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3.
Braz. j. biol ; 82: e232525, 2022. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1249239

RESUMO

The coupling of a ligand with a molecular receptor induces a signal that travels through the receptor, reaching the internal domain and triggering a response cascade. In previous work on T-cell receptors and their coupling with foreign antigens, we observed the presence of planar molecular patterns able to generate electromagnetic fields within the proteins. These planes showed a coherent (synchronized) behavior, replicating immediately in the intracellular domain that which occurred in the extracellular domain as the ligand was coupled. In the present study, we examined this molecular transduction - the capacity of the coupling signal to penetrate deep inside the receptor molecule and induce a response. We verified the presence of synchronized behavior in diverse receptorligand systems. To appreciate this diversity, we present four biochemically different systems - TCR-peptide, calcium pump-ADP, haemoglobin-oxygen, and gp120-CD4 viral coupling. The confirmation of synchronized molecular transduction in each of these systems suggests that the proposed mechanism would occur in all biochemical receptor-ligand systems.


A ligação de um ligante com um receptor molecular induz um sinal que viaja através do receptor, chegando ao domínio interno e disparando uma cascata de resposta. Em trabalhos anteriores em receptores de células T e sua ligação com antígenos estranhos, observamos a presença de padrões moleculares planares capazes de gerar campos eletromagnéticos dentro das proteínas. Esses planos mostraram um comportamento coerente (sincronizado), replicando, instantaneamente, no domínio intracelular o que ocorreu no domínio extracelular, enquanto o ligante era acoplado. No presente estudo, examinamos essa transdução ­ a capacidade de um sinal de acoplamento de penetrar profundamente a molécula receptora e induzir uma resposta. Verificamos a presença de um comportamento coerente em sistemas diversos de receptor-ligante. Para apreciar essa diversidade, apresentamos quatro sistemas bioquímicos diferentes: TCR-peptídeo, ADP-bomba de cálcio, hemoglobina-oxigênio e gp120-CD4 acoplamento viral. A confirmação de transdução molecular sincronizada em cada um desses sistemas sugere que o mecanismo proposto ocorreria em todos os sistemas bioquímicos receptor-ligante.


Assuntos
Transdução de Sinais , Campos Eletromagnéticos , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/genética , Ligantes
4.
Medicina (B.Aires) ; 81(3): 337-345, jun. 2021. graf
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: biblio-1346468

RESUMO

Resumen Las leucemias agudas constituyen la neoplasia más frecuente en pacientes pediátricos. Actualmente, el 80% de los niños con leucemia linfoblástica aguda (LLA) logran curarse con quimioterapia con vencional pero el 20% de los mismos presentarán una reaparición de la enfermedad. La enfermedad residual medible (ERM) ha sido descripta como un importante factor pronóstico, que permite evaluar la respuesta de los pacientes al tratamiento. Una de las técnicas más sensibles par a estudiar ERM es la cuantificación de reordena mientos génicos de inmunoglobulinas (Ig) y receptores de linfocitos-T (TCR). Los objetivos del presente trabajo fueron describir los reordenamientos detectados de Ig/TCR, evaluar el efecto de la ERM en la supervivencia de niños con LLA y comparar la ERM por Ig/TCR con la cuantificada mediante citometría de flujo multiparamétrica (CFM). Del total de 455 pacientes estudiados, en el 96% fue posible caracterizar al menos un reordenamiento de Ig/TCR. El total de reordenamientos clonales detectados fue de 1550. La ERM pudo ser estudiada en forma exitosa en el 89% de los casos. El valor de ERM positiva combinada al día 33 y 78 de tratamiento, permitió identificar pacientes de alto riesgo, entre los previamente estratificados por la ERM mediante CFM al día 15. La comparación entre la determinación de ERM mediante reordenamientos Ig/TCR y CFM mostró una excelente correlación. El presente trabajo constituye un estudio de ERM mediante Ig/TCR realizado en un número muy significativo de pacientes diagnosticados en forma consecutiva, tratados en el marco de un protocolo homogéneo y con excelente seguimiento clínico.


Abstract Acute leukemias are the most common neoplasm in pediatric patients. Currently, 80% of children with diagnosis of acute lymphoblastic leukemia (ALL) are cured with conventional chemotherapy, but 20% of them will have a recurrence of the disease. Measurable Residual Disease (MRD) has been described as an important prognostic factor that allows evaluating the response of patients to treatment. One of the most sensitive techniques to study MRD is the quantification of immunoglobulins (Ig) and T-lymphocyte receptors (TCR) genes rearrangements. The aims of this study were to describe the detected Ig/TCR rearrangements, to evaluate the prognostic impact of MRD in our population of children with ALL and to compare the MRD values by Ig/TCR with those obtained by multiparametric flow cytometry (MFC). A total of 455 patients were studied. In 96% of the cases, it was possible to characterize at least one Ig/TCR rearrangement. The total number of Ig/TCR rear rangements detected was 1550. MRD was successfully applied in 89% of the cases. The combined positive MRD values at day 33 and 78 of treatment allow the identification of high-risk patients in cases previously stratified by MRD using flow cytometry at day 15. The comparison between MRD determination by Ig/TCR rearrangements and FC showed excellent correlation. The present work constitutes a study of MRD by Ig/TCR carried out in a very significant number of patients consecutively diagnosed, treated within a homogeneous protocol and with excellent clinical follow-up.


