Co-transfection of hepatocyte growth factor and truncated TGF-ß type II receptor inhibit scar formation

Wound scarring remains a major challenge for plastic surgeons. Transforming growth factor (TGF)-β plays a key role in the process of scar formation. Previous studies have demonstrated that truncated TGF-β type II receptor (t-TGF-βRII) is unable to continue signal transduction but is still capable of binding to TGF-β, thereby blocking the TGF-β signaling pathway. Hepatocyte growth factor (HGF) is a multifunctional growth factor that promotes tissue regeneration and wound healing. Theoretically, the combination of HGF and t-TGF-βRII would be expected to exert a synergistic effect on promoting wound healing and reducing collagen formation. In the present study, lentivirus-mediated transfection of the two genes (t-TGF-βRII/HGF) into fibroblasts in vitro and in a rat model in vivo was used. The results demonstrated that the expression of t-TGF-βRII and HGF in NIH-3T3 cells was successfully induced. The expression of both molecules significantly reduced collagen I and III expression, and also inhibited fibroblast proliferation. Furthermore, histological examination and scar quantification revealed less scarring in the experimental wound in a rat model. Moreover, on macroscopic inspection, the experimental wound exhibited less visible scarring compared with the control. Therefore, the present study demonstrated that the combination gene therapy of t-TGF-βRII and HGF promoted wound healing, with less scarring and more epithelial tissue formation, not only by suppressing the overgrowth of collagen due to its antifibrotic effect, but also by promoting tissue regeneration.

Solid dispersion-based pellet for colon delivery of tacrolimus through time- and pH-dependent layer coating: preparation, in vitro and in vivo studies

The intent of the present investigation is to develop and evaluate colon-specific coated tacrolimus solid dispersion pellet (SDP) that retards drug release in the stomach and small intestine but progressively releases in the colon. Tacrolimus-SDP was prepared by extrusion-spheronization technology and optimized by the micromeritic properties including flowability, friability, yields and dissolution rate. Subsequently, the pH-dependent layer (Eudragit L30D55) and time-dependent layer (Eudragit NE30D and L30D55) were coated on the SDP to form tacrolimus colon-specific pellets (CSP) using a fluidized bed coater. Under in vitro gradient pH environment, tacrolimus only released from CSP after changing pH to 6.8 and then quickly released in the phosphate buffer solution of pH 7.2. The Cmax of CSP was 195.68 ± 3.14 ng/mL at Tmax 4.5 ± 0.24 h where as in case of SDP, the Cmax was 646.16 ± 8.15 ng/mL at Tmax 0.5 ± 0.03 h, indicating the ability of CSP targeted to colon. The highest area under the curve was achieved 2479.58 ± 183.33 ng·h/mL for SDP, which was 2.27-fold higher than tacrolimus suspension. However, the best biodistribution performance was achieved from CSP. In conclusion, SDP combining of pH- and time-dependent approaches was suitable for targeted delivery of tacrolimus to colon.

Relación entre el factor de crecimiento hepático y el estadio de la cirrosis / Relationship between Hepatocyte Growth Factor (Hgf) and Stage of Cirrosis

Introducción: en el hígado, el factor de crecimiento hepático (FCH) es conocido por ser un potente agente mitogénico tanto in vivo como in vitro. Sin embargo, el papel del FCH en la cirrosis no está completamente claro y algunos estudios lo señalan como un marcador de severidad en la cirrosis, en la insuficiencia hepática aguda y en la hepatitis crónica. Objetivos: determinar la relación entre el FCH y el estadio de la cirrosis hepática e identificar los factores asociados con los niveles de FCH en esta población. Metodología: se evaluaron todos los pacientes con cirrosis hepática atendidos desde enero a marzo de 2014. La elastografía transitoria (ET), la recopilación de la información clínica y la extracción de la muestra para la determinación del FCH se realizó de forma simultánea en el momento de la inclusión. Resultados: no se encontró relación entre los niveles de FCH y la clasificación de Child-Pugh; sin embargo, se observaron niveles más elevados en pacientes con enfermedad descompensada. Se determinó una asociación lineal positiva entre el FCH y la dureza hepática estimada por elastografía (b = 0,53; r2 = 0,26; p = 0,002) y una asociación lineal negativa con la albúmina (b = -0,62; r2 = 0,39; p <0,001). Únicamente la albúmina conservó esta asociación en el análisis multivariante. Conclusión: el FCH es un marcador de severidad en la cirrosis hepática. La albúmina y el grado de fibrosis determinada por ET se asociaron con niveles de FCH

