Electroacupuncture alleviates inflammatory pain via adenosine suppression and its mediated substance P expression / A eletroacupuntura alivia a dor inflamatória por meio da supressão de adenosina e da expressão mediada de substância P

ABSTRACT Background: Acupuncture has been widely used for alleviating pain. However, its mechanisms remain largely enigmatic. Objective: In the present study, we focused on whether the analgesic effect of electroacupuncture is related to its regulation on adenosine and substance P expression. Methods: We established chronic inflammatory pain model in rats through a single injection of Complete Freund's Adjuvant, and then we treated animals using daily electroacupuncture. We applied seven bilateral sessions of electroacupuncture (ST36 and BL60, 0.5 to 1.5 mA, initial strength of 0.5 mA, increased by 0.5 mA every 10 minutes, for 30 minutes per session, one section per day) to Complete Freund's Adjuvant rats for seven days. The analgesic effect of electroacupuncture was evaluated by measuring paw withdrawal threshold in rats that received mechanical and thermal stimulation. Results: Daily electroacupuncture stimulation effectively increased paw withdrawal threshold in Complete Freund's Adjuvant rats. Electroacupuncture increased the adenosine level in zusanli. A further study showed that electroacupuncture could decrease substance P, neurokinin-1 receptor, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1β, interleukin-6 and CD68 levels in dorsal root ganglion. Interestingly, direct injection of adenosine A1 or substance P receptor antagonists, or dorsal nerve root transection could significantly impair electroacupuncture induced analgesic actions in Complete Freund's Adjuvant rats could and reduce the levels of substance P, neurokinin-1 receptor, tumor necrosis factor-alpha, interleukin-1β, interleukin-6 and CD68. Finally, we confirmed that direct injection of adenosine A1 receptor agonist replicated the analgesic effect of electroacupuncture. Conclusion: Our results indicate regulation of adenosine-mediated substance P secretion. Substance P-mediated pathway may be involved in the analgesia process by electroacupuncture in rats.

RESUMO Introdução: A acupuntura tem sido amplamente utilizada para alívio de dor. No entanto, seus mecanismos são muito pouco conhecidos. Objetivo: Investigar a relação entre o efeito analgésico da eletroacupuntura e a regulação da expressão de adenosina e de substância P. Métodos: Utilizou-se um modelo de dor inflamatória crônica em ratos por injeção única do Adjuvante Completo de Freund e, em seguida, os animais foram tratados com eletroacupuntura diariamente. Foram aplicadas sete sessões bilaterais de eletroacupuntura (ST36 e BL60, 0,5 a 1,5 mA, força inicial de 0,5 mA, aumentada em 0,5 mA a cada 10 minutos, 30 minutos por sessão, uma sessão por dia) em ratos com Adjuvante Completo de Freund, por sete dias. O efeito analgésico da eletroacupuntura foi avaliado pela medida do limiar de retirada da pata em ratos que receberam estimulações mecânica e térmica. Resultados: A estimulação diária com eletroacupuntura aumentou efetivamente o limiar de retirada da pata em ratos com Adjuvante Completo de Freund. A eletroacupuntura aumentou o nível de adenosina na região zusanli. Estudos posteriores mostraram que a eletroacupuntura poderia diminuir os níveis de substância P, receptor de neurocinina-1, fator de necrose tumoral-alpha, interleucina-1β, interleucina-6 e CD68 nos gânglios da raiz dorsal. Curiosamente, a injeção direta de antagonistas do receptor de adenosina A1 ou de substância P, ou a transecção da raiz do nervo dorsal, podem prejudicar significativamente as ações analgésicas induzidas pela eletroacupuntura em ratos com Adjuvante Completo de Freund e reduzir os níveis de substância P, receptor de neurocinina-1, fator de necrose tumoral-alfa, interleucina-1β, interleucina-6 e CD68. Por fim, confirmamos que a injeção direta de um agonista do receptor da adenosina A1 reproduziu os efeitos analgésicos da eletroacupuntura. Conclusão: Nossos resultados indicam a regulação da secreção da substância P mediada pela adenosina. A via mediada pela substância P pode estar envolvida no processo de analgesia por eletroacupuntura em ratos.

Changes in substance P levels of inferior turbinate in patients with mucosal contact headache / Alterações nos níveis da substância P da concha inferior de pacientes com cefaleiapor ponto de contato da mucosa

Abstract Introduction Mucosal contact headache is a referred pain that arises from contact between the nasal septum and the lateral nasal wall. Evidence supports the role of substance P in a contact headache such that release of substance P from sensory nerve endings causes inflammation and allergy. Objectives This study aimed to determine possible differences in substance P levels in inferior turbinate hypertrophy creating a contact headache. Methods 28 patients who had contact headaches (study group) and 16 volunteers with no complaints were included in the study. Substance P levels in the inferior turbinate tissue samples were quantified using a commercially available substance P EIA kit. Results In the study group average substance P levels were 2.65 ± 0.27 pg/mg tissue (range: 0.61-5.44) and in the control group it was 1.77 ± 0.27 pg/mg tissue (range: 0.11-4.35). The difference was statistically significant between the two groups (p = 0.0215). Average preoperative headache group visual analog scale scores was 5.93 ± 0.38 (2-9) and the turbinate volume was 6.56 ± 0.35 cm3 (3.50-10.30). The control group turbinate volume was 4.71 ± 0.39 cm3 (2.50-7.70). We found a correlation between the visual analog scale scores and substance P levels such that substance P levels were higher in visual analog scale scores above 5 (p = 0.001). Conclusion This study demonstrates the relationship between intranasal contact headaches and increased mucosal substance P levels. We also found that there is no correlation with substance P levels and volume of the inferior turbinate.

