AMPc: una molécula clave en los eventos de regulación inmune y en el control de la replicación del VIH / cAMP: A keymolecule in events of immune regulation and in the control of HIV replication

El monofosfato de adenosina cíclico (AMPc) induce la activación de la proteína cinasa A, la cual regula negativamente la activación, la proliferación celular y la producción de IL-2, en células T. En células infectadas con el virus de inmunodeficiencia humana, el monofosfato de adenosina cíclico suprime la actividad de transcripción del promotor del virus y el paso del ADN viral del citoplasma al núcleo. El incremento del monofosfato de adenosina cíclico mediado por células T reguladoras CD4+, empleando la inyección de esta molécula en células blanco a través de las uniones comunicantes o empleando el eje CD39-CD73 para generar adenosina es utilizado para suprimir otras poblaciones celulares. En esta revisión se propone que la modulación del monofosfato de adenosina cíclico por las células T reguladoras CD4+ podría tener un papel dual durante la evolución de la infección por el virus de inmunodeficiencia humana. Su papel benéfico se centraría principalmente en el control de la replicación viral y factores de transcripción, o evitando la infección de nuevas células blanco por disminución en la expresión de los receptores virales. Paradójicamente, la segunda posibilidad es que el aumento del monofosfato de adenosina cíclico podría tener un papel perjudicial, debido al efecto negativo sobre la proliferación, activación, respuesta citotóxica y en la producción de citocinas que se observa durante la infección viral.

Cyclic adenosine monophosphate induces the activation of protein kinase A, which negatively regulates activation, proliferation and IL-2 production in T cells. In cells infected with human immunodeficiency virus, cyclic adenosine monophosphate suppresses the transcriptional activity of long terminal repeats and the amount of viral DNA from the cytoplasm to the nucleus. The increase in cyclic adenosine monophosphate mediated by CD4+ regulatory T cells, using either the influx of this molecule in target cells through the GAP junctions or by CD39-CD73 to generate adenosine, is used by CD4+ regulatory T cells to suppress other cell populations. In this review, we suggest that modulation of cyclic adenosine monophosphate by CD4+ regulatory T cells may have a dual role during the evolution of human immunodeficiency virus infection. The beneficial role would be mainly focused on the control of viral replication and transcription factors to replicate the virus, and/or preventing the infection of new target cells, decreasing the expression of the viral co-receptors. Paradoxically to this beneficial role, the second possibility is that increased cyclic adenosine monophosphate could have a detrimental role, due to the negative effect on proliferation, activation, cytotoxic response and cytokine production, which occurs during viral infection.

Interacción de rotavirus con la proteína disulfuro-isomerasa in vitro y en sistemas celulares / Interaction of rotavirus with protein disulfide isomerase in vitro and cell system

Introducción. La entrada del rotavirus a la célula implica un mecanismo de múltiples pasos; las proteínas virales externas interaccionan con cuatro diferentes integrinas y Hsc70. Recientemente reportamos que la infección por rotavirus disminuye cuando se bloquea la proteína disulfuro-isomerasa de la superficie celular, lo que sugiere su interacción con el rotavirus en el proceso de entrada. Objetivo. Establecer la interacción del rotavirus con la proteína disulfuro-isomerasa en un sistema in vitro utilizando la proteína aislada de hígado bovino y, en un sistema celular, utilizando vellosidades intestinales de ratón y células MA104. Materiales y métodos. Se aisló la proteína disulfuro-isomerasa a partir de un homogenizado de hígado bovino utilizando anticuerpos anti-proteína disulfuro-isomerasa acoplados a agarosa mediante enlace hidrazona. La proteína disulfuro-isomerasa purificada se examinó por SDS-PAGE y Western blot y se utilizó para estudiar su interacción in vitro con rotavirus. Esta interacción se comparó con aquella observada en células MA104 y en las vellosidades intestinales de ratón. Resultados. La proteína disulfuro-isomerasa purificada mostró homogeneidad electroforética y fue capaz de unirse a rotavirus en un sistema in vitro. La interacción proteína-rotavirus fue detectada por ELISA de captura usando la proteína disulfuro-isomerasa bovina purificada y rotavirus de las cepas RRV y silvestre ECwt. La interacción de partículas de rotavirus purificadas con la proteína disulfuro-isomerasa celular se evidenció con ELISA, usando lisado celular después de la inoculación viral. Conclusión. La interacción rotavirus-proteína disulfuro-isomerasa fue demostrada in vitro, en células MA104 y en vellosidades intestinales de ratón lactante.

