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1.
Braz. J. Pharm. Sci. (Online) ; 58: e20101, 2022. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1403732

RESUMO

Abstract Ligustrazine is widely used for the treatment of cardiovascular diseases in traditional Chinese medication. It has been reported that Ligustrazine decreases the concentration of intracellular calcium ions (Ca2+); however, the underlying mechanism remains unknown. In the present study, the effect of Ligustrazine on adenosine diphosphate (ADP)-induced platelet aggregation was evaluated using a turbidimetric approach. The changes in concentration of intracellular Ca2+ stimulated by ADP was measured using fluo-4, a fluorescent Ca2+ indicator dye. The mRNA expression of stromal interaction molecule l (STIM1) and Orai1, calcium sensor, was determined using real-time PCR. In addition, the protein expression of STIM1, Orai1, and serum/glucocorticoid-regulated protein kinase 1 (SGK1) was determined using Western blot analysis. The data demonstrated that Ligustrazine significantly suppressed platelet aggregation in a dose-dependent manner and reduced the concentration of intracellular Ca2+ triggered by ADP. Our data showed that Ligustrazine treatment inhibited the expression of STIM1 and Orai1 induced by ADP at both mRNA and protein levels, and suppressed the protein expression of SGK1. Taken together, our data indicated that Ligustrazine suppressed platelet aggregation by partly inhibiting the activities of calcium sensors, thereby suggesting that Ligustrazine may be a promising candidate for the treatment of platelet aggregation.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Proteínas Quinases , Doenças Cardiovasculares/patologia , Agregação Plaquetária , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Western Blotting/métodos , Cálcio/agonistas , Povo Asiático/classificação , Moléculas de Interação Estromal
2.
Electron. j. biotechnol ; 48: 53-61, nov. 2020. ilus, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1254710

RESUMO

BACKGROUND: Alzheimer's disease (AD) is a chronic, progressive neurodegenerative disease. Recent studies have reported the close association between cognitive function in AD and purinergic receptors in the central nervous system. In the current study, we investigated the effect of CD73 inhibitor α, ß-methylene ADP (APCP) on cognitive impairment of AD in mice, and to explore the potential underlying mechanisms. RESULTS: We found that acute administration of Aß1­42 (i.c.v.) resulted in a significant increase in adenosine release by using microdialysis study. Chronic administration of APCP (10, 30 mg/kg) for 20 d obviously mitigated the spatial working memory impairment of Aß1­42-treated mice in both Morris water maze (MWM) test and Y-maze test. In addition, the extracellular adenosine production in the hippocampus was inhibited by APCP in Aß-treated mice. Further analyses indicated expression of acetyltransferase (ChAT) in hippocampus of mice of was significantly reduced, while acetylcholinesterase (AChE) expression increased, which compared to model group. We observed that APCP did not significantly alter the NLRP3 inflammasome activity in hippocampus, indicating that anti-central inflammation seems not to be involved in APCP effect. CONCLUSIONS: In conclusion, we report for the first time that inhibition of CD73 by APCP was able to protect against memory loss induced by Aß1­42 in mice, which may be due to the decrease of CD73-driven adenosine production in hippocampus. Enhancement of central cholinergic function of the central nervous system may also be involved in the effects of APCP.


Assuntos
Animais , Masculino , Camundongos , Difosfato de Adenosina/análogos & derivados , Doenças Neurodegenerativas/prevenção & controle , Hipocampo , Nucleotidases/antagonistas & inibidores , Acetilcolinesterase , Difosfato de Adenosina/administração & dosagem , Doença de Alzheimer/prevenção & controle , Teste do Labirinto Aquático de Morris , Camundongos Endogâmicos C57BL
3.
Con-ciencia (La Paz) ; 8(2): 21-34, 2020. ilus.
Artigo em Inglês | LIBOCS, LILACS | ID: biblio-1147979

RESUMO

INTRODUCCIÓN: el canal de Potasio sensible a ATP (canal KATP) regula la producción de Insulina por células ß pancreáticas. La Glibenclamida (GBM) (fármaco antidiabético) y el ATP actúan como inhibidores de este canal, mientras que el ADP lo activa. El canal KATP es un octámero constituido por 4 subunidades centrales Kir6.2 que forman el poro y 4 subunidades externas de regulación SUR1. OBJETIVO: determinar la dinámica estructural entre las conformaciones abierta y cerrada del canal KATP en células pancreáticas. MÉTODO: análisis estructural comparativo de diferentes estructuras cristalográficas del canal KATP de células pancreáticas humanas empleando el software Chimera v1.11.2 RESULTADOS: La subunidad Kir6.2 presenta un dominio de unión a PIP2 (activador), una Hélice Interfacial (IFH) y un dominio N-terminal (KNtp). Por otro lado, la subunidad SUR1 que contiene el sitio de unión a la GBM, tiene 2 Dominios de Unión a Nucleótidos (NBD1/2), un bucle M5-Lh1 y un Motivo de Lazo formado por la interface entre el Dominio Trans-membrana 0 y el Bucle 0 (TMD0-L0). Los resultados del análisis dinámico estructural mediante herramientas bioinformáticas, indican que estas regiones participan activamente en los cambios conformacionales que dan lugar al cierre (inhibición) o apertura (activación) de este canal. CONCLUSIÓN: El estudio de la dinámica de activación e inhibición de los canales KATP es imprescindible para la evaluación, descubrimiento y/o diseño de nuevos compuestos naturales, que como la GBM, puedan promover la secreción de Insulina para coadyuvar o mejorar el tratamiento de pacientes diabéticos.


