Enzyme Inhibitory and Anti-cancer Properties of Moringa peregrina / Propiedades inhibidoras Enzimáticas y Anticancerígenas de la Moringa peregrina

Background: Moringa peregrina is widely used in the traditional medicine of the Arabian Peninsula to treat various ailments, because it has many pharmacologically active components with several therapeutic effects. Objective: This study aimed to investigate the inhibitory effect of Moringaperegrina seed ethanolic extract (MPSE) against key enzymes involved in human pathologies, such as angiogenesis (thymidine phosphorylase), diabetes (α-glucosidase), and idiopathic intracranial hypertension (carbonic anhydrase). In addition, the anticancer properties were tested against the SH-SY5Y (human neuroblastoma). Results: MPSE extract significantly inhibited α-glucosidase, thymidine phosphorylase, and carbonic anhydrase with half-maximal inhibitory concentrations (IC50) values of 303.1 ± 1.3, 471.30 ± 0.3, and 271.30 ± 5.1 µg/mL, respectively. Furthermore, the antiproliferative effect of the MPSE was observed on the SH-SY5Y cancer cell line with IC50 values of 55.1 µg/mL. Conclusions: MPSE has interesting inhibitory capacities against key enzymes and human neuroblastoma cancer cell line.

Antecedentes: La Moringa peregrina se utiliza ampliamente en la medicina tradicional de la Península Arábiga para tratar diversas dolencias, ya que posee numerosos componentes farmacológicamente activos con varios efectos terapéuticos. Objetivo: Este estudio tenía como objetivo investigar el efecto inhibidor del extracto etanólico de semillas de Moringaperegrina (MPSE) frente a enzimas clave implicadas en patologías humanas, como la angiogénesis (timidina fosforilasa), la diabetes (α-glucosidasa) y la hipertensión intracraneal idiopática (anhidrasa carbónica). Además, se comprobaron las propiedades anticancerígenas frente al SH-SY5Y (neuroblastoma humano). Resultados: El extracto de MPSE inhibió significativamente la α-glucosidasa, la timidina fosforilasa y la anhidrasa carbónica con concentraciones inhibitorias semimáximas (IC50) de 303,1 ± 1,3, 471,30 ± 0,3 y 271,30 ± 5,1 µg/mL, respectivamente. Además, se observó el efecto antiproliferativo del MPSE en la línea celular del cáncer SH-SY5Y con valores de IC50 de 55,1 µg/mL. Conclusiones: MPSE posee interesantes capacidades inhibitorias frente a enzimas clave y línea celular de neuroblastoma canceroso humano.

Antioxidant potential and α-glucosidase inhibitory activity of onion (Allium cepa L. ) peel and bulb extracts / Atividade antioxidante e potencial inibidor de glucosidase de extratos de casca e bulbo de cebola (Allium cepa) preparados por etanol e água

Abstract Allium cepa L. is a commonly consumed vegetable that belongs to the Amaryllidaceae family and contains nutrients and antioxidants in ample amounts. In spite of the valuable food applications of onion bulb, its peel and outer fleshy layers are generally regarded as waste and exploration of their nutritional and therapeutic potential is still in progress with a very slow progression rate. The present study was designed with the purpose of doing a comparative analysis of the antioxidant potential of two parts of Allium cepa, i.g., bulb (edible part) and outer fleshy layers and dry peels (inedible part). Moreover, the inhibitory effect of the onion bulb and peel extracts on rat intestinal α-glucosidase and pancreatic α-amylase of porcine was also evaluated. The antioxidant potential of onion peel and bulb extracts were evaluated using 2,2-diphenyl- 1-picryl hydrazyl (DPPH), ferric-reducing antioxidant power assay (FRAP), 2,2'-azino-bis- 3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid (ABTS) radical scavenging assay, H2O2 radical scavenging activity and Fe2+ chelating activity. Total flavonoids and phenolic content of ethanolic extract of onion peel were significantly greater as compared to that of onion bulb. Ethanolic extract of onion peel also presented better antioxidant and free-radical scavenging activity as compared to the ethanolic extract of bulb, while the aqueous extract of bulb presented weakest antioxidative potential. Onion peel extract's α-glucosidase inhibition potential was also correlated with their phenolic and flavonoid contents. The current findings presented onion peel as a possible source of antioxidative agents and phenolic compounds that might be beneficial against development of various common chronic diseases that might have an association with oxidative stress. Besides, outer dry layers and fleshy peels of onion exhibited higher phenolic content and antioxidant activities, compared to the inner bulb. The information obtained by the present study can be useful in promoting the use of vegetable parts other than the edible mesocarp for several future food applications, rather than these being wasted.

Resumo Allium cepa pertence à família Liliaceae e é rica em nutrientes e antioxidantes. Apesar das expressivas aplicações alimentares do bulbo da cebola, sua casca e outras camadas externas são geralmente consideradas resíduos, e seu potencial nutricional e terapêutico ainda é pouco explorado. O presente estudo foi delineado com o objetivo de investigar comparativamente o potencial antioxidante de duas partes de Allium cepa, por exemplo o bulbo (parte comestível) e camadas externas e cascas secas (parte não comestível). Além disso, o efeito inibitório dos extratos do bulbo de cebola e casca sobre a α-glucosidase intestinal de ratos e α-amilase pancreática suína também foi avaliado. O potencial antioxidante dos extratos da casca de cebola e bulbo foi avaliado utilizando-se 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), método de poder antioxidante de redução do ferro (FRAP), método 2,2'-azino-bis-3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico (ABTS) de eliminação de radicais, atividade de eliminação de radicais H2O2 e atividade quelante do Fe2+. Os flavonoides totais e os teores fenólicos do extrato de etanol da casca de cebola foram significativamente maiores quando comparados ao do bulbo. O extrato de etanol da casca de cebola também apresentou melhor atividade antioxidante e eliminação de radicais livres quando comparado ao extrato de etanol do bulbo, enquanto o extrato aquoso de bulbo apresentou menor potencial antioxidante. O potencial de inibição da α-glicosidase dos extratos de casca de cebola correlacionou-se com seus teores fenólicos e de flavonoides. Os resultados encontrados identificaram que a casca de cebola é uma possível fonte de agentes antioxidantes e compostos fenólicos que podem ser benéficos contra o desenvolvimento de várias doenças crônicas que estão associadas ao estresse oxidativo. Além disso, as camadas externas secas e as cascas da cebola exibiram maior conteúdo fenólico e atividades antioxidantes, em comparação com o bulbo interno. As informações obtidas pelo presente estudo podem promover o uso de outras partes vegetais além do mesocarpo comestível para futuras aplicações em alimentos, ao invés de serem desperdiçadas.