Introduction. Rotavirus entry process involves a multi-step mechanism, the first of which is when the outermost viral proteins interact with four different integrins and Hsc70. Recently, rotavirus infection reportedly has been decreased after blocking cell surface protein disulfide isomerase (PDI). This suggested that this protein interacts with rotavirus during the entry process. Objectives. The aim was to establish the rotavirus-PDI interaction in an in vitro system using PDI isolated from bovine liver, and in a cell system consisting of MA104 cells and mouse small intestinal villi. Materials and methods. Protein disulfide isomerase was isolated from a bovine liver homogenate using anti-PDI antibodies coupled to agarose through hydrazone bonds. Purity of purified protein was assessed by SDS-PAGE and Western blot. The purified PDI was used to study its in vitro interaction with the rotavirus particles. This interaction was compared with that taking place in MA104 cells and small intestinal villi isolated from sucking mice ICR. Results. The purified PDI showed an electrophoretic homogeneity and was able to bind rotavirus particles in vitro. Rotavirus-PDI interaction was detected by capture ELISA using purified protein and rotavirus strains RRV and wild-type ECwt. Interaction between rotavirus particles and cellular PDI was detected by ELISA using cell lysates after virus inoculation. Conclusions. Rotavirus-PDI interaction was demonstrated in vitro as well as in MA104 cells and intestinal villi from suckling mice.

Molecular characterization of severe and mild cases of influenza A (H1N1) 2009 strain from Argentina / Caracterización molecular de cepas de influenza A (H1N1) 2009 de casos leves y graves de la Argentina

While worldwide pandemic influenza A(H1N1) pdm case fatality rate (CFR) was 0.4%, Argentina's was 4.5%. A total of 34 strains from mild and severe cases were analyzed. A full genome sequencing was carried out on 26 of these, and a partial sequencing on the remaining eight. We observed no evidence that the high CFR can be attributed to direct virus changes. No evidence of re-assortment, mutations associated with resistance to antiviral drugs, or genetic drift that might contribute to virulence was observed. Although the mutation D225G associated with severity in the latest reports from the Ukraine and Norway is not observed among the Argentine strains, an amino acid change in the area (S206T) surrounding the HA receptor binding domain was observed, the same previously established worldwide.

Mientras que la tasa de letalidad (CFR) para (H1N1)pdm en todo el mundo era del 0.4%, en la Argentina la mortalidad observada fue de 4.5%. La secuenciación del genoma completo de 26 cepas de virus argentinos de influenza A (H1N1)pdm de casos leves y graves y de 8 cepas secuenciadas parcialmente no mostró evidencia de que la elevada tasa de letalidad se pueda atribuir directamente a cambios en el virus. No se encontraron hallazgos de recombinación, de mutaciones asociadas con la resistencia a los medicamentos antivirales ni de variaciones genéticas que puedan contribuir a la virulencia observada. Si bien la mutación D225G asociada con la gravedad, comunicada en informes procedentes de Ucrania y Noruega, no se ha encontrado en las cepas argentinas estudiadas, se ha observado un cambio aminoacídico en la región (S206T) en torno al dominio del sitio de unión al receptor en la HA, el mismo hallado en cepas distribuidas alrededor del mundo.