INTRODUCTION: the ATP-sensitive Potassium channel (KATP channel) regulates insulin production by pancreatic ß cells. Glibenclamide (GBM) (antidiabetic drug) and ATP act as inhibitors of this channel, while ADP activates it. The KATP channel is an octamer consisting of 4 central Kir6.2 subunits that form the pore and 4 external regulation subunits SUR1. OBJECTIVE: to determine the structural dynamics between the open and closed conformations of the KATP channel in pancreatic cells. METHOD: comparative structural analysis of different crystallographic structures of the KATP channel of human pancreatic cells using Chimera v1.11.2. RESULTS: the Kir6.2 subunit has a PIP2 binding domain (activator), an Interfacial Helix (IFH) and an N-terminal domain (KNtp). On the other hand, the SUR1 subunit that contains the GBM binding site, has 2 Nucleotide Binding Domains (NBD1/2), an M5-Lh1 loop and a Lasso Motif formed by the interface between the Trans-membrane Domain 0 and Loop 0 (TMD0-L0). The results of the dynamic structural analysis using bioinformatics tools indicate that these regions participate actively in the conformational changes that lead to the closure (inhibition) or opening (activation) of this channel. CONCLUSION: the study of the dynamics of activation and inhibition of the KATP channels is essential for the evaluation, discovery and/or design of new natural compounds, which like GBM, can promote insulin secretion to aid or improve the treatment of diabetic patients.


Assuntos
Humanos , Software , Canais de Potássio , Difosfato de Adenosina , Pacientes , Insulina
4.
Rev. med. Risaralda ; 25(2): 77-82, jul.-dic. 2019. tab
Artigo em Espanhol | LILACS, COLNAL | ID: biblio-1115750

RESUMO

Resumen Introducción: La fisiopatología de la preeclampsia no está dilucidada por completo, diferentes índices plaquetarios dentro de los que se incluye el ancho de distribución plaquetaria (ADP) podrían ser utilizado para predecir la severidad en esta condición. Objetivo: Analizar el comportamiento del ADP en el desarrollo de severidad en preeclampsia en mujeres atendidas en la unidad de medicina materno-fetal del Hospital Simón Bolívar de Bogotá, Colombia. Materiales y métodos: Estudio de corte trasversal analítico en 105 pacientes con trastorno hipertensivo asociado al embarazo, preeclampsia y preeclampsia severa. Se analizó el comportamiento del ADP en una población de mujeres hipertensas con preeclampsia mediante una curva de análisis ''Receiver Operating Characteristic'' (ROC) para estimar la sensibilidad, tasa de falsos positivos, razón de probabilidad positiva y negativa de la prueba como marcador de desarrollo de severidad Resultados: El ADP tuvo un ascenso significativo mayor en pacientes donde su progresión de enfermedad desarrollaron características de severidad. En la curva ROC el área bajo la curva para del ADP como predictor de severidad en la preeclampsia fué de 0.68 Conclusión: El ADP es un índice plaquetario que aumentó significativamente en las mujeres con preeclampsia con características de severidad. El ADP podría ser un marcador para la predicción de severidad de la preeclampsia.


Abstract Introduction: The pathophysiology of preeclampsia is not completely elucidated. Different platelet indices, including the platelet distribution width (PDW), could be used to predict the severity of this condition. Objective: To analyze the behavior of PDW in the severity development of preeclampsia in women treated in the maternal-fetal medicine unit of Hospital Simón Bolívar in Bogotá, Colombia. Materials and methods: This is an analytical cross-sectional study in 105 patients with hypertensive disorder associated with pregnancy, preeclampsia and severe preeclampsia. We analyzed the behavior of PDW in a population of hypertensive women with preeclampsia using a curve of analysis '' Receiver Operating Characteristic '' (ROC) to estimate the sensitivity, false positive rate, positive and negative likelihood ratio of the test as a marker of development of severity Results: PDW had a higher significant increase in patients where their disease progression developed severity characteristics. In the ROC curve, the area under the curve for PDW as a predictor of severity in preeclampsia was 0.68. Conclusion: PDW is a platelet index that increased significantly in women with preeclampsia with severity characteristics. PDW could be a marker for the prediction of severity of preeclampsia.


Assuntos
Humanos , Feminino , Gravidez , Pré-Eclâmpsia , Toxemia , Transtornos Plaquetários , Perinatologia , Difosfato de Adenosina , Estudos Transversais , Progressão da Doença , Área Sob a Curva
5.
Vitae (Medellín) ; 23(2): 119-123, 2016. Ilustraciones
Artigo em Inglês | LILACS, COLNAL | ID: biblio-988472

RESUMO

Background: Some species of the Lauraceae family are known to produce secondary metabolites that have antiplatelet properties. Studies on the leaves of Nectandra amazonum Nees. have shown antiaggregant activity but the bark of this species has not been studied. Objectives: To assess the antiplatelet effect of the ethanolic fraction obtained from the bark of Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] applying the "Born" turbidimetric method. Methods: The screening test compared the effects of a fraction of N. amazonum (0.1 mg/mL), acetylsalicylic acid (ASA, 0.5 mM, as reference standard) and dimethylsulphoxide (DMSO, 0.1%, as control) on human platelets stimulated with adenosine diphosphate (ADP, 2 µM), epinephrine (EPI, 1 uM (one micromolar)), collagen (COLL, 1 µg/mL) and arachidonic acid (AA, 0.2 mg/mL). Subsequently, the study focused on determining the antiaggregant potency of the N. amazonum fraction through concentration - response curves (from 1 µg/mL to 0.4 mg/ mL), obtaining pIC50 (-log IC50) values against the platelet agonists. Results: Control platelets attained the highest percentage values of aggregation (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, and 77% ADP). The N. amazonum fraction significantly reduced the aggregation effects (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), with values close to those obtained with ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). According to concentration - response curves, the pIC50 values of the ethanolic fraction indicated the following order of potency: AA, 4.90 > ADP, 4.51 > COLL, 4.33 > EPI, 3.85. Conclusions: These results suggest that the N. amazonum Nees. ethanolic fraction elicited antiplatelet effects mainly related to the inhibition of the arachidonic acid pathway.