Resumo Introdução A cefaleia por ponto de contato da mucosa é uma dor direcionada que surge do contato entre o septo nasal e a parede nasal lateral. Evidências corroboram o papel da substância P na cefaleia de contato, de tal forma que a liberação da mesma a partir de terminações nervosas sensoriais possa causar inflamação e alergia. Objetivo Determinar possíveis diferenças nos níveis da substância P na hipertrofia de conchas inferiores em relação à cefaleia de contato. Método Foram incluídos no estudo 28 pacientes que apresentaram cefaleia por ponto de contato (Grupo Estudo) e 16 voluntários sem queixas. Os níveis de substância P nas amostras de tecido da concha inferior foram quantificados com um kit substância P EIA, comercialmente disponível. Resultados No grupo do estudo, os níveis médios de substância P foram 2,65 ± 0,27 pg/mg de tecido (variação: 0,61-5,44) e no grupo controle foram de 1,77 ± 0,27 pg/mg de tecido (variação: 0,11-4,35) e a diferença foi estatisticamente significante entre os dois grupos (p = 0,0215). O escore médio da escala visual analógica do grupo de cefaleia pré-operatória foi de 5,93 ± 0,38 (2-9) e o volume das conchas foi de 6,56 ± 0,35 cm3 (3,50-10,30). O volume da concha do grupo controle foi de 4,71 ± 0,39 cm3 (2,50 ± 7,70). Encontramos uma correlação entre o escore da escala visual analógica e os níveis de substância P, de modo que os níveis de substância P foram maiores nos escores da escala visual analógica acima de 5 (p = 0,001). Conclusão Este estudo demonstra a relação entre cefaleias por contato intranasais e níveis aumentados de substância P nas mucosas. Também observamos que não há correlação com os níveis de substância P e o volume da concha inferior.

Modulatory effects of neuropeptides on pentylenetetrazol-induced epileptic seizures and neuroinflammation in rats

SUMMARY OBJECTIVE We aimed to explore the effects of neuropeptides ghrelin, obestatin, and vasoactive intestinal peptide (VIP) on seizures and plasma concentrations of neuroinflammation biomarkers including calcitonin gene-related peptide (CGRP), substance-P (SP), and interleukin-1 beta (IL-1β) in pentylenetetrazol-induced seizures in rats. METHODS Ghrelin (80 µg/kg), obestatin (1 µg/kg), VIP (25 ng/kg) or saline were administered to rats intraperitoneally 30 min before pentylenetetrazole (PTZ, 50 mg/kg) injections. Stages of epileptic seizures were evaluated by Racine's scale, and plasma CGRP, SP, and IL-1β concentrations were measured using ELISA. RESULTS Both obestatin and VIP shortened onset-time of generalized tonic-clonic seizure, respectively, moreover VIP also shortened the onset-time of first myoclonic-jerk induced by PTZ. While PTZ increased plasma CGRP, SP and IL-1β concentrations, ghrelin reduced the increases evoked by PTZ. While VIP further increased PTZ-evoked CGRP levels, it diminished IL-1β concentrations. However, obestatin did not change CGRP, SP, and IL-1β concentrations. CONCLUSION Our results suggest that ghrelin acts as an anticonvulsant, obestatin acts as a proconvulsant, and VIP has dual action on epilepsy. Receptors of those neuropeptides may be promising targets for epilepsy treatment.

RESUMO OBJETIVO Nosso objetivo foi explorar os efeitos dos neuropeptídeos grelina, obestatina e peptídeo intestinal vasoativo (VIP) nas convulsões e concentrações plasmáticas de biomarcadores neuroinflamatórios, incluindo peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), substância-P (SP) e interleucina-1 beta (IL-1β) em convulsões induzidas por pentilenotetrazol em ratos. MÉTODOS Grelina (80 µg/kg), obestatina (1 µg/kg), VIP (25 ng/kg) ou solução salina foram administrados a ratos intraperitonealmente 30 minutos antes de injeções de pentilenotetrazol (PTZ, 50 mg/kg). Os estágios das crises epilépticas foram avaliados pela escala de Racine e as concentrações plasmáticas de CGRP, SP e IL-1β foram medidas usando Elisa. RESULTADOS Tanto a obestatina quanto o VIP encurtaram o tempo de início da crise tônico-clônica generalizada, respectivamente. Além disso, o VIP também encurtou o tempo de início do primeiro impulso mioclônico induzido por PTZ. Enquanto o PTZ aumentou as concentrações plasmáticas de CGRP, SP e IL-1β, a grelina reduziu os aumentos evocados por PTZ. Enquanto o VIP aumenta ainda mais os níveis de CGRP evocados por PTZ, diminui as concentrações de IL-1β. No entanto, a obestatina não alterou as concentrações de CGRP, SP e IL-1β. CONCLUSÃO Nossos resultados sugerem que a grelina tem anticonvulsivante, a obestatina tem proconvulsivante e o VIP tem ação dupla na epilepsia. Receptores desses neuropeptídeos podem ser alvos promissores para o tratamento da epilepsia.

TNF-α inhibits SCF, ghrelin, and substance P expressions through the NF-κB pathway activation in interstitial cells of Cajal

Ulcerative colitis is a chronic inflammatory disease of the colon where intestinal motility is disturbed. Interstitial cells of Cajal (ICC) are required to maintain normal intestinal motility. In the present study, we assessed the effect of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) on viability and apoptosis of ICC, as well as on the expression of stem cell factor (SCF), ghrelin, and substance P. ICC were derived from the small intestines of Swiss albino mice. Cell viability and apoptosis were measured using CCK-8 assay and flow cytometry, respectively. ELISA was used to measure the concentrations of IL-1β, IL-6, ghrelin, substance P, and endothelin-1. Quantitative RT-PCR was used to measure the expression of SCF. Western blotting was used to measure the expression of apoptosis-related proteins, interleukins, SCF, and NF-κB signaling pathway proteins. TNF-α induced inflammatory injury in ICC by decreasing cell viability and increasing apoptosis and levels of IL-1β and IL-6. TNF-α decreased the levels of SCF, ghrelin, and substance P, but had no effect on endothelin-1. TNF-α down-regulated expressions of SCF, ghrelin, and substance P by activating the NF-κB pathway in ICC. In conclusion, TNF-α down-regulated the expressions of SCF, ghrelin, and substance P via the activation of the NF-κB pathway in ICC.