Papel de los receptores tipo toll en las infecciones virales: el VIH-1 como modelo / The role of toll-like receptors in viral infections: HIV-1 as a model

Los receptores tipo toll son un componente esencial de la respuesta inmune innata y adaptativa, pues se encargan del reconocimiento de los diferentes agentes patógenos y desencadenan respuestas dirigidas a eliminarlos y a desarrollar memoria inmunológica. Durante las infecciones virales se activan diferentes receptores tipo toll que, generalmente, inducen una respuesta inmune protectora pero, también, pueden hacer parte de los mecanismos patogénicos del virus. Una de las infecciones virales en la que los receptores tipo toll participan de esta respuesta dual, es la infección por el VIH-1, en la cual varios de estos receptores se activan para desarrollar respuestas antivirales dirigidas por los interferones tipo 1; pero, la replicación y la diseminación del virus también se favorecen por las señales derivadas de la estimulación de dichos receptores, en particular, por las infecciones asociadas con microorganismos oportunistas, lo cual favorece la progresión de la infección por el VIH-1. Un entendimiento integral del comportamiento de estos receptores durante las infecciones virales, permitirá diseñar estrategias profilácticas o terapéuticas basadas en la modulación de su expresión y función, en particular, utilizando agonistas de estos receptores que sean eficaces en la lucha por el control de las infecciones virales.

The toll-like receptors are an essential component of the innate and adaptive immune response. They are responsible for the recognition of different pathogens agents and trigger responses directed at eliminating the pathogens as well as the development of immunological long-term memory. During viral infections, several different toll-like receptors are activated. These generally induce a protective immune response, but at the same time, can also be part of the pathogenic mechanisms of the viral infection. One of the viral infections in which toll-like receptors participate is the HIV-1 infection. Here, several receptors are activated to develop antiviral responses mediated by interferon type I; however virus replication and spreading dissemination are also favoured by signals derived from stimulation of the toll-like receptors. Individuals co-infected with opportunistic microorganisms are particularly affected, promoting the progression of HIV- 1 infection. An integral understanding of the behavior of toll-like receptors during viral infections will allow the design of prophylactic and/or therapeutic strategies, based on the modulation of the expression and function of these receptors. Agonists of these receptors can be used effectively to control these viral infections.

Receptores para el virus de la rabia / Rabies virus receptors

El virus de la rabia causa una infección en el sistema nervioso que puede provocar la muerte. La patogenia y el neurotropismo de este virus han sido estudiados extensamente con el objeto de explicar el porqué la letalidad de la enfermedad y proponer nuevas alternativas terapéuticas. El proceso de adsorción del virus a la célula blanco se considera un evento que define el neurotropismo del virus. Se piensa que debe existir una molécula en la superficie de las neuronas que une con alta afinidad al virus y da comienzo al proceso infeccioso. Durante los últimos años se han propuesto varias proteínas, carbohidratos y lípidos complejos, como receptores para el virus de rabia y se han hecho nuevas proposiciones de terapia antirreceptor. Además de los gangliósidos y fosfolípidos para los que se ha hallado evidencia sobre su participación en la adsorción del virus de la rabia, hay datos experimentales sobre la participación del receptor nicotínico de acetilcolina, la molécula de adhesión celular neural y el receptor de baja afinidad para neurotrofinas en la infección neuronal. En este artículo se hace una revisión de los datos que sustentan a cada una de las moléculas propuestas, se discuten sus implicaciones para la explicación del neurotropismo del virus de rabia y la exploración de nuevas terapias antivirales

Receptor presente en eritrocitos humanos para la variante RD del virus coxsackie B3 / Present receptor in human erythrocytes for the coxsackie virus B3 variant RD