Assuntos
Humanos , Criança , Imunoglobulinas , Rearranjo Gênico do Linfócito T , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/genética , Linfócitos T , Reação em Cadeia da Polimerase , Neoplasia Residual/genética
5.
Braz. j. med. biol. res ; 52(7): e8292, 2019. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-1011589

RESUMO

The thymus is a primary lymphoid organ responsible for the maturation of T cells as well as the immunological central tolerance. It is in the antenatal period and infancy that it plays its major role. In clinical practice, T cell receptor excision circles (TRECs) are considered a direct and reliable measure of the thymic function. TRECs are a by-product of DNA formation in gene rearrangement of T cell receptors. They are stable and they do not duplicate during mitosis, representing the recent emigrant T cells from the thymus. Despite their importance, TRECs have been neglected by physicians and there is a lack of data regarding thymic function during infancy of healthy children. In order to evaluate thymic function in the first years of life, we propose measuring TRECs as a valuable tool. One hundred and three blood samples from children and adolescents between 3 months and 20 years of age were analyzed. The mean TRECs count was 136.77±96.7 copies of TRECs/μL of DNA. The individuals between 0 and 5 years of age had significantly higher TRECs values than those between 10 and 20 years of age. No significant difference was observed in TRECs values among age groups below 5 years of age. An inverse correlation between TRECs and age was found (r=0.3 P=0.003). These data highlight and validate the evidence of decreased thymus function with age, even during infancy. Awareness should be raised with this important albeit ignored organ.


Assuntos
Humanos , Lactente , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto Jovem , Timo/fisiologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/fisiologia , Valores de Referência , Timo/citologia , Biomarcadores/sangue , Rearranjo Gênico do Linfócito T , Reprodutibilidade dos Testes
6.
Einstein (Säo Paulo) ; 15(3): 369-375, July-Sept. 2017. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-891391

RESUMO

ABSTRACT The ability to make site-specific modifications to the human genome has been an objective in medicine since the recognition of the gene as the basic unit of heredity. Thus, gene therapy is understood as the ability of genetic improvement through the correction of altered (mutated) genes or site-specific modifications that target therapeutic treatment. This therapy became possible through the advances of genetics and bioengineering that enabled manipulating vectors for delivery of extrachromosomal material to target cells. One of the main focuses of this technique is the optimization of delivery vehicles (vectors) that are mostly plasmids, nanostructured or viruses. The viruses are more often investigated due to their excellence of invading cells and inserting their genetic material. However, there is great concern regarding exacerbated immune responses and genome manipulation, especially in germ line cells. In vivo studies in in somatic cell showed satisfactory results with approved protocols in clinical trials. These trials have been conducted in the United States, Europe, Australia and China. Recent biotechnological advances, such as induced pluripotent stem cells in patients with liver diseases, chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy, and genomic editing by CRISPR/Cas9, are addressed in this review.


RESUMO A habilidade de fazer modificações pontuais no genoma humano tem sido o objetivo da medicina desde o conhecimento do DNA como unidade básica da hereditariedade. Entende-se terapia gênica como a capacidade do melhoramento genético por meio da correção de genes alterados (mutados) ou modificações sítio-específicas, que tenham como alvo o tratamento terapêutico. Este tipo de procedimento tornou-se possível por conta dos avanços da genética e da bioengenharia, que permitiram a manipulação de vetores para a entrega do material extracromossomal em células-alvo. Um dos principais focos desta técnica é a otimização dos veículos de entrega (vetores) que, em sua maioria, são plasmídeos, nanoestruturados ou vírus − sendo estes últimos os mais estudados, devido à sua excelência em invadir as células e inserir seu material genético. No entanto, existe grande preocupação referente às respostas imunes exacerbadas e à manipulação do genoma, principalmente em linhagens germinativas. Estudos em células somáticas in vivo apresentaram resultados satisfatórios, e já existem protocolos aprovados para uso clínico. Os principais trials têm sido conduzidos nos Estados Unidos, Europa, Austrália e China. Recentes avanços biotecnológicos empregados para o aprimoramento da terapia gênica, como células-tronco pluripotentes induzidas em pacientes portadores de doenças hepáticas, imunoterapia com células T do receptor do antígeno quimera e edição genômica pelos sistema CRISPR/Cas9, são abordados nesta revisão.


Assuntos
Humanos , Animais , Terapia Genética/métodos , Sistemas CRISPR-Cas/genética , Edição de Genes/métodos , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/genética , Terapia Genética/tendências , Vetores Genéticos/genética , Vetores Genéticos/uso terapêutico
7.
Acta bioquím. clín. latinoam ; 50(4): 657-664, dic. 2016. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: biblio-837639

RESUMO

El acople de un ligando con un receptor induce una señal que viaja a través de este último hasta llegar a su dominio intracelular, donde desencadena una cascada de respuesta. Analizando el acople del Receptor de Células T (TCR) con antígenos foráneos, los autores identificaron patrones moleculares de geometría planar al interior de este receptor, capaces de internalizar la señal producida por el acople TCR/Antígeno. Este mecanismo fue también hallado en diversidad de sistemas receptor-ligando de diferente funcionalidad biológica, tales como las parejas Bomba de Calcio-ADP, el acople viral gp120-CD4 y el sistema Hemoglobina-Oxígeno. Dicho mecanismo identificado por los autores es de naturaleza Cuántica y permitiría explicar la transducción de señales en todo tipo de receptores bioquímicos. Este hallazgo facilitaría el diseño de péptidos-vacuna con alta capacidad inmunogénica así como el desarrollo de nuevos medicamentos.