Does dexamethasone act in neuropeptides SP and CGRP in neurogenic inflammation of the skin? An experimental study

PURPOSE: To investigate the neuropeptides substance P (SP) and calcitonin gene-related peptide (CGRP) after subcutaneous injection of dexamethasone prior to skin incision in rats.METHODS:Twenty seven Wistar-EPM-1 rats were randomly divided into three groups. The sham group (SG) of rats was injected with 0.9 % saline. The second group (Dexa) was injected with 1.0 mg/kg dexamethasone, and the third group (Dexa+) was injected with 10.0 mg/kg dexamethasone. In all groups, the three subcutaneous injections were performed 30 minutes prior to the surgical skin incision and tissue collection. SP and CGRP (15 kDa pro-CGRP and 5 kDa CGRP) were quantified by Western Blotting.RESULTS: No statistically significant differences (p>0.05) were found in pro-CGRP, CGRP and SP values in all three groups.CONCLUSION:The anti-inflammatory effect of dexamethasone did not occur when the substance P and calcitonin gene-related peptide levels were altered during the neurogenic inflammation process of skin wound healing in rats.

Neuropeptide Y, substance P, and human bone morphogenetic protein 2 stimulate human osteoblast osteogenic activity by enhancing gap junction intercellular communication

Bone homeostasis seems to be controlled by delicate and subtle “cross talk” between the nervous system and “osteo-neuromediators” that control bone remodeling. The purpose of this study was to evaluate the effect of interactions between neuropeptides and human bone morphogenetic protein 2 (hBMP2) on human osteoblasts. We also investigated the effects of neuropeptides and hBMP2 on gap junction intercellular communication (GJIC). Osteoblasts were treated with neuropeptide Y (NPY), substance P (SP), or hBMP2 at three concentrations. At various intervals after treatment, cell viability was measured by the MTT assay. In addition, cellular alkaline phosphatase (ALP) activity and osteocalcin were determined by colorimetric assay and radioimmunoassay, respectively. The effects of NPY, SP and hBMP on GJIC were determined by laser scanning confocal microscopy. The viability of cells treated with neuropeptides and hBMP2 increased significantly in a time-dependent manner, but was inversely associated with the concentration of the treatments. ALP activity and osteocalcin were both reduced in osteoblasts exposed to the combination of neuropeptides and hBMP2. The GJIC of osteoblasts was significantly increased by the neuropeptides and hBMP2. These results suggest that osteoblast activity is increased by neuropeptides and hBMP2 through increased GJIC. Identification of the GJIC-mediated signal transduction capable of modulating the cellular activities of bone cells represents a novel approach to studying the biology of skeletal innervation.

Efeito da toxina botulínica tipo A sobre a expressão de neuropeptídeos e o transporte mucociliar nasal em coelhos / Effect of botulinum toxin type A on nasal neuropeptides and mucociliary clearance in rabbits

INTRODUÇÃO: A toxina botulínica tipo A (TXB-A) tem sido testada no tratamento da rinite, principalmente nos casos de rinite idiopática. Sugere-se que um estado de hiper-reatividade do nervo trigêmeo esteja envolvido na fisiopatologia da rinite idiopática. O nervo trigêmeo possui fibras sensitivas não mielinizadas tipo C (FSNMT-C) que contém os neuropeptídeos substância P (SP) e peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP). O óxido nítrico (NO) produzido pelas enzimas óxido nítrico sintase (NOS) também está envolvido nesse processo de neurorregulação nasal. O transporte mucociliar, mecanismo primário de defesa do sistema respiratório, é formado pelo batimento ciliar e muco nasal, e esses componentes podem ser influenciados por diferentes neuropeptídeos e neurotransmissores presentes na mucosa nasal. OBJETIVO: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da TXB-A sobre a expressão da SP, CGRP e óxido nítrico sintase neural (nNOS), além de sua influência sobre o transporte mucociliar nasal em coelhos. MÉTODOS: Coelhos machos saudáveis da linhagem Nova Zelândia foram divididos em dois grupos: o grupo tratamento recebeu TXB-A (25UI) na concha nasomaxilar (CNM) do lado direito e soro fisiológico a 0,9% (SF0,9%) na CNM esquerda. O grupo controle recebeu SF0,9% na CNM direita e nenhuma intervenção na CNM esquerda. Foram investigados os efeitos da TXB-A sobre a expressão da SP, CGRP e nNOS no tecido de CNM por meio da imuno-histoquímica. Para esta análise, dividiu-se o tecido em camada externa (CE, acima da membrana basal) e camada interna (CI, abaixo da membrana basal). Avaliou-se também a presença de apoptose celular, a frequência de batimento ciliar (FBC), o perfil histoquímico do muco nasal (glicoproteínas ácidas e neutras) e a espessura do epitélio (ESP-CE). RESULTADOS: Foi observado um aumento significativo na quantidade de células apoptóticas na CNM do grupo tratamento que recebeu TXB-A em comparação aos controles (p <= 0,001). A CNM do grupo tratamento...(au)