Se efectuó un estudio comparativo de los receptores para la variante RD del virus coxsacki B3 presentes en la membrana plamática de eritrocitos humanos y de células de rhabdomiosarcoma (RD). Para ello se usó un anticuerpo monoclonal, obtenido a partir del receptor presente en la célula RD, el cual fue marcado con 125l. El ligando marcado se unió a los receptores de los eritrocitos humanos e impidió que el virus se uniera a ellos. El anticuerpo monoclonal saturó los receptores, lo que permitió calcular el número de sitios de unión, que fue de 1.95x10 3 por eritrocito, número aproximadamente 10 veces menor que los calculados para las células RD. Los receptores de ambas células fueron bloqueados en su unión al ligando, cuando dos proteasas usadas, la quimotripsina y la pronasa, ejercieron su acción proteolítica, modificando la estructura de los receptores. Los presentes en la membrana plasmática de las células RD fueron más sensibles a la acción proteolítica que los presentes en los eritrocitos. Otra proteasa usada, la tripsina, bloqueó los receptores sobre los eritrocitos en un porcentaje similar a como lo hicieron las otras dos enzimas. Por el contrario, los receptores presentes en las células RD fueron casi insensibles al tratamiento con la tripsina.Las glicoforinas A, tipos MN y MM, fueron capaces de competir por ambos receptores, no así la tipo NN. Se concluye de esto que los receptores presentes en la membrana plasmática de los eritrocitos humanos y de las células RD, son de naturaleza proteica y comparten epítopes. El receptor presente en los eritrocitos humanos para el virus coxsackie B3, variante RD, que es bloqueado por el anticuerpo monoclonal, podría ser la glicoforina A, tipo MN y/o MM

Compuestos lisosomotrópicos inhibidores de la multiplicación del virus Junín / Lysosomotropic compounds inhibiting the multiplication of Junin virus

La multiplicación del virus Junín en células Vero fue inhibida por la acción de drogas lisosomotrópicas de carácter básico como cloruro de amonio, clorhidrato de procaína y clorofeniramina. El efecto inhibitorio del cloruro de amonio (15mM) es máximo cuando la droga es agregada junto con el inóculo viral o inmediatamente después de la infección, pero aun agregado 8 horas después de la infección produce una inhibición significativa del 97,8%. Estos resultados indicarían que la droga actúa fundamentalmente sobre una etapa temprana del ciclo de multiplicación viral. Por lo tanto, el mecanismo de entrada del virus Junín a la célula transcurriría a través de una endocitosis mediada por receptor

Sistema linfoide y deficiencia proteica: deferenciación en timo y placas de Peyer / Lymphoid system and protein deficiency: differentiation in thymus gland and Peyer's patches

En un modelo experimental de inmunodeficiencia provocada por déficit de proteínas, se demuestra: 1) en el timo, existencia de graves alteraciones en sus poblaciones celulares que se encuentran drmáticamente disminuídas: W3/13+ (pan- T), W3/25+ (CD4+) y OX8+ (DC8+), existiendo una población celular que contiene TdT como único marcador; 2) alteraciones en el ciclo celular de la IgA que permitieron demostrar in vivo la presencia de células pre-B en placas de Peyer con alteración marcada en las subpoblaciones T; 3) los mecanismos involucrados en la inmunidad mediada por células son dañados por el déficit de proteínas y continúan alterados después de que dicho déficit ha sido superado; 4) en el timo, la administración por via oral de una dieta de caseína al 20% restaura la población celular- T W3/13+ luego de 21 días, pero la subpoblación W3/25+ (CD4+) se encuentra muy disminuida; 5) al mismo tiempo se reinicia, en placas de Peyer, la diferenciación de los precursores de células plasmáticas de clase IgA, aunque se encuentra la diferenciación de los precursores de células plamáticas de clase IgA, aunque se encuentra alterado, tanto en ellas como en ganglio mesentérico, el número absoluto de células que expresan y contienen IgA, así como el de las células T maduras, especialmente la población CD4+; 6) el dearrollo de un mecanismo de tolerancia a dextrina que es antígeno-específico, está mediado por células-T y puede ser transferido a receptores normales, ya sea con células provenientes de...