Mannich bases derivatives of 2-Phenyl-5-Benzimidazole sulfonic acid; Synthesis, Characterization, Computational studies and Biological evaluation

Abstract A new series of N-Mannich bases of 2-Phenyl-5-benzimidazole sulfonic acid have been synthesized through amino methylation reaction with secondary amines. The two moieties were held together through a methylene bridge, which comes from formaldehyde (Formalin Solution 37%) used in the reaction. Chemical structures of the newly synthesized compounds have been confirmed using FT-IR, 1HNMR and 13CNMR. Different in vitro assays including Anti-oxidant, Enzyme inhibition, Anti-microbial and Cytotoxicity assay were performed to evaluate the biological potential with reference to the standard drug. Among the synthesized library, compound 3a shows maximum alpha-glucosidase inhibition with an IC50 value of 66.66 µg/ml, compound 3d was found most toxic with LC50 value of 10.17 µg/ml. ADME evaluation studies were performed with the help of Molinspiration online software. Docking calculations were also performed. Given the importance of the nucleus involved, the synthesized compound might find extensive medicinal applications as reported in the literature.

Reacciones de hipersensibilidad a alglucosidasa alfa en enfermedad de Pompe: dos casos de desensibilización exitosa / Hypersensitivity reactions to alglucosidase alfa in Pompe disease: two cases of successful desensitization

La enfermedad de Pompe es un desorden neuromuscular autosómico recesivo de baja prevalencia, causado por la deficiencia total o parcial de la enzima alfa glucosidasa ácida (GAA), cuya única terapia de reemplazo enzimático disponible es la alglucosidasa alfa recombinante. Las reacciones adversas asociadas a la infusión se presentan con frecuencia. Se reportan dos casos de desensibilización exitosa con alglucosidasa alfa utilizando protocolos con dosis meta de 20 mg/kg, administrados quincenalmente; el primero de ellos, en una niña con historia de reacción adversa grave a los 15 meses de edad, en quien se utilizó un esquema con una dilución inicial de 1/10.000.000 de 28 pasos y una duración total de 13,1 horas. En el segundo caso, la paciente tuvo una reacción adversa grave a los 4 años de edad, se utilizó el protocolo de 22 pasos, concentración inicial de 1/1.000.000 y duración total de 7,2 horas. Se concluye que en pacientes con enfermedad de Pompe que presentan reacciones adversas durante la terapia de reemplazo enzimático, es posible realizar la desensibilización cada dos semanas con la dosis estándar de 20 mg/kg de forma exitosa, y progresivamente lograr la administración usual de la infusión

Pompe disease is a low prevalence autosomal recessive neuromuscular disorder, caused by total or partial deficiency of the acid alpha-glucosidase (GAA) enzyme, and its only available enzyme replacement therapy is the recombinant alglucosidase alfa. Infusion-associated adverse reactions occur frequently. Two cases of successful desensitization with alglucosidase alfa using protocols with a target dose of 20 mg/kg administered biweekly are reported; the first was a girl who had a history of serious adverse reaction at the age of 15 months, and undergone to a scheme with an initial dilution of 1/10,000,000 with 28 steps and a total duration of 13.1 hours. In the second case, the patient had a severe adverse reaction at the age of 4 years, a 22-step protocol was used with an initial concentration of 1/1,000,000 and a total duration of 7.2 hours. In conclusion, in patients with Pompe disease who presented adverse reactions during enzyme replacement therapy with alglucosidase alfa, it is possible to perform desensitization every two weeks with the standard dose of 20 mg/kg, and progressively achieve the usual administration of the infusion

Efecto antidiabético de los extractos liofilizados de Guazuma ulmifolia Lam., Dracontium loretense Krause, Physalis angulata L, y Handroanthus obscurus (Bureau & K. Schum) Mattos, mediante la inhibición in vitro de la alfa α-glucosidasa / Antidiabetic effect of freeze-dried extracts of Guazuma ulmifolia Lam, Dracontium loretense Krause, Physalis angulata L, and Handroanthus obscurus (Bureau & K. Schum) Mattos, through in vitro inhibition of alpha α-glucosidase

La etnomedicina es una disciplina idónea para elegir especies vegetales con el fin de ser estudiadas farmacológicamente; las cuatro especies seleccionadas para el presente estudio se usan como hipoglucemiantes en la medicina tradicional de la Amazonía peruana. Objetivos. Estudiar la capacidad inhibitoria in vitro de los extractos de cuatro plantas de uso tradicional, sobre la actividad de la α-glucosidasa, una enzima importante involucrada en la regulación de la glicemia. Materiales y métodos. Mediante el ensayo de inhibición de la enzima α-glucosidasa se evaluaron diferentes concentraciones de cada extracto para determinar la concentración inhibitoria media (IC50) y compararlos con la droga control acarbosa. Resultados. El extracto acuoso liofilizado de Guazuma ulmifolia mostró significante efecto inhibitorio (IC50 :13,49±3,65 µg/mL), al compararlo con la droga control, acarbosa (IC50: 858,67±29,73 µg/mL) y los otros extractos. Conclusiones. Los resultados sugieren que la actividad antidiabética de la Guazuma ulmifolia estaría mediada por la inhibición de la α-glucosidasa, lo que implicaría su potencial en la reducción de la glucosa posprandial.