INTRODUCTION: Botulinum toxin type A (BoNT-A) has been assessed in the treatment of rhinitis, especially in cases of idiopathic rhinitis. Trigeminal hyper-responsiveness appears to be involved in the pathological process of idiopathic rhinitis. Trigeminal nociceptive type C unmyelinated sensory fibers contain the neuropeptides calcitonin gene-related peptide (CGRP) and substance P (SP). Nitric oxide (NO) produced by the enzyme nitric oxide synthase (NOS) are also involved in this nasal neurorregulation process. The mucociliary clearance, primary defense system of the respiratory system, is composed by the ciliary beat and nasal mucus. These components can be influenced by different nasal neuropeptides and neurotransmitters. OBJECTIVE: The aim of this study was to evaluate the effect of BoNT-A on the expression of SP, CGRP and neural nitric oxide synthase (nNOS), and its influence on nasal mucociliary clearance in rabbits. METHODS: Healthy New Zealand male rabbits were divided into two groups: the treatment group was challenged with BoNT-A (25UI) in the right nasomaxillary turbinate (NMT) and saline (SF0.9%) in the left NMT. The control group received SF0.9% in the right NMT and no-intervention in the left NMT. We investigated the effects of BoNT-A on SP, CGRP and nNOS expression in the NMT tissue by immunohistochemistry. Each area of interest was subdivided into an internal layer (IL: below the basement membrane) and outer layer (OL: above the basement membrane) for analysis. It was also assessed signs of cellular apoptosis, ciliary beat frequency (CBF), mucus histochemical profile (acidic and neutral glycoproteins) and epithelial thickness (EP-TH). RESULTS: It was observed a significant increase in the amount of apoptotic cells in the BoNT-A-challanged NMT compared with controls (p <= 0.001). The NMT of treatment group which received only SF0.9% showed an increase in the amount of apoptotic cells in the IL compared with controls (NMT SF0.9%, p = 0.035)...

Estudo da substância P e do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina em amostras do couro cabeludo e séricas de pacientes com líquen plano pilar e alopecia frontal fibrosante / Study of the neuropeptides substance P and calcitonin gene-related peptide in the scalp and serum samples from patients with lichen planopilaris and frontal fibrosing alopecia

INTRODUÇÃO: Líquen plano pilar (LPP) e alopecia frontal fibrosante (AFF) são alopecias cicatriciais linfocíticas crônicas, caracterizadas pela destruição permanente da unidade pilossebácea. Neuropeptídeos como a substância P (SP) e o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP) têm sido implicados no metabolismo lipídico das glândulas sebáceas e na manutenção do estado inflamatório de diversas doenças. OBJETIVOS: 1. Quantificar e comparar a expressão dos neuropeptídeos SP e CGRP em amostras do couro cabeludo (áreas afetadas e aparentemente não afetadas) e séricas de pacientes com LPP e AFF, em relação a indivíduos sadios, utilizando a técnica de ELISA. 2. Analisar áreas afetadas e aparentemente não afetadas de pacientes com LPP e AFF através da imunofluorescência direta (IFD). MÉTODO: 20 pacientes (10 com LPP e 10 com AFF) e 11 indivíduos sadios foram submetidos a biópsias com punch de 4mm do couro cabeludo e coleta de amostras sanguíneas. Pacientes foram submetidos a biópsias das áreas afetadas e aparentemente não afetadas do couro cabeludo, as quais foram pareadas com amostras da região anterior e posterior do couro cabeludo dos indivíduos-controle. As amostras dos pacientes foram enviadas para análise histopatológica, IFD e teste de ELISA para SP e CGRP. As amostras dos controles foram submetidas à análise histopatológica e aos mesmos testes de ELISA. Sintomas (dor, prurido, queimação e formigamento) e sinais inflamatórios (eritema difuso, eritema peripilar e descamação peripilar) na região afetada dos pacientes também foram avaliados. Este estudo foi realizado nas Universidades de São Paulo (BRA) e de Minnesota (EUA), entre os anos de 2012 e 2014. RESULTADOS: A análise histopatológica evidenciou infiltrado perifolicular linfocítico típico em 70% das áreas aparentemente não afetadas do couro cabeludo de pacientes com LPP e AFF, além de fibrose e depósitos de mucina perifoliculares. Em relação à IFD, o resultado se mostrou positivo em 50%...

INTRODUCTION: Lichen planopilaris (LPP) and frontal fibrosing alopecia (FFA) are primary lymphocytic cicatricial alopecias characterized by permanent destruction of the pilossebaceous unit. Neuropeptides such as substance P (SP) and calcitonin gene-related peptide (CGRP) are related to lipid metabolism in sebaceous glands and to the maintenance of many inflammatory chronic disorders. OBJECTIVES: 1. Quantify SP and CGRP expression in affected and in normal-appearing scalp areas and serum samples from patients with LPP and FFA, and compare to healthy controls using ELISA technique. 2. Compare affected and normal-appearing areas from patients with LPP and FFA, using direct immunofluoresce (DIF) technique. METHODS: Twenty patients (10 with LPP and 10 with FFA) and eleven healthy controls underwent 4mm-punch biopsies and blood extraction. Patients collected samples from affected and normal-appearing scalp areas, and controls collected from anterior and posterior scalp areas. Patients samples were sent to histopathologic examination, DIF and ELISA tests for SP and CGRP detection. Control samples were sent to histopathologic examination and to the same ELISA tests. Symptoms (pain, burning, itching and tingling) and signs of inflammation (diffuse erythema, perifollicular erythema and perifollicular scale) were also assessed. This study was done at the Universities of São Paulo (Brazil) and Minnesota (USA), between 2012 and 2014. RESULTS: Normal-appearing scalp areas from patients with LPP and FFA showed lymphocytic perifollicular typical inflammation in 70% of the cases, as well as perifollicular fibrosis and mucin deposits. DIF test was positive in 50% of the affected areas and in 40% of normalappearing areas from patients with LPP, comparing to 40% and 20% in the FFA group, respectively. In SP ELISA test, affected areas from patients with LPP that had histopathologic moderate or intense infiltrate showed more expression of SP in the affected scalp,...

Medicinas tradicionales andinas y su despenalización: entrevista con Walter Álvarez Quispe / Decriminalizing traditional Andean medicine: an interview with Walter Álvarez Quispe

Walter Álvarez Quispe, terapeuta kallawaya y biomédico especializado en cirugía general y ginecología, presenta la lucha de los terapeutas tradicionales y alternativos por la depenalización de estos sistemas médicos andinos realizada entre 1960 y 1990. Bolivia se torna el primer país en América Latina y el Caribe en despenalizar la medicina tradicional antes de los planteamientos de la Conferencia Internacional sobre Atención Primaria de Salud (Alma-Ata, 1978). Los datos aportados por el entrevistado aseguran que los logros alcanzados, principalmente por los kallawayas, responden a un proyecto propio y autónomo. Estas conquistas no se deben a las políticas oficiales de interculturalidad en salud, aunque busquen atribuirse para sí los logros alcanzados.