Introduction: Hepatocyte growth factor (HGF) is known to be a potent mitogenic agent both in vivo and in vitro. The role of HGF in cirrhosis is not completely clear, but some studies point to it as a marker of severity in cirrhosis, acute liver failure and chronic hepatitis. Objective: The objective of this study was to determine the relationship between HGF and the stage of hepatic cirrhosis and to identify factors associated with HGF levels in this population. Methodology: All patients with hepatic cirrhosis treated from January to March 2014 were evaluated. At the time patients were enrolled in the study their clinical histories were taken and they underwent transient elastography and extraction of samples for measurement of HGF. Results: No relationships were found between HGF levels and Child-Pugh classifications, however, higher levels of HGF were observed in patients with decompensated disease. A positive linear relations was found between HGF and hepatic hardness estimated by elastography (b = 0.53, r2 = 0.26, p = 0.002) and a negative linear relation was found between HGF and albumin (b = -0.62, r2 = 0.39, p <0.001). Only albumin retained this association in the multivariate analysis. Conclusion: HGF is a marker of severity in liver cirrhosis. Albumin and the degree of fibrosis determined by transient elastography were associated with HGF levels.

Use of solid dispersions to increase stability of dithranol in topical formulations

The present study was planned to improve the stability of dithranol using solid dispersions (SD). Two different SD at a 1:9 ratio of dithranol/excipient were prepared: one of them using glyceryl behenate as excipient and the other using a mixture of argan oil with stearic acid (1:8 ratio) as excipient. Pure dithranol and SD of dithranol were incorporated in an oil-in-water cream and in a hydrophobic ointment in a drug/dermatological base ratio of 1:10. The physical and mechanical properties of semisolid formulations incorporating the pure drug and the developed SD were evaluated through rheological and textural analysis. To evaluate the stability, L*a*b* color space parameters of SD and semisolid formulations, and pH of hydrophilic formulations were determined at defined times, during one month. Each sample was stored at different conditions namely, light exposure (room temperature), high temperature exposition (37 °C) (protected from light) and protected from light (room temperature). Despite higher values of firmness and adhesiveness, hydrophobic ointment exhibited the best rheological features compared to the oil-in-water cream, namely a shear-thinning behavior and high thixotropy. These formulations have also presented more stability, with minor changes in L*a*b* color space parameters. The results of this study indicate that is possible to conclude that the developed SD contributed to the increased stability of dithranol.

Este trabalho teve como objetivo aumentar a estabalidade do ditranol através da preparação de dispersões sólidas (DS). Prepararam-se duas DS diferentes em proporção de 1:9 de ditranol/excipiente: em uma das DS utilizou-se beenato de glicerila como excipiente e na outra se utilizou mistura de óleo de argan com ácido esteárico (razão 1:8). Posteriormente, efetuou-se a incorporação de ditranol puro e das DS contendo este fármaco num creme hidrófilo ou óleo-água (O/A) e em pomada hidrófoba, na proporção 1:10 (fármaco ou respetivas DS/base dermatológica). As propriedades físicas e mecânicas das formulações semissólidas incorporando fármaco ou as respetivas DS previamente desenvolvidas, foram avaliadas através da análise do comportamento reológico e das propriedades de textura. Para avaliar a estabilidade, os parâmetros do espaço de cor L*a*b* das DS e das formulações semissólidas e o pH das preparações hidrófilas foram determinados em períodos de tempo definidos, durante um mês para cada amostra armazenada sob diferentes condições, especificamente, exposição à luz (à temperatura ambiente), protegidas da luz à temperatura elevada (37 °C) e protegidas da luz (temperatura ambiente). Embora tenham apresentado valores de firmeza e de adesividade mais elevados, as pomadas hidrófobas apresentaram melhores características reológicas do que os cremes óleo-água. Além disso, as pomadas hidrófobas também apresentaram melhor estabilidade, com pequenas alterações nos parâmetros do espaço de cor L*a*b*. Os resultados deste trabalho permitiram concluir que as DS desenvolvidas contribuíram para o aumento da estabilidade do ditranol.

