Preparation and characterization of a novel antimicrobial film dressing for wound healing application

Antibacterial activity and good mechanical properties are some of the characteristics required for an appropriate film dressing. A novel polymer blend was developed for wound healing application. Twenty-four formulations using the polymers chitosan, poly(vinyl alcohol) and/or ɛ-Polylysine and the plasticizer glycerol were designed using factorial design and then the films were prepared by the casting/solvent evaporation method. Seventeen films were obtained among the twenty-four proposed formulations that were characterized by Field Emission Scanning Electron Microscopy (FE-SEM) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Mechanical properties, such as tensile strength (σ), elongation at break (ɛ) and Young's modulus (Y) as well as antibacterial properties were determined. The best candidate was then further analyzed with regard to porosity, Water Vapor Transmission Rate (WVTR), swelling and cytotoxicity experiments. The results showed a film with semi-occlusive characteristics, good mechanical properties and no toxic. Incorporation of ɛ-Polylysine increased antibacterial activity against gram-negative (Escherichia coli) and gram-positive (Staphylococcus aureus) bacteria

Optimización de cultivos de hepatocitos humanos para estudios de citotoxicidad / Optimization of human hepatocyte cultures for citotoxicity studies

Los cultivos de hepatocitos entregan un valioso acercamiento al estudio de las funciones metabólicas específicas del hígado, evaluación de citotoxicidad. No existen líneas humanas inmortales con función normal. La inmortalización de hepatocitos humanos con el método UCHT1(medio de cultivo condicionado por células tumorales de tiroides) permitirá prolongar la sobrevida y función de estos, siendo útil para evaluar funcionalidad y citotoxicidad. Objetivo: Optimizar el cultivo de hepatocitos humanos. Metodología: En cultivos primarios de hepatocitos humanos, se agregó medio UCHT1 cultivando en superficies de colágeno, polilisina, gelatina y matrigel. Como control positivo, se utilizó línea Gherschenson (GER) para evaluar curva de crecimiento y producción de Glucógeno (PAS). Se evaluó citotoxicidad (LIVE/DEAD) en hepatocitos GER expuestos a Metotrexato (10, 100 y 1000 mM) a 24, 48 y 72 hrs. Resultados: Se realizó 3 cultivos primarios. Fue efectiva la utilización de Polilisina y Colágeno. Duración 8 meses. No se ha realizado la curva de crecimiento, ni evaluación de funcionalidad en hepatocitos humanos. La línea GER tiene un crecimiento exponencial (tiempo duplicación: 36 hrs). Se observó producción de glucógeno en condiciones de diferenciación hasta 120 hrs. La citotoxicidad por Metotrexato tiene una curva dosis dependiente, significativa en todas las concentraciones (p<0,001) (CL50 a 1000 mM a 24 hrs). Conclusiones: Se logró establecer una línea primaria de hepatocitos humanos. La polilisina y el colágeno han optimizado el establecimiento de cultivos primarios. El método PAS permitió evaluar producción de glucógeno (diferenciación). Los valores de citotoxicidad demostraron un efecto dosis dependiente en las condiciones experimentales. Logrando estandarizar el método para evaluación futura de líneas celulares humanas.

Background: Hepatocyte cultures are a valuable tool to study specific metabolic liver functions and cytoxicity. Human hepatocyte cell lines with normal function do not exist. Immortalization of human hepatocytes with a rat thyroid cell line (UCHT1) allows long-term survival and function of these cells, becoming useful to evaluate functionality and cytotoxicity. Aim: To optimize long-term culture of human hepatocytes. Material and Methods: UCHT1 media was added to primary cultures of human hepatocytes, seeding in collagen, gelatin, matrigel and polilisine surfaces. Gherschenson cell line (GER) was used as a positive control to evaluate the growth curve and Glycogen production (PAS). Cytotoxicity was evaluated (LIVE/ DEAD) in GER hepatocytes exposed to Metotrexate (10, 100 and 1000 µM) 24, 48 and 72 hrs. Results: Three primary cultures were made. The use of Polilisine and Collagen was effective. Cultures were kept for 8 months. Growth curves or evaluation of functionality in human hepatocytes, were not carried out. GER cell line had an exponential growth (duplication time: 36 hrs). Production of glycogen in differentiation conditions was observed up to 120 hrs. Cytotoxicity by Metotrexate had a dose dependent curve with a 50% lethal dose calculated as 1000 µM at 24 hrs. Conclusions: A primary line of human hepatocytes was obtained. Polilisine and collagen optimized the establishment of primary cultures. PAS method allowed the evaluation of glycogen production (differentiation). Cytotoxicity demonstrated a dose dependent effect in experimental conditions.

