Knockdown of PAICS inhibits malignant proliferation of human breast cancer cell lines

BACKGROUND: Phosphoribosylaminoimidazole carboxylase, phosphoribosylaminoimidazole succinocarboxamide synthetase (PAICS), an enzyme required for de novo purine biosynthesis, is associated with and involved in tumorigenesis. This study aimed to evaluate the role of PAICS in human breast cancer, which remains the most frequently diagnosed cancer and the leading cause of cancer-related death among women in less developed countries. RESULTS: Lentivirus-based short hairpin RNA targeting PAICS specifically depleted its endogenous expression in ZR-75-30 and MDA-MB-231 breast cancer cells. Depletion of PAICS led to a significant decrease in cell viability and proliferation. To ascertain the mechanisms through which PAICS modulates cell proliferation, flow cytometry was performed, and it was confirmed that G1-S transition was blocked in ZR-75-30 cells through PAICS knockdown. This might have occurred partly through the suppression of Cyclin E and the upregulation of Cyclin D1, P21, and CDK4. Moreover, PAICS knockdown obviously promoted cell apoptosis in ZR-75-30 cells through the activation of PARP and caspase 3 and downregulation of Bcl-2 and Bcl-xl expression in ZR-75-30 cells. CONCLUSIONS: These findings demonstrate that PAICS plays an essential role in breast cancer proliferation in vitro, which provides a new opportunity for discovering and identifying novel effective treatment strategies.

Cinnamic acid, ethanol and temperature interaction on coumarate decarboxylase activity and the relative expression of the putative cd gene in D. bruxellensis

Dekkera bruxellensis is one of the main contaminating yeasts in wine due to its ability to metabolize cinnamic acids into volatile phenols. This yeast metabolizes p-coumaric acid into 4-vinylphenol through a coumarate decarboxylase (CD) and then transforms it into to 4-ethylphenol (EF) through a vinylphenol reductase. In this work we investigated the influence of the interaction between the concentration of p-coumaric acid, ferulic acid and ethanol as well as growth temperature on the production of CD activity and the expression of a putative gene that codes for this enzymatic activity. For this, a Box Behnken experimental design was used. The concentration of p-coumaric acid (5-26 ppm) and ferulic acid (3-9 ppm) alone did not show any significant effect on any of the studied response variables. However, the interaction between (ethanol concentration * cinnamic acid concentration) and (ethanol concentration * temperature) had a significant statistical effect on the production of CD activity. Additionally, a higher growth temperature negatively affected the expression of the putative cd gene and the production of CD activity. This is the first work that studies the effect of cinnamic acids on the production of CD activity and the relative expression of its putative gene, using natural concentrations of cinnamic acid found in wine.

Importancia del metabolismo de la biotina / Importance of biotin metabolism

La biotina pertenece al grupo de las vitaminas hidrosolubles del complejo B. En humanos la biotina está directamente involucrada en importantes procesos metabólicos como la gluconeogénesis, la síntesis de ácidos grasos y el catabolismo de algunos aminoácidos, debido a su papel como grupo prostético de las enzimas piruvato carboxilasa, propionil-CoA carboxilasa, b-metilcrotonil-CoA carboxilasa y de la acetil-CoA carboxilasa. La biotina se une al sitio activo de estas enzimas y funciona como acarreador de CO2. Las carboxilasas se sintetizan como apocarboxilasas, carentes de biotina y la forma activa se produce por la unión covalente de la biotina al grupo e-amino de un residuo de lisina de la apocarboxilasa, reacción catalizada por la holocarboxilasa sintetasa. El paso final de la degradación de las carboxilasas es el rompimiento de la fracción biotinil del grupo e-amino de la lisina que es catalizada por la biotinidasa y resulta en la liberación de la biotina libre, la cual puede ser nuevamente reciclada. La biotina regula, a nivel postranscripcional, la expresión de la propionil-CoA carboxilasa y, a nivel transcripcional, a la de la holocarboxilasa sintetasa. Además de su papel como cofactor y regulador de la biosíntesis de las carboxilasas, la biotina está involucrada en otras áreas del metabolismo, donde regula la síntesis de proteínas específicas entre las que se encuentran el receptor de la asialoglicoproteína, varias enzimas reguladoras del metabolismo de glucosa y proteínas que unen biotina en la yema de huevo, entre otras. La deficiencia de biotina se ha reportado en pacientes sometidos a una alimentación parenteral total, en personas que ingieren grandes cantidades de clara de huevo crudo, en niños con desnutrición energético proteínica severa y en personas con errores innatos del metabolismo. Entre estas últimas se encuentran las enfermedades autosómicas recesivas del metabolismo de biotina que resultan de la alteración de la actividad de la holocarboxilasa sintetasa o de la biotinidasa.