Development of fast dispersing tablets of nebivolol: experimental and computational approaches to study formulation characteristics

Formulation of FDT (fast dispersing tablets) of nebivolol was optimized and evaluated using simplex lattice design (SLD). The influence of type and concentration of three disintegrants viz., Ac-Di-Sol, Primojel and Polyplasdone XL on hardness, friability and disintegration time of tablet was studied. Response surface plot and the polynomial equations were used to evaluate influence of polymer on the tablet properties. Results were statistically analyzed using ANOVA, and a p < 0.05 was considered statistically significant. Results reveal that fibrous integrity and optimal degree of substitution in Primojel and Ac-Di-Sol are mainly responsible for the hardness of the tablet. Use of Polyplasdone in higher percentage in tablet formulation may result in high friability. Increase in concentration of Ac-Di-Sol increases the disintegration time but increased concentration of Primojel in the tablet formulation decreases the disintegration time. This is also evident from model terms for disintegration time with a high 'F' value of 14.69 and 'p' value of 0.0031 (<0.05). The reason could be that Primojel has higher swelling properties and an optimum hydration capacity, which favors fast disintegration of a tablet. In conclusion, careful selection of disintegrant for FDT could improve their properties. Use of Simplex Lattice Design for formulation development could simplify the formulation process and reduce the production cost.

Otimizou-se e avaliou-se formulação de comprimidos de dispersão rápida (CDR) de nebivolol, usando planejamento de grade simplex (PGS). Estudou-se a influência do tipo e da concentração de três desintegrantes viz, Ac-Di-Sol, Primojel e Poliplasdona XL, na dureza, friabilidade e tempo de desintegração do comprimido. O gráfico de superfície de resposta e as equações polinomiais foram utilizados para avaliar a influência do polímero nas propriedades do comprimido. Os resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA, considerando-se p < 0,05 como estatisticamente significativo. Os resultados revelam que a integridade das fibras e o grau de substituição ótimo no Primojel e Ac-Di-Sol são os principais responsáveis pela dureza do comprimido. O uso de Poliplasdona em maior porcentagem na formulação pode produzir friabilidade elevada. O aumento de Ac-Di-Sol aumenta o tempo de desintegração, mas o aumento da concentração de Primojel na formulação diminui o tempo de desintegração. Isto é, também, evidente no modelo de tempo de desintegração com alto valor de "F" de 14,69 e "p" de 0,0031 (< 0,05). A razão poderia ser que o Primojel tem maiores propriedades de intumescimento e ótima capacidade de hidratação, favorecendo a desintegração rápida do comprimido. Em conclusão, a cuidadosa seleção de um desintegrante para CDR poderia aprimorar suas propriedades. O uso do PGS para o desenvolvimento da formulação poderia simplificar o processo de formulação e reduzir o custo de produção.

Induced maturation of hepatic progenitor cells in vitro

Hepatic progenitor cells (HPCs) are a potential cell source for liver cell transplantation but do not function like mature liver cells. We sought an effective and reliable method to induce HPC maturation. An immortalized HP14.5 albumin promoter-driven Gaussian luciferase (ALB-GLuc) cell line was established from HPCs isolated from fetal mouse liver of post coitus day 14.5 mice to investigate the effect of induction factors on ALB promoter. HP14.5 parental cells were cultured in DMEM with different combinations of 2% horse serum (HS), 0.1 µM dexamethasone (DEX), 10 ng/mL hepatic growth factor (HGF), and/or 20 ng/mL fibroblast growth factor 4 (FGF4). Trypan blue and crystal violet staining were used to assess cell proliferation with different induction conditions. Expression of hepatic markers was measured by semi-quantitative RT-PCR, Western blot, and immunofluorescence. Glycogen storage and metabolism were detected by periodic acid-Schiff and indocyanine green (ICG) staining. GLuc activity indicated ALB expression. The combination of 2% HS+0.1 µM Dex+10 ng/mL HGF+20 ng/mL FGF4 induced the highest ALB-GLuc activity. Cell proliferation decreased in 2% HS but increased by adding FGF4. Upon induction, and consistent with hepatocyte development, DLK, AFP, and CK19 expression decreased, while ALB, CK18, and UGT1A expression increased. The maturity markers tyrosine aminotransferase and apolipoprotein B were detected at days 3 and 6 post-induction, respectively. ICG uptake and glycogen synthesis were detectable at day 6 and increased over time. Therefore, we demonstrated that HPCs were induced to differentiate into functional mature hepatocytes in vitro, suggesting that factor-treated HPCs may be further explored as a means of liver cell transplantation.

