RESUMO
Background: Intrathecal injection of voltage-sensitive calcium channel blocker peptide toxins exerts analgesic effect in several animal models of pain. Upon intrathecal administration, recombinant Phα1β exerts the same analgesic effects as the those of the native toxin. However, from a clinical perspective, the intrathecal administration limits the use of anesthetic drugs in patients. Therefore, this study aimed to investigate the possible antinociceptive effect of intravenous recombinant Phα1β in rat models of neuropathic pain, as well as its side effects on motor, cardiac (heart rate and blood pressure), and biochemical parameters. Methods: Male Wistar rats and male Balb-C mice were used in this study. Giotto Biotech® synthesized the recombinant version of Phα1β using Escherichia coli expression. In rats, neuropathic pain was induced by chronic constriction of the sciatic nerve and paclitaxel-induced acute and chronic pain. Mechanical sensitivity was evaluated using von Frey filaments. A radiotelemeter transmitter (TA11PA-C10; Data Sciences, St. Paul, MN, USA) was placed on the left carotid of mice for investigation of cardiovascular side effects. Locomotor activity data were evaluated using the open-field paradigm, and serum CKMB, TGO, TGP, LDH, lactate, creatinine, and urea levels were examined. Results: Intravenous administration of recombinant Phα1β toxin induced analgesia for up to 4 h, with ED50 of 0.02 (0.01-0.03) mg/kg, and reached the maximal effect (Emax = 100% antinociception) at a dose of 0.2 mg/kg. No significant changes were observed in any of the evaluated motor, cardiac or biochemical parameters. Conclusion: Our data suggest that intravenous administration of recombinant Phα1β may be feasible for drug-induced analgesia, without causing any severe side effects.
Assuntos
Masculino , Animais , Ratos , Analgésicos , Neuropatia Ciática/terapia , Paclitaxel , Toxinas Biológicas/administração & dosagem , Toxinas Biológicas/efeitos adversos , Venenos de Aranha/química , Administração Intravenosa , Camundongos Endogâmicos BALB C , Ratos WistarRESUMO
ABSTRACT One of the mechanisms proposed for chronic kidney disease (CKD)-related cognitive impairment is the accumulation of uremic toxins due to the deterioration of the renal clearance function. Cognition can be categorized into five major domains according to its information processing functions: memory, attention, language, visual-spatial, and executive. We performed a review using the terms 'uric acid', 'indoxyl sulfate', 'p-cresyl sulfate', 'homocysteine', 'interleukins' and 'parathyroid hormone'. These are the compounds that were found to be strongly associated with cognitive impairment in CKD in the literature. The 26 selected articles point towards an association between higher levels of uric acid, homocysteine, and interleukin 6 with lower cognitive performance in executive, attentional, and memory domains. We also reviewed the hemodialysis effects on cognition. Hemodialysis seems to contribute to an amelioration of CKD-related encephalopathic dysfunction, although this improvement occurs more in some cognitive domains than in others.
RESUMO Um dos mecanismos propostos para explicar o comprometimento cognitivo relacionado à doença renal crônica (DRC) é o acúmulo de toxinas urêmicas devido à deterioração da função de depuração renal. A cognição pode ser categorizada em cinco domínios principais de acordo com suas funções de processamento de informações: memória, atenção, linguagem, visual-espacial e executiva. Realizamos uma revisão usando os termos "ácido úrico", "indoxil sulfato", "p-cresil sulfato", "homocisteína", "interleucinas" e "paratormônio". Estes são os compostos que se mostraram fortemente associados ao comprometimento cognitivo na DRC na literatura. Os 26 artigos selecionados apontam para uma associação entre níveis mais elevados de ácido úrico, homocisteína e interleucina-6 com menor desempenho cognitivo nos domínios executivo, atenção e de memória. Também revisamos os efeitos da hemodiálise na cognição. A hemodiálise parece contribuir para uma melhoria da disfunção encefalopática relacionada à DRC, embora essa melhora ocorra mais em alguns domínios cognitivos do que em outros.
