Response to direct-acting antiviral agents in chronic hepatitis C patients with end-stage renal disease: a clinical experience

SUMMARY OBJECTIVE The recent development of direct-acting antiviral agents (DAAs) has dramatically changed the treatment of chronic hepatitis C, and interferon-based regimes have become a poor treatment choice in clinical practice. Today DAAs offer shorter, well-tolerated, highly effective curative therapies. This study aimed to evaluate the effectiveness and safety of DAAs in patients with end-stage renal disease and HCV genotype 1 infection in real clinical practice. METHODS Thirty-six patients who attended our clinic, were diagnosed with chronic hepatitis C (CHC), undergoing hemodialysis, and fulfilled the criteria of age >18 years, genotype 1 infection, with a detectable HCV RNA level were considered for the study. Patients with GT1a infection received OBV/PTV/r plus DSV plus RBV for 12 weeks; GT1b infected patients received this regimen without RBV for 12 weeks. RESULTS The study was conducted on 33 patients. The mean age was 52.30 ±13.77 years, and 70 % of them were male. By the fourth week of treatment, HCV RNA levels decreased below 15 IU/ml in all patients. Sustained virologic response (SVR) 12 rate was 100%. Nine patients had side effects during treatment. Of the patients with side effects, 89.9% were in group 1a and 11.1% in group 1b. CONCLUSION In this study, treatment with OBV/PTV/r and DSV with or without RBV resulted in high rates of sustained virologic response in HCV GT1-infected patients with end-stage renal disease (ESRD). SVR was achieved in all patients with few side effects.

RESUMO O recente desenvolvimento de agentes antivirais de ação direta (DAAs) mudou drasticamente o tratamento da hepatite C crônica, e os regimes livres de interferon tornaram-se pobres escolhas para tratamento na prática clínica. Hoje os DAAs oferecem terapias curativas mais curtas, bem toleradas e altamente eficazes. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia e segurança dos DAAs em pacientes com doença renal em estágio terminal e infecção pelo genótipo 1 do HCV na prática clínica real. MÉTODOS Trinta e seis pacientes, que se inscreveram em nossa clínica com diagnóstico de hepatite C crônica (CHC), inclusive no programa de hemodiálise, e preencheram os critérios de idade >18 anos, foram considerados para infecção pelo genótipo 1 com nível detectável de RNA do HCV. Os pacientes com infecção por GT1a receberam OBV/PTV/r mais DSV mais RBV por 12 semanas. Os pacientes infectados com GT1b receberam este regime sem RBV por 12 semanas. RESULTADOS O estudo foi realizado em 33 pacientes. A idade média foi de 52,30±13,77 anos e 70% deles eram do sexo masculino. Na semana 4 do tratamento, os níveis de ARN do VHC diminuíram para menos de 15 UI/ml em todos os pacientes. A taxa de resposta virológica sustentada (RVS) 12 foi de 100%. Nove pacientes apresentaram efeitos colaterais durante o tratamento. Dos pacientes com efeitos colaterais, 89,9% estavam no grupo 1a e 11,1% no grupo 1b. CONCLUSÃO Neste estudo, o tratamento com OBV/PTV/r e DSV com ou sem RBV resultou em altas taxas de resposta virológica sustentada em pacientes infectados pelo VGC GT1 com doença renal em estágio final (ESRD). A RVS foi alcançada em todos os pacientes com poucos efeitos colaterais.

Discomfort and unease of the subject in the interpretation movement of a Tuberculosis questionnaire / O desconforto e inquietação do sujeito em seu movimento de interpretação de um questionário sobre a tuberculose / Malestar e inquietud del sujeto en su movimiento de interpretación de un cuestionario sobre la Tuberculosis

OBJECTIVE: to propose a discussion about traces of the derivation of meanings, the subjects' discomfort and resistance when they are called upon to signify a questionnaire on the transfer of the Directly Observed Treatment of Tuberculosis policy, in order to reveal the limitations of closed questionnaires in the subject's interpretation process. METHOD: health professionals from a Primary Health Care Unit in Porto Alegre/RS were interviewed and some excerpts from the interviews were investigated in the light of French Discourse Analysis. RESULTS: resistance, discomfort, slips, silencing and the derivation of meanings were observed in the subjects' interpretation. CONCLUSION: the interpretation process has multiple meanings and varies from subject to subject. The questionnaire, as a prototype of the logically stabilized universe, fails when the purpose is to control the interpretation. Its isolated use in health research can entail inexactness or incompleteness of the collected data. Therefore, its use associated with qualitative research techniques is ideal. .