Effect of hepatocyte growth factor and angiotensin II on rat cardiomyocyte hypertrophy

Angiotensin II (Ang II) plays an important role in cardiomyocyte hypertrophy. The combined effect of hepatocyte growth factor (HGF) and Ang II on cardiomyocytes is unknown. The present study was designed to determine the effect of HGF on cardiomyocyte hypertrophy and to explore the combined effect of HGF and Ang II on cardiomyocyte hypertrophy. Primary cardiomyocytes were isolated from neonatal rat hearts and cultured in vitro. Cells were treated with Ang II (1 µM) alone, HGF (10 ng/mL) alone, and Ang II (1 µM) plus HGF (10 ng/mL) for 24, 48, and 72 h. The amount of [³H]-leucine incorporation was then measured to evaluate protein synthesis. The mRNA levels of β-myosin heavy chain and atrial natriuretic factor were determined by real-time PCR to evaluate the presence of fetal phenotypes of gene expression. The cell size of cardiomyocytes was also studied. Ang II (1 µM) increased cardiomyocyte hypertrophy. Similar to Ang II, treatment with 1 µM HGF promoted cardiomyocyte hypertrophy. Moreover, the combination of 1 µM Ang II and 10 ng/mL HGF clearly induced a combined pro-hypertrophy effect on cardiomyocytes. The present study demonstrates for the first time a novel, combined effect of HGF and Ang II in promoting cardiomyocyte hypertrophy.

Development and evaluation of ofloxacin orally disintegrating tablets

Bitter taste of ofloxacin, a broad spectrum bactericidal agent, is masked and orally disintegrating tablets were formulated. The bitter taste is masked by forming complex between drug and weak cation exchange resins, Tulsion 335 and Indion 204. Effect of pH and drug:resin ratio on the drug loading was studied. Maximum drug loading was observed at pH 6. Ratio of 1:2 of drug:resin masked almost complete bitterness of ofloxacin. Formation of complexes was confirmed by IR spectroscopy. Physical characterization of taste masked complexes was carried out. Present work envisages the taste masking of ofloxacin and development of orally disintegrating tablets. The effect of pH and resin quantities on drug loading were studied to find the optimum conditions of drug loading for complete taste masking. Effect of superdisintegrants like sodium starch glycolate, croscarmellose sodium and polyplasdone XL at varying level on physical parameters of compressed tablets was also assessed. The formulations containing 5 % w/w polyplasdone XL showed about 90 % of drug release within 5 minutes. No significant differences were observed in the physical parameters of resinates as well as tablets prepared from Tulsion 335 and Indion 204.

O gosto amargo de ofloxacina, agente bactericida de largo espectro, é mascarado e formularam-se comprimidos dispersíveis. O sabor amargo é mascarado pela formação de complexo entre o fármaco e resinas de troca catiônica fraca, Tulsion 335 e Indion 204. Efeito do pH e da proporção fármaco: resina sobre a carga de fármaco foi estudada. Carga de fármaco máxima foi observada em pH 6. Proporção 1:2 do fármaco: resina mascarou quase completamente o gosto amargo de ofloxacina. A formação de complexos foi confirmada por espectroscopia no IV. Caracterização física dos complexos de sabor mascarado foi realizada. O presente trabalho preconiza o mascaramento do gosto de ofloxacina e desenvolvimento decomprimidos por via oral, se desintegrando. O efeito do pH e da resina quantidades de carga de fármaco foram estudadas paraencontrar as condições óptimas de carga de fármaco para dissimulação do saborcompleto. Efeito da superdisintegrants como amido glicolato de sódio, croscarmelose sódica e Polyplasdone XL em diferentes níveis de parâmetros físicos de comprimidos também avaliados foi avaliada. As formulações contendo 5 %w/w Polyplasdone XL mostraram cerca de 90% de libertação do fármaco no prazo de 5 minutos. Não foram observadas diferenças significativas nos parâmetros físicos de resinatosbem como comprimidos preparados a partir de Tulsion 335 e Indion 204.

Comparative study of sustained-release lipid microparticles and solid dispersions containing ibuprofen

Ibuprofen is one of the most important non-steroidal anti-inflammatory drugs used in the treatment of inflammatory diseases. In its pure state, ibuprofen presents poor physical and mechanical characteristics and its use in solid dosage forms needs the addition of excipients that improve these properties. The selection of the best excipients and the most suitable pharmaceutical dosage form to carry ibuprofen is very important for the industrial success of this drug. Given these factors, lipid microparticles and solid dispersions of ibuprofen with cetyl alcohol, stearic acid, and hydrogenated castor oil were prepared. These formulations were intended to improve the physical and mechanical characteristics and to sustain the release of this drug. Physical mixtures were also prepared with the same ingredients in similar proportions. The solid dispersions of ibuprofen/stearic acid and ibuprofen/hydrogenated castor oil showed the best flow characteristics compared with pure ibuprofen. Further, gelatin capsules filled with lipid microparticles and solid dispersions were submitted to dissolution tests in order to study the influence of the prepared systems in the release profiles of ibuprofen. Prolonged release of ibuprofen was achieved with the lipid microparticles and solid dispersions prepared with the different types of excipients.