Assuntos
Humanos , Toxinas Biológicas/efeitos adversos , Uremia/complicações , Insuficiência Renal Crônica/complicações , Disfunção Cognitiva/etiologia , Hormônio Paratireóideo/efeitos adversos , Ésteres do Ácido Sulfúrico/efeitos adversos , Ésteres do Ácido Sulfúrico/sangue , Ácido Úrico/efeitos adversos , Ácido Úrico/sangue , Diálise Renal/efeitos adversos , Interleucina-6/efeitos adversos , Cresóis/efeitos adversos , Cresóis/sangue , Interleucina-1beta/efeitos adversos , Interleucina-1beta/sangue , Homocisteína/efeitos adversos , Homocisteína/sangue , Indicã/efeitos adversos , Indicã/sangueRESUMO
En Argentina, más del 97% de los accidentes ponzoñosos son producidos por serpientes del género Bothrops, siendo aquellas pertenecientes al complejo Bothrops neuwiedi unas de las de mayor incidencia. El envenenamiento por esta especie es similar al descripto para otras especies Bothrops de América, presentando en el individuo accidentado daño tisular considerable: dolor, inflamación, edema, exudación, mionecrosis, problemas en la coagulación y hemorragias importantes. Del veneno entero del complejo Bothrops neuwiedi se aisló una proteína básica por cromatografía de intercambio iónico y RP-HPLC, la que se denominó Miotoxina I. Esta proteína provocó edema, miotoxicidad local cuando se la ensayó en ratones, citotoxicidad en cultivos celulares y alteración a nivel de la coagulación sanguínea, con potencia comparable al de otros venenos del género Bothrops. Con el objeto de determinar en qué medida esta toxina era importante en el daño que provoca el veneno entero de serpientes del complejo Bothrops neuwiedi cuando se produce un accidente ofídico, se caracterizó la misma a nivel bioquímico determinando las siguientes actividades: letal, necrótica, hemorrágica, miotóxica, edematizante, desfibrinogenante, citotóxica y enzimática (fosfolipasa A2). Al inyectar dosis de hasta 4,4 mg/kg de peso de ratón por vía endovenosa, se observó que la toxina no era letal, a su vez no produjo necrosis ni hemorragia, como se observa cuando se inyecta el veneno crudo, tampoco se detectó actividad fosfolipasa A2 cuando se la ensayó sobre fosfolípidos de yema de huevo. Sin embargo, sí se observó un aumento de la enzima cretinina kinasa (CK) debido al daño producido en tejido muscular, y de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH) cuando se la inoculó a líneas celulares endoteliales (t-END) y mioblastos (C2C12) de ratón, observándose un daño en la monocapa celular a partir de las 3H de inoculada la toxina. A nivel sanguíneo se pudo determinar que esta nueva toxina posee actividad anticoagulante en un porcentaje menor al que provoca el veneno entero cuando es inoculado. Con el fin de determinar su peso molecular se realizó una electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecyl sulfato de sodio, donde se observó que la Miotoxina I de BnC aparecía, al colorear el gel, como un homodímero de 15 kD. Al realizar una inmunodifusión en gel de agarosa, se observó que existe un patrón de identidad antigénica parcial entre esta nueva miotoxina aislada y la miotoxina II del veneno de la especie Bothrops asper de Costa Rica. A su vez, se secuenciaron los primeros 40 residuos aminoacídicos de esta miotoxina, lo que demostró una alta homología con varias miotoxinas fosfolipasas A2 clase II, de la familia de las Lys-49, de crotálidos. Estos resultados en conjunto sugieren que esta toxina es un nuevo miembro de las fosfolipasas A2 Lys-49, con actividades: miotóxica, citolítica e inflamatoria por inducción de edema y con actividad anticoagulante probablemente por el consumo de fibrinógeno en el torrente sanguíneo.