The coupling of a ligand with a receptor induces a signal that travels through the receptor until it reaches the intracellular domain, where it triggers a response cascade. By analyzing the coupling of receptor cells (TCR) with foreign antigens, the authors identified the presence of molecular patterns, planar in geometry, within this receptor, that are capable of internalizing the signal produced by TCR/antigen coupling. This mechanism, also found in a range of receptor-ligand systems with greatly differing biological functions, including calcium pump-ADP, gp120-CD4 viral coupling, and the hemoglobin-oxygen system, is quantum in nature and capable of explaining the means of signal transduction in all kinds of biochemical receptors. As such, the finding may facilitate the design of vaccine-peptides with high immunogenicity, as well as make it possible to develop new drugs.


O acoplamento de um ligante com um receptor induz um sinal que viaja através do receptor atingindo seu domínio intracelular onde desencadeia uma cascata de resposta. Analisando o acoplamento do Receptor de Células T (TCR) com antígenos forâneos, os autores identificaram padrões moleculares de geometria planar no interior desse receptor, capazes de internalizar o sinal produzido pelo acoplamento TCR/ Antígeno. Esse mecanismo também foi encontrado em múltiplos sistemas receptor-ligante de diferente funcionalidade biológica, tais como os pares Bomba de Cálcio-ADP, o acoplamento viral gp120-CD4 e o sistema de Hemoglobina-Oxigênio. Tal mecanismo identificado pelos autores é de natureza Quântica e permitiria explicar a transdução de sinais em todo tipo de receptores bioquímicos. Este achado também facilitaria o desenho de peptídeos-vacina com alta capacidade imunogênica bem como o desenvolvimento de novos medicamentos.


Assuntos
Campos Eletromagnéticos , Receptores de Antígenos de Linfócitos T , Transdução de Sinais , Hemoglobinas , Oxigênio
8.
J. pediatr. (Rio J.) ; 92(4): 374-380, July-Aug. 2016. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-792575

RESUMO

Abstract Objective To apply, in Brazil, the T-cell receptor excision circles (TRECs) quantification technique using real-time polymerase chain reaction in newborn screening for severe combined immunodeficiency and assess the feasibility of implementing it on a large scale in Brazil. Methods 8715 newborn blood samples were collected on filter paper and, after DNA elution, TRECs were quantified by real-time polymerase chain reaction. The cutoff value to determine whether a sample was abnormal was determined by ROC curve analysis, using SSPS. Results The concentration of TRECs in 8,682 samples ranged from 2 to 2,181 TRECs/µL of blood, with mean and median of 324 and 259 TRECs/µL, respectively. Forty-nine (0.56%) samples were below the cutoff (30 TRECs/µL) and were reanalyzed. Four (0.05%) samples had abnormal results (between 16 and 29 TRECs/µL). Samples from patients previously identified as having severe combined immunodeficiency or DiGeorge syndrome were used to validate the assay and all of them showed TRECs below the cutoff. Preterm infants had lower levels of TRECs than full-term neonates. The ROC curve showed a cutoff of 26 TRECs/µL, with 100% sensitivity for detecting severe combined immunodeficiency. Using this value, retest and referral rates were 0.43% (37 samples) and 0.03% (3 samples), respectively. Conclusion The technique is reliable and can be applied on a large scale after the training of technical teams throughout Brazil.


Resumo Objetivo Aplicar no Brasil a técnica de quantificação de T-cell Receptor Excision Circles (TRECs) por PCR em tempo real para triagem neonatal de imunodeficiência combinada grave (SCID) e avaliar se é possível fazê-la em grande escala em nosso país. Métodos Foram coletadas em papel filtro 8.715 amostras de sangue de recém-nascidos e, após eluição do DNA, os TRECs foram quantificados por PCR em tempo real. O valor de corte para determinar se uma amostra é anormal foi determinado pela análise de curva ROC com o programa SSPS. Resultados A concentração de TRECs em 8.682 amostras analisadas variou entre 2 e 2.181 TRECs/µL de sangue, com média e mediana de 324 e 259 TRECs/µL, respectivamente. Das amostras, 49 (0,56%) ficaram abaixo do valor de corte (30 TRECs/µL) e foram requantificadas. Quatro (0,05%) mantiveram resultados anormais (entre 16 e 29 TRECs/µL). Amostras de pacientes com diagnóstico clínico prévio de SCID e síndrome de DiGeorge foram usadas para validar o ensaio e todas apresentaram concentração de TRECs abaixo do valor de corte. Recém-nascidos prematuros apresentaram menores níveis de TRECs comparados com os nascidos a termo. Com o uso da curva ROC em nossos dados, chegamos ao valor de corte de 26 TRECs/µL, com sensibilidade de 100% para detecção de SCID. Com o uso desse valor, as taxas de repetição e encaminhamento ficaram em 0,43% (37 amostras) e 0,03% (3 amostras), respectivamente. Conclusão A técnica é factível e pode ser implantada em grande escala, após treinamento técnico das equipes envolvidas.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Recém-Nascido , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/sangue , Triagem Neonatal/métodos , Imunodeficiência Combinada Severa/diagnóstico , Imunodeficiência Combinada Severa/sangue , Valores de Referência , Fatores de Tempo , Brasil , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/genética , Reprodutibilidade dos Testes , Sensibilidade e Especificidade , Fatores Etários , Estatísticas não Paramétricas , Teste em Amostras de Sangue Seco , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real
9.
Braz. j. infect. dis ; 19(6): 578-584, Nov.-Dec. 2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-769622

