Avaliação in silico da atividade ansiolítica de compostos do extrato de camomila (Matricaria recutita) nos receptores GABAa humanos / In silico evaluation of the anxiolytic activity of compounds from chamomile (Matricaria recutita) extract in human GABAa receptors

Objetivo: Avaliar a possível atividade ansiolítica de compostos presentes no extrato padronizado de camomila por meio da interação com o receptor GABAa, como também analisar parâmetros farmacocinéticos das moléculas escolhidas por meio de ferramentas computacionais. Método: Simulação da interação proteína-ligante da apigenina, alfa-bisabolol e camazuleno, por meio de docagem molecular com o receptor GABAa, comparadas com diazepam. Por fim, os parâmetros farmacocinéticos dos três compostos foram calculados, usando a ferramenta on line SwissADME. Resultados: Alfa-bisabolol e camazuleno adequaram-se aos parâmetros farmacocinéticos favoráveis, enquanto a apigenina e o diazepam não atenderam ao perfil de ideal de biodisponibilidade. No estudo docking, as energias de ligação obtidas foram de -5-1 (a-bisabolol), -7,0 (camazuleno), -7,5 (diazepam), e -8.3 kcal/mol (apigenina); também foram observadas ligações do tipo hidrofóbicas, de Van der Waals e interações eletrostáticas. Conclusão: Os parâmetros analisados sugerem a atividade ansiolítica das moléculas estudas. Ademais, mais pesquisas in vivo devem ser realizadas a fim de elucidar os resultados e seus mecanismos e possíveis limitações em humanos.

Objective: To evaluate the possible anxiolytic activity of compounds present in standardized chamomile extract through interaction with the GABAa receptor and to analyze pharmacokinetic parameters of the chosen molecules through computational tools. Methods: Simulation of the protein-ligand interaction of apigenin, alpha-bisabolol, and camazulene by molecular docking with the GABAa receptor compared with diazepam. Finally, the pharmacokinetic parameters of the compounds were calculated using the SwissADME online tool. Results: Alpha-bisabolol and camazulene fit the favorable pharmacokinetic parameters, while apigenin and diazepam did not meet the ideal bioavailability profile. In the docking study. The binding energies obtained were -5-1 ( a-bisabolol), -7.0 (camazulene), -7.5 (diazepam), and -8.3 kcal/mol (apigenin). Hydrophobic bonds, Van der Waals and electrostatic interactions were observed. Conclusion: The parameters analyzed suggest an anxiolytic activity of the molecules studied. Also, more in vivo research to elucidate the results and their human and possible resources used in humans

Phytohormone abscisic acid boosts pentobarbital-induced sleep through activation of GABA-A, PPARß and PPARγ receptor signaling / O fito-hormônio ácido abscísico estimula o sono induzido por fenobarbital por meio de ativação da sinalização de receptores GABA-A, PPARß e PPARγ

ABSTRACT Background: Sleep disorders induce anxiety and forgetfulness and change habits. The chemical hypnotic drugs currently used have serious side effects and, therefore, people are drawn towards using natural compounds such as plant-based healing agents. Abscisic acid (ABA) is produced in a variety of mammalian tissues and it is involved in many neurophysiological functions. Objective: To investigate the possible effect of ABA on pentobarbital-induced sleep and its possible signaling through GABA-A and PPAR (γ and β) receptors, in male Wistar rats. Methods: The possible effect of ABA (5 and 10 µg/rat, intracerebroventricularly) on sleep onset latency time and duration was evaluated in a V-maze model of sleep. Pentobarbital sodium (40 mg/kg, intraperitoneally) was injected to induce sleep 30 min after administration of ABA. PPARβ (GSK0660, 80 nM/rat), PPARγ (GW9662, 3 nM/rat) or GABA-A receptor (bicuculline, 6 µg/rat) antagonists were given 15 min before ABA injection. Diazepam (2 mg/kg, intraperitoneally) was used as a positive control group. Results: ABA at 5 µg significantly boosted the pentobarbital-induced subhypnotic effects and promoted induction of sleep onset in a manner comparable to diazepam treatment. Furthermore, pretreatment with bicuculline significantly abolished the ABA effects on sleep parameters, while the amplifying effects of ABA on the induction of sleep onset was not significantly affected by PPARβ or PPARγ antagonists. The sleep prolonging effect of ABA was significantly prevented by both PPAR antagonists. Conclusions: The data showed that ABA boosts pentobarbital-induced sleep and that GABA-A, PPARβ and PPARγ receptors are, at least in part, involved in ABA signaling.

RESUMO Introdução: Os distúrbios do sono induzem a ansiedade e esquecimento e mudam hábitos. Os medicamentos hipnóticos químicos utilizados atualmente têm efeitos colaterais graves e, portanto, as pessoas são atraídas para o uso de compostos naturais, como agentes de cura à base de plantas. O ácido abscísico (ABA) é produzido em uma variedade de tecidos de mamíferos e está envolvido em muitas funções neurofisiológicas. Objetivo: Investigar o possível efeito do ABA no sono induzido por pentobarbital e sua possível sinalização por meio dos receptores GABA-A e PPAR (γ e β), em ratos Wistar machos. Métodos: O possível efeito do ABA (5 e 10 µg/rato, intracerebroventricularmente) no tempo de latência e duração do início do sono foi avaliado em um modelo de labirinto em V de sono. Pentobarbital sódico (40 mg/kg, intraperitonealmente) foi injetado para induzir o sono 30 minutos após a administração de ABA. PPARβ (GSK0660, 80 nM/rato), PPARγ (GW9662, 3 nM/rato) ou antagonistas do receptor GABA-A (bicuculina, 6 µg/rato) foram administrados 15 minutos antes da injeção de ABA. Diazepam (2 mg/kg, intraperitonealmente) foi utilizado como grupo de controle positivo. Resultados: ABA a 5 µg aumentou significativamente os efeitos sub-hipnóticos induzidos por pentobarbital e promoveu a indução do início do sono de forma comparável ao tratamento com diazepam. Além disso, o pré-tratamento com bicuculina aboliu significativamente os efeitos do ABA nos parâmetros do sono, ao passo que os efeitos amplificadores do ABA na indução do início do sono não foram significativamente afetados pelos antagonistas do PPARβ ou PPARγ. O efeito de prolongamento do sono do ABA foi significativamente prevenido por ambos os antagonistas do PPAR. Conclusões: Os dados mostraram que o ABA estimula o sono induzido por pentobarbital e que os receptores GABA-A, PPARβ e PPARγ estão, pelo menos em parte, envolvidos na sinalização ABA.