Estudo de prevalência em recém-nascidos por deficiência de biotinidase / Neonatal screening for biotinidase deficiency

A deficiência de biotinidase é um erro inato do metabolismo caracterizado principalmente por ataxia, crise convulsiva , retardo mental, dermatites, alopécia e susceptibilidade a infecçöes. É atribuída a esta deficiência enzimática a forma tardia de deficiência múltipla das carboxilases. Com o objetivo de verificar a prevalência da deficiência de biotinidase e validar o teste de triagem neonatal considerando a relaçäo custo/benefício, elaborou-se estudo prospectivo na populaçäo de recém-nascidos no Estado do Paraná. Em um período de 8 meses foram triados 125.000 recém-nascidos. A amostra sangüínea foi a mesma obtida para os testes de triagem para fenilcetonúria e hipotireoidismo congênito, submetida ao teste semiquantitativo colorimétrico para atividade de biotinidase. As amostras consideradas suspeitas foram repetidas em duplicatas do mesmo cartäo de papel de filtro, e as que permaneceram alteradas solicitou-se novo cartäo. O teste quantitativo colorimétrico da doença foi realizado nos casos em que a segunda amostra testada em duplicata sugeriu deficiência de biotinidase. A taxa de repetiçäo em duplicata variou de 0,9 por cento a 0,5 por cento do total de exames realizados por mês. A taxa de reconvocaçäo do segundo cartäo foi de 0,17 por cento, sendo que destes 212 casos, 30 por cento näo retornaram o segundo cartäo solicitado. Foram identificados 2 casos, um de deficiência total de biotinidase e outro foi de 1:62.500 nascidos-vivos. A sensibilidade do teste semiquantativo colorimétrico foi calculada em 100 por cento e a especificidade 99,88 por cento. A prevalência da doença no Estado do Paraná foi de 1:125.000 nascidos-vivos para deficiência total de enzima, levando-se em consideraçäo que 30 por cento de casos suspeitos que repetiram novo teste. O teste semiquantativo colorimétrico foi considerado efetivo em identificar os casos afetados, com sensibilidade de 100 por cento especificidade de 99,88 por cento. A relaçäo custo/benefício foi satisfatória, permitindo a inclusäo do teste de detecçäo de deficiência de biotinidase no programa de triagem neonatal do Estado do Paraná

Efecto de la cocarboxilasa no degradable en la acidosis metabólica del neonato de término con asfixia perinatal / Effects of non degradable cocorboxilase and metabolic acidosis in term neonate with perinatal asphyxia

