobre la misma diana y también sobre diferentes dianas frente a cepas bacterianas de Pseudomonas aeruginosa. Métodos: el cálculo de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) se realizó por el método de microdilución en caldo. La modulación de la actividad sobre bacterias se realizó por asociación de antibióticos. Resultados: las asociaciones claritromicina‒imipenem y claritromicina ‒ciprofloxacina mostraron sinergismo frente a P. aeruginosa; sin embargo la asociación claritromicina‒gentamicina no mostro diferencias. Por otro lado las asociaciones imipenem‒claritromicina, ciprofloxacino‒claritromicina y gentamicina ‒claritromicina demostraron antagonismo. Conclusión: los resultados de este estudio indican que la combinación de dos antibióticos aumenta su potencial antimicrobiano, y que pueden ser utilizadas en combinación, una vez que otras investigaciones confirmen la seguridad de dicho uso(AU)

Pharmacokinetic-pharmacodynamic correlation of imipenem in pediatric burn patients using a bioanalytical liquid chromatographic method / Correlação farmacocinética-farmacodinâmica de imipenem em pacientes queimados pediátricos utilizando um método bioanalítico de cromatografia líquida

A bioanalytical method was developed and applied to quantify the free imipenem concentrations for pharmacokinetics and PK/PD correlation studies of the dose adjustments required to maintain antimicrobial effectiveness in pediatric burn patients. A reverse-phase Supelcosil LC18 column (250 x 4.6 mm 5 micra), binary mobile phase consisting of 0.01 M, pH 7.0 phosphate buffer and acetonitrile (99:1, v/v), flow rate of 0.8 mL/min, was applied. The method showed good absolute recovery (above 90%), good linearity (0.25-100.0 µg/mL, r²=0.999), good sensitivity (LLOQ: 0.25 µg/mL; LLOD: 0.12 µg/mL) and acceptable stability. Inter/intraday precision values were 7.3/5.9%, and mean accuracy was 92.9%. A bioanalytical method was applied to quantify free drug concentrations in children with burns. Six pediatric burn patients (median 7.0 years old, 27.5 kg), normal renal function, and 33% total burn surface area were prospectively investigated; inhalation injuries were present in 4/6 (67%) of the patients. Plasma monitoring and PK assessments were performed using a serial blood sample collection for each set, totaling 10 sets. The PK/PD target attained (40%T>MIC) for each minimum inhibitory concentration (MIC: 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 mg/L) occurred at a percentage higher than 80% of the sets investigated and 100% after dose adjustment. In conclusion, the purification of plasma samples using an ultrafiltration technique followed by quantification of imipenem plasma measurements using the LC method is quite simple, useful, and requires small volumes for blood sampling. In addition, a small amount of plasma (0.25 mL) is needed to guarantee drug effectiveness in pediatric burn patients. There is also a low risk of neurotoxicity, which is important because pharmacokinetics are unpredictable in these critical patients with severe hospital infection. Finally, the PK/PD target was attained for imipenem in the control of sepsis in pediatric patients...