Treatment with zolpidem after ethanol administration potentiates the expression of ethanol-induced behavioral sensitization in mice

Contradictory findings suggest that the behavioral and abuse-related effects of ethanol are mediated by its action at α1 subunit-containing GABAA (α1GABAA) receptors. In the present study, we investigated the effects of a sub-chronic post-ethanol administration treatment with zolpidem, an α1-preferring positive allosteric modulator at GABAA receptors, on the subsequent expression of ethanol-induced behavioral sensitization in mice. Animals received ethanol (1.8 g/kg, ip) or saline treatments every other day for 15 days (8 treatment sessions) and were subsequently treated with zolpidem (0.5 mg/kg, ip) or vehicle 4 times on alternate days. At the end of the treatment phase, animals were challenged with saline or ethanol on separate days for the evaluation of the expression of conditioned locomotion and behavioral sensitization. Eight-day treatment with ethanol did not lead to the development of ethanol-induced behavioral sensitization. Animals treated with ethanol and subsequently administered vehicle showed similar locomotion frequencies during the last ethanol challenge compared to the control group receiving ethanol for the first time. Animals treated with ethanol and subsequently administered zolpidem expressed behavioral sensitization to ethanol during the ethanol challenge. The present study adds to the literature by providing further evidence of a role of α1GABAA receptors on the behavioral effects of ethanol. Because of the current highly prevalent co-abuse of ethanol and benzodiazepine drugs in humans, the use of zolpidem and other α1GABAA receptor ligands during ethanol withdrawal should be monitored carefully.

Avaliação in silico da interação entre o receptor GABAA e metalocompostos derivados de benzodiazepínicos / Evaluation of the interaction between GABAA receptor and organometallics derived from benzodiazepines in silico

O receptor do ácido γ-aminobutírico do tipo A (GABAA) é o receptor de ação rápida mais amplamente distribuído no sistema nervoso central (SNC) dos mamíferos. Os receptores GABAA são canais iônicos pentaméricos transmembranares e apresentam alta heterogeneidadede entre suas subunidades. Quando estes receptores são ativados pelo neurotransmissor GABA, permitem a passagem de íons cloreto para dentro dos neurônios, resultando em uma hiperpolarização destas células, as tornando menos reativas a neurotransmissores excitatórios. Os receptores GABAA são alvos de vários grupos farmacológicos com propriedades anestésicas e sedativas. A ativação destes receptores pode ser modulada por diferentes grupos de compostos, incluindo os benzodiazepínicos (BZDs), que se tornaram o grupo farmacológico prescrito mais consumido no mundo, sendo indicados no tratamento de ansiedade, insônia, relaxamento muscular e epilepsia. Apesar de serem indicados no tratamento em diversas manifestações clínicas, podem apresentar efeitos adversos, como comprometimento da memória, síndrome de descontinuação, além da sua ineficiência no tratamento em alguns casos de epilepsia. Nesse contexto, é importante identificar e desenvolver novos compostos que apresentem as mesmas características e eficiência dos BZDs clássicos, porém minimizando seus efeitos adversos.

Uma abordagem interessante é a síntese de compostos de coordenação, a partir da associação entre compostos orgânicos com elementos metálicos a partir dos BZDs clássicos, como o diazepam. Neste trabalho, foi analisada a interação do receptor GABAA com cinco compostos de coordenação derivados do diazepam com íon paládio ([(DZP)PdOAcPPh3], [(DZP)PdClPPh3], [(DZP)PdClPy], ([(DZP)PdCl]2 e [(DZP)PdOAc]2) em um modelo heteropentamérico da principal combinação de isoformas do receptor GABAA (α1ß2γ2) construído pela técnica de modelagem comparativa. Com o intuito de predizer a pose dos ligantes, foram realizadas simulações de docking molecular entre os compostos de coordenação e o diazepam com o receptor GABAA, utilizando o software AutoDock. Nossos resultados indicam que os compostos de coordenação apresentaram energia livre de ligação estimada mais baixa que o ligante diazepam, com destaque para o composto o [(DZP)PdOAc]2. Foram identificados quatro resíduos que aparentemente contribuem para a interação proteína-ligante: His101(α1), Ser204(α1), Tyr58(γ2) e Phe77(γ2). O metal paládio incluso nos compostos de coordenação apresentou um papel de estabilidade estrutural, conferindo um maior número de interações com o receptor GABAA no sítio dos benzodiazepínicos. (AU)

The use of flumazenil for benzodiazepine associated respiratory depression in postanesthesia recovery: risks and outcomes / O uso de flumazenil para depressão respiratória associada ao benzodiazepínico na recuperação pós-anestésica: riscos e resultados