The effects of drugs, ions, and poly-l-lysine on the excretory system of Schistosoma mansoni

We have been able to label the excretory system of cercariae and all forms of schistosomula, immature and adult worms with the highly fluorescent dye resorufin. We have shown that the accumulation of the resorufin into the excretory tubules and collecting ducts of the male adult worm depends on the presence of extracellular calcium and phosphate ions. In the adult male worms, praziquantel (PZQ) prevents this accumulation in RPMI medium and disperses resorufin from tubules which have been prelabelled. Female worms and all other developmental stages are much less affected either by the presence of calcium and phosphate ions, or the disruption caused by PZQ. The male can inhibit the excretory system in paired female. Fluorescent PZQ localises in the posterior gut (intestine) region of the male adult worm, but not in the excretory system, except for the anionic carboxy fluorescein derivative of PZQ, which may be excreted by this route. All stages of the parasite can recover from damage by PZQ treatment in vitro. The excretory system is highly sensitive to damage to the surface membrane and may be involved in vesicle movement and damage repair processes. In vivo the adult parasite does not recover from PZQ treatment, but what is inhibiting recovery is unknown, but likely to be related to immune effector molecules.

Membrana de látex da seringueira (Hevea brasiliensis), com e sem polilisina a 0,1 por cento e tela de marlex na reconstrucão de defeitos iatrogênicos da parede abdominal de ratos / Seringueira's latex membrane (Hevea brasiliensis) with and without polylysine 0, 1 percent and marlex mesh for the reconstruction of iatrogenics abdominal wall defects in rats

OBJETIVO: Comparar o implante de membrana de látex da seringueira sem e com polilisina 0,1 por cento e tela de marlex na reparacão de defeitos abdominais iatrogênicos em ratos. MÉTODOS: Ressectou-se em bloco um segmento circular de aproximadamente três centímetros de diâmetro da parede muscular abdominal ventral de 31 ratos Wistar, preservando-se a pele. Os animais foram divididos em 3 grupos: grupo látex sem polilisina, grupo látex com polilisina 0,1 por cento e grupo marlex. Os animais foram sacrificados aos cinco e aos 120 dias após o procedimento cirúrgico. Fragmentos da parede abdominal foram coletados e submetidos à avaliacão histopatológica. RESULTADOS: As principais alteracões observadas nos grupos tratados com as membranas de látex sem e com polilisina 0,1 por cento foram deiscência (21 animais) e evisceracão (dois animais). A eliminacão dos implantes nos grupos tratados com látex ocorreu, em média, aos 13,8 dias. Nestes animais ocorreu a formacão de tecido conjuntivo fibroso, similar ao observado no grupo que recebeu o marlex. Outras alteracões notadas foram aderências viscero-parietais em todos os grupos avaliados. CONCLUSAO: A membrana de látex da seringueira com e sem polilisina a 0,1 por cento, quando utilizada para reconstrucão de defeitos abdominais em ratos é eliminada, em média, aos 13,8 dias após a sua implantacão, deixando uma base fibrosa de reparacão, similar à observada após a implantacão da tela de marlex.