Desenvolveu-se e aplicou-se método bioanalítico para quantificar concentrações de imipenem livre para estudos de farmacocinética (PK) e de correlação PK/PD dos ajustes de dose requeridos para manter a efetividade antimicrobiana em pacientes pediátricos queimados. Utilizou-se coluna Supelcosil LC18 (250 x 4,6 mm 5 micra), fase móvel binária, consistindo de tampão fosfato 0,01M pH 7,0 e acetonitrila (99:1, v/v) e fluxo de 0,8 mL/min. O método mostrou boa recuperação absoluta (acima de 90%), boa linearidade (0,25-100,0 µg/mL, r²=0.999), boa sensibilidade (LLOQ: 0,25 µg/mL; LLOD: 0,12 µg/mL) e estabilidade aceitável. Os valores de precisão inter/intradia foram 7,3/5,9% e a exatidão média foi de 92,9%. O método bioanalítico foi aplicado para quantificar concentrações de fármaco livre em crianças com queimaduras, Seis pacientes pediátricos queimados (idade média de 7,0 anos, 27,5 kg), com função renal normal e 33% da superfície total queimada foram investigados prospectivamente. Lesões por inalação estavam presentes em 4/6 (67%) dos pacientes. O monitoramento plasmático e a as avaliações de PK foram efetuadas utilizando coleção de amostras seriais de sangue para cada série, totalizando 10 conjuntos. O alvo PK/PD alcançado (40%T>MIC) para cada concentração inibitória mínima (MIC: 0,5, 1,0, 2,0, 4,0 mg/L) ocorreu em porcentagem maior do que 80% dos conjuntos investigados e 100% após o ajuste de dose. Em conclusão, a purificação das amostras do plasma usando técnica de ultrafiltração seguida de quantificação das medidas do imipenem no plasma usando método de cromatografia líquida é bastante simples, útil e necessita de pequenos volumes para as amostras de sangue. Além disso, pequena quantidade de plasma (0,25 mL) é necessário para garantir a efetividade do fármaco nos pacientes pediátricos queimados. Há, ainda, baixo risco de neurotoxicidade, o que é importante, visto que as farmacocinéticas são imprevisíveis nesses pacientes...

Cistitis enfisematosa: una inusual forma de presentación de la infección del tracto urinario bajo / Emphysematous cystitis: Report of one case

Emphysematous cystitis is found in diabetic patients and in individuals with urinary stasis and immunosuppression. We report a 58-year-old male with hypertension, type 2 Diabetes on insulin treatment and central nervous system vasculitis on immunosuppressive therapy. He was admitted with weight loss and gait instability. A PET-CT showed a circumscribed image of air in the bladder contour without involving the upper urinary tract, suggesting emphysematous cystitis. Re-interrogated, the patient referred pneumaturia, dysuria and febrile sensation one week before admission. Urine culture showed Enterobacter aerogenes. He was treated with a urinary catheter, metabolic control and parenteral antimicrobials. The patient was discharged without symptoms 21 days after admission, with the bladder catheter.

Análise molecular da expressão do fenótipo multi-droga resistente (MDR) em enterobactérias isoladas de amostras clínicas após exposição in vitro ao Imipenem / Molecular analysis of multi-drug resistant phenotype expression (MDR) in enterobacteria isolated from clinical specimens after exposure in vitro to imipenem