Walter Álvarez Quispe, a Kallawaya healer and biomedical practitioner specializing in general surgery and gynecology, presents the struggle of traditional and alternative healers to get their Andean medical systems depenalized between 1960 and 1990. Bolivia was the first country in Latin America and the Caribbean to decriminalize traditional medicine before the proposals of the International Conference on Primary Health Care (Alma-Ata, 1978). The data provided by the interviewee show that the successes achieved, mainly by the Kallawayas, stem from their own independent initiative. These victories are not the result of official policies of interculturality in healthcare, although the successes achieved tend to be ascribed to them.

Involvement of midbrain tectum neurokinin-mediated mechanisms in fear and anxiety

Electrical stimulation of midbrain tectum structures, particularly the dorsal periaqueductal gray (dPAG) and inferior colliculus (IC), produces defensive responses, such as freezing and escape behavior. Freezing also ensues after termination of dPAG stimulation (post-stimulation freezing). These defensive reaction responses are critically mediated by γ-aminobutyric acid and 5-hydroxytryptamine mechanisms in the midbrain tectum. Neurokinins (NKs) also play a role in the mediation of dPAG stimulation-evoked fear, but how NK receptors are involved in the global processing and expression of fear at the level of the midbrain tectum is yet unclear. The present study investigated the role of NK-1 receptors in unconditioned defensive behavior induced by electrical stimulation of the dPAG and IC of male Wistar rats. Spantide (100 pmol/0.2 μL), a selective NK-1 antagonist, injected into these midbrain structures had anti-aversive effects on defensive responses and distress ultrasonic vocalizations induced by stimulation of the dPAG but not of the IC. Moreover, intra-dPAG injections of spantide did not influence post-stimulation freezing or alter exploratory behavior in rats subjected to the elevated plus maze. These results suggest that NK-1 receptors are mainly involved in the mediation of defensive behavior organized in the dPAG. Dorsal periaqueductal gray-evoked post-stimulation freezing was not affected by intra-dPAG injections of spantide, suggesting that NK-1-mediated mechanisms are only involved in the output mechanisms of defensive behavior and not involved in the processing of ascending aversive information from the dPAG.

Prevención de adherencias peritoneales postoperatorias mediante uso de antagonista de receptores de neurokinina tipo 1 / Peritoneal adhesions prevention: neurokinin-1 receptor antagonist

Background: The fibrinolytic activity plays an important role in Peritoneal Adhesions (PA) develop-ment. It's well known that de substance P decreased the fibrinolysis by binding the neurokinin-1 receptor, improving the PA formation. Objectives: To evaluate the effectiveness of intraperitoneal treatment with a Neurokinin-1 receptor antagonist (NK-R1A) in peritoneal adhesión prevention in animal model. Materials and Methods: In 40 male wistar rats, PA were induced, and then randomly assigned to 2 groups: A group treated with Aprepitant (NK-Rl A), and a control group. The animals were killed at 7 or 14 postoperative day, and the number, severity and histopathology of PA were evaluated. Results: NK-Rl A decreased the number (40 percent less) and severity (p = 0.001) of PA when compare to control group. The NK-Rl A group had less PA in manipulated and no manipulated organs during surgery. Besides presented less fibrosis (p = 0.001), less inflamation (p = 0.005) and less vascular proliferation (p = 0.047) than control group. Conclusions: The NK-Rl A is effective as in PA prevention.

Introducción: La actividad fibrinolítica juega un papel fundamental en el desarrollo de las adherencias peritoneales (AP), y se conoce que la Sustancia P al actuar sobre receptores de neurokinina tipo 1 a nivel peritoneal, disminuye la fibrinólisis, favoreciendo la formación de las mismas. Objetivos: Evaluar la efectividad del tratamiento intraperitoneal con antagonista de receptores 1 de neurokinina (NK-R1A) en la prevención de AP en modelo animal. Materiales y Métodos: A 40 ratas wistar se les practicó cirugía formadora de AP y fueron distribuidas de forma aleatoria en 2 grupos, un grupo que recibió Aprepitant (NK-R1A), y el otro como grupo control. Los animales fueron sacrificados a los 7 ó 14 días, y se evaluó el número, severidad e histopatología de las AP. Resultados: El NK-Rl A disminuyó el número (40 por ciento menos) y severidad de las AP (p = 0,001) en relación al grupo control y presentó menos AP en órganos manipulados y no manipulados durante la cirugía. Ademßs presentó menor grado de fibrosis (p = 0,001), menor inflamación (p = 0,005) y menor proliferación vascular (p = 0,047) que el grupo control. Conclusión: El tratamiento peritoneal con NK-R1A es eficaz en la prevención de la formación de AP.

Ensayos in-vitro e in-vivo del péptido marcado 177Lu-DOTA-Sustancia P y evaluación de los cálculos dosimétricos en la etapa preclínica / Tests in-vitro and in vivo of 177Lu-DOTA-SP labeled peptide and evaluation of the dosimetric calculations in the preclinical stage

Introducción: El péptido Sustancia P (SP) es el ligando principal de los receptores de neurokininas tipo 1, los cuales se encuentran sobreexpresados en los gliomas malignos. Método: Se obtuvo 177Lu-DOTA-SP con elevada pureza radioquímica. Se realizaron biodistribuciones en ratones normales a diferentes tiempos. Se calcularon las dosis absorbidas para los diferentes órganos del ratón (cGy/uCi). Utilizando los métodos de escalación por tiempo (A) y extrapolación directa (B), se obtuvieron las dosis en los diferentes órganos humanos. Se calcularon las máximas dosis tolerables en función de los órganos críticos (mCi/kg). Resultados: La máxima actividad tolerable que puede ser inyectada sin producir toxicidad en riñones es 11,2 mCi/kg (hombre adulto) y 11,4 mCi/kg (mujer adulta) según el método A y de 47,2 mCi/kg y 56,2 mCi/kg, respectivamente según el método B. Conclusiones: Hasta el momento se pudo obtener 177Lu-DOTA-SP con Ae= 0,05mCi/ ug de péptido. La misma puede aumentarse utilizando el 177LuCl3 de mayor actividad específica.