Abstract Background and objectives The primary aim was to determine risk factors for flumazenil administration during postanesthesia recovery. A secondary aim was to describe outcomes among patients who received flumazenil. Methods Patients admitted to the postanesthesia recovery room at a large, academic, tertiary care facility after surgery under general anesthesia from January 1, 2010, to April 30, 2015, were identified and matched to 2 controls each, by age, sex, and surgical procedure. Flumazenil was administered in the recovery phase immediately after general anesthesia, according to the clinical judgment of the anesthesiologist. Demographic, procedural, and outcome data were extracted from the electronic health record. Conditional logistic regression, accounting for the 1:2 matched-set case-control study designs, was used to assess characteristics associated with flumazenil use. Results The incidence of flumazenil administration in the postanesthesia care unit was 9.9 per 10,000 (95% CI, 8.4-11.6) general anesthetics. History of obstructive sleep apnea (Odds Ratio [OR] = 2.27; 95% CI 1.02-5.09), longer anesthesia (OR = 1.13; 95% CI 1.03-1.24 per 30 minutes), use of total intravenous anesthesia (OR = 6.09; 95% CI 2.60-14.25), and use of benzodiazepines (OR = 8.17; 95% CI 3.71-17.99) were associated with risk for flumazenil administration. Among patients who received midazolam, cases treated with flumazenil received a higher median (interquartile range) dose than controls: 3.5 mg (2.0-4.0 mg) vs. 2.0 mg (2.0-2.0 mg), respectively (p < 0.001). Flumazenil use was correlated with a higher rate of unanticipated noninvasive positive pressure ventilation, longer postanesthesia care unit stay, and increased rate of intensive care unit admissions. Conclusions Patients who required flumazenil postoperatively had received a higher dosage of benzodiazepines and utilized more postoperative health care resources. More conservative perioperative use of benzodiazepines may improve postoperative recovery and use of health care resources.

Resumo Justificativa e objetivos Determinar os fatores de risco da administração de flumazenil durante a recuperação pós-anestésica e descrever os desfechos entre os pacientes que receberam flumazenil. Métodos Os pacientes admitidos em sala de recuperação pós-anestésica de um grande centro universitário em setor terciário de cuidados pós-cirurgia sob anestesia geral entre 1° de janeiro de 2010 e 30 de abril de 2015 foram identificados e pareados com dois controles cada por idade, sexo e procedimento cirúrgico. Flumazenil foi administrado na fase de recuperação imediatamente após a anestesia geral, de acordo com a avaliação clínica do anestesiologista. Os dados demográficos, dos procedimentos e dos desfechos foram extraídos do registro eletrônico de saúde. A regressão logística condicional para os desenhos do estudo de caso-controle pareado em 1:2 foi usada para avaliar as características associadas ao uso de flumazenil. Resultados A incidência da administração de flumazenil em sala de recuperação pós-anestésica foi de 9,9 por 10.000 (95% IC: 8,4-1,6) anestesias gerais. História da apneia obstrutiva do sono (razão de chances [OR] = 2,27; IC 95%: 1,02-5,09), anestesia de longa duração (OR = 1,13; IC 95%: 1,03-1,24 por 30 minutos), uso de anestesia intravenosa total (OR = 6,09; IC de 95%: 2,60-14,25) e uso de benzodiazepínicos (OR = 8,17; IC 95%: 3,71-17,99) foram associados a risco para a administração de flumazenil. Entre os pacientes que receberam midazolam, os casos tratados com flumazenil receberam uma dose mediana mais alta (intervalo interquartil) do que os controles: 3,5 mg (2,0-4,0 mg) vs. 2,0 mg (2,0-2,0 mg), respectivamente (p < 0,001). O uso de flumazenil foi correlacionado com uma taxa maior não prevista de ventilação não invasiva com pressão positiva, permanência mais longa em sala de recuperação pós-anestésica e aumento da taxa de admissões em unidade de terapia intensiva. Conclusão Os pacientes que precisaram de flumazenil no pós-operatório receberam uma dose maior de benzodiazepínicos e usaram mais recursos de cuidados da saúde no pós-operatório. O uso mais conservador de benzodiazepínicos no período perioperatório pode melhorar a recuperação e o uso de recursos de cuidados da saúde no pós-operatório.

Cancer Stem Cells are Depolarized Relative to Normal Stem Cells Derived from Human Livers

ABSTRACT Introduction and aim. The inability to distinguish cancer (CSCs) from normal stem cells (NSCs) has hindered attempts to identify safer, more effective therapies for hepatocellular carcinoma (HCC). The aim of this study was to document and compare cell membrane potential differences (PDs) of CSCs and NSCs derived from human HCC and healthy livers respectively and determine whether altered GABAergic innervation could explain the differences. Material and methods. Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) positive stem cells were isolated from human liver tissues by magnetic bead separations. Cellular PDs were recorded by microelectrode impalement of freshly isolated cells. GABAA receptor subunit expression was documented by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and immunofluorescence. Results. CSCs were significantly depolarized (-7.0 ± 1.3 mV) relative to NSCs (-23.0 ± 1.4 mV, p < 0.01). The depolarized state was associated with different GABAA receptor subunit expression profiles wherein phasic transmission, represented by GAGAA α3 subunit expression, was prevalent in CSCs while tonic transmission, represented by GABAA α6 subunit expression, prevailed in NSCs. In addition, GABAA subunits α3, β3, γ3 and δ were strongly expressed in CSCs while GABAA π expression was dominant in NSCs. CSCs and NSCs responded similarly to GABAA receptor agonists (ΔPD: 12.5 ± 1.2 mV and 11.0 ± 3.5 mV respectively). Conclusion. The results of this study indicate that CSCs are significantly depolarized relative to NSCs and these differences are associated with differences in GABAA receptor subunit expression. Together they provide new insights into the pathogenesis and possible treatment of human HCC.

A prescrição de benzodiazepínicos no Brasil: uma análise da literatura / The prescription of benzodiazepines in Brazil: a literature review

Benzodiazepínicos são medicamentos psicotrópicos de prescrição restrita e sujeitos a controle especial, conforme a Portaria nº 344, de 12 de maio de 1998. São utilizados como hipnóticos e sedativos, sendo bastante comuns na prática clínica. O uso prolongado destes fármacos pode causar dependência e por isso é necessário identificar seu perfil de prescrição. Este estudo busca revisar a literatura sobre os trabalhos que descreveram o uso de benzodiazepínicos no Brasil. Para isso, uma busca direta foi realizada em três bases de dados, Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde (LILACS), PubMed e Scientific Eletronic Library Online (SciELO), utilizando os descritores prescrição/prescription, benzodiazepínicos/benzodiazepines, Brasil/Brazil. Depois de aplicados os critérios de inclusão e exclusão, restaram 12 artigos, os quais foram analisados. A análise destes trabalhos mostrou que, no Brasil, os benzodiazepínicos são utilizados especialmente por mulheres com tendência ao aumento do uso com o avançar da idade. Desta maneira, conclui-se que permanece a necessidade de políticas públicas que busquem o uso racional destes fármacos.