Após o surgimento e disseminação das ß-lactamases de amplo espectro em membros da família Enterobacteriaceae, os antibióticos carbapenêmicos (imipenem, meropenemeertapenem) têm sido considerados a terapia de escolha devido à estabilidade apresentada contra estas enzimas. A desvantagem destes antibióticos é a sua capacidade de induzir resistência aos ß-lactâmicos e a outros antibióticos quimicamente não relacionados. O imipenem tem favorecido a indução de cefalosporinases cromossômicas (AmpC) e também tem sido relacionado, in vivo, com a seleção de mecanismos intrínsecos de resistência, contribuindo com o perfil multi -droga resistente (MDR). Esse perfil é freqüentemente associado à diminuição da permeabilidade por alteração na síntese de porinas em conjunto com um aumento da atividade de bombas de efluxo, as quais não permitem o estabelecimento de uma concentração ativa do antibiótico no interior da célula bacteriana. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o estabelecimento do perfil MDR em enterobactérias provenientes de isolados clínicos em função da exposição a diferentes concentrações de imipenemin vitro. A seleção do grupo das amostras estudadas foi feito por meio da determinação do perfil de sensibilidade dos isolados, tipagem molecular e ensaio de hidrólise de Imipenem. Nos isolados selecionados para a indução foi realizada numa etapa inicial (etapa basal) a análise de porinas de membrana externa por SDS-PAGE e o estudo de genes codificadores de ß-lactamases pela técnica de PCR. O estudo do estabelecimento do perfil MDR foi feito por meio de passagens sucessivas das amostras em meio contendo concentrações sub-inibitórias de imipenem seguido de análise fenotípica (CIM e acúmulo do antibiótico intracelular e SDS-PAGE), e a análise da expressão gênica de genes associados a permeabilidade de membrana (ompC, ompF eAcrA) e genes reguladores(marA e ompR). Após a indução com o imipenem, 77% dos isolados induzidos aumentaram a CIM para os carbapenêmicos, mudando assim o perfil de resistência observado na etapa basal Também foi afetado o perfil de resistência para outros antibióticos não relacionados a ß-lactámicos, porém numa percentagem menor. Com relação à alteração da permeabilidade, a perda de porina foi observada apenas para um isolado, no entanto a diminuição na expressão gênica de Omp36 foi significativa desde o começo da indução. A expressão da bomba de efluxoAcrAB foi afetada pela indução com imipenem, aumentando significativamente a expressão de AcrA, enquanto os reguladores estudados, MarA e OmpR tiveram a sua expressão induzida pelo imipenem. Foi possível observar também associação do nível de expressão gênica do regulador MarA com a expressão de AcrA,porém não foi possível observar uma associação estatisticamente significativa deste regulador com o perfil de expressão de OMPs. A indução de OmpR foi associado com um aumento da expressão de RNAm de Omp35, já para Omp36 foi possível observar apenas uma tendência na repressão deste gene. O estudo da resposta destes genes reguladores e determinantes de resistência, em resposta à exposição ao com o imipenem in vitro, permitiu reportar o comportamento molecular da bactéria numa resposta adaptativa no estagio inicial do estabelecimento do fenótipo MDR. A utilização de isolados clínicos com diversos determinantes de resistência permitiu observar a variabilidade nas respostas adaptativas das enterobacterias, o que é fundamental para a compreensão dos mecanismos de adaptação da bactéria e sua contribuição na falha terapêutica

After emergence and broad dissemination of extended spectrum ß-lactamases into the Enterobacteriaceae family, the carbapenemic antibiotics (imipenem, meropenem and ertapenem) have been considered the chosen therapy in the treatment of nosocomial infections by the stability that these antibiotics show to these enzymes. The disadvantage of carbapenems is theirs capacity to induce resistance against ß-lactamics and to other chemically unrelated antibiotics. The imipenem has been shown to induce chromosomal cephalosporinases (AmpC) and it was also related, in vivo, with the selection of intrinsic mechanism leading to multi-drug resistance profile (MDR). This profile is usually associated with membrane impermeability due to reduced outer membrane porin synthesis with an incremented activity of efflux pumps, which results in a reduced concentration of antibiotics inside the bacteria. This study aimed to evaluate the establishment of the MDR profile in Enterobacteriaceae from clinical isolates by exposure to different concentrations of imipenem in vitro. The selection of the study group was performed by determination of antibiotic susceptibility profile,molecular typing and hydrolysis assay of imipenem. In the selected isolates submitted to induction, in an initial step (baseline), was performed the outer membrane porin analysis by SDS-PAGE and the gene-specific amplification of B-lactamase enzymes by PCR. The study of the establishment of MDR was performed by progressive passages with subclinical concentrations of imipenem, followed each one by the evaluation of phenotypic profile (MIC, accumulation antibiotic in celland SDS-PAGE) and gene expression analysisof genes related to membrane permeability (ompC, ompF and acrA) and regulatory genes(MarA and ompR). After induction with imipenem, 77 % of the isolates increased the MIC for the carbapenems, changing the resistance profile at the baseline. In a lesser percentage, the resistance profile to other ß-lactams-unrelated antibiotics was also affected. Loss of porin was observed only for an isolated, however a significantly decreased Omp36 mRNA expression was observed from the start of induction. The expression of the efflux pump AcrAB ,was also affected by the imipenem induction, significantly increasing the AcrA gene expression, whereas the studied regulatory genes,MarA and OmpR,were induced by the imipenem. It was also possible to observe an association between the expression of the regulator MarA and the expression of AcrA, nevertheless no association was observed between this regulator and OMPs . OmpR induction was associated with an increased Omp35mRNA expression, however only a trend for the repression of Omp36was observed. The study of the response of these regulatory genes and genetic determinants of resistance, in response to the imipenem exposure in vitro, allowed to report the molecular behavior of the bacteria in an adaptive response in the initial stage of the establishment of a MDR phenotype. The use of clinical isolates with diverse resistance determinants allowed observing the variability in adaptive responses in enterobacteria, which is important to understand the adaptive mechanisms of bacteria to this antibiotic, the involvement in the emergence of the MDR profile and its contribution to the treatment failure