Introduction: Substance P (SP) is the main ligand of neurokin type 1 receptors, which are consistently overexpressed in malignant gliomas. Method: 177Lu-DOTA-SP was obtained with high radiochemical purity. Biodistribution in normal mice at different times, were done. Absorbed doses were calculated for different mice organs (cGy/uCi). Absorbed doses in human organs were calculated using two different methods, time scaling (A) and data extrapolation (B). Maximum tolerated doses were calculated according to critical organs (mCi/kg). Results: Maximum tolerated dose that can be injected without kidney toxicity is 11,2 mCi/kg (adult man) and 11,4 mCi/kg (adult woman) according to method A and 47,2 mCi/kg, 56,2 mCi/kg, respectively according to method B. Conclusion: So far, 177Lu-DOTA-SP was achieved with a specific activity (S.a) of 0,05 mCi/ ug of peptide. This S.a can be increased using 177LuCl3 of higher specific activity.

Manobras odontológicas para diminuição do risco de pneumonia aspirativa em idosos / Dental treatment maneuvers for decreasing aspiration pneumonia risk to elderly

A expectativa de vida da população tem aumentado significativamente, principalmente na faixa etária a partir dos 60 anos. O diagnóstico precoce e o sucesso no tratamento de muitas doenças sistêmicas contribuíram para o aumento da população dessa faixa etária. A pneumonia é uma das doenças mais frequentes em idosos e o acompanhamento por uma equipe multidisciplinar proporciona segurança, eficiência e eficácia na deglutição orofaríngea, mantendo uma nutrição e hidratação para melhorar a higiene oral. A Odontologia, como parte do corpo de saúde, deve se preocupar com a reabilitação oral, proporcionando uma melhor eficiência mastigatória, estimulando os músculos da mastigação e da deglutição, para que haja menos resíduo alimentar na orofaringe. Um protocolo de higienização diminui a placa bacteriana e controla as doenças gengivoperiodontais, além de estimular os nervos sensoriais na cavidade oral, elevando os níveis de substância P e reforçando a liberação de neuropeptídeos, através das vias aferente ou eferente do reflexo da deglutição.

Expressão da substância P e de seu receptor Neuroquinina-1 em carcinomas espinocelulares de boca e sua implicação na atividade proliferativa tumoral / Expression of the substance P and its receptor NK-1 in oral squamous cell carcinoma and its tumor proliferative activity

A substância P (SP) é um neuropeptídeo da família das taquicininas que regula numerosas funções biológicas por meio da ligação ao seu receptor altamente específico neuroquinina-1 (NK-1R). Este complexo SP/NK-1R está envolvido em diversos processos relacionados à oncogênese, como a mitogênese, angiogênese, migração celular e metástase. O objetivo deste trabalho foi investigar a expressão de substância P e de seu receptor NK-1 e sua correlação com o índice de proliferação celular em 73 pacientes portadores de 90 carcinomas espinocelulares de boca, diagnosticados e tratados no Hospital General e Hospital de La Princesa, Jaen, Espanha, durante o período de 1995 a 2008. Todos os tumores foram corados pela técnica imunoistoquímica da estreptavidina-biotina-peroxidase com os anticorpos anti-SP, anti-NK-1R e anti-Ki-67. As alterações celulares epiteliais das margens cirúrgicas livres de doença também foram registradas. A expressão imunoistoquímica da substância P e do seu receptor neurokinina-1 foi avaliada na membrana, no citoplasma e no núcleo das células epiteliais malignas e do epitélio da mucosa bucal adjacente ao tumor, nos linfócitos e nos vasos sanguíneos dos tumores. O índice de proliferação celular tumoral foi determinado pela expressão imunoistoquímica de Ki-67 identificada no núcleo das células neoplásicas. As correlações entre as diversas localizações da SP, de seu receptor NK-1R e do índice de proliferação tumoral determinado pelo Ki-67 foram determinadas estatísticamente utilizando-se o Crosstab, Regress e Descript de SUDAAN. A expressão de SP foi identificada no estroma de 77% dos tumores, na membrana de 71% das células malignas e no citoplasma de 81,2% dos tumores. A maioria dos tumores apresentou altas taxas de proliferação das células neoplásicas com mais de 50% das células imunopositivas para o Ki-67. Ao analisar as margens cirúrgicas livres de doença, observou-se expressão da SP, sobretudo no terço inferior e médio, tanto no núcleo, como no...

The substance P (SP) is a neuropeptide of the tachykinin family that regulates multiple biological functions by binding to the highly specific receptor neurokinin-1. This complex SP/NK-1 is involved in several processes related to oncogenesis, such as mitogenesis, angiogenesis, cell migration and metastasis. This study investigated the expression of substance P and its receptor NK-1 and its correlation with the cell proliferation index in 73 patients with oral squamous cell carcinoma, diagnosed and treated at the General Hospital and Princess Hospital at Jaen, Spain, during the period 1995 to 2008. All tumors were stained immunohistochemically by the streptavidin-biotin-peroxidase technique using the antibodies anti-SP, anti-NK-1R and anti-Ki-67. The epithelial cell alterations on the disease-free surgical margins were registered. The immunohistochemical expression of SP and its receptor neurokinin-1 were evaluated on the membrane, cytoplasm and nucleus of malignant epithelial cells and cells of healthy oral mucosa adjacent to the tumor, as well as on the infiltrating lymphocytes and peritumoral or intratumoral blood vessels. The tumor cell proliferation index was determined by the immunohistochemical expression of Ki- 67 identified on the malignant cell nucleus. The correlations between the distinct localizations of SP, its receptor NK-1 and the proliferation index Ki-67 were statistically analyzed using the Sudaan Crosstab, Regress and Descript tests. The SP expression was identified on the stroma of 77% of tumors, on the membrane of 71% of malignant cells and cytoplasm of 81.2% of tumors. Most tumors presented high proliferation rates of neoplastic cells, with more than 50% of cells immunopositive for Ki-67. Analysis of the disease-free surgical margins revealed SP expression especially on the lower and medium third, both on the nucleus, cytoplasm and cell membrane. The simultaneous expression of substance P and its receptor NK-1 on the cytoplasm...