Antecedentes: Algunas especies de la familia Lauraceae poseen metabolitos secundarios que ejercen efectos antiplaquetarios. Estudios de las hojas de Nectandra amazonum Nees. han mostrado esa actividad, pero no se conoce sobre las propiedades antiagregantes de su corteza. Objetivos: Evaluar el efecto antiagregante plaquetario de la fracción etanólica obtenida de la corteza de Nectandra amazonum Nees. [N.V. "laurel amarillo", Lauraceae] aplicando el método turbidimétrico de Born. Métodos: En el tamizaje antiagregante se comparó la fracción de N. amazonum (0,1 mg/mL) con ácido acetil salicílico (ASA 0,5 mM, como estándar de referencia) y dimetilsulfóxido (DMSO, 0,1%, como control) en plaquetas humanas estimuladas con adenosin difosfato (ADP, 2 µM), epinefrina (EPI, 1 uM (uno micromolar)), colágeno (COLL, 1 µg/mL) y ácido araquidónico (AA, 0,2 mg/mL). Posteriormente, el estudio se enfocó en la determinación de la potencia antiagregante de la fracción mediante curvas de concentración - respuesta (desde 1 µg/mL hasta 0,4 mg/mL) para obtener los valores respectivos de pIC50 (-log CI50). Resultados: En el grupo control se alcanzaron altos valores de agregación plaquetaria (96% AA, 89% EPI, 85% COLL, 77% ADP). La fracción de N. amazonum redujo significativamente la agregación (6% AA, 45% EPI, 10% COLL, 21% ADP), con valores próximos a los obtenidos con ASA (17% AA, 21% EPI, 10% COLL, 20% ADP). De acuerdo con las curvas de concentración ­ respuesta, los valores de pIC50 arrojaron el siguiente orden de potencia: AA, 4,90 > ADP, 4,51 > COLL, 4,33 > EPI, 3,85. Conclusiones: Estos resultados sugieren que la fracción etanólica de N. amazonum Nees ejerce efectos antiplaquetarios relacionados especialmente con la cascada metabólica del ácido araquidónico.


Assuntos
Humanos , Agregação Plaquetária , Lauraceae , Epinefrina , Difosfato de Adenosina , Colágeno , Ácido Araquidônico
6.
Acta bioquím. clín. latinoam ; 46(4): 656-659, dic. 2012. graf, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-671973

RESUMO

La agregación por transmisión de luz (ATL) es el método más usado por laboratorios clínicos y de investigación para evaluar la función plaquetaria y es considerado actualmente el estándar de oro; no obstante, la ATL aún no es un método estandarizado, pese a los esfuerzos de organismos internacionales como la International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Organismos regulatorios recomiendan que cada laboratorio clínico determine e informe sus intervalos de referencia (IR) para cada agonista que utiliza. Se presenta los IR de este laboratorio en la determinación de agregación plaquetaria mediante ALT utilizando adenosin difosfato (ADP), colágeno y adrenalina como agonistas. Para ello se diseñó un estudio de corte transversal sobre una muestra a conveniencia de voluntarios(as) aparentemente sanos; se usó un agregómetro óptico y se emplearon los siguientes agonistas y concentraciones finales: ADP 5 µM, colágeno 2 µM y adrenalina 10 µM. Se definió IR como los percentiles 2,5 y 97,5 (P2,5 y P97,5) del Porcentaje de Agregación Plaquetaria Máxima APM%. Participaron 63 individuos, rango de edad 18 a 66 años, 79,4% sexo femenino. Los valores de APM% fueron: ADP P2,5=49% y P97,5=87%; colágeno P2,5=43% y P97,5=86%; adrenalina P2,5=42% y P97,5=85%. Atendiendo a recomendaciones internacionalmente aceptadas, se presentan los IR de APM (%) por el método ATL en este laboratorio (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), lo que permite al clínico basar sus decisiones en evidencia válida y pertinente.


Platelet aggregation tests by means of light transmission (LTA), the current gold standard, are the most commonly used methods used to evaluate platelet function at clinical and research laboratories. However, LTA has not been determinastandardized despite the work from international organizations such as the International Society of Thrombosis and Homeostasis (ISTH). Regulatory agencies recommend that each clinical laboratory establishes and informs its own Reference Internal (RI) for all agonists they use. RI are presented for our laboratory using the following agonists: diphosphate (ADP), collagen y adrenaline and the pertaining methodology. To assess our RI for platelet aggregation tests by LTA, a cross-sectional study was designed with a convenience sample of healthy volunteer men and women using an optical aggregometer with the following agonist and final concentration: adenosine diphosphate (ADP) 5 µM, collagen 2 µM and adrenaline 10 µM. The RIs were defined as Percentiles 2.5 (P2,5) and 97.5 (P97.5) of the percentage of maximal aggregation (%MA). 63 subjects participate, age range 18 to 66,79.4% were female. The IR for %MA were: ADP P2,5=49% and P97.5=87%; collagen P2,5=43% and P97.5=86%; adrenaline P2,5=42% and P97.5=85%. In agreement with international accepted recommendation guidelines, RIs for the %MA values were presented by LTA done in our clinical laboratory (ASCARDIO, Barquisimeto, Lara State, Venezuela), that allows physicians to base their clinical decision process on valid and pertinent information.