Antecedentes. La Cocarboxilasa No Degradable (CND); coenzima de la deshidrogenasa pirúvica, en la mitocondria, puede ejercer sus efectos benéficos en la normalización de pH y mantenimiento de la reserva alcalina, ya en un estudio anterior se demostró que no existían diferencias significativas al compararlo con bicarbonato. Objetivo. Demostrar que la CND revierte la acidosis metabólica relacionada a asfixia al nacimiento en recién nacidos de término eutróficos sin otra patología asociada. Material y método. En un estudio, realizado de julio de 1993 a julio de 1994, se estudiaron 10 recién nacidos, de término, eutróficos con Apgar igual o menor a 3 y con alteraciones acidobásicas demostradas mediante gasometrías. Se administra un total de 3 CND con materiales de 8 horas a razón de 80 mg/kg, determinandose gasometrías 15 minutos después de la administración, las variables consideradas fueron: pH, PCO2, PO2 y bicarbonato, exceso de base, tensión arterial media, frecuencia cardiaca, temperatura y hematocrito. Resultados. El peso fué de 3236ñ511.7 g, con una edad gestaciones de 40ñ1 semanas. En las gasometrías: el pH promedio basal fué 7.14ñ0.06, apreciandose corrección desde la 1a. muestra después de la administración de CND con 7.36ñ0.07. El exceso de base basal fué de -10.6ñ3.6 y también se encontrarón diferencias en las siguientes determinaciones. El mismo comportamiento se aprecia en la PCO2. Para la PO2 y HCO3 los resultados no presentaron diferencias demostrables en forma individual o tendencias significativas en el comportamiento grupal. Conclusiones. Se apreció correción en la acidosis 15 minutos después del uso de la CND, corrigiendo pH, HCO3 y Exceso de Base desde la primera administración. Corroborando lo expuesto en el primer estudio de este trabajo el efecto de la CND se hace patente al duplicar la dosis

Complicaciones motoras precoces en parkisonianos de novo tratados con L-Dopa más inhibidor periférico de la decarboxilasa / Early motor complications in parkisonians of novo treated with L-Dopa plus descarboxylase inhibitor

En una serie de 27 pacientes con enfermedad de Parkinson esencial de novo, en grado 2,7 de Hoehn y Yahr como promedio, con un rango de 1 a 4, tratados con levodopa más benserazida durante 16 semanas, se observaron efectos motores adversos leves a moderados en 12 casos (44,4 por ciento): 8 pacientes presentaron diskinesias, 7 distonías y un deterioro de final de dosis. La dosis máxima de levodopa ID utilizada fue de 750 mg los que alcanzaron a la tercera semana, previo ascenso paulatino desde 125 mg inicial. Posteriormente, se buscó la mínima dosis efectiva la cual correspondió a una cifra de 475 mg como media con un rango de 250 a 750 mg correspondiente a 49,7 por ciento de reducción, lográndose un efecto antiparkinsoniano similar al obtenido con la dosis máxima. Se discuten los posibles factores que hayan influido en el porcentaje alto de efectos motores adversos encontrados en esta serie

Efecto de la cocarboxilasa no degradable en la acidosis metabólica del recién nacido / Metabolic acidosis in the neonate: Efficacy of non degradable cocarboxylase

Antecedentes: La cocarboxilasa no degradable (CND), es una coenzima importante para la síntesis de la deshidrogenasa pirúvica, enzima que regula el catabolismo del piruvato y posiblemente la clave para la recuperación de la acidosis metabólica. Objetivo: Evaluar la eficacia de la cocarboxilasa no degradable para manejar la acidosis metabólica del recién nacido. Material y métodos: Se realizó un estudio doble ciego controlado, seleccionado aleatoriamente 30 neonatos durante un año, con diagnóstico gasométrico de acidosis metabólica (pH de 7.30 o menos, bicarbonato de 18 o menos, y exceso de base de -9 o mayor). Se administró solución isotónica de cloruro de sodio (grupo I) 1ml/kg, bicarbonato de sodio (grupo II) 2mEq/kg y CND (grupo III) a razón de 40 mg/kg. El volumen en todos los casos fue de 1 mL/kg. La primera dosis se administró en cuanto se realizó el diagnóstico y las dos siguientes con espacio de 8 horas. Se determinó el efecto de las sustancias en el pH y la corrección de la acidosis metabólica. Resultados: Los resultados mostraron un discreto aumento del pH con la CND sin diferencias para ninguna de las sustancias sobre la acidosis metabólica

Evaluacion de la capacidad de la desferrioxamina para revertir una severa porfiria inducida por hexaclorobenceno / Evaluation of desferrioxamine capacity to revert a severe porphyrid induced by hexachlorobenzene