OBJETIVO: propor uma discussão a respeito de vestígios da derivação de sentidos, do desconforto e resistência dos sujeitos, quando convocados a significar um questionário referente à transferência da política do tratamento diretamente observado da tuberculose, de modo a revelar as limitações de questionários fechados, quando se trata do processo interpretativo do sujeito. MÉTODO: profissionais de saúde de uma Unidade de Atenção Primária de Saúde de Porto Alegre, RS, foram entrevistados e alguns recortes das entrevistas examinados à luz da Análise de Discurso de linha francesa. RESULTADOS: observou-se a resistência, o incômodo, o deslizamento, o silenciamento e a derivação dos sentidos no ato de interpretação dos sujeitos. CONCLUSÃO: o processo de interpretação é polissêmico e varia de sujeito para sujeito. O questionário, enquanto um protótipo do universo logicamente estabilizado, falha quando o propósito é o de controlar a interpretação. O seu uso de forma isolada, em pesquisas em saúde, pode incorrer em inexatidão ou incompletude dos dados obtidos, sendo ideal a sua utilização associada a técnicas qualitativas de pesquisa. .

OBJETIVO: proponer una discusión respecto a vestigios de la derivación de sentidos, del malestar y resistencia de los sujetos cuando convocados a significar un cuestionario respecto a la trasferencia de la política del Tratamiento Directamente Observado de la Tuberculosis, de manera a revelar las limitaciones de cuestionarios cerrados cuando se trata del proceso interpretativo del sujeto. MÉTODO: profesionales de salud de una Unidad de Atención Primaria de Salud de Porto Alegre/RS fueron entrevistados y algunos recortes de las entrevistas examinados a la luz del Análisis de Discurso de línea Francesa. RESULTADOS: fueron observados la resistencia, la molestia, el deslizamiento, el silenciamiento y la derivación de los sentidos en el acto de interpretación de los sujetos. CONCLUSIÓN: el proceso de interpretación es polisémico y varia de sujeto a sujeto. El cuestionario como un prototipo del universo lógicamente estabilizado falla cuando el objetivo es el de controlar la interpretación. Su uso de forma aislada en investigaciones en salud puede llevar a datos inexactos o incompletos, siendo ideal su utilización asociada a técnicas cualitativas de investigación. .

Efeito da revascularização renal sobre a evolução da disfunção renal na nefropatia isquêmica aterosclerótica / Effect of renal revascularization on the development of renal dysfunction in atherosclerotic ischemic nephropathy

A doença renal crônica (DRC) é caracterizada por uma perda progressiva da função renal e suas principais causas são hipertensão arterial (HA) e diabete melito. Entre as causas de HA, podemos destacar a doença renal aterosclerótica (DRA). O desenvolvimento de DRC nos pacientes com DRA parece ser decorrente não apenas do acometimento das artérias renais principais, mas também da microcirculação renal, o que pode justificar o fato de o sucesso do procedimento não garantir uma melhora da evolução da DRC. Até o presente momento, não existe evidência de benefício da angioplastia em relação ao tratamento clínico exclusivo nos pacientes com DRA. O presente trabalho analisa os estudos mais significantes sobre os desfechos renais em pacientes portadores de DRA submetidos à revascularização ou ao tratamento clínico exclusivo.