RESUMO

ABSTRACT Human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) is a human retrovirus related to the chronic neuroinflammatory disease HTLV-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). CD4+ T cells activation appears to play a key role on HTLV-1 infection. Here we investigated the expression of genes associated to T cell activation CD3e molecule, epsilon (CD3?), lymphocyte-specific protein tyrosine kinase (LCK), vav 1 guanine nucleotide exchange factor (VAV1), and zeta-chain (TCR) associated protein kinase 70 kDa (ZAP70) on T lymphocytes of HTLV-1-infected individuals and compared to healthy uninfected individuals (CT). We observed that CD3?, LCK, ZAP70, and VAV1 gene expression were increased in CD4+ T cells from HAM/TSP group compared to HTLV-1 asymptomatic patients (HAC). Moreover, ZAP70 and VAV1 were also upregulated in HAM/TSP compared to CT group. We detected a positive correlation among all these genes. We also observed that CD3?, LCK, and VAV1 genes had a positive correlation with the proviral load (PVL) and Tax expression. These results suggest that PVL and Tax protein could drive CD3?, LCK, and VAV1 gene expression in CD4+ T cells, and these genes function on a synchronized way on the CD4+ T cell activation. The elucidation of the mechanisms underlying T cell receptor signaling pathway is of considerable interest and might lead to new insights into the mechanism of HAM/TSP.


Assuntos
Adulto , Idoso , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , /imunologia , Perfilação da Expressão Gênica , Paraparesia Espástica Tropical/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/imunologia , Transdução de Sinais/imunologia , /metabolismo , Estudos de Casos e Controles , /enzimologia , /virologia , Expressão Gênica , Paraparesia Espástica Tropical/genética , Proteínas Tirosina Quinases/metabolismo , Proteínas Proto-Oncogênicas c-vav/metabolismo , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Linfócitos T/metabolismo , Carga Viral , /metabolismo
10.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 110(5): 596-605, Aug. 2015. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-755895

RESUMO

In human cutaneous leishmaniasis (CL), the immune response is mainly mediated by T-cells. The role of CD8+ T-lymphocytes, which are related to healing or deleterious functions, in affecting clinical outcome is controversial. The aim of this study was to evaluate T-cell receptor diversity in late-differentiated effector (LDE) and memory CD8+ T-cell subsets in order to create a profile of specific clones engaged in deleterious or protective CL immune responses. Healthy subjects, patients with active disease (PAD) and clinically cured patients were enrolled in the study. Total CD8+ T-lymphocytes showed a disturbance in the expression of the Vβ2, Vβ9, Vβ13.2, Vβ18 and Vβ23 families. The analyses of CD8+T-lymphocyte subsets showed high frequencies of LDE CD8+T-lymphocytes expressing Vβ12 and Vβ22 in PAD, as well as effector-memory CD8+ T-cells expressing Vβ22. We also observed low frequencies of effector and central-memory CD8+ T-cells expressing Vβ2 in PAD, which correlated with a greater lesion size. Particular Vβ expansions point to CD8+ T-cell clones that are selected during CL immune responses, suggesting that CD8+ T-lymphocytes expressing Vβ12 or Vβ22 are involved in a LDE response and that Vβ2 contractions in memory CD8+T-cells are associated with larger lesions.

.


Assuntos
Adolescente , Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Adulto Jovem , /imunologia , Leishmaniose Cutânea/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/imunologia , Subpopulações de Linfócitos T/imunologia , Brasil , Ativação Linfocitária/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/análise
11.
Salvador; s.n; 2013. 104 p. ilus, tab.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-1000895

RESUMO

O vírus linfotrópico das células T humanas do tipo 1 (HTLV-1) é o agente etiológico da mielopatia associada ao HTLV / paraparesia espástica tropical (HAM / TSP ), que ocorre em menos de 5 % dos indivíduos infectados. A resposta imune controla parcialmente a infecção, porém pode estar ligada a patogênese da doença. O objetivo deste estudo foi caracterizar fenotipicamente as subpopulações de linfócitos T, em pacientes assintomáticos e com diagnóstico de HAM/TSP. Foram avaliados 103 pacientes acompanhados no Centro de HTLV da Escola Bahiana de Medicina e Saúde Pública (EBMSP) e 19 controles não infectados. Os pacientes foram categorizados de acordo com o grau de certeza do diagnóstico de HAM/TSP: possível (Ps), provável (Pb) e definido (D), além de pacientes assintomáticos (ASS). O perfil fenotípico (CD25, CD45RA, CD45RO, HLA-DR, CD25, CCR-7, CD62L)...


The human T-cell lymphotropic vírus type 1(HTLV-1) is the etiological agent of HTLV- associated myelopathy/ Tropical spastic paraparesis(HAM/TSP), wich occurs in less then 5% of the infected individuals. The immune response partially controls the infection, but may be linked to the pathogenesis of disease. The aim of this study was to characterize phenotipically T lymphocyte subpopulations in asymptomatic and in patients diagnosed with HAM/TSP. We evaluated 103 patients treated at the center for HTLV of Bahia School of Medicine and Public Health (EBMSP) and 19 uninfected controls. Patients were categorized as asymptomatic and according to the degree of certainty of the diagnosis of HAM/TSP: Possible(Ps), Probable(Pb) and Definite(D). The phenotypic profile (CD25, CD45RA, CD45RO, HLA-DR, CCR-7, CD62L)...