A agregometria por transmissão de luz (ATL) é o método mais utilizado pelos laboratórios clínicos e de pesquisa para avaliar a função plaquetária e é atualmente considerada o padrão-ouro; no entanto, a ATL ainda não é um método padronizado, apesar dos esforços das agências internacionais como a International Society of Thrombosis and Hemostasis (ISTH). Agências reguladoras recomendam que cada laboratório clínico determine e comunique seus intervalos de referência (IR) para cada agonista utilizado. São apresentados o IR de nosso laboratório para determinar a agregação plaquetária através de ALT usando Difosfato de Adenosina (ADP), Colágeno e Adrenalina como agonistas. Para isso foi elaborado um estudo de corte transversal em uma amostra de conveniência de voluntários(as) aparentemente saudáveis , foi usado agregômetro ótico e foram utilizados os seguintes agonistas e concentrações finais: 5µ M ADP, Colágeno 2µM e Adrenalina 10µM. Definiu-se o IR com os percentis 2,5 e 97.5 (P2,5 e P97.5) do Percentual de Agregação Plaquetária Máxima APM%. Participaram 63 indivíduos, na faixa etária 18-66 anos, 79,4% do sexo feminino. Os valores de APM% foram: ADPP2,5=49% e P97.5=87%; Colágeno P2,5=43% e P99,5=86%, Adrenalina P2,5=42% e P97.5=85%. Atendendo às recomendações aceitas internacionalmente, apresentam-se os IR de APM% pelo método ATL em nosso laboratório (ASCARDIO, Barquisimeto, Venezuela), o que permite ao médico basear as suas decisões em evidências válidas e pertinentes.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Agregação Plaquetária/fisiologia , Difosfato de Adenosina/agonistas , Agonistas Colinérgicos/sangue , Transtornos Hemorrágicos/diagnóstico , Valores de Referência
7.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 23(2): 190-196, abr.-jun. 2008. ilus, graf
Artigo em Inglês, Português | LILACS | ID: lil-492970

RESUMO

OBJETIVO: Aplicação de energia por ultra-som pode facilitar a remoção da placa ateromatosa, mas o efeito desse procedimento em vasos próximos ainda é matéria de estudos experimentais. MÉTODOS: Para determinar se a energia ultra-sônica compromete a produção de óxido nítrico, segmentos de artérias coronárias caninas foram expostos a baixos (0-10 W) e altos (25 W) níveis de energia por 15 segundos, utilizando-se protótipo de aparelho para a realização de endarterectomia. Após exposição, segmentos das artérias coronarianas foram estudados em organ chambers. Para os ensaios farmacológicos foram utilizadas as seguintes drogas:difosfato de adenosina (ADP), acetilcolina (Ach) e fluoreto de sódio (NaF) para a avaliação do relaxamento dependente do endotélio. O nitroprussiato de sódio (NPS) e o isoproterenol foram utilizados para a avaliação do relaxamento independente do endotélio. RESULTADOS: A aplicação de alta energia ultra-sônica comprometeu o relaxamento dependente do endotélio induzido por ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) e NaF (0,5 -9,5 mM) em artérias coronarianas epicárdicas. Entretanto, baixos valores de energia ultra-sônica não alteraram o relaxamento dependente do endotélio (nem o relaxamento máximo e nem a EC50) induzido pelos mesmos agonistas. O relaxamento da musculatura lisa vascular induzido por isoproterenol (10-9 - 10-5 M) ou NPS (10-9 - 10-6 M) não foi comprometido, tanto por baixos, quanto por altos níveis de energia ultra-sônica. CONCLUSÃO: Os experimentos demonstram que altas energias ultra-sônicas alteram a função endotelial. Entretanto, o ultra-som não altera a habilidade de relaxamento da musculatura lisa vascular de artérias caninas epicárdicas.


OBJECTIVE: Application of ultrasound energy by an endarterectomy probe can facilitate the removal of atheromatous plaque, but the effect of this procedure on surrounding vessel structure and function is still a matter of experimental investigations. METHODS: To determine whether ultrasound energy impairs the production of nitric oxide or damages vascular smooth muscle function, isolated canine epicardial coronary artery segments were exposed to either high (25 W) or low (0-10 W) ultrasonic energy outputs, for 15 seconds, using an endarterectomy device prototype. After exposure, segments of epicardial coronary artery were studied in organ chambers. The following drugs were used: adenosine diphosphate (ADP), acetylcholine (Ach) and sodium fluoride (NaF) to study endothelium-dependent relaxation and sodium nitroprusside (SNP) and isoproterenol to evaluate endothelium-independent relaxation. RESULTS: Application of high ultrasonic energy power impaired endothelium-dependent relaxation to ADP (10-9 - 10-4 M), Ach (10-9 - 10-4 M) and NaF (0.5 - 9.5 mM) in epicardial coronary arteries. However, low ultrasound energy output at the tip of the probe did not alter the endothelium-dependent relaxation (either maximal relaxation or EC50) to the same agonists. Vascular smooth muscle relaxation to isoproterenol (10-9 - 10-5 M) or SNP (10-9 - 10-6 M) was unaltered following exposure to either low or high ultrasonic energy outputs. CONCLUSION: These experiments currently prove that ultrasonic energy changes endothelial function of epicardial coronary arteries at high power. However, ultrasound does not alter the ability of vascular smooth muscle of canine epicardial coronary arteries to relax.