Chronic kidney disease (CKD) is characterized by a progressive loss of renal function and its main causes are hypertension and diabetes mellitus. Among the causes of hypertension is atherosclerotic renal disease (ARD). The development of CKD in patients with ARD appears to be due not only to the involvement of the main renal arteries, but also of the renal microcirculation, which may explain the fact that the success of the procedure does not guarantee an improvement in the progression of CKD. To date there is no evidence of benefit of angioplasty compared to medical treatment alone in patients with ARD. The present paper analyzes the most significant studies on renal outcomes in patients with ARD undergoing revascularization or medical treatment alone.

Consejería en la detección de VPH como prueba de tamizaje de cáncer cervical: un estudio cualitativo sobre necesidades de mujeres de Michoacán, México / Counseling for HPV detection when used to screen for cervical cancer: a qualitative study on the needs of women from Michoacan, Mexico

Objetivo. Explorar las necesidades de información y consejería de un grupo de mujeres mexicanas al utilizar la prueba de virus de papiloma humano (VPH). Material y métodos. En 2011, se realizaron 24 entrevistas semiestructuradas a mujeres que recibieron el resultado de una prueba de VPH, en dos municipios del estado de Michoacán. El análisis cualitativo de las entrevistas se realizó con las técnicas de la comparación constante. Resultados. Durante el tamizaje, las mujeres recibieron escasa consejería; experimentaron angustia y confusión. Las usuarias de la prueba se mostraron interesadas en recibir información sobre el VPH y el cáncer cervical, el significado de sus resultados, los pasos que habrían de realizar en la atención, apoyo emocional e información vinculada con la transmisión sexual de VPH. Conclusiones. Se requiere diseñar e implementar políticas para impartir educación para la salud y consejería, a la par de la realización de pruebas de VPH.

Objective. To explore the information and counseling needs of a group of Mexican women during use of the HPV test. Materials and methods. In 2011, 24 semistructured interviews were done with women upon receiving HPV test results in two municipalities in the state of Michoacan. Qualitative analysis of the interviews was done using constant comparison techniques. Results. During their use of screening services women received limited counseling; they felt anguish and confusion. Women were interested in receiving information and advice on HPV and cervical cancer, the meaning of test result, next steps to be taken in their healthcare use as well as information and emotional support related to the sexual transmission of HPV. Conclusions. The design and implementation of policies are needed which instigate health education and counseling in conjunction with HPV testing.

Estrategia de genotipado del gen FMR1: Método de diagnóstico alternativo para el Síndrome X Frágil y otras enfermedades por expansión de trinucleotidos / Genotyping strategy for the FMR1 gene: An alternative diagnostic method for the Fragile X syndrome and other trinucleotide expansion diseases

Objetivos: Diseñar una estrategia alternativa por PCR para el genotipado de secuencias ricas en citosinas, basada en modificación nucleotídica. Material y métodos: Se modificó el gen FMR1 nativo de ocho individuos clínicamente no afectados por el Síndrome X frágil, cambiando las citosinas por uracilos, empleando bisulfito de sodio. El ADN modificado fue purificado y cuantificado por espectrofotometría. Las estructuras alternativas y potenciales islas CpG que adopta el microsatélite inestable fueron simuladas con los programas MFOLD y CpGplot. Se generaron cebadores específicos que hibriden tanto con el microsatélite modificado (Primer T) y con una secuencia modificada de las islas CpG (Primer M), utilizando el programa MethPrimer. Finalmente, ambas secuencias fueron amplificadas por PCR y los amplicones fueron separados por electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE por sus siglas en inglés) al 6% y visualizados con tinción de nitrato de plata. Resultados: La modificación del ADN fue evidenciada por espectrofotometría al uracilo. Las estructuras observadas en la simulación fueron las horquillas encontrándose dos potenciales islas CpG. La amplificación con los cebadores T, confirmó el diseño in silico desarrollado para abordar la estructura en horquillas. La amplificación con los cebadores M permitió detectar metilación de la primera isla CpG del gen FMR1.Conclusión: Se propone un diseño alternativo para amplificación de secuencias de microsatélite que contengan citosinas metiladas y no metiladas. Se requieren estudios posteriores con muestras de ADN que contengan microsatélites muy expandidos para validar su aplicación para diagnóstico molecular. (AU)