O ibuprofeno é um dos antiinflamatórios não esteróides mais utilizados no tratamento de patologias associadas a processos inflamatórios. Este fármaco, quando no seu estado puro, apresenta características físicas e mecânicas pouco satisfatórias e a sua utilização em formas sólidas só é possível se forem adicionados excipientes que permitam melhorar estas propriedades. A seleção dos excipientes ideais e da forma farmacêutica mais adequada para veicular o ibuprofeno é fundamental para o sucesso industrial deste fármaco. Tendo em conta estes fatores, prepararam-se micropartículas lipídicas e dispersões sólidas de ibuprofeno com cada um dos seguintes excipientes: álcool cetílico, ácido esteárico e óleo de rícino hidrogenado. Estas formulações tinham por finalidade melhorar as características físicas e mecânicas e prolongar a liberação deste fármaco. Foram, também, preparadas misturas físicas do ibuprofeno com os mesmos excipientes e nas mesmas proporções. As dispersões sólidas de ibuprofeno/ácido esteárico e as dispersões sólidas de ibuprofeno/óleo de rícino hidrogenado foram aquelas que apresentaram melhores características de escoamento comparativamente com o ibuprofeno puro. Por outro lado, foram preparadas cápsulas de gelatina com as diferentes micropartículas lipídicas e dispersões sólidas e submetidas a ensaios de dissolução com o objetivo de estudar a influência dos sistemas preparados nos perfis de liberação do ibuprofeno. A liberação prolongada do ibuprofeno foi conseguida nas diferentes micropartículas lipídicas e dispersões sólidas preparadas com os diferentes excipientes.

Mechanisms of RON-mediated epithelial-mesenchymal transition in MDCK cells through the MAPK pathway

The epithelial-mesenchymal transition (EMT) is involved in neoplastic metastasis, and the RON protein may be involved. In the present study, we determined the role and the mechanisms of action of RON in EMT in Madin-Darby canine kidney (MDCK) cells by Western blot and cell migration analysis. Activation of RON by macrophage stimulating protein (MSP) results in cell migration and initiates changes in the morphology of RON-cDNA-transfected MDCK cells. The absence of E-cadherin, the presence of vimentin and an increase in Snail were observed in RE7 cells, which were derived from MDCK cells transfected with wt-RON, compared with MDCK cells. Stimulation of RE7 cells with MSP resulted in increased migration (about 69 percent of the wounded areas were covered) as well as increased activation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (Erk1/2) and glycogen synthase kinase-3β (GSK-3β; the percent of the activation ratio was 143.6/599.8 percent and 512.4 percent, respectively), which could be inhibited with an individual chemical inhibitor PD98059 (50 μM) specific to MAPK/ERK kinase (the percent inhibition was 98.9 and 81.2 percent, respectively). Thus, the results indicated that RON protein could mediate EMT in MDCK cells via the Erk1/2 pathway. Furthermore, GSK-3β regulates the function of Snail in controlling EMT by this pathway.

Efeitos da injeção e reinjeção do fator de crescimento de hepatócito sobre a cicatrização de pregas vocais de coelhos / Effects of hepatocyte growth factor injection and reinjection on healing in the rabbit vocal fold

Objetivos: Fator de crescimento de hepatócito (HGF) é um polipeptídeo multifuncional, envolvido na embriogênese e regeneração tecidual, com intensa atividade antifibrótica. Os objetivos do presente estudo foram avaliar os efeitos da injeção e reinjeção do HGF coincidindo com seu pico de ação sobre a densidade de colágeno, densidade de vasos, processo inflamatório na lâmina própria e espessura média do epitélio das pregas vocais escarificadas de coelhos. Métodos: Catorze coelhos foram submetidos à injúria em ambas as pregas vocais, subdivididos em grupos 1 e 2. Nos animais do grupo 1 injetou-se HGF nas pregas vocais direitas e nos animais do grupo 2 o HGF foi injetado bilateralmente, sendo reinjetado nas pregas vocais direitas 10 dias após, coincidindo com seu pico de ação. As pregas vocais esquerdas funcionaram como controle, e as laringes foram avaliadas respectivamente aos 30 e 40 dias, através de análise histológica. Resultados: Nossos resultados demonstraram menor densidade de colágeno nas pregas vocais direitas em relação aos controles em ambos os grupos (p=0,018). Densidade de vasos foi maior nas pregas vocais direitas dos animais do grupo 2 (p=0,018); a espessura média do epitélio e o processo inflamatório avaliado na lâmina própria mostraram diferenças estatisticamente não-significantes. Conclusões: A injeção do HGF promoveu menor densidade de colágeno na lâmina própria e a reinjeção levou à menor densidade de colágeno e maior densidade de vasos em pregas vocais escarificadas de coelhos.