Ethnomedicine is an ideal discipline for choosing plant species to be studied pharmacologically; the four species selected for this study are used as hypoglycemics in the traditional medicine of the Peruvian Amazon. Objectives. To study the inhibitory capacity in vitro of the extracts of four plants of traditional use, on the activity of α-glucosidase, an important enzyme involved in the regulation of glycemia. Materials and methods. Using the inhibition test of the enzyme α-glucosidase, different concentrations of each extract were evaluated to determine the average inhibitory concentration (IC50) and to compare them with the control drug acarbose. Results. The freeze-dried aqueous extract of Guazuma ulmifolia showed a significant inhibitory effect (IC50:13,49±3,65 µg/mL) when compared with the control drug, acarbose (IC50: 858,67±29,73 µg/mL), and the other extracts. Conclusions. The results suggest that the antidiabetic activity of Guazuma ulmifolia would be mediated by the inhibition of α-glucosidase, which would imply its potential in the reduction of postprandial glucose.

Influence of preparation procedures on the phenolic content, antioxidant and antidiabetic activities of green and black teas

The influence of common tea preparation procedures (temperature, infusion time, consumption time interval and tea bag/loose-leaf) and the type of water used, on the total phenolic content (TPC), the radical scavenging activity and the α-glucosidase inhibitory activity were assessed. Higher TPC and antioxidant activity were obtained when using lower mineralized waters. Tea bags also evidenced higher antioxidant activity than loose-leaf samples. Under the same conditions (90 ºC and five minutes of infusion time) green tea contains almost twice the quantity of polyphenols and the free radical scavenging ability of black tea. In the α-glucosidase assay all infusions were active (97-100 %). Furthermore, HPLC allowed to identify some of the polyphenols present in both teas and to monitor their composition change with time. After twenty-four hours, the antioxidant activity was maintained without significant changes, but a small decrease in enzyme inhibition was observed, although this activity was still very high

Association of anti-nuclesome and anti C1q antibodies with lupus nephritis in an Egyptian cohort of patients with systemic lupus erythematosus

Abstract Introduction: Anti-nucleosome and anti-C1q antibodies demonstrated an association with the development of glomerulonephritis in systemic lupus erythematosus (SLE). Some investigators have proposed that monitoring anti- C1q and anti-nucleosome antibodies might be valuable for making predictions about lupus nephritis (LN) and assessment of disease activity as a non-invasive biological marker of renal disease. Objectives: The current study was proposed to investigate the presence of anti-C1q and anti-nucleosome antibodies in the sera of Egyptian patients with SLE and their association with LN. Methods: Eighty patients with SLE were included. Patients were classified into, a LN group including 40 cases with active LN (based on the results of renal biopsy and renal SLEDAI≥4) and a non renal SLE group including 40 patients (with no clinical or laboratory evidence of renal involvement that were attributed in the past or present to SLE). They were subjected to full medical history taking, clinical examination, routine laboratory investigations, measurement of antinuclear antibody (ANA), anti-ds DNA, anti-C1q & anti-nucleosome antibodies. Results: Anti-C1q antibody showed a statistically significant association with the presence of vasculitis and nephritis while anti-nucleosome antibody didn't show a significant association with the presence of any clinical features. Double positivity of anti-nucleosome and anti-C1q antibodies showed a statistically significant association with the presence of vasculitis and photosensitivity, high ECLAM score, elevated ESR, low serum albumin and low C3 levels. Conclusion: Serum anti-C1q antibody has a significant association with LN while double positive antibodies have a significant association with vasculitis and low C3 levels in Egyptian patients with SLE.

Incremento del valor nutrimental, actividad antioxidante y potencial inhibitorio de α-glucosida en brownies a base de leguminosas cocidas / Increase in nutritional value, antioxidant activity and inhibitory potential of α-glucoside in brownies from cooked legumes

El objetivo de la presente investigación fue evaluar el valor nutrimental, actividad antioxidante e inhibición de la enzima α-glucosidasa de brownies libres de gluten enriquecidos principalmente con leguminosas. Los brownies fueron elaborados principalmente con leguminosas cocidas de frijol pinto (Phaseolus vulgaris L.), alubia chica (Phaseolus vulgaris L.), garbanzo (Cicer arietinum L.) o lenteja (Lens culinaris L.) (300 g de producto). Cada producto fue dividido en porciones de 100 g cada uno. Posteriormente, se determinó su composición nutrimental, y de los extractos etanólicos libres y ligados obtenidos, se evaluó el contenido de fenólicos totales, flavonoides, actividad antioxidante y el potencial inhibitorio de la enzima α-glucosidasa. Los brownies a base de leguminosas cocidas fueron significativamente mejores que los comerciales, y presentaron un contenido de proteínas entre 6.2 y 6.9%, 1.6-4.2% de lípidos, 1.2-5.8% de fibra dietaria soluble y 11.7-21.5% de fibra dietaria insoluble. Los productos presentaron en mayor proporción a los ácidos grasos linolénico y linoleico, además fueron ricos en minerales. El contenido de fenólicos totales, y flavonoides varió dependiendo de la leguminosa con la cual se desarrolló el producto, así como de la fracción que se evaluó. La actividad antioxidante total fue mayor en los brownies de alubia. La mayor inhibición de α-glucosidasa la presentaron los extractos de brownies elaborados a base de lenteja (fracción libre) y garbanzo (fracción ligada). Los brownies elaborados con lenteja fueron sensorialmente los más aceptados. La introducción de este tipo de productos promoverá un consumo nutritivo de alimentos por personas de diferentes edades y con efectos benéficos en la salud(AU)