Objectives: To design an alternative strategy for genotyping cytosine-rich sequences using PCR and nucleotide modification. Methods: The FMR1 gene wild type was modified in the DNA obtained from eight individuals clinically unaffected for Fragile X Syndrome; cytosines were replaced by uracils using sodium bisulfite. Modified DNA was purified and quantified by spectrophotometry. Alternative structures and potential CpG islands of the unstable microsatellite were simulated using MFOLD and CpGplot tools. Specific primers were generated to hybridize with both the modified microsatellite (Primer G) and a modified sequence of CpG islands (Primer M) using the MethPrimer software. Finally, both sequences were amplified by PCR and the amplicons were separated by electrophoresis in silver-stained PAGE 6% gels. Results: The DNA modification was evidenced by spectrophotometry to uracil. We found two potential CpG islands. The amplification with T primers confirmed the "in silico" design developed to engage hairpin structures. The amplification with M primers detected methylation of the first CpG island in the FMR1 gene. Conclusion: We propose an alternative design for amplifying microsatellite sequences that contain methylated and unmethylated cytosine bases. Further studies are required with DNA samples containing expanded microsatellites to validate its molecular diagnostic application. (AU)

Clonagem, expressão heterológica e caracterização molecular das enzimas gliconato cinase e uracil fosforribosiltransferase de trypanosoma cruzi / Cloning, expression and molecular characterization heterological enzymes gluconate kinase and uracil phosphoribosyltransferase of Trypanosoma cruzi

A doença de Chagas é um problema de saúde pública na América Latina, com um forte impacto no Brasil. De acordo com estimativas da Organização Panamericana de Saúde (OPAS), em torno de 8 milhões de pessoas nas Américas estão infectados pelo Trypanosoma cruzi, com uma taxa de mortalidade de 12.000 indivíduos por ano. Apesar desta situação, os medicamentos utilizados no tratamento desta doença são ativos somente na fase aguda, apresentam uma baixa eficácia e uma série de efeitos colaterais. Portanto, a busca por novos alvos terapêuticos, através do estudo do metabolismo de T. cruzi, é uma alternativa no desenvolvimento de novos fármacos. Neste contexto, utilizou-se o AnEnPi, uma ferramenta computacional capaz de identificar e classificar proteínas com uma potencial atividade enzimática, utilizando dados genômicos previamente publicados, permitindo a reconstrução de diferentes vias metabólicas. Por meio dessa abordagem foram identificados em T. cruzi duas proteínas, as quais apresentam as seguintes atividades enzimáticas: uracil fosforibosiltransferase (UPRT) e gliconato cinase (GK). A UPRT é uma enzima da via de salvação de pirimidinas que converte uracil e D-5-fosforibosil-1-fosfato (PRPP) a monofosfato de uridina (UMP) e pirofosfato (PPi). E a GK é uma enzima da via das pentoses-fosfato que catalisa a fosforilação de gliconato a 6-fosfogliconato. Análises das sequências genômicas codificante para essas proteínas, utilizando diferentes ferramentas de bioinformática, permitiram a identificação de dois genes para cada uma dessas atividades enzimáticas em T. cruzi e confirmaram essas atividades pela identificação de seus motivos estruturais. Posteriormente, foi realizada a caracterização molecular das enzimas GK e UPRT de T. cruzi, através da clonagem dos respectivos genes, utilizando os vetores pBAD-TOPO TA e pET28a, e da expressão heteróloga em Escherichia coli, cepa BL21(DE3). As proteínas recombinantes GK e UPRT foram expressas na fração solúvel e insolúvel com pesos moleculares aproximados de 23 kDa e 28 kDa, respectivamente. Essas proteínas recombinantes foram purificadas sob condições desnaturantes através de cromatografia de afinidade. Os soros policlonais produzidos contra as proteínas purificadas foram eficazes no reconhecimento das proteínas recombinantes e de suas formas nativas presentes na forma epimastigota de T. cruzi. O ensaio de imunofluorescência revelou que as enzimas GK e UPRT estão localizadas possivelmente no citoplasma e no interior de vesículas citoplasmáticas ao longo do parasita. Além disto, a estrutura de ambas as enzimas foi deduzida através de modelagem por homologia. Este trabalho visa contribuir para o melhor entendimento do metabolismo deste parasita, de forma a auxiliar na busca de novos alvos terapêuticos contra a doença de Chagas.