Assuntos
Animais , Cães , Feminino , Masculino , Endotélio Vascular/lesões , Músculo Liso Vascular/lesões , Óxido Nítrico/biossíntese , Terapia por Ultrassom/efeitos adversos , Ultrassonografia de Intervenção/efeitos adversos , Análise de Variância , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Vasos Coronários/lesões , Vasos Coronários/metabolismo , Endarterectomia/métodos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/fisiopatologia , Isoproterenol/farmacologia , Modelos Animais , Músculo Liso Vascular/efeitos dos fármacos , Músculo Liso Vascular/fisiopatologia , Nitroprussiato/farmacologia , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Ultrassonografia de Intervenção/métodos , Vasodilatação/efeitos dos fármacos , Vasodilatação/fisiologia
8.
Rev. chil. cardiol ; 23(4): 337-342, oct.-dic. 2004. tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-419192

RESUMO

Introducción: La aspirina se usa frecuentemente para la prevención y tratamiento de eventos isquémicos cardiovasculares. Estudios en población anglosajona han mostrado que entre 5-9 por ciento de los pacientes presentan resistencia total a la acción antiplaquetaria de aspirina. Objetivos: Conocer la prevalencia de resistencia a aspirina en enfermos cardiovasculares chilenos. Evaluar factores asociados a la resistencia. Pacientes y Métodos: Se estudian 68 pacientes (21 mujeres, ± 10 años) con enfermedades cardiovasculares estables usuarios de aspirina (100-325 mg/día). Se evalúan variables clínicas y de coagulación básica. Se estudió la agregación plaquetaria con agregómetro óptico en plasma rico en plaquetas con 3 agonista. Se definió Resistencia Total a la aspirina como. 1) agregación (20 por ciento con ácido araquidónico y 2) agregación > 70 por ciento con ADP y/o colágeno. Resultados: Siete pacientes (10,3 por ciento, IC 95 por ciento = 4,2-20,1 por ciento) cumplieron ambos criterios y se consideraron como resistentes totales, 34 (50 por ciento, IC 95 por ciento = 37,6-62,4 por ciento) cumplieron con sólo un criterio y se consideraron como resistentes parciales, y los 27 pacientes restantes (39,7 por ciento, IC 95 por ciento = 28,0-52,3 por ciento) no cumplieron con ninguno de los criterios y se clasificaron como respondedores a AAS. Hubo una mayor frecuencia de fumadores (55,6 vs 23,7 por ciento) en los pacientes con Resistencia Total, pero no alcanzó significación estadística (p = 0,06). Conclusiones: La mayoría de los pacientes cardiovasculares presentan algún grado de resistencia al AAS y un 10,3 por ciento presentan Resistencia Total. No encontramos diferencias significativas entre los los pacientes con y sin resistencia total a aspirina.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , Aspirina/uso terapêutico , Resistência a Medicamentos , Doenças Cardiovasculares/tratamento farmacológico , Difosfato de Adenosina , Ácido Araquidônico , Agregação Plaquetária , Aspirina/administração & dosagem , Aspirina/agonistas , Aspirina/sangue , Chile , Colágeno , Relação Dose-Resposta a Droga , Tempo de Sangramento/métodos
9.
Braz. j. med. biol. res ; 34(10): 1247-1256, Oct. 2001. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-299840

RESUMO

Sertoli cells have been shown to be targets for extracellular purines such as ATP and adenosine. These purines evoke responses in Sertoli cells through two subtypes of purinoreceptors, P2Y2 and P A1. The signals to purinoreceptors are usually terminated by the action of ectonucleotidases. To demonstrate these enzymatic activities, we cultured rat Sertoli cells for four days and then used them for different assays. ATP, ADP and AMP hydrolysis was estimated by measuring the Pi released using a colorimetric method. Adenosine deaminase activity (EC 3.5.4.4) was determined by HPLC. The cells were not disrupted after 40 min of incubation and the enzymatic activities were considered to be ectocellularly localized. ATP and ADP hydrolysis was markedly increased by the addition of divalent cations to the reaction medium. A competition plot demonstrated that only one enzymatic site is responsible for the hydrolysis of ATP and ADP. This result indicates that the enzyme that acts on the degradation of tri- and diphosphate nucleosides on the surface of Sertoli cells is a true ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5) (specific activities of 113 + or - 6 and 21 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for ATP and ADP, respectively). The ecto-5'-nucleotidase (EC 3.1.3.5) and ectoadenosine deaminase activities (specific activities of 32 + or - 2 nmol Pi mg-1 min-1 for AMP and 1.52 + or - 0.13 nmol adenosine mg-1 min-1, respectively) were shown to be able to terminate the effects of purines and may be relevant for the physiological control of extracellular levels of nucleotides and nucleosides inside the seminiferous tubules


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , 5'-Nucleotidase , Nucleotídeos de Adenina , Células de Sertoli , Adenosina Desaminase , Difosfato de Adenosina , Monofosfato de Adenosina , Trifosfato de Adenosina , Cromatografia Líquida de Alta Pressão , Hidrólise , Ratos Wistar
10.
Arq. bras. cardiol ; 75(2): 97-105, Aug. 2000. tab, graf
Artigo em Português, Inglês | LILACS | ID: lil-269929