Benzodiazepines are prescription restricted psychotropic drugs, subject to special control according to Decree nº 344 of May 12, 1998. They are used as hypnotics and sedatives, being widely used in clinical practice. Prolonged use of these drugs can cause dependence, and therefore it is necessary to identify their prescription profile. This study aims to review the literature on studies that described the use of benzodiazepines in Brazil. For such, a direct search was conducted in databases, such as LILACS, Pubmed and SciELO, with the descriptors, in Portuguese and English, "prescrição" (prescription), "benzodiazepínicos" (benzodiazepines) and "Brasil" (Brazil). After applying the criteria for inclusion and exclusion, 12 articles remained, which were analyzed in this work. The analysis of these data has shown that, in Brazil, benzodiazepines are used especially by women with a tendency to increased use with advancing age. On this wat, we might conclude that Brazil's needs to improve his politics to promote rational use of Benzodiazepines.

Monoterpenoids (thymol, carvacrol and S-(+)-linalool) with anesthetic activity in silver catfish (Rhamdia quelen): evaluation of acetylcholinesterase and GABAergic activity

This study evaluated the anesthetic potential of thymol and carvacrol, and their influence on acetylcholinesterase (AChE) activity in the muscle and brain of silver catfish (Rhamdia quelen). The AChE activity of S-(+)-linalool was also evaluated. We subsequently assessed the effects of thymol and S-(+)-linalool on the GABAergic system. Fish were exposed to thymol and carvacrol (25, 50, 75, and 100 mg/L) to evaluate time for anesthesia and recovery. Both compounds induced sedation at 25 mg/L and anesthesia with 50-100 mg/L. However, fish exposed to carvacrol presented strong muscle contractions and mortality. AChE activity was increased in the brain of fish at 50 mg/L carvacrol and 100 mg/L thymol, and decreased in the muscle at 100 mg/L carvacrol. S-(+)-linalool did not alter AChE activity. Anesthesia with thymol was reversed by exposure to picrotoxin (GABAA antagonist), similar to the positive control propofol, but was not reversed by flumazenil (antagonist of benzodiazepine binding site), as observed for the positive control diazepam. Picrotoxin did not reverse the effect of S-(+)-linalool. Thymol exposure at 50 mg/L is more suitable than carvacrol for anesthesia in silver catfish, because this concentration did not cause any mortality or interference with AChE activity. Thymol interacted with GABAA receptors, but not with the GABAA/benzodiazepine site. In contrast, S-(+)-linalool did not act in GABAA receptors in silver catfish.

Utilização da associação de cetamina, diazepam e detomidina na contenção farmacológica de equídeos (Equus sp) Para procedimentos de orquiectomia em campo / Use of ketamine, diazepam and detomidine in chemical restraint of equids (Equus sp) For field orchiectomy / Uso de la asociación de ketamina, diazepam y detomidina en la contención farmacológica de équidos (Equus sp) Para procedimientos de castración en campo

Este artigo apresenta os resultados de um protocolo de contenção farmacológica para orquiectomia eletiva realizada em campo pela técnica aberta, na Região Noroeste do Estado do Paraná, em 106 cavalos (sendo cinco pôneis) e 29 muares, utilizando abraçadeira de náilon 6.6 (poliamida) para ligaduras vasculares hemostáticas. Os 135 equídeos foram contidos por meio de injeção intravenosa da associação de cloridrato de detomidina, cloridrato de cetamina e diazepam, acondicionados em uma mesma seringa, o que facilita o manejo, especialmente quando se trabalha com animais inquietos ou agressivos. O método empregado teve fácil execução e baixo custo, e os resultados permitem sugerir seu uso em orquiectomias e outras pequenas cirurgias de campo em equídeos domésticos.(AU)

This paper reports the results of an anesthetic protocol used for elective field orchiectomy performed by open technique, in the northwestern region of Paraná State, Brazil, in 106 equids (being five ponies) and 29 mules, using 6.6 nylon (polyamide) cable ties for hemostatic vascular ligature. The 135 equids were chemically restrained by intravenous injection of a combination of detomidine HCl, ketamine HCl and diazepam, mixed in the same syringe, in order to facilitate handling, especially when working with restless or aggressive animals. The method was considered low-cost and easy to perform, and the results allows to suggest its use in orchiectomies and other minor field surgeries in domestic equids.(AU)

Este artículo presenta los resultados de un protocolo de contención farmacológica para castración electiva realizada en campo por técnica abierta, en la Región Noroeste del Estado de Paraná, en 106 caballos (incluyendo cinco ponis) y 29 mulares, utilizando abrazaderas de nylon 6,6 (poliamida) para las ligaduras hemostáticas vasculares. Los 135 équidos fueron anestesiados mediante inyección intravenosa de la asociación de clorhidrato de ketamina, clorhidrato de detomidina y diazepam, mesclados en una misma jeringa, lo que facilita la manipulación, especialmente cuando se trabaja con animales inquietos o agresivos. El método empleado ha sido fácil de realizar y de bajo costo, los resultados sugieren su uso en la castración y otras pequeñas cirugías de campo en équidos domésticos.(AU)

Desafios na prescrição de benzodiazepínicos em unidades básicas de saúde / Challenges in benzodiazepines prescriptions in basic health units