Objectives: Hepatocyte growth factor (HGF) is a multifunctional polypeptide that plays various roles in embryogenesis and tissue regeneration and exhibits marked antifibrotic activity. The present study sought to assess the effects of HGF injection and reinjection coinciding with its peak of activity on collagen density, vessel density, inflammatory reaction in the lamina propria, and mean epithelial thickness in the injured rabbit vocal fold. Methods: Fourteen rabbits were subdivided into two groups and underwent scarring of both vocal folds. Animals in group 1 received HGF injections into the right vocal fold, whereas those in group 2 received bilateral HGF injections and a single reinjection into the right vocal fold 10 days after the first, to coincide with the peak of HGF activity. The left vocal folds served as controls in both groups. Histological assessment of laryngeal specimens was performed at 30 and 40 days respectively. Results: In both groups, collagen density was lower in the right vocal folds than in the left (control) folds (p=0.018). Vessel density was higher in the right vocal folds in group 2 (p=0.018). Differences were found in mean epithelial thickness and inflammatory reaction in the lamina propria, but did not reach statistical significance. Conclusions: In the scarred rabbit vocal fold, HGF injection is associated with decreased collagen density in the lamina propria, whereas reinjection after 10 days produces decreased collagen density and higher vessel density.

Terapia celular no tecido muscular: influência do HGF, matriz extracelular e metaloproteases na migração de mioblastos humanos / Cellular therapy in the fabric muscular: influence of the HGF, extracellular matrix and metalloproteases in the migration of human myoblasts

Um dos maiores desafios para o delineamento de terapia celular em doenças musculares é encontrar as condições ideais para a inserção das células do doador no músculo receptor. Na presente tese, avaliamos inicialmente o impacto de irradiação e criolesão local nos músculos de camundongos imunodeficientes Rag2/(gama)c/C5 no processo de transplante de mioblastos, analisando a migração, proliferação e sobrevivência dessas células. Vimos que, o tratamento prévio de músculos receptores com irradiação e criolesão promoveu um aumento na dispersão e sobrevivência dos precursores injetados. Além disso, observamos acúmulo das células transplantadas em sítios onde foi detectado um aumento da deposição de laminina. Experimentos in vitro confirmaram que a laminina é capaz de induzir a migração, proliferação e sobrevivência dessas células. Fatores de crescimento vêm sendo bastante utilizados como forma de promover aumento da dispersão das células ao longo músculo receptor. Nesse sentido definimos o papel do fator de crescimento de hepatócito (HGF) na migração dessas células frente a diferentes moléculas de matriz extracelular, relacionando tal efeito com a produção de metaloproteases de matriz extracelular (MMP). HGF foi capaz de aumentar a migração mioblastos quando estes foram cultivados sobre laminina-111 ou fibronectina. Além disso, vimos por zimografia que diferentes doses de HGF foram capazes de aumentar a secreção de MMP-2, e que o bloqueio da produção dessa enzima poderia inibir parcialmente o incremento de respostas migratória induzido por HGF e proteínas de matriz extracelular. Tomados em conjunto, estes dados sugerem um efeito conjunto de MMP-2 e HGF. Nesse sentido, tais interações devem ser levadas em conta nas tentativas de aumentar a migração de precursores miogênicos in vivo.

Liver cirrhosis and hepatic stellate cells / Cirrose hepática e células estreladas do figado

The cirrhosis represents the final stage of several chronic hepatic diseases and it is characterized by the presence of fibrosis and morphologic conversion from the normal hepatic architecture into structurally abnormal nodules. In the evolution of the disease there is loss of the normal vascular relationship and portal hypertension. There are also regenerative hepatocelular alterations that become more prominent with the progression of the disease. The liver transplantation continues to be the only therapeutic option in cases of disease in terminal phase. The hepatic stellate cells (HSC) are perisinusoidal cells that store vitamin A and produce growth factors, citocins, prostaglandins and other bioactive substances. They can suffer an activation process that convert them to cells with a phenotype similar to myofibroblasts. When activated, they present increased capacity of proliferation, mobility, contractility and synthesis of collagen and other components of extracelular matrix. They possess cytoplasmic processes adhered to sinusoids and can affect the sinusoidal blood flow. HSC are important in pathogenesis of fibrosis and portal hypertension.