The aim of the present study was to evaluate the nutritional value, antioxidant activity and inhibition of α-glucosidase enzyme of gluten-free brownies enriched mainly with legumes. The brownies were elaborated mainly with cooked legumes of pinto (Phaseolus vulgaris L.), haricot bean (Phaseolus vulgaris L.), chickpea (Cicer arietinum L.) or lentils (Lens culinaris L.) (300 g of product). Each product was divided into portions of 100 g and the chemical and nutritive composition were determined. From the free and bound ethanolic extracts obtained, the content of total phenolics, flavonoids, antioxidant activity and the potential inhibitor of the α-glucosidase enzyme were evaluated. Brownies based on cooked legumes were significantly better than commercial brownies, with a protein content between 6.2 and 6.8%, 1.6-4.2% lipids, 1.2-5.8% soluble dietary fiber and 11.7-21.5% insoluble dietary fiber. The products had a higher proportion of linolenic and linoleic fatty acids, and they were rich in minerals. The content of total phenolics and flavonoids varied depending on the legume as well as the fraction that was evaluated. Total antioxidant activity was higher in haricot bean-brownies. The highest inhibition of α-glucosidase was detected in extracts obtained from lentil (free fraction) and chickpea (bound fraction) brownies. Brownies based on lentil were the most accepted in the sensory test. The introduction of this type of products promotes a nutritious consumption of foods by people of different ages with beneficial effects on health(AU)

Late-onset Pompe disease: what is the prevalence of limb-girdle muscular weakness presentation? / Doença de Pompe de início tardio: qual é a prevalência na apresentação de fraqueza muscular de cinturas?

ABSTRACT Pompe disease is an inherited disease caused by acid alpha-glucosidase (GAA) deficiency. A single center observational study aimed at assessing the prevalence of late-onset Pompe disease in a high-risk Brazilian population, using the dried blood spot test to detect GAA deficiency as a main screening tool. Dried blood spots were collected for GAA activity assay from 24 patients with "unexplained" limb-girdle muscular weakness without vacuolar myopathy in their muscle biopsy. Samples with reduced enzyme activity were also investigated for GAA gene mutations. Of the 24 patients with dried blood spots, one patient (4.2%) showed low GAA enzyme activity (NaG/AaGIA: 40.42; %INH: 87.22%). In this patient, genetic analysis confirmed two heterozygous mutations in the GAA gene (c.-32-13T>G/p.Arg854Ter). Our data confirm that clinicians should look for late-onset Pompe disease in patients whose clinical manifestation is an "unexplained" limb-girdle weakness even without vacuolar myopathy in muscle biopsy.

RESUMO A doença de Pompe é uma doença hereditária causada pela deficiência da enzima alfa-glicosidase ácida (GAA). Estudo observacional foi realizado, em um único centro, para determinar a prevalência da doença de Pompe de início tardio (LOPD) em uma população brasileira de alto risco, usando teste em gota seca (DBS) como ferramenta principal de triagem para detectar a deficiência da GAA. DBS foi coletado para avaliar a atividade da GAA em 24 pacientes com fraqueza muscular de cinturas "não explicada" sem miopatia vacuolar na biópsia muscular. As amostras com atividade enzimática reduzida foram também submetidas a análise de mutações no gene GAA. Dos 24 pacientes com DBS, baixa atividade da enzima GAA (NaG/AaGIA: 40.42; %INH: 87.22%) foi encontrada em um paciente (4.2%). Nessa paciente, a análise genética confirmou duas mutações em heterozigose composta no gene GAA (c.-32-13T > G/p.Arg854Ter). Nossos resultados confirmam que LOPD deve ser investigada quando a manifestação clínica é uma fraqueza muscular de cinturas "não explicada", mesmo na ausência de miopatia vacuolar na biópsia muscular.

Caracterização de α-glicosidases de Lutzomyia longipalpis: atividades enzimáticas, expressão gênica e modulação por Leishmania mexicana / Characterization of Lutzomyia longipalpis α-glycosidases: enzymatic activities, gene expression and modulation by Leishmania mexicana

Lutzomyia longipalpis é o vetor de Leishmania infantum, um dos agentes causadores da leishmaniose visceral. Os flebotomíneos adultos possuem uma dieta rica em açúcares, essencial para atender às demandas energéticas necessárias ao desenvolvimento; as fêmeas, além de açúcares, também se alimentam de sangue. As α-glicosidases e α-amilases estão envolvidas na digestão de carboidratos adquiridos na dieta, e são classificadas nas famílias 13 e 31 das glicosídeo hidrolases. Para determinação da atividade de α-glicosidase utilizando o substrato MUαGlu padronizamos uma técnica de ensaio contínuo para realização de ensaios em amostras teciduais individuais. Quantificamos a atividade de α-glicosidase em diferentes tecidos, ressaltando a atividade presente no divertículo e no intestino médio de L. longipalpis, sendo essa enzima mais ativa sobre sacarose que sobre o substrato MUαGlu. Atividades basais foram observadas em insetos não alimentados; a alimentação sanguínea induz a atividade no conteúdo do intestino médio e a alimentação açucarada modula a atividade nos tecidos do intestino médio. A exposição a diferentes concentrações ou moléculas de açúcares também alterou a atividade. As α-glicosidases de diferentes tecidos apresentaram diferentes propriedades bioquímicas, como pH ótimo entre 7,0 - 8,0, KM entre 0,37 - 4,7 mM (MUαGlu como substrato), pH ótimo de 6,0 e KM entre 11 - 800 mM (sacarose como substrato)