Endocarditis infecciosa por Rhizobium radiobacter: Reporte de un caso / Infective endocarditis by Rhizobium radiobacter: A case report

Rhizobium radiobacter es una bacteria Gram-negativa, fijadora de nitrógeno que se encuentra principalmente en el suelo. Rara vez causa infecciones en humanos. Ha sido asociada a bacteriemia secundaria a colonización de catéteres intravasculares en pacientes inmunocomprometidos. El objetivo de este trabajo es informar un caso de endocarditis infecciosa por R. radiobacter. Se trata de paciente masculino, de 47 años de edad, con diagnóstico de enfermedad renal crónica estadio 5 en tratamiento sustitutivo con hemodiálisis, quien acude a centro asistencial por presentar fiebre de dos semanas de evolución. Es hospitalizado, se toman muestras de sangre periférica para hemocultivo y se inicia antibioticoterapia empírica con cefotaxime más vancomicina. El ecocardiograma transtorácico revelo vegetación fusiforme en válvula tricúspide con regurgitación grado III-IV/IV. Al séptimo día del inicio de la antibioterapia el paciente presenta mejoría clínica y paraclínica. La bacteria identificada por hemocultivo es Rhizobium radiobacter resistente a ceftriaxona y sensible a imipenem, amikacina, ampicilina y ampicilina/sulbactam. Debido a la mejoría clínica se decide continuar tratamiento con vancomicina y se anexa imipenem. A los 14 días de iniciada la antibioterapia el paciente es dado de alta con tratamiento ambulatorio con imipenen hasta cumplir seis semanas de tratamiento. En el ecocardiograma control se evidencio ausencia de la vegetación en la válvula tricúspide. Este caso sugiere que R. radiobacter puede ser una causa de endocarditis en pacientes portadores de catéteres intravasculares.

Rhizobium radiobacter is a Gram-negative, nitrogen-fixing bacterium, which is found mainly on the ground. It rarely causes infections in humans. It has been associated with bacteremia, secondary to colonization of intravascular catheters, in immunocompromised patients. The aim of this paper was to report the case of an infective endocarditis caused by R. radiobacter, in a 47-year-old male, diagnosed with chronic kidney disease stage 5, on replacement therapy with hemodialysis and who attended the medical center with fever of two weeks duration. The patient was hospitalized and samples of peripheral blood were taken for culture. Empirical antibiotic therapy was started with cefotaxime plus vancomycin. The transthoracic echocardiogram revealed fusiform vegetation on the tricuspid valve, with grade III-IV/IV regurgitation. On the seventh day after the start of antibiotic therapy, the patient had a clinical and paraclinical improvement. The bacterium identified by blood culture was Rhizobium radiobacter, ceftriaxone-resistant and sensitive to imipenem, amikacin, ampicillin and ampicillin/ sulbactam. Because of the clinical improvement, it was decided to continue treatment with vancomycin and additionally, with imipenem. At 14 days after the start of antibiotic therapy, the patient was discharged with outpatient treatment with imipenem up to six weeks of treatment. The control echocardiogram showed the absence of vegetation on the tricuspid valve. This case suggests that R. radiobacter can cause endocarditis in patients with intravascular catheters.