Introdução: Os benzodiazepínicos (BZDs) são drogas psicotrópicas que atuam no controle de transtornos de humor e ansiedade. O objetivo deste estudo foi avaliar o consumo de benzodiazepínicos em duas unidades de saúde de Tubarão/SC, sendo uma de área urbana e outra de área rural, a partir das características dos usuários e dos medicamentos utilizados. Métodos: Estudo observacional transversal, por meio de análise de prontuários de indivíduos em uso de BZDs há pelo menos dois meses, cadastrados em duas Unidades de Saúde da Família (USF) do município de Tubarão/SC. Resultados: Foram identifi cados 203 indivíduos em uso de BZDs, correspondentes a 4,7% da amostra total, sendo a prevalência maior na área rural (6,7%) do que na área urbana (3,3%; RP 2,03 IC95% 1,55-2,68; p<0,001). Entre os usuários, 72,9% são do sexo feminino, 70% são casados, 75,9% não estão inseridos no mercado de trabalho e possuem em média 60,16 (±13,73) anos. O medicamento mais relatado foi o clonazepam (48,8%), seguido pelo diazepam (26,6%). O clínico geral emitiu 56,7% das prescrições, e as principais indicações foram referentes aos sintomas depressivos, ansiosos e difi culdade para dormir. O tempo mediano de uso do medicamento foi 4 anos (0-15 anos). Os residentes da área rural apresentaram maior tempo de uso e maior número de receituários renovados. Conclusão: O consumo de BZD foi maior entre mulheres, idosos, casados e indivíduos economicamente inativos e moradores da área rural. A maioria das prescrições foi realizada por um clínico geral.

Introduction: Benzodiazepines (BZDs) are psychotropic drugs that act in the control of mood disorders and anxiety. The aim of this study was to assess BDZs consumption in two health units located in a urban and in a rural area in Tubarão, SC, from the characteristics of users and medications used. Methods: A cross-sectional, observational study, through analysis of medical records of individuals using BDZs for at least two months, registered in one of two Family Health Units in the city of Tubarão, SC. Results: 203 users of benzodiazepines were identifi ed, corresponding to 4.7% of the total sample, with a higher prevalence in the rural (6.7%) than in the urban area (3.3%; PR 2.03 CI 9595% 1.55 to 2.68; p<0,001). Among the users, 72.9% are female, 70% are married, 75.9% are not included in the labor market, and the mean age is 60.16 (± 13.73). The most frequently reported drug was clonazepam (48.8%), followed by diazepam (26.6%). 56.7% of prescriptions were issued by a general practitioner and the main indications were related to depressive symptoms, anxiety and diffi culty sleeping. The median duration of drug use was 4 years (0-15 years). Residents of rural areas showed longer use and more prescriptions renewals. Conclusion: BZDs consumption was higher among females, older, married, and economically inactive individuals and residents of the rural area. Most prescriptions were performed by a GP.

Perfil epidemiólogico dos usuários de benzodiazepínicos na atenção primária à saúde / Epidemiological profile of users of benzodiazepines in primary health care

Trata-se de um estudo transversal, cujo objetivo foi identificar o perfil epidemiológico dos usuários de benzodiazepínicos.A amostra intencional foi composta de 219 usuários de benzodiazepínicos (BZD) cadastrados em quatro equipes de saúde da família, sendo que a coleta de dados ocorreu entre os meses de janeiro e maio de 2013. Para a tabulação e a análise descritiva dos dados utilizaram-se os softwares Epidata 3.1. e EPINFO 6.04. Os resultados apontam que a maior parte dos usuários de benzodiazepínicos são do sexo feminino, autodeclarados negros ou pardos, com idade entre 53 e 60 anos, com baixo nível de escolaridade e renda familiar. Na caracterização das condições de saúde da amostra, observou-se que 69,9%dos usuários relatam possuir algum tipo de doença. O Clonazepam foi o BZD mais utilizado. O tempo de uso prolongado foiobservado, o que caracterizou uso indevido. O principal motivo de uso foi insônia seguido por motivo de ansiedade. O perfil encontrado direciona para a necessidade de promover mudanças nas condutas de prescrição, dispensação e utilização de benzodiazepínicos nas unidades de APS...

This is a cross-sectional study whose objective was to identify the epidemiological profile of users of benzodiazepines (BZD). The sample was composed of 219 registered users of benzodiazepines in four family health teams. Data collection took place between January and May, 2013. Epidata 3.1 software and 6:04 EPINFO were used for tabulation anddescriptive data analysis. The results show that most users of benzodiazepines are female, self-declared black or brown,aged between 53 and 60 years, with low levels of education and low family income. It was observed, in thecharacterization of the health conditions of the sample, that 69.9 percent of user report having some kind of disease.Clonazepam was used as a BZD. Prolonged use was observed, which characterizes misuse. The main reason for use was insomnia due to anxiety. The profile points to the need to promote changes in prescribing, dispensing and usingbenzodiazepines in the units of APS lines...

Este es un estudio transversal cuyo objetivo fue identificar el perfil epidemiológico de los usuarios de las benzodiacepinas. La muestra está compuesta por 219 usuarios registrados de las benzodiacepinas en 4 equipos de salud familiar y la recolección de datos se llevó a cabo entre enero y mayo de 2013. Para la tabulación y análisis de datos descriptivos se utilizó el software Epidata 3.1 y 06:04 EPINFO. Los resultados muestran que la mayoría de los usuarios de lasbenzodiacepinas son mujeres , negros o pardos autodeclarados , con edades comprendidas entre 53 y 60 años , con un bajo nivel de educación e ingreso familiar. En la caracterización de las condiciones de salud de la muestra, se observó que el 69,9 % de usuarios informan que tienen algún tipo de enfermedad. El clonazepam fue el BZD más utilizado. Se observó el uso prolongado, lo que caracteriza el uso indebido. La razón principal para el uso fue el insomnio seguido por motivo de ansiedad. El perfil encontrado conlleva hacia la necesidad de promover cambios en la prescripción, dispensación y uso de las benzodiacepinas en las unidades de APS...