Aprendizaje cooperativo para forjar vivienda saludable en Bogotá: estudio de caso / Cooperative learning for improving healthy housing conditions in Bogota: a case study

Objetivo Construir desde la comunidad una propuesta educativa orientada al auto empoderamiento para mejorar las condiciones sanitarias y de habitabilidad de la vivienda. Método Con un enfoque constructivista y con base en el programa "Gestores comunitarios del hábitat", se trabajó con quince familias residentes en el barrio Mochuelo Bajo de la Localidad de Ciudad Bolívar en Bogotá, Colombia, con el fin de que identificaran los aspectos sanitarios más relevantes para el mejoramiento de sus viviendas y propusieran la metodología y organización de la propuesta educativa. Resultados Se identificaron veinti ún indicadores epidemiológicos ligados a una vivienda insalubre, los cuales sirvieron como base para definir las problemáticas específicas y establecer la metodología para diseñar la propuesta educativa. Discusión El curso diseñado pretende fomentar la educación y las capacidades en salud de la comunidad con el fin de mejorar las condiciones de habitabilidad de las viviendas y lograr un entorno saludable del hábitat que les permita desarrollarse con bienestar y dignidad.

Objective This was a community-based effort at constructing an educational proposal orientated towards self-empowerment aimed at improving the target population's sanitary, housing and living conditions through cooperative learning. Methods A constructivist approach was adopted based on a programme called "Habitat community manger". The project involved working with fifteen families living in the Mochuelo Bajo barrio in Ciudad Bolívar in Bogotá, Colombia, for identifying the most relevant sanitary aspects for improving their homes and proposing a methodology and organisation for an educational proposal. Results Twenty-one poor housing-related epidemiological indicators were identified which formed the basis for defining specific problems and establishing a methodology for designing an educational proposal. Discussion The course which emerged from the cooperative learning experience was designed to promote the community's skills and education regarding health aimed at improving households' living conditions and ensuring a healthy environment which would allow them to develop an immediate habitat ensuring their own welfare and dignity.

Hidroperóxido de timina como fonte biológica de oxigênio molecular singlete [O2 (1 Delta g)] / Thymine hydroperoxide as biological source of singlet molecular oxygen [O2 (1 Delta g)]

A oxidação do DNA por espécies reativas de oxigênio, como o oxigênio molecular singlete [O2 (1Δg)] , pode estar relacionada ao aparecimento de mutações e ao desenvolvimento de doenças. O O2 (1Δg) pode ser gerado biologicamente por reação de fotossensibilização, pela reação de H2O2 e HOCl e pela decomposição de peróxidos orgânicos contendo hidrogênio alfa (α-ROOH), na presença de metais de transição (Fe2+, Cu2+) ou HOCl. A decomposição de α-ROOH, como hidroperóxidos de lipídeos ou proteínas na presença de metais de transição, pode gerar O2 (1Δg) via mecanismo de Russell. Neste mecanismo, a oxidação de α -ROOH gera radicais peroxila, que podem reagir entre si, formando um intermediário tetraóxido linear. Este intermediário tetraóxido linear pode decompor através de um mecanismo cíclico e produzir O2 (1Δg), um álcool e um composto carbonílico. Como a decomposição de α-ROOH pelo mecanismo de Russell pode ser uma importante fonte biológica de O2 (1Δg) decidimos investigar se o α-hidroperóxido de timina, 5-(hidroperoximetil)uracil (5-HMPU), poderia gerar esta espécie reativa na presença de metais (Ce4+, Fe2+, Cu2+) e HOCl. Outro objetivo foi avaliar os efeitos oxidativos, em DNA plasmidial (pBR322), da decomposição de 5-HPMU na presença de Cu2+. A geração de O2 (1Δg) na reação de 5-HPMU e Ce4+ ou HOCl foi demonstrada por meio do monitoramento da emissão de luz monomolecular de O2 (1Δg) na região do infravermelho próximo (IR-próximo, λ = 1270 nm) e bimolecular na região do visível (λ = 634 e 703 nm). A aquisição do espectro de emissão de O2 (1Δg) forneceu evidências inequívocas da geração desta espécie reativa na reação de 5-HPMU e Ce4+ ou HOCl. Além disto, a formação de O2 (1Δg) na reação de 5-HPMU e Fe2+, Cu2+ ou HOCl foi demonstrada através da captação química de O2 (1Δg) utilizando 9,10- divinilsulfonatoantraceno (AVS) e detecção por HPLC/MS/MS do endoperóxido (AVSO2) formado. A detecção por HPLC/MS/MS dos produtos de decomposição de 5-HPMU...