Detection and characterization of metallo-β-lactamases in Pseudomonas aeruginosa by phenotypic and molecular methods from clinical samples in a tertiary care hospital / Detección y caracterización de la metallo-betalactamasa en la Pseudomonas aeruginosa mediante métodos fenotípicos y moleculares a partir de muestras clínicas en un hospital de atención terciaria

AIMS: The aim of this study was to detect and characterize the presence of metallo-β-lactamase (MBL) production in multidrug resistant (MDR) P aeruginosa collected from clinical samples in a tertiary care hospital. METHODS AND MATERIALS: A total of 67 non-repetitive isolates of MDR P aeruginosa recovered from various clinical specimens were screened for MBL production by IPM/MEM-EDTA combined disc test. Polymerase chain reaction was performed on all isolates using blaIMP and blaVIM consensus primers to characterize them genotypically. RESULTS: Among 67 P aeruginosa isolates, 62.7% (42/67) and 70.1% (47/67) were resistant to imipenem and meropenem respectively and 47 (70.1%) were found to be MBL producers. Among this 47 MBL-producing isolates, 41 (61.1%) strains carried the blaVIM gene and 2 (3%) strains carried the blaIMP gene. Three strains were phenotypically negative but positive genotypically for blaVIM gene. One strain was resistant to both imipenem and meropenem but did not show phenotypic positivity. CONCLUSION: This study confirms the dissemination of blaVIM genes among MDR Pseudomonas aeruginosa and hence it is indispensible to identify and aptly control the threat of horizontal and vertical transfer.

OBJETIVO: El objetivo de este estudio es descubrir y caracterizar la presencia de producción de metallo-betalactamasa (MBL) en P aeruginosa resistente a los multifármacos (RMF), recogida de muestras clínicas de un hospital de atención terciaria. MÉTODO: Un total de 67 aislados no repetitivos de P aeruginosa RMF obtenidos de varios specímenes clínicos, fueron tamizados en busca de producción de MBL, mediante una prueba de disco combinado IPM/MEM-EDTA. Se efectuó una reacción en cadena de la polimerasa sobre todos los aislados, usando iniciadores de consenso blaIMP y blaVIM para la caracterización genotípica. RESULTADOS: Entre los aislados de P aeruginosa, 62.7% (42/67) y 70.1% (47/67) fueron resistentes al Imipenem y al Meropenem respectivamente, mientras que se halló que 47 (70.1%) eran productores de MBL. De los 47 aislados productores de MBL, 41 (61.1%) cepas eran portadoras del gen blaVIM en tanto que 2 (3%) cepas eran portadoras del gen blaIMP. Tres cepas fueron fenotípicamente negativas, pero genotípicamente positivas con respecto al gen blaVIM. Una cepa fue resistente tanto al Imipenem como al Meropenem, pero no mostró positividad fenotípicamente. CONCLUSIÓN: El presente estudio confirma la diseminación de los genes blaVIM entre las Pseudomonas aeruginosa RMF. Es importante identificar así como controlar adecuadamente la amenaza de la transferencia horizontal y vertical.

Metallo-β-lactamase-production in meropenem-susceptible Pseudomonas aeruginosa isolates: risk for silent spread

The aim of this study was to characterize two metallo-β-lactamases (MBLs)-producing Pseudomonas aeruginosa clinical isolates showing meropenem susceptibility. Antimicrobial susceptibility was assessed by automated testing and Clinical and Laboratory Standards Institute agar dilution method. MBL production was investigated by phenotypic tests. Molecular typing was determined by pulsed field gel electrophoresis (PFGE). MBL-encoding genes, as well as their genetic context, were identified by polymerase chain reaction (PCR) and sequencing. The location of blaIMP-16 was determined by plasmid electrophoresis, Southern blot and hybridization. Transcriptional levels of blaIMP-16, mexB, mexD, mexF, mexY, ampC and oprD were determined by semi-quantitative real time PCR. The P. aeruginosa isolates studied, Pa30 and Pa43, showed imipenem and meropenem susceptibility by automated testing. Agar dilution assays confirmed meropenem susceptibility whereas both isolates showed low level of imipenem resistance. Pa30 and Pa43 were phenotypically detected as MBL producers. PFGE revealed their clonal relatedness. blaIMP-16 was identified in both isolates, carried as a single cassette in a class 1 integron that was embedded in a plasmid of about 60-Kb. Pa30 and Pa43 overexpressed MexAB-OprM, MexCD-OprJ and MexXY-OprM efflux systems and showed basal transcriptional levels of ampC and oprD. MBL-producing P. aeruginosa that are not resistant to meropenem may represent a risk for therapeutic failure and act as silent reservoirs of MBL-encoding genes.