Different Extracts of Zingiber officinale Decrease Enterococcus faecalis Infection in Galleria mellonella

Dried, fresh and glycolic extracts of Zingiber officinale were obtained to evaluate the action against G. mellonella survival assay against Enterococcus faecalis infection. Eighty larvae were divided into: 1) E. faecalis suspension (control); 2) E. faecalis + fresh extract of Z. officinale (FEO); 3) E. faecalis + dried extract of Z. officinale (DEO); 4) E. faecalis + glycolic extract of Z. officinale (GEO); 5) Phosphate buffered saline (PBS). For control group, a 5 μL inoculum of standardized suspension (107 cells/mL) of E. faecalis (ATCC 29212) was injected into the last left proleg of each larva. For the treatment groups, after E. faecalis inoculation, the extracts were also injected, but into the last right proleg. The larvae were stored at 37 °C and the number of dead larvae was recorded daily for 168 h (7 days) to analyze the survival curve. The larvae were considered dead when they did not show any movement after touching. E. faecalis infection led to the death of 85% of the larvae after 168 h. Notwithstanding, in treatment groups with association of extracts, there was an increase in the survival rates of 50% (GEO), 61% (FEO) and 66% (DEO) of the larvae. In all treatment groups, the larvae exhibited a survival increase with statistically significant difference in relation to control group (p=0.0029). There were no statistically significant differences among treatment groups with different extracts (p=0.3859). It may be concluded that the tested extracts showed antimicrobial activity against E. faecalis infection by increasing the survival of Galleria mellonella larvae.

Extratos seco, fresco e glicólico de Zingiber officinale foram obtidos para avaliar suas ações por meio de ensaio de sobrevivência em G. mellonella contra infecção por Enterococcus faecalis. Oitenta larvas foram divididas em: 1) Suspensão de E. faecalis (controle); 2) E. faecalis + extrato fresco de Z. officinale (FEO); 3) E. faecalis + extrato seco de Z. officinale (DEO); 4) E. faecalis + extrato glicólico de Z. officinale (GEO); 5) Solução tampão fosfato salina (PBS). Para o grupo de controle, 5 µL de inóculo de suspensão padronizada (107 células/mL) de E. faecalis (ATCC 29212) foi injetado na última proleg esquerda de cada lagarta. Para os grupos com tratamento, após a injeção de E. faecalis, os extratos foram injetados na última proleg direita. Após as injeções, as lagartas foram armazenadas a 37 °C e o número de animais mortos foi registrado diariamente em 168 h (7 dias) para analisar a curva de sobrevivência. As lagartas foram consideradas mortas quando elas não mostraram qualquer movimento após o toque. A infecção por E. faecalis levou à morte de 85% das lagartas após 168 h. Não obstante, nos grupos de tratamento com associação dos extratos, houve um aumento nas taxas de sobrevivência de 50% (GEO), 61% (FEO) e 66% (DEO) das lagartas. Em todos os grupos com tratamento, as lagartas apresentaram um aumento na sobrevivência, com diferença estatisticamente significativa em relação ao grupo controle (p=0,0029). Não houve diferença estatisticamente significativa entre os tratamentos com os diferentes extratos (p=0,3859). Pode concluir-se que os extratos testados mostraram atividade antimicrobiana contra a infecção por E. faecalis, aumentando a sobrevivência das lagartas de G. mellonella.

Desenvolvimento de métodos analíticos para a identificação de drogas facilitadoras de crime em amostras de urina / Developing analytical methods for identification of drug-facilitated crime in urine samples

As drogas facilitadoras de crime (DFC) são uma série de substâncias químicas que permitem o ato sexual e/ou roubo com pouca ou nenhuma resistência da vítima. Benzodiazepínicos, gama-hidroxibutirato (GHB), cetamina e etanol são clássicas DFC, porém outras substâncias também têm sido utilizadas. Devido às diferentes classes de DFC e a necessidade de métodos sensíveis, a determinação dessas substâncias é um desafio aos toxicologistas forenses. A proposta do estudo foi desenvolver métodos analíticos para determinação principais analitos alvos de DFC para benzodiazepínicos, cetamina e GHB em amostras de urina. Esta matriz biológica é considerada uma amostra não-invasiva e apresenta um período de detecção maior que o sangue. A preparação das amostras foi avaliada através de microextração em fase líquida (LPME) e extração líquido-líquido (LLE). A LPME é uma técnica de extração de drogas que utiliza menor quantidade de solventes orgânicos, maior praticidade e possibilidade de obtenção de altos valores de recuperação. Os analitos foram determinados por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GC-MS). A LPME validada para benzodiazepínicos e seus produtos de biotransformação exigiu uma combinação de solventes e dupla derivatização para atingir a sensibilidade exigida, enquanto o método para determinação de cetamina, norcetamina e deidronorcetamina utilizou óleo essencial de eucalipto como meio extrator, caracterizando-se um procedimento ecologicamente correto com alta sensibilidade. A extração de GHB foi efetiva por LLE com redução da quantidade de solvente e tempo de análise sem o prejuízo na sensibilidade. Em geral, os métodos desenvolvidos neste trabalho são sensíveis e confiáveis para todos os analitos relatados e conclui-se que a LPME é uma técnica de preparo de amostra eficiente, versátil de baixo custo. Estas condições permitem que sua implementação em qualquer laboratório de análises toxicológicas, podendo ser aplicada em situações de DFC ou de qualquer outra natureza

Drug-facilitated crime (DFC) are a series of chemicals that allow the sexual act and/or theft with little or no resistance from the victim. Benzodiazepines, gamma-hydroxybutyrate (GHB) and ketamine and ethanol are considered classic DFC, however other substances were also used as the DFC. Due to the different classes of DFC and the need for sensitive methods, the determination of these substances is a challenge to forensic toxicologists. The purpose of this study was to develop analytical methods for determination of the main target analytes of DFC for benzodiazepines, ketamine and GHB in urine samples. This biological matrix is considered a non-invasive sample and shows a larger window of detection than blood. Sample preparation was assessed using liquid phase microextraction (LPME) and liquid-liquid extraction (LLE). The LPME is a drug extraction technique that uses less organic solvents, greater practicality and possibility of obtaining high recovery values. The analytes were determined by gas chromatography - mass spectrometry (GC-MS). The validated LPME technique for benzodiazepines and their metabolites required a combination of solvents and double derivatization to achieve the required sensitivity, while the ketamine, norketamine and dehydronorketamine method used essential oil of eucalyptus as solvent, characterizing a green chemistry approach with high sensitivity. The extraction of GHB was effective by LLE with a reduced amount of solvent and the analysis time without loss in sensitivity. In general, the methods developed in this work using GC-MS are sensitive and reliable for all analytes reported and LPME technique showed to be an efficient sample preparation, versatile and low cost. These conditions allow LPME implementation in any laboratory of toxicological analysis and it can be applied in situations of DFC or any other kind of analysis