RESUMO

OBJECTIVE: Studies have demonstrated that methylxanthines, such as caffeine, are A1 and A2 adenosine receptor antagonists found in the brain, heart, lungs, peripheral vessels, and platelets. Considering the high consumption of products with caffeine in their composition, in Brazil and throughout the rest of the world, the authors proposed to observe the effects of this substance on blood pressure and platelet aggregation. METHODS: Thirteen young adults, ranging from 21 to 27 years of age, participated in this study. Each individual took 750mg/day of caffeine (250mg tid), over a period of seven days. The effects on blood pressure were analyzed through the pressor test with handgrip, and platelet aggregation was analyzed using adenosine diphosphate, collagen, and adrenaline. RESULTS: Diastolic pressure showed a significant increase 24 hours after the first intake (p<0.05). This effect, however, disappeared in the subsequent days. The platelet aggregation tests did not reveal statistically significant alterations, at any time during the study. CONCLUSION: The data suggest that caffeine increases diastolic blood pressure at the beginning of caffeine intake. This hypertensive effect disappears with chronic use. The absence of alterations in platelet aggregation indicates the need for larger randomized studies.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pressão Sanguínea/efeitos dos fármacos , Cafeína/efeitos adversos , Estimulantes do Sistema Nervoso Central/efeitos adversos , Inibidores de Fosfodiesterase/efeitos adversos , Agregação Plaquetária/efeitos dos fármacos , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Monofosfato de Adenosina/metabolismo , Análise de Variância , Colágeno/efeitos adversos , Epinefrina/efeitos adversos , Hipertensão/induzido quimicamente , Receptores Purinérgicos P1/antagonistas & inibidores
11.
Braz. j. med. biol. res ; 33(7): 725-9, July 2000. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-262672

RESUMO

Potato apyrase, a soluble ATP-diphosphohydrolase, was purified to homogeneity from several clonal varieties of Solanum tuberosum. Depending on the source of the enzyme, differences in kinetic and physicochemical properties have been described, which cannot be explained by the amino acid residues present in the active site. In order to understand the different kinetic behavior of the Pimpernel (ATPase/ADPase = 10) and Desirée (ATPase/ADPase = 1) isoenzymes, the nucleotide-binding site of these apyrases was explored using the intrinsic fluorescence of tryptophan. The intrinsic fluorescence of the two apyrases was slightly different. The maximum emission wavelengths of the Desirée and Pimpernel enzymes were 336 and 340 nm, respectively, suggesting small differences in the microenvironment of Trp residues. The Pimpernel enzyme emitted more fluorescence than the Desirée apyrase at the same concentration although both enzymes have the same number of Trp residues. The binding of the nonhydrolyzable substrate analogs decreased the fluorescence emission of both apyrases, indicating the presence of conformational changes in the neighborhood of Trp residues. Experiments with quenchers of different polarities, such as acrylamide, Cs+ and I- indicated the existence of differences in the nucleotide-binding site, as further shown by quenching experiments in the presence of nonhydrolyzable substrate analogs. Differences in the nucleotide-binding site may explain, at least in part, the kinetic differences of the Pimpernel and Desirée isoapyrases.


Assuntos
Difosfato de Adenosina/metabolismo , Apirase/metabolismo , Nucleotídeos/metabolismo , Solanum tuberosum/enzimologia , Apirase/química , Apirase/isolamento & purificação , Césio/química , Césio/metabolismo , Iodo/química , Iodo/metabolismo , Isoenzimas/química , Solanum tuberosum/química , Espectrometria de Fluorescência
13.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 12(1): 68-76, jan.-mar. 1997. ilus, graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-193722

RESUMO

Estudos prévios demonstraram que o comprometimento da produçäo de EDRF/NO mediada por receptores, após isquemia global e reperfusäo, possa ser devido a uma disfunçäo de G-proteínas que liga os receptores da célula endotelial à via da síntese de EDRF/NO. O presente trabalho experimental sugere que a criocardioplegia cristalóide, associada a hipotermia tópica, previne ou pode reverter, em parte, a disfunçäo endotelial nas mesmas condiçöes. Mais estudos seräo necessários para conclusöes mais definitivas, pois as análises estatísticas mais acuradas sugeriram aumento da amostragem. Este detalhe talvez seja devido às grandes dificuldades de uniformizaçäo relacionada a este tipo de experimentos. Além disso, demonstrou-se pela primeira vez que a hipotermia, por si só, pode estimular a liberaçäo de EDRF/NO pelo endotélio vascular. Isto sugere que o endotélio possa ser um importante sensor de mudanças da temperatura sangüínea e tem importantes implicaçöes para o entendimento da fisiologia da CEC e dos mecanismos locais de auto-regulaçäo.


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Cães , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular , Circulação Extracorpórea , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Hipotermia Induzida , Ionóforos/farmacologia , Isoproterenol/farmacologia , Isquemia Miocárdica , Reperfusão Miocárdica , Nitroprussiato/farmacologia , Parada Cardíaca Induzida/métodos , Soluções Cardioplégicas/farmacologia , Traumatismo por Reperfusão/prevenção & controle , Fosfolipases Tipo C/farmacologia , Relação Dose-Resposta a Droga , Relaxamento
14.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 11(2): 115-22, abr.-jun. 1996. ilus, graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-177628