Assuntos
Humanos , Doenças da Medula Espinal/diagnóstico , Doenças da Medula Espinal/imunologia , Doenças da Medula Espinal/patologia , Doenças da Medula Espinal/prevenção & controle , Doenças da Medula Espinal/virologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/administração & dosagem , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/análise , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/imunologia , Vírus Linfotrópico T Tipo 1 Humano/patogenicidade
12.
Acta bioquím. clín. latinoam ; 46(3): 393-397, set. 2012.
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-662032

RESUMO

La poliaglutinabilidad de los glóbulos rojos puede deberse al desenmascaramiento del antígeno T críptico debido a la acción de neuraminidasas microbianas que eliminan residuos terminales de ácido siálico en la membrana del hematíe. En experiencias preliminares se demostró que Ascaris lumbricoides capta ácido siálico del eritrocito y que las suspensiones globulares en medio enzimático, incubadas con este parásito, pierden totalmente la capacidad de agregación. El objetivo fue estudiar la exposición del antígeno T eritrocitario, por acción de A. lumbricoides sobre la carga aniónica de glóbulos rojos deficientes en ácido siálico. Se trabajó con 48 extractos de ejemplares adultos del parásito ([EA]) y un concentrado de larvas L1/ L2 ([CLAL]):1300-1500 larvas/mL). Se utilizaron eritrocitos Grupo O en medio enzimático de bromelina (GRB) y eritrocitos Control en medio salino (GRC). El sedimento globular de GRB se incubó con igual volumen de [EA]/ [CLAL] y el de GRC con solución fisiológica durante 120 minutos a 37 ºC. Se realizaron Pruebas de Aglutinación en Placa y en Tubo, enfrentando los GRB y GRC a sueros humanos de adulto y de cordón. Los resultados mostraron que el 33,33% de los GRB incubados con [EA] y el 66,67% de los GRB incubados con [CLAL] aglutinaron con suero de adulto, pero no con suero de cordón. Los GRC no aglutinaron con ninguno de los sueros. Es la primera vez que se comunica la exposición del antígeno T eritrocitario por acción de un parásito. La activación T podría producir autoaglutinación y hemólisis en el hombre adulto y representaría un factor de riesgo transfusional en la población infantil.


Red cell polyagglutination may be due to the unmasking of the cryptic T antigen by the action of microbial neuraminidases, which remove terminal sialic acid residues in the erythrocyte membrane. Previous experiences showed that Ascaris lumbricoides capture erythrocyte sialic acid and thatglobular suspensions in enzymatic medium, incubated with this parasite, completely lost the ability to aggregate. The aim of this work was to study the erythrocyte T antigen exposure by A. lumbricoides action on the anionic charge of sialic acid deficient red cells. Studies were done on 48 adult specimen parasite extracts ([AE]) and an L1/ L2 larvae concentrate ([ALLC]: 1300-1500 larvae/mL). Group O red cells in bromelain enzymatic medium (RCB) and Control erythrocytes in saline medium (RCC) were used. The RCB sediment was incubated with an equal volume of [AE]/ [ALLC] and the RCC sediment with physiological solution during 120 minutes at 37 ºC. Plate and Tube Agglutination Tests were performed, contrasting RCB and RCC with adult and cord human sera. The results showed that 33.33% of the RCB incubated with [AE] and 66.67% of the RCB incubated with [LCAL] agglutinated with serum from adult, but not cord serum. RCB were not agglutinated with any of the sera. It is the first time that erythrocyte T antigen exposure by a parasite action is communicated. T activation could produce autoagglutination and haemolysis in the adult and would represent a transfusion risk factor in the child population.


A poliaglutinabilidade dos glóbulos vermelhos pode ser resultado do desmascaramento do antígeno críptico T devido à ação de neuraminidases microbianas que eliminam resíduos terminais de ácido siálico na membrana da hemácia. Em experiências preliminares foi demonstrado que Ascaris lumbricoides capta ácido siálico do eritrócito e que as suspensões globulares em meio enzimático, incubadas com esta parasita, perdem totalmente a capacidade de agregação. O objetivo foi estudar a exposição do antígeno T eritrocitário, por ação de A. lumbricoides sobre a carga aniônica de glóbulos vermelhos deficientes em ácido siálico. Trabalhou-se com 48 extratos de exemplares adultos da parasita ([EA]) e um concentrado de larvas L1/ L2 ([CLAL]):1300-1500 larvas/mL). Foram utilizados eritrócitos Grupo O em meio enzimático de bromelina (GVB) e eritrócitos Controle em meio salino (GVC). O sedimento globular de GVB foi incubado com igual volume de [EA]/ [CLAL] e o de GVC com solução fisiológica durante 120 minutos a 37 ºC. Foram realizados Testes de Aglutinação em Placa e em Tubo, enfrentando os GVB e GVC a soros humanos de adulto e de cordão. Os resultados mostraram que 33,33% dos GVB incubados com [EA] e 66,67% dos GVB incubados com [CLAL] aglutinaram com soro de adulto, mas não com soro de cordão. Os GVC não aglutinaram com nenhum dos soros. É a primeira vez que se comunica a exposição do antígeno T eritrocitário por ação de uma parasita. A ativação T poderia produzir autoaglutinação e hemólise no homem adulto e representaria um fator de risco transfusional na população infantil.