A cirrose representa o estágio final de diversas doenças hepáticas crônicas e é caracterizada pela presença de fibrose e conversão da arquitetura hepática normal em nódulos estruturalmente anormais. Na evolução da doença ocorre perda da relação vascular normal e hipertensão portal. Há também alterações regenerativas hepatocelulares que se tornam mais proeminentes com a progressão da doença. O transplante hepático permanece como a única opção terapêutica nos casos de doença em fase terminal. As células estreladas hepáticas (CEH) são células perisinusoidais que armazenam vitamina A e produzem fatores de crescimento, citocinas, prostaglandinas e outras substâncias bioativas. Podem sofrer um processo de ativação para um fenótipo semelhante a miofibroblastos. Quando ativadas apresentam maior capacidade de proliferação, motilidade, contractilidade, síntese de colágeno e componentes da matriz extracelular. Possuem processos citoplasmáticos aderidos aos sinusóides e podem afetar o fluxo sangüíneo sinusoidal. As CEH são importantes na patogênese da fibrose e hipertensão portal.

A molecular view of liver regeneration / Uma visão molecular da regeneração hepática

The purpose of this review was to carry out an analysis of the liver regenerative process focusing on the molecular interactions involved in this process. The authors undertook a review of scientific publications with a focus on the liver regeneration.The cellular processes involved in liver regeneration require multiple systematic actions related to cytokines and growth factors. These interactions result in the initiation of mitogenic potential of the hepatocytes. The action of these modulators in the regenerative process require a processing in the extra-cellular matrix. Serines and metal proteins are responsible for the bio availability of cytokines and growth factors so that they can interact as receptors in the cellular membrane generating signaling events for the beginning and end of the liver regenerative process. The exact mechanism of interaction between cells, cytokines and growth factors is not well established yet. A series of ordered events that result in the hepatic tissue regeneration has been described. The better understanding of these interactions should provide a new approach of the treatment for liver diseases, aiming at inducing the regenerative process.

O objetivo desta revisão foi desenvolver uma análise do processo regenerativo do fígado, focando as interações moleculares envolvidas neste processo.Os processos celulares envolvidos na regeneração hepática requerem múltiplas ações sistemáticas relacionadas com citoquinas e fatores de crescimento. Estas interações resultam na iniciação do potencial mitogênico dos hepatócitos. A ação destes moduladores do processo regenerativo necessita de processamento no meio extra celular. As serinas e metaloproteínas são responsáveis pela biodisponibilização de citoquinas e fatores de crescimento, para que então possam interagir com receptores na membrana celular gerando os eventos sinalizadores para o inicio e o término do processo regenerativo hepático.O exato mecanismo de interação entre células, citoquinas e fatores de crescimento não está bem estabelecido. Tem-se descrito uma série de eventos ordenados que resulta na regeneração do tecido hepático. O melhor entendimento destas interações leva a uma nova abordagem de tratamento para doenças hepáticas, objetivando a indução do processo regenerativo.

New localities for Heliconius besckei Ménétriés and Heliconius sara (Fabricius) (Lepidoptera: Nymphalidae) in Bahia, Brazil

New occurrences for two Heliconius Kluk species are reported for sites in inland Bahia, Brazil. New inland sites are reported for Heliconius sara (Fabricius), a species normally found at coastal regions. To our knowledge, Heliconius besckei Ménétriés, a species restricted to cool mountain habitats, is reported for Northeastern Brazil for the first time.

Novas ocorrências para duas espécies de Heliconius Kluk são registradas para áreas no interior da Bahia. Novas áreas interioranas para Heliconius sara (Fabricius), uma espécie encontrada na costa, são apresentadas. Este é, provavelmente, o primeiro relato de Heliconius besckei Ménétriés para o Nordeste brasileiro.

Tratamento da hepatite C com fator promotor do crescimento do hepatócito (phgf) / Treatment of hepatitis C with promoting hepatocyte growth factor