Enzimas do divertículo e do tecido do intestino médio apresentaram inibição em altas concentrações de substrato (sacarose), o que explica os altos valores de KM encontrados. No genoma de L. longipalpis foram encontradas nas famílias GH13 e GH31 proteinas envolvidas no metabolismo de açúcar, transporte de aminoácidos, armazenamento e mobilização das reservas de glicogênio e regulação da miogênese. Descrevemos também uma α-glicosidase neutra (controle de N-glicosilação) e uma α-glicosidase lisossomal inativa (sem resíduos catalícos). A estrutura e as funções dessas proteínas identificadas são conservadas. Uma análise comparativa demonstrou retração no número de genes de maltases e expansão das α-amilases, com organização em dois grandes clusters. Maltases são mais expressas no intestino médio de fêmeas alimentadas com sangue, e a infecção por L. mexicana modulou negativamente a sua expressão gênica. Em fêmeas alimentadas com sangue (sem sacarose), as taxas de infecção por L. mexicana e migração para a região da cárdia não foram afetadas, sugerindo que a migração não é inteiramente baseada nos estímulos de quimiotaxia pelas moléculas de açúcar. Contudo, a ausência de açúcar na dieta do inseto resultou no desenvolvimento de L. mexicana no intestino posterior. Todos esses resultados sugerem que as α-amilases evoluíram para assumir diferentes funções além da hidrólise de açúcares primários e que as α-glicosidases também estão envolvidas em diferentes processos metabólicos, como digestão de açúcares vegetais, digestão de glicoproteínas ou glicolipídios sanguíneos e mobilização de estoques energéticos. (AU)

In vitro effect of terpenoids - rich extract of Momordica charantia on alpha glucosidase activity / Efecto in vitro del extracto rico en terpenoides de Momordica charantia sobre la actividad de la alfa-glucosidasa

Background: Momordica charantia is a vine, native to tropics and subtropics that has found use in herbal medicine. In Nigeria, the plant is locally used in the treatment of diabetes. Objective: To investigate the inhibitory effect of terpenoid-rich extract from Momordica charantia on α-glucosidase activity. Method: The inhibitory effect of the terpenoid-rich extract from Momordica charantia on the activity of alpha-glucosidase from Saccharomyces cerevisiae as well as the determination of the mode of inhibition were investigated using in vitro assay methods. Results: The results revealed that the terpenoid-rich extract had a high IC50 of 1.60 mg/mL. The Lineweaver-Burk plot revealed that the extract exhibited partially mixed­type inhibition of α-glucosidase. Conclusions: It can be inferred from this study that although terpenoid-rich extract inhibited α-glucosidase, further purification will be necessary on the extract so as to increase its potency as an inhibitor of α-glucosidase. The action of the extract on α-glucosidase provided an insight into the probable mechanism of action of Momordica charantia in reducing hyperglycemia.

Antecedentes: Momordica charantia es una vid, nativa de las regiones tropicales y subtropicales que ha sido usada en la medicina herbal. En Nigeria, esta planta se ha usado localmente en el tratamiento de la diabetes. Objetivo: Investigar el efecto inhibitorio del extracto rico en terpenoides de Momordica charantia sobre la actividad de la α-glucosidasa. Método: El efecto inhibitorio del extracto rico en terpenoides de Momordica charantia sobre sobre la actividad de la α-glucosidasa y el modo de inhibición se evaluó con un ensayo in vitro. Resultados: Los resultados mostraron que el extracto rico en terpenoides tiene un alto IC50 de 1,60 mg/mL. El gráfico Lineweaver-Burk reveló que el extracto presenta una inhibición combinada de la α-glucosidasa. Conclusión: De este estudio se infiere que aunque el extracto rico en terpenoides inhibió la α-glucosidasa, es necesario realizar una purificación con el fin de incrementar su potencia como inhibidor de la α-glucosidasa. La acción del extracto sobre la α-glucosidasa proporciona un entendimiento del mecanismo de acción probable de Momordica charantia en la reducción de la hiperglicemia.

Alpha amylase and Alpha glucosidase inhibitory effects of aqueous stem extract of Salacia oblonga and its GC-MS analysis

ABSTRACT Our present investigation deals with the phytochemical screening, estimation of total flavonoids, terpenoids and tannin contents to evaluate the anti-diabetic activities of Salacia oblonga stem followed by GC-MS analysis. It explores the natural compounds and the potential α-amylase and α-glucosidase inhibitory actions of stem extracts. The aqueous stem extract was selected from other extracts (ethanol, acetone, petroleum ether and chloroform) for the in vitro study of anti-diabetic activity by alpha amylase and alpha glucosidase inhibitory assays. The stem extract was also analyzed by gas chromatography mass spectrometry to identify the natural chemical components. Phytochemical analysis of aqueous stem extract showed major classes of secondary metabolites such as phenols, flavonoids, alkaloids, terpenoids, tannins, saponins. The total flavonoid, terpenoid, and tannin contents were quantified as 19.82±0.06 mg QE/g, 96.2±0.20 mg/g and 11.25±0.03 mg TAE/g respectively. The percentage inhibition of assays showed maximum inhibitory effects (59.46±0.04% and 68.51±0.01%) at a concentration of 100 mg/mL. The IC50 values of stem extract was found to be 73.56 mg/mL and 80.90 mg/mL for alpha amylase and alpha glucosidase inhibition. Fifteen chemical constituents were found by GC-MS analysis. This study suggest the aqueous stem extract of Salacia oblonga might be considered as potential source of bio active constituents with excellent antidiabetic activity.