Detección fenotípica de metalobetalactamasas en aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa / Phenotypic detection of metallo-beta-lactamase in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa

Pseudomonas aeruginosa, es considerado uno de los más importantes gérmenes hospitalarios, siendo común su aislamiento en pacientes hospitalizados, adicionalmente, este microorganismo presenta una marcada multiresistencia, lo que incrementa la mortalidad. El tratamiento de estos pacientes suele ser difícil, ya que además de su resistencia natural, Pseudomonas puede adquirir mecanismos de resistencia para prácticamente la totalidad de los antimicrobianos disponibles para su tratamiento, por lo que cada vez es más frecuente y necesario el empleo de antibióticos como los carbapenems, lo que facilita la adquisición de mecanismos de resistencia a estas drogas. El presente estudio intenta determinar la producción de metalobetalactamasas (MBL) en aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa, utilizando para ello dos métodos fenotípicos. Se utilizó el método del doble disco (MDD) y el test de Hodge modificado (MHT). Se analizaron 726 aislados clínicos de P. aeruginosa, el 20,11% (146) de estos fueron resistentes a imipenem (IPM) y meropenem (MEM), por lo que se les realizaron los dos métodos fenotípicos, de los 146 aislados resistentes a carbapenems, 139 fueron positivas para el MDD, mientras que 144 lo fueron para el MHT, estos dos métodos permitieron confirmar la presencia de una carbapenemasa tipo MBL en el 98,63% de los aislados de P. aeruginosa, por otra parte, cinco aislados no fueron positivos para el MDD pero si para el MHT, lo que indicaría la presencia de carbapenemasas no MBL en estos aislado, también se obtienen 2 aislados que a pesar de ser IPM y MEM resistentes fueron negativos por los dos métodos fenotípicos utilizados, esto indicaría la presencia de un mecanismo de resistencia no enzimático que confiere resistencia a carbapenems...

Pseudomonas aeruginosa is considered one of the most important hospital germs; its isolation is common in hospitalized patients. In addition, this microorganism has a marked multi-resistance, which increases mortality. Treatment of these patients is often difficult, since in addition to its natural resistance, Pseudomonas can obtain resistance mechanisms to virtually all antimicrobial drugs available for its treatment; due to this, its appearance is increasingly frequent and necessitates the use of antibiotics such as carbapenems, which facilitates the acquisition of resistance mechanisms to these drugs. This study attempts to determine the production of metallo-beta-lactamase (MBL) in clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa, utilizing two phenotypic methods: the double disc method (MDD) and the modified Hodge test (MHT). 726 clinical isolates of P. aeruginosa were analyzed; 20.11% (146) of these were resistant to imipenem (IPM) and meropenem (MEM); 139 were positive for the MDD, while 144 were positive for the MHT. These two methods permitted confirming the presence of an MBL-type carbapenemase in 98.63% of P. aeruginosa isolates; five isolates were negative for the MDD but positive for the MHT, indicating the presence of non-MBL-type carbapenemase in these isolates. Also, 2 isolates were obtained that, despite being resistant to IPM and MEM, were negative according to the two phenotypic methods used; this would indicate the presence of a non-enzymatic resistance mechanism conferring resistance to carbapenems. The use of phenotypic methods for detecting MBL in P. aeruginosa isolates is quite an acceptable option for use in routine laboratories where specialized molecular biology tests are not available.