Assuntos
Humanos , Ascaríase , Ascaris lumbricoides/imunologia , Ascaris lumbricoides/fisiologia , Ascaris lumbricoides/parasitologia , Eritrócitos , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/antagonistas & inibidores , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/fisiologia
13.
Univ. sci ; 17(1): 35-42, Jan.-Apr. 2012. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-650124

RESUMO

T cell activation involves positive cellular signals that promote effector functions and negative signals that contribute to the regulation of these responses. These regulatory signals are generated upon activation of receptors on T cells that include CD160, 2B4, Programmed Death-1 and CTLA-4. Objective. To evaluate the expression of inhibitory receptors like CD160, 2B4, Programmed Death-1 and CTLA-4 on CD4+ and CD8+ T cells from healthy Colombian donors. Materials and methods. Peripheral blood mononuclear cells from 30 healthy donors from Bogotá (Colombia) were obtained via Ficoll-Hypaque density gradient and cells were stained with specific conjugated antibodies previously titrated. Results. The CD160, 2B4, and Programmed Death-1 inhibitory markers were detected on CD4+ T cells with expression levels of 0.35%, 1.04%, and 1.35%, respectively. On CD8+ T cells, these markers were expressed at higher levels: 16%, 8.97%, and 4.3%, respectively. In contrast to the other receptors, CTLA-4 frequency of expression showed no significant difference between CD4+ (1.56%) and CD8+ (1.53%) T cells. Frequency of CD160/2B4 and CTLA-4/ Programmed Death-1 coexpression was 0.18% and 0.09% on CD4+ cells, and 4.02% and 0.2% on CD8+ T cells. Conclusions. This is the first report showing the frequency of inhibitory receptors such as CD160, 2B4, Programmed Death-1, and CTLA-4 on CD4+ and CD8+ T cells from healthy Colombian donors. Our findings serve as a baseline for the analysis and comparison of these receptors in Colombian populations with different disease conditions.


La activación de células T involucra señales positivas que promueven funciones efectoras y señales negativas que contribuyen a la regulación de la respuesta inmune. Estas actividades regulatorias son generadas por la activación de receptores de las células T e incluyen moléculas como CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4. Objetivo. Evaluar la expresión de los receptores inhibitorios CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4 en células T CD4+ y CD8+ de donantes sanos colombianos. Materiales y métodos. Se obtuvieron células mononucleares de sangre periférica de 30 donantes sanos provenientes de Bogotá (Colombia) mediante gradiente de densidad por Ficoll-Hypaque, las células fueron marcadas con anticuerpos conjugados a fluorocromos previamente titulados. Resultados. CD160, 2B4, y PD-1 presentaron porcentajes de expresión en células T CD4+ de 0.35%, 1.04% y 1.35% respectivamente. En células T CD8+ estos receptores mostraron niveles de expresión más altos con porcentajes de 16.3%, 8.97% y 4.3% respectivamente. A diferencia de los otros receptores, CTLA-4 no mostró diferencias entre células T CD4+ (1.56%) y CD8+ (1.53%). Los porcentajes de co-expresión de CD160/2B4 y CTLA-4/PD-1 en células T CD4+ fueron de 0.18% y 0.09%, en células T CD8+ se observaron porcentajes de expresión de 4.02% y 0.2%. Conclusión. Este es el primer reporte que muestra la frecuencia de expresión de receptores inhibitorios tales como CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4 en células T CD4+ y CD8+ de donantes sanos colombianos. Estos hallazgos representan una línea de base para el análisis y la comparación de estos receptores en la población colombiana con diferentes enfermedades.


A ativação de células T envolve sinais positivos que promovem funções efetoras e sinais negativos que contribuem para a regulação da resposta imune. Estas atividades reguladoras são geradas através da ativação de receptores de células T e incluem moléculas tais como CD160, 2B4, PD-1 e CTLA-4. Objetivo. Avaliar a expressão de receptores inibitórios CD160 e 2B4, PD-1 e CTLA-4 em células T CD4+ e CD8+ de doadores saudáveis colombianos. Materiais e métodos. Foram obtidas células mononucleares do sangue periférico de 30 doadores saudáveis provenientes de Bogotá (Colômbia) a partir de gradiente de densidade por Ficoll-Hypaque, as células foram marcadas com anticorpos conjugados com fluorocromos previamente titulados. Resultados. CD160, 2B4, e PD-1 mostraram percentagens de expressão em células T CD4+ de 0,35%, 1,04% e 1,35%, respectivamente. Em células T CD8+ estes receptores mostraram níveis de expressão mais elevados com percentagens de 16,3%, 8,97% e 4,3% respectivamente. Ao contrário de outros receptores, CTLA-4 não apresentou diferenças entre células T CD4+ (1,56%) e CD8+ (1,53%). As percentagens de co-expressão de CD160/2B4 e CTLA-4/PD-1 em células T CD4+ foram de 0,18% e 0,09%; em células T CD8+ foram observadas percentagens de expressão de 4,02% e 0,2%. Conclusão. Este é o primeiro relatório que apresenta a frequência de expressão de receptores inibitórios tais como CD160, 2B4, PD-1 e CTLA-4 em células T CD4+ e CD8+ de doadores saudáveis colombianos. Estes resultados representam uma linha de base para análise e comparação desses receptores na população colombiana com diferentes doenças.