Informe de evaluación científica basada en la evidencia disponible: enfermedad de Pompe / Scientific evaluation report based on available evidence: Pompe disease

INTRODUCCIÓN: La enfermedad de Pompe, es una enfermedad rara y corresponde a un trastorno metabólico autosómico recesivo, debido a variantes patogénicas en el gen GAA, que codifica para la proteína glucosidasa alfa-1,4 ácida lisosómica, responsable de la degradación del glucógeno en los lisosomas. Estas variantes patogénicas originan un déficit de actividad enzimática, lo que determina acumulación y depósito de glucógeno en los tejidos, principalmente en el músculo, provocando insuficiencia cardiaca, motora y respiratoria progresiva, dando lugar a debilidad progresiva, fallo orgánico y muerte. TECNOLOGÍAS SANITARIAS ANALIZADAS: Alglucosidasa Alfa. EFICACIA DE LOS TRATAMENTOS: Se encontraron 3 tipos de estudios según el diseño de los mismos. Estudios controlados aleatorizados, estudios observacionales y estudios de casos. El análisis del estudio controlado aleatorizado considerado arroja que entre los principales resultados (outcomes primarios) se encuentra que el uso de Alglucosidasa en pacientes con Pompe de inicio tardío podría implicar un leve aumento de metros caminados en test de marcha de seis minutos y que la utilización de Alglucosidasa en pacientes con Pompe de inicio tardío podría implicar un leve aumento de la capacidad vital forzada (en relación a su valor pronóstico). Con respecto a los estudios observacionales, y considerando que la calidad de la evidencia de estos es inferior a la del estudio aleatorizado, los resultados de los mismos resultan heterogéneos, sin embargo, se puede señalar que los efectos de la Alglucosidasa alfa podrían implicar una estabilización o una leve mejoría de outcomes como capacidad vital forzada, fuerza muscular y las pruebas de marcha. Finalmente, se encontraron 13 estudios que tienen un carácter de reporte de casos. Los estudios consideran distintos tipos de pacientes (adultos, niños, diversos grados de severidad, etc.) y diversos resultados, pero en general concluyen que la terapia de remplazo enzimático con Alglucosidasa alfa implica una mejora o al menos una estabilización de los síntomas de enfermedad de Pompe, recomendando una intervención temprana o en las primeras etapas de progresión de la enfermedad. EVALUACIÓN ECONÓMICA: Los estudios de costo efectividad encontrados arrojan que el tratamiento, en comparación con mejores cuidados actuales, no sería costo efectivo. En cuanto a las recomendaciones de agencias internacionales, no se encuentra una tendencia en cuanto a la recomendación favorable del tratamiento. Excepto por Canadá, que recomienda el tratamiento para la enfermedad de Pompe Infantil, y en Gales, que se recomienda su inclusión salvo en pacientes con enfermedad de Pompe tardío, no se encontraron otras recomendaciones favorables. El cálculo de impacto presupuestario arroja que el valor del mismo para el año 2018 será de unos $M 11.514.108. CONCLUSIÓN: Para dar cumplimiento al artículo 28° del Reglamento que establece el proceso destinado a determinar los diagnósticos y tratamientos de alto costo con Sistema de Protección Financiera, según lo establecido en los artículos 7°y 8° de la ley N°20.850, aprobado por el decreto N°13 del Ministerio de Salud, se concluye que el presente informe de evaluación se considera no favorable, de acuerdo a lo establecido en el Título III. de las Evaluaciones Favorables de la Norma Técnica N° 0192 de este mismo ministerio.

Aqueous extract of Psidium guajava leaves: phenolic compounds and inhibitory potential on digestive enzymes

ABSTRACT Leaves of Psidium guajava L. (guava) have been widely used in the popular way for prevention and treatment of various diseases. Thus, the objective of this study was to evaluate the inhibitory potential of leaves aqueous extract from three cultivars of P. guajava (Pedro Sato, Paluma and Século XXI) on α-amylase, α-glycosidase, lipase, and trypsin enzymes, in the presence or not of simulated gastric fluid and to determine the content of phenolic compounds by high performance liquid chromatography. All cultivars presented the same composition in phenolic compounds, but in different proportions. The compounds identified are gallic acid, epigallocatechin gallate, syringic acid, o-coumaric acid, resveratrol, quercetin, and catechin (which was the major compound in all the cultivars evaluated). In the absence of simulated gastric fluid, it was observed different inhibitions exercised by the leaves aqueous extracts from three cultivars of P. guajava on each enzyme. In presence of simulated gastric fluid, all cultivars showed increase in the inhibition of lipase and α-glycosidase, and decrease in inhibition of α-amylase and trypsin enzymes. These results indicate that P. guajava leaves aqueous extracts from all cultivars evaluated possess potential of use as an adjuvant in the treatment of obesity and other dyslipidemias.

Seguridad y eficacia de alglucosidasa alfa en el tratamiento de pacientes con enfermedad de pompe de inicio tardío / Safety and efficacy of alglucosidase alfa in the treatment of patients with late-onset pompe disease