Doença periodontal grave em pacientes com e sem queixa de dor crônica crânio-facial: correlação dos aspectos clínicos com a análise quantitativa da substância P e do óxido nítrico do tecido gengival inflamado / Severe periodontal disease in patients with and without chronic complaint of cranium-facial pain: correlation of clinical aspects with the quantitative analysis of substance P and nitric oxide of inflamed gingival tissue

Com o objetivo de avaliar a implicação da doença periodontal avançada (DP), e da expressão da NOS e sP dos tecidos gengivais inflamados, na intensidade de dor e na qualidade de vida de pacientes com dor crônica crânio-facial; foram avaliados e tratados 20 pacientes com queixas de dor crônica crânio-facial e DP (Grupo de Estudo), comparativamente com 20 pacientes que tinham somente DP (Grupo Controle). Após o tratamento periodontal houve redução da EVA no Grupo de Estudo e houve melhora significativa das queixas iniciais. No Grupo de Estudo, houve redução dos descritores afetivos de dor e os escores de qualidade de vida foram inferiores aos do Grupo Controle nos domínios psicológico e físico. As expressões da nNOS e da iNOS foram maiores nas gengivas inflamadas do Grupo de Estudo e a expressão da sP foi semelhante nos dois grupos. Pelos dados deste estudo a Doença Periodontal avançada pode ter implicação nas queixas de dor dos pacientes com dor crônica crânio-facial...

The aims of this study was to assess the implications of advanced periodontal disease (PD), and the expression of NOS and sP of inflamed gingival tissue, in the intensity of pain and the quality of life in patients with chronic craniofacial pain. Were evaluated and treated 20 patients with complaints of chronic craniofacial pain and DP (Study Group), compared with 20 patients who had only DP (Control Group). After periodontal treatment there was reduction in the VAS and there was significant improvement of the initial complaints. In Study Group, there was significant reduction of pain affective descriptors and the scores of quality of life of this group were lower than the Control Group in the psychological and physical. The nNOS and iNOS expressions were higher in inflamed gingival Study Group and the expression of sP was similar in the two groups The data of this study show that advanced periodontal disease can have involvement in complaints of pain in patients with chronic craniofacial pain...

Participação da substância P e dos receptores NK1 na modulação da pressão arterial e dos reflexos cardiovasculares nos núcleos do tracto solitário de ratos: estudo em modelos experimentais livres de anestesia / Participation of substance P and NK1 receptors on the modulation of arterial pressure and cardiovascular reflexes in the nucleus of the solitary tract o rats: study in experimental models free of anaesthetics

A substância P (SP) tem sido caracterizada como um possível modulador envolvido controle cardiovascular nos núcleos do tracto solitário (NTS). Há evidências de que a SP modula o barorreflexo e os quimiorreflexos carotídeo a cardiopulmonar. Entretanto imprescindibilidade e a relevância da SP para a transmissão e modulação, respectivamente, desses reflexos geraram controvérsia. Uma fonte de controvérsia foi a observação de que os efeitos deste neuropeptídeo no NTS são influenciados por agentes anestésicos. Neste estudo avaliamos, em ratos não anestesiados, a participação de neurônios que expressam receptores NK1 no NTS para a transmissão do barorreflexo e dos quimiorreflexos carotídeo e cardiopulmonar (Bezold-Jarisch). Para tanto, utilizamos a SP conjugada a uma to inativadora do ribossomo, a saporina, para lesar estes neurônios seletivamente Também avaliamos o efeito do bloqueio farmacológicos de receptores GABAA sobre as respostas cardiovasculares induzidas pela microinjeção de SP no NTS de ratos não anestesiados (ABDALA et al., 2003). Em uma preparação in situ de ratos descerebrados e artificialmente perfundidos, que nos permitiu a utilização de protocolos mais invasivos, estudamos a importância da SP para a modulação do barorreflexo durante situações de hipóxia e participação no controle da atividade simpática em ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Observamos que a lesão de neurônios que expressam receptores NK1 no NTS atenuou significantemente o barorreflexo e o quimiorreflexo cardiopulmonar, afetando de maneira menos intensa o quimiorreflexo carotídeo. Isso é sugestivo de que a SP modula população significativa de neurônios do NTS envolvidos na mediação destes reflexos. Mostramos que as respostas pressora e taquicárdica induzidas pela microinjeção de SP no NTS de ratos não anestesiados dependem da liberação endógena de GABA, e que a SP passa a induzir hipotensão após o bloqueio farmacológico de receptores GABAA. Isto confirma a participação da SP na modulação de vias funcionalmente antagônicas no NTS. Observamos que a injeção de SP no NTS comissural é capaz de reduzir a atividade simpática e provocar vasodilatação em SHR jovens por um longo período de tempo, mas não em ratos normotensos…(au)

Reatividade vascular e celular da polpa dental de ratos frente a estímulos inflamatórios / Vascular and cellular responses to pro-inflammatory stimuli in rat dental pulp