El objeto del presente trabajo es investigar la capacidad de la desferrioxamina (DF) como quelante de hierro para disminuir o revertir una porfiria experimental severa inducida por hexaclorobenceno (HCB) en ratas. La DF se comienza a administrar después de 17 semanas de intoxicación con HCB y se continúa hasta la semana 27. Se cuantifican semanalmente excreciones en orina de ácido aminolevúlico (ALA), profobilinógeno y porfirinas. Al final del experimento se sacrifican los animales y se determinan porfirinas hepáticas y actividad de ALA sintetasa y porfirinógeno carboxi-liasa. Los resultados indican que el quelante adminsitrado no mejora el disturbio provocado por el HCB sobre el camino metabólico del hemo en las presentes condiciones. Se comparan estos resultados con los obtenidos cuando la DF se da conjuntamente con el HCB desde el comienzo de la administración del fungicida, situación en que sí el quelante retarda y atenúa el efecto porfirinogénico del HCB. Se discute el papel del hierro en la metabolización del HCB

Porfiria experimental por hidrocarburos clorados. Estudios sobre la porfirinogeno carboxi-liase en el modelo experimental de la porfiria cutanea tarda humana. / Experimental porphyria induced by chlorinated hydrocarbons.Studies of porphyrinogen carboxy-lyase in the experimental model of human cutaneous delayed porphyria

La porfirinogeno carboxi-liase (PCL) esta severamente disminuida por accion del hexaclorobenceno (HCB) y otros hidrocarburos policlorados, que reproducen en animales una porfiria semejante a la porfiria cutanea tarda humana. El presente trabajo tiene por objeto establecer si la fuerte disminucion de la PCL observada en ratas porfiricas por HCB se debe a la presencia de algun inhibidor o a la modificacion de la estructura proteica de la enzima. Los primeros intentos realizados, que consistieron en ensayos cruzados y de calentamiento y en ensayos in vitro con hidrocarburos clorados y otros compuestos relacionados, permitieron detectar la presencia en el higado de los animales porfiricos de un inhibidor termoestable o parcialmente termoestable, de la PCL normal. Paralelamente se purifico la enzima proveniente de ratas normales e intoxicadas con HCB, con el objeto de analizar una serie de propiedades y de ellas deducir si la diferencia en actividad se debe a diferencias a nivel estructural. Con los metodos empleados hasta el momento se logro una purificacion de aproximadamente 110 veces. El efecto de dietilditiocarbamato de sodio, pirofosfato de sodio, ditiotreitol, temperatura pH, v 02 el comportamiento cromatografico y el PM, indicarian que pueden existir dichas diferencias estructurales

Las poliaminas y el sistema reproductor de la hembra. / Polyamines and reproduction system in female

Las poliaminas putrescina, espermidina y espermina juegan un papel importante en el crecimiento y proliferacion celular. En organos del sistema reproductor de la hembra, su acumulacion depende del estimulo hormonal. Las actividades de ornitina descarboxilasa y de S-adenosilmetionina descarboxilasa surgen repentinamente al principio de la gestacion, paralelas a un incremento en la sintesis de RNA y proteinas. Estos parametros podrian ser indicativos del inicio de la decidualizacion inducida por el blastocisto. La inhibicion irreversible de la biosintesis de poliaminas por farmacos provoca detencion del desarrollo embrionario, lo que ofrece nuevas perspectivas contraceptivas en mamiferos

Ocorrência em São Paulo de um biotipo de Salmonellatyphimurium lisina descarboxilase negativa / Occurrence in São Paulo of a lysine decarboxylase-negative Salmonellatyphimurium biotype

Foram isoladas de material humano 1.000 cepas de Salmonella typhimurium, durante o período de 13 meses, começando em agosto de 1976. Dentre as cepas isoladas, 89 (8,90/0) não descarboxilaram a lisina. Sugere-se que as cepas lisina descarboxilase negativas estariam associadas a infecções hospitalares (AU).