RESUMO

O presente ensaio experimental estudou o efeito da infusao de soluçao cardioplégica cristalóide a altas pressoes sobre a funçao endotelial de artérias epicárdicas de caes. Nao se encontraram alteraçoes a nível de receptores (curvas dose-respostas à ACH e ADP; da transduçao do sinal iniciado nos receptores/sitema de G-proteínas (fluoreto de sódio) e nos processos intracelulares da produçao de EDRF/NO (fosfolipase C e ionóforo do cálcio A23187). A funçao da musculatura lisa vascular nao foi afetada quando se analisaram as respostas relaxantes (nitroprussiato de sódio e isoproterenol) e contráteis (KCI e prostaglandina 2alfa). Estes achados permitem as seguintes consideraçoes especulativas: a) O barotrauma produzido pela infusao da cardioplegia cristalóide a altas pressoes ocorreria apenas em circulaçoes coronarianas previamente doentes? b) Uma vez que as infusoes duraram de 2 a 3 minutos, seria o barotrauma coronariano um fenômeno dependente do tempo de infusao? c) Para que ocorra o barotrauma seriam necessários níveis mais elevados de Potássio? d) Questionara existência do fenômeno do barotrauma coronariano produzido pela infusao de soluçoes cadioplégicas pelo menos nas condiçoes experimentais utilizadas. e) A metodologia empregada estuda apenas as reatividades vasculares de artérias coronarias epicárdicas. estas artérias seriam menos sensíveis aos efeitos da pressao de infusao da cardioplegia do que a microcirculaçao coronariana? f) Seria a circulaçao coronária do cao menos sensível a altas pressoes do que do homem? Estas observaçoes experimentais sugerem que a infusao de cardioplegia cristalóide, moderadamente hipocalêmica, a altas pressoes em um tempo de 2 a 3 minutos, nao interfere com a produçao de EDRF/NO pelo endotélio de coronárias epicárdicas do cao.


Assuntos
Animais , Cães , Barotrauma , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Parada Cardíaca Induzida/métodos , Pericárdio/efeitos dos fármacos , Soluções Cardioplégicas/farmacologia , Acetilcolina/farmacologia , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Cálcio/farmacologia , Cloreto de Potássio/farmacologia , Dinoprosta/farmacologia , Endotélio Vascular/fisiologia , Fatores Relaxantes Dependentes do Endotélio , Fluoreto de Sódio/farmacologia , Ionóforos/farmacologia , Isoproterenol/farmacologia , Óxido Nítrico , Nitroprussiato/farmacologia , Pericárdio/lesões , Pressão/efeitos adversos , Fosfolipases Tipo C/farmacologia
15.
Biol. Res ; 29(1): 31-46, 1996.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-228547

RESUMO

Photoaffinity labeling is a special type of chemical modification, where the label is activated by the action of light. This article presents the general principles and limitations of this technique, its application to the study of Micrococcus luteus ATPase and the use of photoaffinity crosslinking to probe the structure of this enzyme


Assuntos
Difosfato de Adenosina/química , Trifosfato de Adenosina/química , Marcadores de Afinidade/química , Ativação Enzimática/fisiologia , Radicais Livres/química , Ligantes , Micrococcus luteus/enzimologia , Peptídeos/química , Conformação Proteica , ATPases Translocadoras de Prótons/química , ATPases Translocadoras de Prótons/ultraestrutura
16.
Rev. bras. alergia imunopatol ; 18(6): 223-7, nov.-dez. 1995. tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-163277

RESUMO

As plaquetas podem estar envolvidas na fisiopatologia da asma liberando mediadores inflamatórios e/ou espasmogênicos, bem como interagindo com outras células inflamatórias. O objetivo deste trabalho foi investigar a agregaçao plaquetária de crianças com asma crônica grave. Foram selecionadas 16 crianças entre 7 e 15 anos de idade, tratadas com brocodilatadores inalatórios e beclometasona (no máximo 750 mug/dia). Doadores de sangue foram selecionados como controles-sadios. Plasma em plaquetas (PRP) e plasma pobre em plaquetas (PPP) foram preparados de acordo com procedimento padrao. A agregaçao de plaquetas foi estudada em agregômetro Payton de dois canais, calibrados com PRP (0 por cento) e PPP (100 por cento) segundo a transmitância de luz. Os estímulos utilizados para induzir a agregaçao plaquetária foram adrenalina (1-30 muM) ou adenosina bifosfato (ADP,1-30 muM). Os resultados foram expressos como percentagem da transmitância máxima. As medianas da agregaçao plaquetária dos pacientes foram respectivamente (adrenalina/ADP 1,3,10 e 30 muM): 0/0, 30/48/41/52, 45/58. As medianas da agregaçao plaquetária dos controles-sadios foram respectivamente (adrenalina/ADP 1,3,10 e 30 muM): 0/0, 12/44, 29/65, 54/74. A análise estatística demontra que a agregaçao de plaquetas dos pacientes foi significativamente menor que a de controles-sadios quando o estímulo foi ADP nas concentraçoes 10 e 30 muM. Em contrapartida, frente aos estímulos adrenalina (1-30 muM) ou mesmo ADP em concentraçoes menores (1-3 muM), a agregaçao de plaquetas dos pacientes foi similar a de controles-sadios. Concluímos que plaquetas de crianças com asma crônica grave sao hiporresponsivas quando o estímulo é ADP em altas concentraçoes. Os mecanismos bioquímicos e molecular envolvidos nesse fenômeno encontram-se sob investigaçao.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Criança , Adolescente , Agregação Plaquetária/fisiologia , Asma/fisiopatologia , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Asma/sangue , Doença Crônica , Epinefrina/efeitos adversos
18.
Braz. j. med. biol. res ; 27(9): 2163-7, Sept. 1994. graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-144468