Oxidation of DNA by singlet molecular oxygen O2 (1Δg) can be involved in the development of mutations and diseases. In vivo, O2 (1Δg) can be generated by photosensitization reaction, H2O2 and HOCl reaction and decomposition of organic hydroperoxides with α-hydrogen (α-ROOH) in the presence of metal ions (Fe2+, Cu2+) or HOCl. The α-ROOH decomposition, such as lipid or protein hydroperoxides in the presence of metal ions or HOCl can generate O2 (1Δg) by Russell mechanism. In this mechanism, the self-reaction of peroxyl radicals generates a linear tetraoxide intermediate that decomposes to O2 (1Δg) , an alcohol and an aldehyde. Therefore, the purpose of this work is to investigate if O2 (1Δg) can be generated by α-thymine hydroperoxide, 5- (hydroperoxymethyl)uracil (5-HPMU) in the presence of Ce4+, Fe2+, Cu2+ or HOCl. Another purpose is to study base modification and strand breaks formation in plasmid DNA (pBR322) by 5-HPMU decomposition in the presence of Cu2+. The generation of O2 (1Δg) in the reaction of 5- HPMU and Ce4+ or HOCl was monitored by monomol light emission in the near-infrared region (NIR, λ = 1270 nm) and dimol light emission in the visible region (λ = 634 e 703 nm). The generation of O2 (1Δg) during the reaction of 5-HPMU and Ce4+ or HOCl was confirmed by acquisition of the light emission spectrum in the NIR. Furthermore, the generation of O2 (1Δg) produced by 5-HPMU and Fe2+, Cu2+ or HOCl was also confirmed by chemical trapping using anthracene-9,10-divinylsulfonate (AVS) and HPLC/MS/MS detection of the corresponding endoperoxide (AVSO2). The detection by HPLC/MS/MS of 5-(hydroxymethyl)uracil (5-HMU) and 5-formyluracil (5-FoU), two 5-HPMU decomposition products, support the Russell mechanism. Plasmid results from pBR322, 5-HPMU and Cu2+ reaction showed formation of DNA open circular form (OC), probably produced by 5-HPMU peroxyl and alkoxyl radicals. Additionally, the reaction of pBR322, 5-HPMU and Cu2+ following by Fpg and NTH enzyme treatment...

Estudo de fase II avaliando eficácia e toxicidade de UFT (uracil e tegafur) e leucovorin, administrados duas vezes ao dia, no tratamento de pacientes com câncer metastático de cólon e reto / Phase II trial evaluating the efficacy and toxicity of UFT and toxicity of UFT and leucovorin twice-daily as a treatment for metastatic colorectal cancer

O desenvolvimento clínico de novos fármacos é uma tarefa bastante complexa, que requer a participação de um grande número de investigadores e instituições. A disponibilidade de fármacos ativos contra o câncer de cólon e reto avançado sempre foi limitada, e por muitos anos este foi considerado um tumor resistente ao tratamento sistêmico, sendo essencialmente incurável a partir do momento em que se detectavam metástases à distância. Entretanto, a última década testemunhou um notável progresso no tratamento desta doença, graças ao desenvolvimento de diversos novos fármacos. Material e métodos: Revisamos nossa contribuição ao tratamento do câncer de cólon e reto avançado, representada por 94 manuscritos indexados (Pubmed, 06/08/2007), e 82 trabalhos apresentados em congressos internacionais...