Fatores relacionados à utilização de flumazenil em pacientes hospitalizados / Factors related to use of flumazenil in hospitalized patients / Factores relacionados con el uso de flumazenil en pacientes hospitalizados

Interações medicamentosas (IM) exacerbam o risco de eventos adversos graves relacionados ao uso de benzodiazepínicos. Este estudo objetivou conhecer aspectos relacionados à utilização de flumazenil em pacientes hospitalizados. Através do método observacional, foram analisados prescrições e prontuários de 31 pacientes internados entre junho/2008 e junho/2010 quanto à indicação do flumazenil, aos fatores que podem ter contribuído para intoxicação por benzodiazepínicos e à frequência de IM potenciais (IMP). A frequência de indicação para reversão de sedação excessiva foi aproximadamente 1,3 prescrições por 1.000 pacientes. Foram identificadas IMP em 84% dessas prescrições. Para sete casos, não houve prescrição prévia de benzodiazepínicos. O exame permitiu a identificação dos eventos com necessidade do manejo da sedação excessiva relacionados à ocorrência de IMP entre benzodiazepínicos e outros medicamentos para um elevado percentual de pacientes. Observou-se que idade elevada, quadro clínico com muitas comorbidades e administração de medicamentos com interações bem definidas estiveram associados à hipersedação...

Drug interactions (DIs) heighten the risk of severe adverse events connected with use of benzodiazepines. This observational study aimed to ascertain aspects of use of flumazenil in hospital inpatients. The prescriptions and medicalrecords of 31 patients admitted between June 2008 and June 2010 were examined for indication of flumazenil, factors that could have contributed to benzodiazepine intoxication, and potential drug interaction (PDI) frequency. In 1.3 prescriptions per 1,000 patients the indication was for reversal of excessive sedation. PDIs were observed in 84% of these prescriptions. In 7 cases there was no prior prescription of benzodiazepines. The examination identified events requiring management of excessive sedation associated with occurrence of PDI between benzodiazepines and other drugs in a high percentage of patients. It was observed that more advanced age, clinical condition with many comorbidities, and administration of drugs with well-defined interactions were observed to associate with over-sedation...

Interacciones medicamentosas (IM) incrementan el riesgo de efectos adversos graves. Este estudio observacional investigó los aspectos relacionados con el uso de flumazenil en los pacientes hospitalizados. Se analizaron las prescripciones y prontuarios de 31 pacientes ingresados entre junio/2008 y junio/2010. La frecuencia de la indicación de reversión de la sedación excesiva fue de 1,3 prescripciones por 1.000 pacientes. Se identificaron IMP en 84% de estas prescripciones. En siete casos no hubo prescripción previa de benzodiazepínicos. Este estudio permitió la identificación de la sedación excesiva asociada con la aparición de IMP entre los benzodiazepínicos y otras drogas para un alto porcentaje de pacientes. Se ha observado que la edad avanzada, cuadro clínico con muchas comorbilidades y administración de fármacos con interacciones bien definidas se asociaron con excesiva sedación...

Impacto do fentanil associado ao midazolam na sedação para ecocardiograma transesofágico / Impact of fentanyl associated with midazolam in sedation for transesophageal echocardiography / Impacto del Fentanil Asociado al Midazolam en la Sedación para Ecocardiograma Transesofágico

Introdução: O ecocardiograma transesofágico é atualmente uma das principais ferramentas no diagnóstico de diversas alterações cardíacas. Para uma maior segurança e conforto na sua realização, o exame tem sido realizado sob sedação consciente moderada, sendo os benzodiazepínicos os agentes de escolha. Nessa classe de medicamentos, o midazolam é o mais utilizado, todavia não está isento de possíveis complicações relacionadas ao seu uso, como hipóxia, hipotensão, entre outras. Sabemos que grau de sedação é dose-dependente, portanto, quanto menor a dose utilizada, será menor o risco de complicações do procedimento.Objetivo: Verificar o impacto do uso do fentanil na administração endovenosa de midazolam, no intuito de avaliar eficiência de protocolo de sedação de pacientes submetidos a ecocardiograma transesofágico, utilizando ambos os medicamentos. Metodologia: : Estudamos 201 pacientes (idade média de 51,5 anos, 115 homens) submetidos a ecocardiograma transesofágico, com sedação por via endovenosa divididos em dois grupos: Grupo A (n = 89), seguindo protocolo definido com uso de fentanil associado ao midazolam; e Grupo B (n = 112), sem o emprego de fentanil. Comparou-se então a dosagem de midazolam administrada em ambos os grupos. Monitorização adequada dos sinais vitais foi realizada durante todo o procedimento. Resultados: A dose média de midazolam utilizada foide 2,6 ± 1,4 mg no Grupo A e de 4,0 ± 2,7 mg no Grupo B (p < 0,01). A dose de fentanil empregada foi de 66,2 ± 24,8 mcg. Não houve diferença significativa entre idade (p = 0,08) e gênero (p > 0,1) nos grupos estudados. Conclusão: O uso de fentanil na sedação para realização de ecocardiograma transesofágico associado à administração de midazolam permite a administração de uma dose menor desse benzodiazepínico.