Assuntos
Linfócitos T , Receptores de Antígenos de Linfócitos T
14.
Clinics ; 67(5): 425-429, 2012. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-626336

RESUMO

OBJECTIVES: The purpose of this study was to investigate the association between T cell receptor excision circle levels in peripheral blood mononuclear cells and regulatory T cells that co-express CD25 and Foxp3 in healthy children and adolescents of different ages. MATERIALS AND METHODS: The quantification of signal-joint T-cell receptor excision circle levels in the genomic DNA of peripheral blood mononuclear cells was performed using real-time quantitative PCR. The analysis of CD4, CD8, CD25, and Foxp3 expression was performed using flow cytometry. RESULTS: Ninety-five healthy controls (46 females and 49 males) ranging in age from 1 to 18 years were analyzed. The mean T-cell receptor excision circle count in all individuals was 89.095¡36.790 T-cell receptor excision circles per microgram of DNA. There was an inverse correlation between T-cell receptor excision circles counts and age (r = -0.846; p<0.001) as well as between the proportion of CD4+CD25+Foxp3+ T cells and age (r = -0.467; p = 0.04). In addition, we observed a positive correlation between the amount of CD4+CD25+Foxp3+ T cells and the amount of Tcell receptor excision circles per microgram of DNA in individuals of all ages (r = -0.529; p = 0.02). CONCLUSIONS: In this study, we observed a decrease in the thymic function with age based on the fact that the level of T-cell receptor excision circles in the peripheral blood positively correlated with the proportion of regulatory T cells in healthy children and adolescents. These findings indicate that although T-cell receptor excision circles and regulatory T cells levels decrease with age, homeostasis of the immune system and relative regulatory T cells population levels are maintained in the peripheral blood.


Assuntos
Adolescente , Criança , Pré-Escolar , Feminino , Humanos , Lactente , Doenças Autoimunes/imunologia , Fatores de Transcrição Forkhead/análise , /análise , Linfócitos T Reguladores/imunologia , Timo/imunologia , Fatores Etários , /análise , /análise , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/metabolismo , Linfócitos T Reguladores/metabolismo , Timo/metabolismo
15.
Biomédica (Bogotá) ; 28(2): 262-270, jun. 2008. ilus, tab
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-503167

RESUMO

Introducción. El complejo asociado al receptor de las células T (TCR), está constituido por las moléculas CD3 (δ , γ , ε ) y las cadenas ζ , todas proteínas transmembranales esenciales para la transducción de señales durante la activación del linfocito y la respuesta inmune, así como durante el desarrollo de lostimocitos. Objetivo. En este trabajo se buscaba determinar la estructura primaria de la cadena CD3 ε , en el mono del nuevo mundo Aotus nancymaae. Materiales y métodos. A partir de ARN total obtenido de células mononucleares de sangre periférica, se amplificó la molécula de CD3 ε , luego se clonó en un vector y finalmente se secuenció. Resultados. Se presenta la secuencia deducida de aminoácidos de la cadenaCD3 ε de Aotus nancymaae. Se estableció una identidad del 84 por ciento y del 76 por ciento en la secuencia nucleotídica y la de aminoácidos, respectivamente, con su contra partehumana. La molécula de Aotus, muestra bastante variabilidad en la región extracelular y bastante conservación en la intracelular. Subregiones delectodominio que son importantes para el plegamiento de la molécula, así como para la asociación con las otras cadenas del complejo están conservadas. Conclusiones. La estructura primaria determinada aquí, sugiere que la proteína de Aotus tiene una funcionalidad similar y que los pasos iniciales de activación de la célula T, se suceden como en humanos; por otra parte, la gran variabilidad encontrada en el ectodominio, permite explicar porque algunos anticuerpos monoclonales dirigidos contra el complejo CD3 de humano, no reconocen estas estructuras en el Aotus.


Assuntos
Proteínas Adaptadoras de Transporte Vesicular , Receptores de Antígenos de Linfócitos T , Transdução de Sinais , Cebidae , Sistema Imunitário
16.
Medicina (B.Aires) ; 67(5): 491-501, sep.-oct. 2007. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-489374

RESUMO

La respuesta inmune desencadenada frente a un trasplante alogénico conduce usualmente a una respuesta efectora que resulta en el rechazo del aloinjerto; sin embargo, algunos individuos mantienen un trasplante funcionante a largo plazo sin signos de rechazo (tolerancia operacional), aun en ausencia de inmunosupresión. Se ha sugerido que los mismos mecanismos son responsables para la tolerancia hacia antígenos propios y aloantígenos. Uno de estos mecanismos es la regulación inmune y se han identificado varias subpoblaciones de células con propiedades reguladoras. Entre ellas, la población celular mejor caracterizada corresponde a las células T reguladoras (Tregs). Aunque las Tregs en ratones son CD4+CD25+, en humanos el fenotipo de las Treg está restringida a las células T CD4 con alta expresión de CD25 (CD25high) y del factor de transcripción Foxp3. El análisis fenotípico y funcional de las células T reguladoras o supresoras circulantes en pacientes trasplantados tal vez sea útil para la detección de pacientes tolerantes operacionales. Además, una futura manipulación in vitro de estas células con fines terapéuticos podría conducir a lograr la inducción de tolerancia in vivo en el trasplante clínico. Aquí, revisamos la evidencia experimental y clínica del papel de las células reguladoras en la biología del trasplante.