The dental pulp is a soft, vascularized, and innervates tissue located in the core of a mineralised dental structure (enamel, dentin, and cement). This peculiar characteristic of being a tissue restrained inside a low compliance environment prompted us to study its vascular and cellular reactivity. Pro-inflammatory stimuli such as Substance P (SP), calcitonin-gene related peptide (CGRP), and prostaglandin E2 (PGE2) were applied to the exposed pulp of anaesthetised animals and the plasma extravasation measured by the Evans blue content. Leukocyte recruitment was evaluated morphometrically by counting the cell number present in serial sections of 1:3 4 µm-pulp tissue 6h after bacterial endotoxin (LPS; 0.06 - 1.2 µg/site) administration. Increase in pulp vascular permeability and cellular recruitment due to the injection of mentioned mediators in teh skin or LPS in the peritoneal cavity were used as positive controls. The local pulp application of SP, CGRP, and PGE2 significantly increased the vascular permeability, although in a minor dose range of that observed in the skin. In both tissues CGRP was the most potent mediator suggesting the presence of CGRP receptors, which was confirmed at least in the pulp, by the PCR method. In relation to cell recruitment it was necessary a higher dose (about 4-fold) of LPS to induce a similar pattern in the pulp as that observed in the rat peritoneal cavity suggesting a deficiency in adhesion molecules in blood vessels in the rat dental pulp. In addition, steroidal and non-steroidal anti-inflammatory drugs were able to reduce the cell recruitment showing the sensitivity of this method to study the effects of these two classes of drugs

Substance P immunoreactivity in the lumbar spinal cord of the turtle Trachemys dorbigni following peripheral nerve injury

Immunoreactive substance P was investigated in turtle lumbar spinal cord after sciatic nerve transection. In control animals immunoreactive fibers were densest in synaptic field Ia, where the longest axons invaded synaptic field III. Positive neuronal bodies were identified in the lateral column of the dorsal horn and substance P immunoreactive varicosities were observed in the ventral horn, in close relationship with presumed motoneurons. Other varicosities appeared in the lateral and anterior funiculi. After axotomy, substance P immunoreactive fibers were reduced slightly on the side of the lesion, which was located in long fibers that invaded synaptic field III and in the varicosities of the lateral and anterior funiculus. The changes were observed at 7 days after axonal injury and persisted at 15, 30, 60 and 90 days after the lesion. These findings show that turtles should be considered as a model to study the role of substance P in peripheral axonal injury, since the distribution and temporal changes of substance P were similar to those found in mammals

Expresión de sustancia P en la articulación temporomandibular / Substance P expression in the temporomandibular joint

Antecedentes: neuropéptidos como la sustancia P se relacionan con el desarrollo y progresión de enfermedad degenerativa. Estudios previos mostraron su papel en la respuesta vascular y nociceptiva en artritis, y su papel modulador en hperalgesia y dolor de tipo artrítico, comprobando su presencia en líquido sinovial de la articulación temporomandibular. Propósito: evaluar la presencia y contenido de sustancia P en tejido retrodiscal hiperplásico de la articulación temporomandibular en pacientes con enfermedad degenerativa articular, mediante radioinmunoensayo. Métodos: 7 pacientes mujeres (13 articulaciones) premenopáusicas, no embarazadas ni lactando por un año, fueron diagnosticadas con enfermedad articular (osteoartrosis). Se registraron niveles de dolor con escala visual análoga, donde 0 es ausencia de dolor y 16 dolor agudo; se clasificó la degeneración ósea entre leve, moderada y severa, de acuerdo con hallazgos de resonancia magnética nuclear. Las pacientes fueron sometidas a cirugía abierta de la articulación temporomandibular, donde se tomaron las muestras. Los especímenes se colocaron en bloques plásticos con medio congelante y se almacenaron a -70§C hasta la extracción del neuropéptido por radioinmunoensayo. Resultados: se estableció una relación directamente proporcional entre grade degeneración ósea y expresión de sustancia P, y entre clasificación de osteoartrosis con escala visual análoga. Los hallazgos muestran correlación definitiva entre niveles de dolor y expresión de sustancia P. Conclusiones: la sustancia P se expresa en el tejido retrodiscal de la articulación temporomandibular en humanos con enfermedad degenerativa articular, relacionándose directamente con niveles de osteoartrosis y particularmente con niveles de dolor

Fibras nervosas contendo substância P na gengiva e no ligamento periodontal em ratos estressados / Nerve fibers containing substance P in gingival tissues and in periodontal ligament of rats submitted to stress

O objetivo do presente estudo foi localizar, imunohistoquimicamente, a densidade de fibras nervosas com imunorreatividade para substância P (SP-IR) nos tecidos gengivais e no ligamento periodontal de ratos submetidos ao estresse. No Laboratório de Psicofarmacologia do Instituto de Biologia Roberto Alcântara Gomes da Universidade do Estado do Rio de Janeiro, ratos (Rattus Novergicus, Albimus, Wistar) foram acompanhados desde seu nascimento e desmamados no 21º dia de vida, apresentando-se saudáveis e sendo selecionados 14 ratos adultos, de 3 a 4 meses de idade, com peso corporal entre 320 a 450g. Os animais foram mantidos em sala com temperatura controlada (23 ± 2º C), em ciclo claro-escuro (claro às 6:00 horas e escuro às 18:00 horas), com livre acesso à ração para ratos e à água ad libitum. Os animais foram divididos em dois grupos, com 7 ratos cada. No grupo experimental, os ratos foram submetidos ao estresse, pelo método de privação do sono paradoxal por 96 horas e imediatamente sacrificados por inalação do gás carbônico (CO2). No grupo controle, os animais não foram submetidos ao estresse, sendo sacrificados pelo mesmo método do grupo esperimental. O dente escolhido foi o primeiro molar inferior. As amostras foram preparadas para a técnica de HE e para a imunohistoquímica sendo analisadas pelo microscópio óptico com aumento de x200 e x2000. Os testes estatísticos aplicados foram de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney. As fibras nervosas com imunorreatividade para a substância P (SP-IR) foram observadas com aspecto de dilatações (varicosidades) ou com indicativo de curso espiralado no epitélio oral, epitélio sulcular, no epitélio juncional e entre os terços superior, médio e inferior do epitélio juncional. Ao redor de vasos sangüíneos encontramos fibras nervosas com imunorreatividade para SP (SP-IR) no tecido conjuntivo gengival e no ligamento periodontal. No entanto, não havia diferença estatisticamente significante, na densidade de fibras nervosas com imunorreatividade para SP (SP-IR) entre os grupos experimental e controle. Assim o estresse não influenciou a densidade de fibras nervosas com imunorreatividade para SP (SP-IR).