Úlceras de perna: tratamento e cicatrização / Leg ulcers: treatment and healing

Objetivos: Avaliar clinicamente a eficácia do tratamento dos diferentes tipos de úlceras de perna com a biomembrana de látex natural e verificar os efeitos adversos mais comuns do tratamento. Pacientes e métodos: foram avaliados 21 pacentes portadores de úlceras de perna do ambulatório de dermatologia HU-UFJF, selecionados aleatoriamente e submetidos ao protocolo. Os curativos constituiam-se de: lavagem das feridas com soro fisiológico 0,9%, aplicação da biomembrana sobre o fundo da úlcera e oclusão realizados no domicilio, pelo pacienteem dias alternados, sendo acompanhado semanalmente no ambulatório. Resultados: a média de idade dos pacientes foi de 64.5 anos, sendo 29% do sexo masculino e 71% feminino. A insuficiência venosa isoladamente foi encontrada em 33,3% dos pacientes e associada à HAS em 52.4%. As úlceras foram classificadas como venosas em 57.6%, hipertensivas em 33.6% e outras em 9.6% com o tempo médio de duração de 6,15 anos. Sinais clínicos de granulação foram evidenciados já na primeira semana em 100% dos casos. Sinais de reepitelização foram observados em 52,4% dos pacientes, num tempo médio de tratamento de 41,4 dias. O surgimento ou aumento da dor foi o efeito adverso mais relatado em 57% das úlceras hipertensivas e em 25% das venosas. O aumento das úlceras foi causa de suspensão da biomembrana em 57% das hipertensivas e em 8% das venosas, sendo que esta apresentou complicação por erisipéla.

Isolation of a frog lectin using polylysine to reduce non-specific interactions with heparin binding ligand

Polylysine is a polycation used in histology to glue tissue sections to glass slides. It was successfully used to eliminate positively charged proteins from heparin-agarose beds applied for affinity chromatography facilitating the preparative steps in the isolation and purification of heparin binding lectins from the ovary of the frog Leptodactylus occellatus. The addition pretreatment of agarose-heparin beds with polylysine increased more than 3-fold the hemagglutinating capacity of eluted lectin

Penicilina y pruebas de sensibilidad / Penicillin and hypersensitivity test

Se hace un recuento histórico sobre la alergia penicilínica y las pruebas de sensibilidad; se presentan las bases inmunológicas, las manifestaciones clínicas y los factores de riesgo asociados a esta hipersensibilidad. Se explica detalladamente la metodología necesaria para llevar a cabo pruebas cutáneas que sean de valor clínico.

Information is summarized in this review on the history, immunological bases, clinical manifestations and risk factors associated with penicillin allergy. A detailed methodology is explained to perform clinically significant skin tests

Development of an in vitro stage prior to neural transplantation: substrate adhesion of cell aggregates

Células fetales obtenidas del cuerpo estriado, corteza cerebral, septum y mesencéfalo ventral fueron sometidas a condiciones de cultivo en rotación durante varios períodos, con o sin el agregado de suero, o tratamiento con arabinósido de citosina (ARA-C). Luego de varios días en cultivo rotatorio, falta de suero en el medio de cultivo o tratamiento con ARA-C se observó reducción del número de agregados adherentes a cápsulas pretratadas con polilisina o Matrigel. Asimismo, luego de varios días en cultivo rotatorio se observó disminución de la adhesividad a una monocapa de células nerviosas fetales. Agregados de segunda generación resultantes de la tripsinización inicial y el ulterior reagregado durante 24 h de agregados previamente no adherentes, mostraron índices de adhesividad similares a los de primera generación. Estas observaciones sugieren que, en las presentes condiciones de cultivo, moléculas superficiales asociadas a membrana que median la adhesividad celular a sustrato sufren cambios reversibles con el tiempo. Puesto que la mayor parte de las condiciones de cultivo mencionadas afectan en forma primaria a las células de la glía, se sugiere también que este tipo celular sería básicamente responsable de los cambios observados en la adhesión a sustrato. Se considera que estos resultados tienen implicancia para el desarrollo de un estadio intermedio de cultivo "in vitro", previo al transplante de células nerviosas