INTRODUCCIÓN: Antecedentes: El presente informe expone la evaluación del medicamento alglucosidasa alfa (AA) respecto a su uso en pacientes con enfermedad de Pompe de inicio tardío (EPIT). Aspectos generales: La enfermedad de Pompe, clasificada también como enfermedad por depósito del glucógeno tipo II, es un trastorno de herencia autosómica recesiva que causa deficiencia de la enzima denominada alfa-1,4-glucosidasa ácida (GAA). La deficiencia de la enzima GAA conduce a la acumulación de glucógeno en los lisosomas y en el citoplasma, resultando en la destrucción de los tejidos, principalmente del musculo esquelético y cardiaco. Tecnología Sanitaria de Interés: Alglucosidasa Alfa: La AA es una forma recombinante de la enzima GAA, el cual es requerido para la división del glucógeno. La AA se une a los receptores de manosa 6-fosfato en la superficie de las células, es internalizado y transportado a los lisosomas donde es activado para aumentar la división del glucógeno. METODOLOGÍA: Estratégia de Busqueda: Se realizó una búsqueda de la literatura con respecto a la eficacia y seguridad de AA como terapia de reemplazo enzimático en pacientes con EPIT, en las bases de datos de OVID MEDLINE y TRIPDATABASE. También se hizo una búsqueda adicional en www.clinicaltrials.gov, para poder identificar ensayos en desarrollo o no publicados. \r\nAdicionalmente, se hizo una búsqueda dentro de la información generada por grupos que realizan revisiones sistemáticas, evaluación de tecnologías sanitarias y guías de práctica clínica, tales como The Cochrane Library y The National Institute for Health and Care Excellence (NICE). RESULTADOS: Sinopsis de la Evidencia: Se realizó la búsqueda bibliográfica y de evidencia científica para el sustento del uso de AA en el tratamiento de pacientes con EPIT. A continuación se detallan los resultados de la búsqueda según tipo de publicación. Guías Clínicas: la búsqueda identificó dos guías sobre la EPIT. Ambas guías fueron desarrolladas por el grupo de expertos de la enfermedad de Pompe en España, para el diagnóstico, seguimiento y manejo de la EPIT; y la más actual, para el seguimiento de la EPIT; Evaluaciones de tecnología sanitaria: \r\nse identificó una evaluación de tecnología sanitaria que evaluó la eficacia y seguridad de AA en los pacientes con EPIT; Revisiones sistemáticas: se identificó una revisión sistemática que recopiló la información de los estudios publicados hasta el 9 de enero del 2012. En esta evaluación no se describirán sus resultados debido a que la ETS incluye los estudios identificados por esta revisión; Ensayos clínicos: se identificó un ECA que evaluó la eficacia y seguridad de AA en los pacientes con EPIT; Estudios observacionales: se identificaron tres estudios adicionales a los incluidos en la ETS, los que evaluaron los efectos de AA en los pacientes con EPIT; Ensayos Clínicos registrados en www.clinicaltrials.gov: no se identificaron estudios registrados que tengan como objetivo evaluar la eficacia y seguridad de AA en los pacientes con EPIT. CONCLUSIONES: El Instituto de Evaluación de Tecnologías en Salud e Investigación-IETSI, aprueba el uso de AA en el tratamiento de pacientes con EPIT. El presente dictamen preliminar tiene una vigencia de dos años a partir de la fecha de publicación. Dado que la calidad de la evidencia del efecto de AA en desenlaces claves como la sobrevida y calidad de vida es aun baja y el impacto presupuestario del uso de esta tecnología es alta, se establece que el efecto del tratamiento de la EPIT con AA se evaluara con datos de los pacientes que estén recibiendo \r\nAA por el lapso de un año para determinar su impacto en desenlaces clínicos y en la calidad de vida. Esta información servirá para una re-evaluación del medicamento, incluyendo una evaluación económica, al terminar la vigencia del presente dictamen.

Guidelines for the diagnosis, treatment and clinical monitoring of patients with juvenile and adult Pompe disease / Diretriz para o diagnóstico, tratamento e acompanhamento clínico de pacientes com doença de Pompe juvenil e do adulto

ABSTRACT Pompe disease (PD) is a potentially lethal illness involving irreversible muscle damage resulting from glycogen storage in muscle fiber and activation of autophagic pathways. A promising therapeutic perspective for PD is enzyme replacement therapy (ERT) with the human recombinant enzyme acid alpha-glucosidase (Myozyme®). The need to organize a diagnostic flowchart, systematize clinical follow-up, and establish new therapeutic recommendations has become vital, as ERT ensures greater patient longevity. A task force of experienced clinicians outlined a protocol for diagnosis, monitoring, treatment, genetic counseling, and rehabilitation for PD patients. The study was conducted under the coordination of REBREPOM, the Brazilian Network for Studies of PD. The meeting of these experts took place in October 2013, at L’Hotel Port Bay in São Paulo, Brazil. In August 2014, the text was reassessed and updated. Given the rarity of PD and limited high-impact publications, experts submitted their views.

RESUMO A doença de Pompe (DP) é uma doença grave, potencialmente letal, devida ao depósito de glicogênio na fibra muscular e ativação de vias autofágicas. Tratamento promissor para a DP é a reposição enzimática com a enzima recombinante humana alfa-glicosidase ácida (rhAGA -Myozyme®). A necessidade de organizar uma propedêutica diagnóstica, sistematizar o seguimento clínico e sedimentar as novas recomendações terapêuticas tornaram-se vitais à medida que o tratamento permite uma maior longevidade aos pacientes. Uma força-tarefa de clínicos experientes no manejo da DP foi constituída para elaborar um protocolo para o diagnóstico, acompanhamento clínico, tratamento, aconselhamento genético, entre outras considerações voltadas ao paciente adulto. O estudo foi realizado sob a coordenação da Rede Brasileira de Estudos da Doença de Pompe (REBREPOM). Diante da raridade da DP e escassez de trabalhos de alto impacto de evidência científica, os especialistas emitiram suas opiniões.