Em 1987, pesquisadores chineses do Hospital da Força Aérea,localizado em Guangzhou, China, extraíram do fígado de porco recém-nato uma substância denominada promoting hepatocyte growth factor (phgf), que funcionaria como um estimulador do crescimento do hepatócito. Para tanto, agiria no DNA do hepatócito, promovendo síntese e divisão celular, com efeitos antifibrose e antiinflamatório. Investigações recentes sugerem que o phgf possa agir no tratamento das hepatites virais. Desenvolveu-se estudo randomizado e controlado do uso intravenoso do phgf em 18 pacientes com diagnóstico histólogico de hepatite crônica ativa ou cirrose hepática em atividade e RNA-VHC positivo. Todos os pacietes apresentavam aumento da ALT por um período mínimo de 12 meses. Outras causas de hepatopatia foram afastadas (viral, auto-imune, medicamentosa, metabólica e alcoólica). O estudo foi aprovado pela Comissão de Ética do Hospital Universitário Clementino Fraga Filho, Rio de Janeiro. O tratamento foi instituído durante três meses e, mensalmente, eram tomadas amostras de sangue para análise do hemograma, leucograma, contagem de plaquetas, TAP e dosagem da ALT. Determinações de carga viral antes e no final do tratamento foram feitas pelo teste Amplicor HCV Monitor-Roche. Todos os pacientes finalizaram o tratamento, sem a ocorrência de efeitos colaterais atribuíveis à medicação. Em três pacientes a ALT normalizou-se durante o uso de phgf(16,9por cento), com retorno aos valores basais pré-tratamento após a sua interrupção. Porém, em relação ao grupo controle, os valores da ALT diminuiram sensivelmente no grupo tratado, com significância estatística. Apesar de a análise média da carga viral ter mostrado nítica diminuição, estatisticamente significativa no grupo que utilizou o phgf, nenhum paciente tratado apresentou negativação do RNA-VHC. Os resultados mostram que a ação do phgf se fez no processo inflamatório sem influir na replicação viral, sugerindo efeito um pouco semelhante ao da ribavirina

Premio doctor Jorge Rosenkranz 2001 investigación clínica / Dr. George Rosenkranz 2001

Antecedentes. El factor de crecimiento hepatocítico (HGF) es una citocina multifuncional que promueve proliferación, motilidad y morfogénesis de células epiteliales. Algunos tumores malignos como el cáncer de mama, broncopulmonar y el miolema múltiple pueden sobreexpresarla al igual que su receptor. El HGF ha sido detectado en astrocitos normales. Los tumores gliales más frecuentes son los astrocitomas malignos con un sobrevida media de 9 meses para glioblastoma multiforma (GBM), y de 3 años para el astrocitoma anáplasico (AA), pronóstico que no se ha modificado en las últimas tres décadas.Objetivos. Determinar la concentración intratumoral de HGF en neoplasias intracraneales y correlacionarlas con el pronóstico, recurrencia, ploliferación celular y densidad vascular.

Fatores hepatotróficos e regeneraçäo hepática. Parte II: fatores de crescimento / Hepatotrophic factors and liver regeneration. Part II: growth factors

Várias substâncias identificáveis estäo implicadas no processo de crescimento hepático, entre elas os fatores de crescimento. A maioria deles possui diferentes açöes, estimulando a proliferaçäo de células, ou mesmo inibindo na dependência de suas concentraçöes. Dentre os fatores de crescimento, ou somatomedinas, com açäo sobre o fígado pode-se destacar: HGF; EGF; TGF-alpha; TGF b ; Interleucina 6; IGF; FGF; VEGF; KGF; HSS e ALR. A açäo conjunta dos hormônios HGF, TGF-alpha, IL-6, TNF-alpha, norepinefrina, EGF, permite que insulina, glucagon e o próprio EGF manifestem seus efeitos. O HGF tem papel vital, talvez o principal "gatilho" deste processo, gerando um sinal endócrino que ativa fortemente a mitogênese nos hepatócitos já "preparados" pelo EGF, IL-6, insulina, matriz remanescente e outros, levando à síntese de DNA. Admite-se que o EGF também participe dos eventos iniciais do processo logo após a hepatectomia e que FGF, VEGF e KGF também participem dos eventos ligados à recomposiçäo de outros tecidos.

Fatores hepatotróficos e regeneraçäo hepática. Parte I: o papel dos hormônios / Hepatotrophic factors and liver regeneration. Part I: the role of hormones

No complexo processo de proliferaçäo celular, os hormônios agem de diferentes maneiras ao atingirem seus receptores nos tecidos-alvo. Os principais fatores ligados ao crescimento hepático säo HGF, TGF-alpha, IL-6, TNF-alpha, norepinefrina, EGF e insulina. O GH estimula tanto o fígado a produzir fatores de crescimento, como a expressäo genética do HGF e a síntese de DNA. Hormônios tireoideanos aumentam a capacidade proliferativa dos hepatócitos. A insulina age sinergicamente com GH e glucagon. Näo tem potencial mitogênico primário mas intensifica o estímulo regenerativo iniciado pela epinefrina e norepinefrina. Esta amplifica os sinais mitogênicos do EGF e HGF, induz a secreçäo de EGF e antagoniza os efeitos inibitórios do TGF-beta 1. O glucagon isoladamente näo produz efeitos mas provavelmente participa na síntese de DNA e da resposta homeostásica pela qual a glicemia é mantida estável durante a regeneraçäo. Também há indícios de açäo hepatotrófica da gastrina.