Introduction: The clinical development of new drugs is a complex task that requires the participation of a large number of investigators and institutions. The availability of active drugs against advanced colorectal cancer has always been limited, and for many years this was considered a resistant tumor, which was essentially incurable once it had metastasized. However, the last decade has witnessed a remarkable progress in the treatment of this disease, thanks to the development of several new drugs. Material e methods: We reviewed our contribution to the treatment of advanced colorectal cancer through 94 indexed manuscripts (Pubmed, august 06, 2007), and 82 abstracts presented at International Congresses. Of those, we selected 51 publications that best represent our line of research, and our contribution to the treatment of this cancer. Results: We have a total of 10 drugs with proven activity against colorectal cancer. We have contributed in a substantial way for the clinical approval of two of those drugs, the oral capecitabine and the UFT, which can replace the old 5-fluorouracil with some advantages. We have also participated in the clinical development of irinotecan, oxaliplatin, bevacizumab and cetuximabe. Conclusion: We have participated in the development of the majority of new drugs available for the treatment of colorectal cancer. The availability of these new drugs has changed the natural history of this tumor, and patients may now expect not only an increase in median survival, but the presence of distant metastasis is not necessarily an impediment for a treatment with curative intent.

Viabilidad de Bacillus subtilis auxotrofos en ausencia de sus metabolitos esenciales / Viability of Bacillus subtilis auxotrophs in the absence of their essential metabolites

Se estudió el efecto de la privación de triptofano y uracilo sobre la viabilidad del tansformante Bacillus subtilis BSA trp ura y de las cepas parentales Bacillus subtilis PB 168 trp-C y Bacillus subtilis PB 3308 ura. Los ensayos se llevaron a cabo en las condiciones descriptas para el desarrollo de competencia para transformación, durante 16 h. Los resultados obtenidos demostraron que Bacillus subtilis BSA 170 trp ura es resistente a la muerte por carencia de triptofano durante el tiempo del ensayo y a la muerte por carencia de uracilo durante 3h. Luego ocurre una disminución de la recuperación de UFC, acompañada por una reduccción de las absorbancias de los cultivos. La muerte por carencia de uracilo es prevenida en ausencia de triptofano, sugiriendo que reuiere síntesis de proteínas. Las cepas parentales mostraron un comportamiento semejante. Bacillus subtilis PB 168 trp-C mostró ser resistente a la muerte por carencia de triptofano y Bacillus subtilis PB 3308 uta sufrió una reducción de la capacidad para formar colonias, debida a la privación de uracilo, comparable a la de la cepa transformante

Bacillus subtilis BSA 170 trp-ura-:Un nuevo mutante nutricional con requerimientos absolutos de triptofano y uracilo exogenos para su crecimiento. / Bacillus subtilis BSA 170 trp-ura-:a new nutritional mutant with absolute requirements of exogen trypthophan and uracil for its growth

Se construyo un mutante nutricional de Bacillus subtilis que requiere triptofano y uracilo exogenos para su crecimiento.Dicho mutante, denominado Bacillus subtilis BSA 170 trp-ura-, fue obtenido por transformante extraido de B. subtilis PB "3308 ura" y seleccionado por replicas en medios nutricionalmente selectivos. Ademas, una poblacion de Bacillus subtilis BSA 170 trp -ura- es capaz de desarrollar competencia para transformacion cuando es tratada de acuerdo a la metodologia propuesta por Young y Spizizen. Los estudios de transformabilidad de los marcadores trp (triptofano) y ura (uracilo) demostraron que cada uno de ellos transforma eficientemente en presencia de ADN transformante extraido de B. subtilis PB 19, prototrofo, posibilitando su empleo como celulas receptoras en estudios posteriores