RESUMO

1. In platelet rich plasma (PRP), chondroitin 4-sulfate release from platelets occurred after stimulation with ADP (5µM), collagen (5-10µM). Release started within 60 s and maximum release (0.7-2.0 mg/l) was reached within 180 s. TXA2 formation and dense granule release reached a maximum within 90 s after stimulation. 2. Using washed platelets (1.5 x 10**8 cells/ml), the platelet responses were faster. Release of chondroitin 4-sulfate and TXA2 started within 20-30 s after thrombin addition (100 mU/ml). Maximum release was reached within 60 s in both cases. Dense granule release started in the first 5 s of stimulation (34.6 ñ 12.4 por cento) reaching maximum secretion (74.4 ñ 8.7 por cento) within 60 s. 3. Our results demonstrate that maximal chondroitin 4-sulfate release occurs after the dense granule release reaction in both PRP and washed platelets. This observation suggests that chondroitin 4-sulfates is unlikely to be stored in the dense granules but may be stored in the alfagranules


Assuntos
Humanos , Plaquetas/química , Sulfatos de Condroitina/metabolismo , Grânulos Citoplasmáticos , Tromboxano A2/biossíntese , Difosfato de Adenosina/farmacologia , Agregação Plaquetária , Plaquetas/efeitos dos fármacos , Colágeno/farmacologia , Trombina/farmacologia , Fatores de Tempo
19.
Braz. j. med. biol. res ; 27(5): 1111-1115, May 1994.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-319815

RESUMO

ATP diphosphohydrolase (EC 3.6.1.5; apyrase) is an enzyme that can promote ATP and ADP hydrolysis to AMP plus inorganic phosphate and depends on divalent cations such as Ca2+ or Mg2+. In previous papers we described this enzyme in the synaptosomal fraction from the central and peripheral nervous system. The present report examines whether cadmium acetate could affect the in vitro activity of the enzyme in the synaptosomal fraction from the cerebral cortex of adult male Wistar rats. Cadmium (Cd2+), a heavy metal with neurotoxic effects, inhibited the enzyme in a concentration-dependent manner. All concentrations tested (0.05-1.0 mM) significantly inhibited the hydrolysis of both substrates (ATP and ADP), with the exception of 0.05 mM on ATP hydrolysis. The kinetic data indicate a noncompetitive inhibition between the cations Cd2+ and Ca2+.


Assuntos
Animais , Masculino , Ratos , Apirase , Cádmio , Córtex Cerebral/enzimologia , Sinaptossomos , Difosfato de Adenosina , Adenosina Trifosfatases , Trifosfato de Adenosina , Apirase , Hidrólise , Cinética , Ratos Wistar , Especificidade por Substrato
20.
Rev. bras. cir. cardiovasc ; 8(3): 195-214, jul.-set. 1993. graf
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-161194

RESUMO

Este estudo mostra alguns aspectos da funçäo endotelial relacionados, diretamente, com a cirurgia cardíaca: 1) Após isquemia miocárdica global seguida de reperfusäo, o endotélio coronariano perde a habilidade de expressar vasodilataçäo endotélio-dependente mediada por receptores, ao passo que o relaxamento endotélio-dependente mediado pelo cálcio ionóforo A23187 e a fosfolipasec C, que näo dependem de estimulaçäo de receptores, encontra-se inalterada. O relaxamento produzido pelo fluoreto de sódio, o qual atua através de G-proteína(s), encontra-se comprometido. Estes experimentos indicam que o comprometimento da produçäo de EDRF/NO mediada por receptores após a lesäo de reperfusäo possa ser devido a uma disfunçäo de G-proteínas que liga os receptores da célula endotelial à via da sínese de EDRF/NO; 2) Quarenta e cinco minutos de parada cardioplégica de coraçöes de cäes, pela soluçäo St. Thomas näo comprometem a produçäo de EDRF/NO em artérias epicárdicas coronárias. Estudos farmacológicos in vitro semelhantes, testando-se os efeitos da soluçäo UW, suportaram o conceito de que ela näo lesa o endotélio coronariano, sendo segura para a preservaçäo cardíaca durantes transplantes cardíacos; 3) Em segmentos de artérias coronárias, renais, femorais, e em segmentos de artéria pulmonar, a protamina induziu vasodilataçäo endotélio-dependente, mediada pela estimulaçäo da liberaçäo de EDRF/NO. Nas circulaçöes coronariana e sistêmica, ao contrário do que se verificou nos experimentos envolvendo a circulaçäo pulmonar, este efeito foi independente da presença de heparina; 4) Em 83 por cento dos ensaios biológicos, o efluente da AMI esquerda induziu um relaxamento maior do anel coronariano bioensaiado do que o efluente da AMI direita, por liberaçäo basal de EDRF/NO. Este inibe a adesividade e a agregaçäo plaquetárias e a aterogêne, contribuindo para os resultados superiores obtidos quando se utiliza esta artéria para a revascularizaçäo do miocárdi. Quando expostos à hipoxia, as atividades vasodilatadoras da AMI e da veia safena foram maiores. Esta acentuaçäo da vasodilataçäo causada pela hipóxia foi inibida pelo tratamento com a indometacina, e, rapidamente, revertida, quando se restabeleceu a normóxia.


Assuntos
Animais , Masculino , Feminino , Cães , Endotélio Vascular/fisiologia , Fatores Relaxantes Dependentes do Endotélio , Cirurgia Torácica , Acetilcolina/efeitos adversos , Difosfato de Adenosina/efeitos adversos , Análise de Variância , Soluções Cardioplégicas , Vasos Coronários/efeitos dos fármacos , Endotélio Vascular/efeitos dos fármacos , Circulação Extracorpórea , Fluoreto de Sódio/efeitos adversos , Ionóforos/efeitos adversos , Isoproterenol/efeitos adversos , Artéria Torácica Interna/efeitos dos fármacos , Veia Safena/efeitos dos fármacos , Fosfolipases Tipo C/efeitos adversos
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