Changing the epidemiology of carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa in a Brazilian teaching hospital: the replacement of São Paulo metallo-β-lactamase-producing isolates

In Brazil, carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa isolates are closely related to the São Paulo metallo-β-lactamase (SPM) Brazilian clone. In this study, imipenem-resistant isolates were divided in two sets, 2002/2003 and 2008/2009, analysed by pulsed field gel electrophoresis and tested for the Ambler class B metallo-β-lactamase (MBL) genes blaSPM-1, blaIMP and blaVIM. The results show a prevalence of one clone related to the SPM Brazilian clone in 2002/2003. In 2008/2009, P. aeruginosa isolates were mostly MBL negative, genetically diverse and unrelated to those that had been detected earlier. These findings suggest that the resistance to carbapenems by these recent P. aeruginosa isolates was not due to the spread of MBL-positive SPM-related clones, as often observed in Brazilian hospitals.

Diclofenac sodium and Imipenem action on rat intestinal mucosa: a biomechanical and histological study / Ação do Diclofenaco de sódio e Imipenem na mucosa intestinal do rato: estudo biomecânico e histológico

PURPOSE: To study diclofenac sodium induced histological and mechanical alterations and their prevention with Imipenem in rat intestine. METHODS: Male Wistar rats (n=240) were randomly assigned to four experimental groups: GI: n=60 treated with 0.9 percent saline IM; GII: n=60 treated with 6mg/kg body weight diclofenac sodium IM for four days; GIII: n=60 treated with 30mg/kg body weight Imipenem IM for four days, and GIV n=60 treated with diclofenac sodium plus Imipenem at the above doses IM for 4 days. Each group was further divided into 4 subgroups of 15 rats each and sacrificed at 4, 7, 14, and 21 days of follow-up, respectively. Abdominal cavity macroscopy and histology, and small bowel breaking strength were analyzed at each sacrifice moment. RESULTS: There were no histological or mechanical alterations in normal control rats throughout the study. Ulcerated lesions in intestinal mucosa were observed and breaking strength decreased in all diclofenac sodium treated rats. Ulcerated lesions in intestinal mucosa were prevented by Imipenem in all rats. CONCLUSION: Diclofenac sodium induced ulcerated lesions in rat intestinal mucosa can be prevented by Imipenem treatment.

OBJETIVO: Avaliar as alterações histológicas e biomecânicas do diclofenaco de sódio na mucosa intestinal do rato e a associação com o uso de Imipenem. MÉTODOS: Foram estudados 240 ratos Wistar distribuídos aleatoriamente em quatro grupos experimentais: GI: 60 ratos tratados com injeção IM de soro fisiológico 0,9 por cento; GII: 60 ratos tratados com injeção IM de diclofenaco de sódio na dose de 6mg/kg de peso por 4 dias; GIII: 60 ratos tratados com injeção IM de Imipenem na dose de 30 mg/kg de peso por 4 dias; GIV: 60 ratos tratados com injeção IM de soro fisiológico e diclofenaco de sódio nas doses acima. Em cada grupo os animais foram posteriormente divididos em 4 momentos de 15 animais em cada um para sacrifício, respectivamente, no 4º, 7º, 14º e 21º dias após o início do tratamento. As alterações da cavidade abdominal, assim como as características histológicas e de força de ruptura do intestino delgado foram analisadas em cada momento, em cada grupo. RESULTADOS: Não foram encontradas alterações histológicas e biomecânicas nos animais do Grupo I nesse estudo. Lesões ulceradas na mucosa do intestino delgado foram observadas nos animais tratados com diclofenaco de sódio, assim como diminuição da força de ruptura. As lesões ulceradas encontradas foram prevenidas pelo uso de Imipenem. CONCLUSÃO: O diclofenaco de sódio induz lesões ulceradas na mucosa intestinal do rato que podem ser prevenidas pelo uso de Imipenem.