The immune response elicited by an allogenic transplant usually leads to an effector response resulting in allograft rejection; however, some individuals maintain a long-term functioning transplant without signs of rejection (operational tolerance) even in the absence of immunosuppression. It has been suggested that the same mechanisms are responsible for tolerance to self-antigens and alloantigens. One of such mechanisms is immune regulation and several cell subsets with regulatory properties have been identified. Among them, the best characterized cell populations are the regulatory T cells (Treg). Although Treg in mice are CD4+CD25+, in humans the Treg phenotype is restricted to CD4 T cells with high expression of CD25 (CD25high) and Foxp3. Phenotypic and functional analysis of circulating regulatory or suppressor T cells in transplant patients may be useful for detection of operationally tolerant patients. Moreover, future in vitro manipulation of these cells with therapeutic purposes could lead to accomplish induction of in vivo tolerance in clinical transplantation. Herein, we review the experimental and clinical evidence for the role of regulatory cells in transplant biology.


Assuntos
Humanos , Animais , Fatores de Transcrição Forkhead/imunologia , Sobrevivência de Enxerto , Rejeição de Enxerto/imunologia , Tolerância Imunológica , Transplante de Rim/imunologia , Linfócitos T Reguladores/imunologia , /imunologia , /imunologia , Ativação Linfocitária/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/imunologia
18.
Biol. Res ; 35(2): 127-131, 2002.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-323334

RESUMO

The Src family tyrosine kinase Lck is essential for T cell development and T cell receptor (TCR) signaling. Lck is post-translationally fatty acylated at its N-terminus conferring membrane targeting and concentration in plasma membrane lipid rafts, which are lipid-based organisational platforms. Confocal fluorescence microscopy shows that Lck colocalizes in rafts with GPI-linked proteins, the adaptor protein LAT and Ras, but not with non-raft membrane proteins including the protein tyrosine phosphatase CD45. The TCR also associates with lipid rafts and its cross-linking causes coaggregation of raft-associated proteins including Lck, but not of CD45. Cross-linking of either the TCR or rafts strongly induces specific tyrosine phosphorylation of the TCR in the rafts. Remarkably, raft patching alone induces signalling events analogous to TCR stimulation, with the same dependence on expression of key TCR signalling molecules. Our results indicate a mechanism whereby TCR engagement promotes aggregation of lipid rafts, which facilitates colocalization of signaling proteins including Lck, LAT, and the TCR, while excluding CD45, thereby potentiating protein tyrosine phosphorylation and downstream signaling. We are currently testing this hypothesis as well as using imaging techniques such as fluorescence resonance energy transfer (FRET) microscopy to study the dynamics of proteins and lipids in lipid rafts in living cells undergoing signaling events. Recent data show that the key phosphoinositide PI(4,5)P2 is concentrated in T cell lipid rafts and that on stimulation of the cells it is rapidly converted to PI(3,4,5)P3 and diacylglycerol within rafts. Thus rafts are hotspots for both protein and lipid signalling pathways (AU)#S


Assuntos
Humanos , Animais , Microdomínios da Membrana , Transdução de Sinais , Linfócitos T , Lipídeos , Proteína Tirosina Quinase p56(lck) Linfócito-Específica , Proteínas ras , Receptores de Antígenos de Linfócitos T
19.
Biol. Res ; 35(2): 133-137, 2002.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-323335

RESUMO

Three innovative and complementary morphological approaches were employed to study the T cell/antigen presenting cell (APC) interaction: (i) high resolution three-dimensional confocal microscopy of the T cell-APC contact site; (ii) time lapse video recording in living T cells of [Ca2+]I and changes in distribution of various GFP fusion proteins with TCR/CD3-zeta complex associated- and other signaling components; (iii) measurement of lateral TCR mobility and that of recruited signaling components using techniques based on fluorescence recovery after photo-bleaching. These approaches were combined with biochemical and functional experiments to investigate two principal issues: (A) Recruitment and the three-dimensional arrangement of receptors and signaling components at the contact site between human CD4+ T lymphocytes and APCs, (B) Structure of the immunological synapse formed at the contact site between cytotoxic T lymphocytes (CTLs) and target cells. We discuss evidence indicating that TCR engagement and triggering can occur in the absence of large-scale molecular segregation into the T cell-APC contact site. Taken together our results indicate that although not required for TCR engagement and triggering, formation of the IS is important to reinforce TCR-mediated signal transduction and achieve full T cell activation


Assuntos
Humanos , Animais , Células Apresentadoras de Antígenos , Linfócitos T CD4-Positivos , Linfócitos T CD8-Positivos , Receptores de Antígenos de Linfócitos T , Células Apresentadoras de Antígenos , Linfócitos T CD4-Positivos , Linfócitos T CD8-Positivos , Microscopia Confocal , Receptores de Antígenos de Linfócitos T , Linfócitos T Citotóxicos
20.
An. acad. bras. ciênc ; 72(1): 79-82, mar. 2000.
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-259482

RESUMO

Trypanosomatid protozoan parasites express an aggressive strategy of parasitism by infecting host macrophages and inducing extensive T-lymphocyte activation. One goal of such strategy is to drive the immune response of genetically susceptible hosts to a state of unresponsiveness regarding parasite killing. Unresponsiveness is achieved through different mechanisms, depending on the parasite species. In this brief review, recent findings on the molecular and cellular bases of the parasites' exploitation of host immune responses are discussed.


Assuntos
Animais , Células Matadoras Naturais/imunologia , Leishmania donovani/fisiologia , Subpopulações de Linfócitos T/imunologia , Trypanosoma cruzi/fisiologia , Antígenos de Diferenciação/imunologia , Apoptose , Interações Hospedeiro-Parasita/fisiologia , Imunidade Celular , Imunossupressores/imunologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T/imunologia , Fatores de Crescimento Transformadores
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