Informe de evaluación rápida de tecnología sobre seguridad y efectividad del uso de Alfaglucosidasa en el tratamiento de pacientes con enfermedad de pompe infantil / Rapid evaluation report of technology on the safety and effectiveness of the use of Alfaglucosidasa in the treatment of patients with infantile pompe disease

Si bien utilizar alfaglucosidasa genera beneficios a los pacientes, estos beneficios no curan la enfermedad. Se demostró mejoría en habilidades motoras, disminución de cardiomegalia, mejora en función cardíaca, mejora anormalidad de conducción, mejora cardiopatía. De la misma forma, reduce el riesgo de ventilación invasiva y de cualquier ventilación, reduce el riesgo de morir y mejora la sobrevida. Con respecto a la seguridad, se reportan reacciones asociadas a la infusión y los efectos adversos son mínimos y pueden ser manejados. Se recomienda cubrir con generación de evidencia.(AU)

Protocolo de evaluación rápida de seguridad y efectividad del uso de Alfaglucosidasa en el tratamiento de pacientes con enfermedad de Pompe infantil / Protocol of rapid evaluation of safety and effectiveness of the use of Alfaglucosidasa in the treatment of patients with infantile Pompe disease

La enfermedad de Pompe es una miopatía metabólica rara, progresiva y letal, con una incidencia global aproximada de 1 de cada 40.000 nacimientos. Otros nombres para la enfermedad de Pompe son enfermedad de depósito de glucógeno tipo II, deficiencia de maltasa ácida y glucogenosis tipo II. La enfermedad de Pompe se incluye dentro de los trastornos de depósito lisosomal, ya que está provocada por una deficiencia de hidrolasa lisosómica, alfa-glucosidasa ácida (GAA) que degrada el glucógeno lisosomal a glucosa. La deficiencia de esta enzima provoca la acumulación de glucógeno en diversos tejidos, especialmente el músculo cardíaco, respiratorio y esquelético, lo que provoca el desarrollo de una cardiomiopatía hipertrófica y una debilidad muscular progresiva, incluyendo una alteración de la función respiratoria. La manifestación clínica de la enfermedad de Pompe se puede describir como un espectro de síntomas que abarca desde una forma de inicio infantil que progresa rápidamente (aparición de los síntomas típicos de la enfermedad de Pompe durante el primer año de vida y con una esperanza de vida muy corta) hasta una forma de inicio tardío que progresa más lentamente. Se ha descrito una forma de inicio infantil de la enfermedad de Pompe atípica y que progresa más lentamente. Se caracteriza por una miocardiopatía menos grave y, consiguientemente, por una supervivencia más prolongada. La presente evaluación se realizará para pacientes con enfermedad de Pompe de inicio infantil.(AU)

Avaliação da alfa-glicosidase Cqm1 de Culex quinquefasciatus e o impacto de suas mutações na fisiologia de larvas / Evaluation of a-glucosidase Cqm1 from Culex quinquefasciatus and the impact of its mutations on larvae physiology

Lysinibacillus sphaericus (Lsp) e uma bacteria entomopatogena que produz a toxina Binaria (Bin) com atividade larvicida para culicideos. A sua acao em Culex quinquefasciatus depende da ligacao da toxina Bin a alfa-glicosidase (Aglu) Cqm1, que atua como receptor no epitelio intestinal de larvas. Na colonia R2362, foram caracterizados dois alelos de resistencia ao Lsp: cqm1REC e cqm1REC-2, cujas mutacoes impedem a expressao da Aglu Cqm1. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade catalitica da Cqm1 e comparar a atividade alfa-glicosidase e o desenvolvimento pre-imaginal de larvas de individuos susceptiveis (S) e resistentes (R) para cada alelo. Para isto, foram avaliados os seguintes parametros: atividade catalitica da Cqm1 recombinante; padrao de transcricao de outras Aglus paralogas a Cqm1; atividade de Aglus nativas em larvas; sobrevivencia de individuos frente a diferentes dietas. A Aglu Cqm1 mostrou atividade enzimatica otima a 37o C, pH 7,5-8,0 e utilizando o substrato sintetico pNalfaG. A atividade alfa-glicosidase total em larvas S e R foi similar, apesar da ausencia de expressao da Cqm1 nas larvas R. A investigacao in silico revelou 18 proteinas paralogas a Cqm1 e, dentre 11 investigadas, nove sao expressas em larvas S e R. A analise quantitativa de tres paralogas demonstrou que duas tem um padrao de transcricao mais elevado em larvas resistentes, sugerindo a existencia de um mecanismo de compensacao de expressao de alfa-glicosidases. O desenvolvimento pre-imaginal de larvas S foi decrescente nas seguintes dietas: racao de gatos, racao de peixes, leite desnatado, extrato de levedura e sacarose. De uma forma global, a taxa de sobrevivencia de larvas R foi inferior a S em todas as dietas testadas. Os dados obtidos mostram que as mutacoes ligadas aos alelos cqm1REC e cqm1REC-2 nao parecem impactar a atividade Aglu nas larvas e que o custo biologico observado poderia estar relacionado a outros genes e vias metabolicas.

Diabetes mellitus: Novas perspectivas terapêuticas / Diabetes Mellitus: new perspectives therapeutic

O diabetes mellitus tipo 2 (DM2) apresenta alta prevalência, com aumento inclusive em crianças e adolescentes. A importância de um estrito controle glicêmico pode ser comprovada com a redução das complicações crônicas microvasculares. Já em relação à redução da doença macrovascular, principal causa de mortalidade nestes pacientes, são fundamentais o controle da glicemia, bem como de outros fatores de risco cardiovasculares, tais como hipertensão arterial, dislipidemia, peso, e a manutenção de hábitos saudáveis de vida. Temos vários medicamentos para o tratamento do DM2, sendo que a metformina é ainda a droga de primeira escolha, devido ao seu baixo custo e eficácia comprovada...

Type 2 diabetes mellitus (DM2) is highly prevalent and is increasing even in children and adolescents. The importance of strict glycemic control can be proven to reduce chronic microvascular complications. Regarding the reduction of macrovascular disease, the leading cause of mortality in these patients, it is essential tight glycemic control, as well as other cardiovascular risk factors, such as arterial hypertension, dyslipidemia, weight control, and maintaining healthy lifestyles. We have a lot of drugs for the treatment of DM2, and metformin is still the drug of first choice due to its low cost and proven effectiveness...