Introduction: Transesophageal echocardiography is currently one of the main tools in the diagnosis of various cardiac abnormalities. For greater safety and comfort, the test has been performed under moderate conscious sedation and benzodiazepines were the agents of choice. In this class of drugs, midazolam is the most commonly used, however it is not free of potential complications related to its use, such as hypoxia, hypotension, among others. We know that sedation level is dose-dependent. Therefore, the lower the dose, the lower the risk of complications from the procedure.Objective: To check the impact of fentanyl in the intravenous administration of midazolam in order to assess the sedation protocol efficiency on patients undergoing transesophageal echocardiography using both drugs.Methodology: We have studied 201 patients (mean age 51.5 years, 115 men) who underwent transesophageal echocardiography with intravenous sedation divided into two groups: Group A (n = 89), following the protocol with fentanyl associated with midazolam; and Group B (n = 112) without the use of fentanyl. The dose of midazolam administered in both groups was then compared. Proper monitoring of vital signs was performed throughout the procedure.Results: The mean dose of midazolam used was 2.6 ± 1.4 mg in Group A and 4.0 ± 2.7 mg in Group B (p < 0.01). The dose of fentanyl used was 66.2 ± 24.8 mcg. There was no significant difference between age (p = 0.08) and gender (p > 0.1) in the groups studied. Conclusion: The use of fentanyl in sedation for transesophageal echocardiography associated with administration of midazolam allows the administration of a lower dose of this benzodiazepine.

Introducción: El ecocardiograma transesofágico es actualmente una de las principales herramientas en el diagnóstico de diversas alteraciones cardíacas. Para una mayor seguridad y confort en su realización, el examen ha sido realizado bajo sedación conciente moderada, siendo los benzodiazepínicos los agentes de elección. En esa clase de medicamentos, el midazolam es el más utilizado, sin embargo no está exento de posibles complicaciones relacionadas a su uso, como hipoxia, hipotensión, entre otras. Sabemos que grado de sedación es dosis-dependiente, por lo tanto, cuanto menor es la dosis utilizada, será menor el riesgo de complicaciones del procedimiento.Objetivo: Verificar el impacto del uso del fentanil en la administración endovenosa de midazolam, con el propósito de evaluar eficiencia de protocolo de sedación de pacientes sometidos a ecocardiograma transesofágico, utilizando ambos medicamentos.Metodología: Estudiamos 201 pacientes (edad media de 51,5 anos, 115 hombres) sometidos a ecocardiograma transesofágico, con sedación por vía endovenosa divididos en dos grupos: Grupo A (n = 89), siguiendo protocolo definido con uso de fentanil asociado al midazolam; y Grupo B (n = 112), sin el empleo de fentanil. Se comparó entonces el dosaje de midazolam administrada en ambos grupos. Monitoreo adecuado de los signos vitales fue realizada durante todo el procedimiento. Resultados: La dosis media de midazolam utilizada fue de 2,6 ± 1,4 mg en el Grupo A y de 4,0 ± 2,7 mg en el Grupo B (p < 0,01). La dosis de fentanil empleada fue de 66,2 ± 24,8 mcg. No hubo diferencia significativa entre edad (p = 0,08) y género (p > 0,1) en los grupos estudiados. Conclusión: El uso de fentanil en la sedación para realización de ecocardiograma transesofágico asociado a la administración de midazolam permite la administración de una dosis menor de ese benzodiazepínico

Participation of the GABAergic system in the anesthetic effect of Lippia alba (Mill.) N.E. Brown essential oil

The objective of this study was to identify the possible involvement of the GABAergic system in the anesthetic effect of Lippia alba essential oil (EO). We propose a new animal model using silver catfish (Rhamdia quelen) exposed to an anesthetic bath to study the mechanism of action of EO. To observe the induction and potentiation of the anesthetic effect of EO, juvenile silver catfish (9.30 ± 1.85 g; 10.15 ± 0.95 cm; N = 6) were exposed to various concentrations of L. alba EO in the presence or absence of diazepam [an agonist of high-affinity binding sites for benzodiazepinic (BDZ) sites coupled to the GABA A receptor complex]. In another experiment, fish (N = 6) were initially anesthetized with the EO and then transferred to an anesthetic-free aquarium containing flumazenil (a selective antagonist of binding sites for BDZ coupled to the GABA A receptor complex) or water to assess recovery time from the anesthesia. In this case, flumazenil was used to observe the involvement of the GABA-BDZ receptor in the EO mechanism of action. The results showed that diazepam potentiates the anesthetic effect of EO at all concentrations tested. Fish exposed to diazepam and EO showed faster recovery from anesthesia when flumazenil was added to the recovery bath (12.0 ± 0.3 and 7.2 ± 0.7, respectively) than those exposed to water (9.2 ± 0.2 and 3.5 ± 0.3, respectively). In conclusion, the results demonstrated the involvement of the GABAergic system in the anesthetic effect of L. alba EO on silver catfish.

Estrous cycle and stress: influence of progesterone on the female brain

The female brain operates in a constantly changing chemical milieu caused by cyclical changes in gonadal hormones during the estrous cycle (menstrual cycle in women). Such hormones are highly lipophilic and pass readily from the plasma to the brain where they can influence neuronal function. It is becoming clear that the rapid reduction in peripheral circulating progesterone, which occurs during the late diestrous phase of the cycle, can trigger a withdrawal-like response, in which changes in GABA A receptor expression render hyper-responsive certain brain areas involved in processing responses to stressful stimuli. The periaqueductal gray matter (PAG) is recognised as an important region for integrating anxiety/defence responses. Withdrawal from progesterone, via actions of its neuroactive metabolite allopregnanolone, triggers up-regulation of extrasynaptic GABA A receptors on GABAergic neurons in the PAG. As a consequence, ongoing GABAergic tone on the output cells decreases, leading to an increase in functional excitability of the circuitry and enhanced responsiveness to stressful stimuli during the late diestrous phase. These changes during late diestrus could be prevented by short-term neurosteroid administration, timed to produce a more gradual fall in the peripheral concentration of allopregnanolone than the rapid decrease that occurs naturally, thus removing the trigger for the central withdrawal response.