Assuntos
Camundongos , Venenos de Víboras/toxicidade , Toxinas Biológicas/toxicidadeRESUMO
Group A human rotaviruses (HuRVA) are causative agents of acute gastroenteritis. Six viral structural proteins (VPs) and six nonstructural proteins (NSPs) are produced in RV-infected cells. NSP4 is a diarrhoea-inducing viral enterotoxin and NSP4 gene analysis revealed at least 15 (E1-E15) genotypes. This study analysed the NSP4 genetic diversity of HuRVA G2P[4] strains collected in the state of São Paulo (SP) from 1994 and 2006-2010 using reverse transcription-polymerase chain reaction, sequencing and phylogenetic analysis. Forty (97.6%) G2P[4] strains displayed genotype E2; one strain (2.4%) displayed genotype E1. These results are consistent with the proposed linkage between VP4/VP7 (G2P[4]) and the NSP4 (E2) genotype of HuRVA. NSP4 phylogenetic analysis showed distinct clusters, with grouping of most strains by their genotype and collection year, and most strains from SP were clustered together with strains from other Brazilian states. A deduced amino acid sequence alignment for E2 showed many variations in the C-terminal region, including the VP4-binding domain. Considering the ability of NSP4 to generate host immunity, monitoring NSP4 variations, along with those in the VP4 or VP7 protein, is important for evaluating the circulation and pathogenesis of RV. Finally, the presence of one G2P[4]E1 strain reinforces the idea that new genotype combinations emerge through reassortment and independent segregation.
Assuntos
Adulto , Criança , Humanos , Antígenos Virais/isolamento & purificação , Glicoproteínas/genética , RNA Viral/genética , Rotavirus/genética , Toxinas Biológicas/genética , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Sequência de Aminoácidos , Sequência de Bases , Brasil , Fezes/virologia , Variação Genética , Genótipo , Ligação Genética/genética , Técnicas Imunoenzimáticas , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , RNA Viral/isolamento & purificação , Rotavirus/classificação , Rotavirus/imunologia , Alinhamento de SequênciaRESUMO
Group C rotaviruses (RVC) cause gastroenteritis in humans and animals worldwide, and the evidence for a possible zoonotic role has been recently provided. To gain information on the genetic diversity and relationships between human and animal RVC, we sequenced the VP4, VP7, and NSP4 genes of 12, 19, and 15 human strains, respectively, detected in São Paulo state during historical (1988 and 1993) and recent (2007 and 2008) Brazilian rotavirus surveillance. All RVC strains analyzed in the present study grouped into human genotype (G4-P[2]-E2), and did not show any evidence of animal ancestry. Phylogenetic analysis showed that RVC samples detected in 1988 and 1993 clustered together with strains from distinct continents, indicating that historical RVC strains circulating in São Paulo were closely related to those strains circulating worldwide. All three genes (VP7, VP4 and NSP4) of São Paulo RVC strains isolated in 2007-2008 exhibited close phylogenetic relationship with human RVC strains isolated in China and Japan, suggesting that they are genetically linked, and that a gene flow could be occurring between this Asian countries and Brazil. We identified two distinct clusters in the NSP4 phylogenetic tree. One cluster formed exclusively by human Brazilian strains detected in 1997 and 2003-2004 in Rio de Janeiro, Bahia, and Rio Grande do Sul states (Subgroup II) previously described in a different study, that displayed low sequence identities to other human strains formerly published, and to the Brazilian RVC strains (Subgroup I) characterized in the present study. These data suggests the circulation of two genetic profiles of the NSP4 gene in Brazil. High sequence diversity in NSP4 gene was previously reported in Asia, and additional diversity in NSP4 RVC strains spreading in the world should be expected. More in-depth molecular and epidemiological analysis of human RVC throughout the world will be needed to understand their diversity and clarify their evolution, as well as to develop classifications schemes.
Assuntos
Filogenia , Infecções por Rotavirus/virologia , Toxinas Biológicas/genética , Variação Genética , Brasil/epidemiologia , Humanos , RNA , RNA Viral/isolamento & purificação , Dados de Sequência Molecular , Sequência de Bases , Glicoproteínas , Glicoproteínas/genética , Glicoproteínas/química , Criança , Pré-Escolar , Demografia , Alinhamento de Sequência , Adolescente , Sequência de Aminoácidos , Proteínas não Estruturais Virais , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Homologia de Sequência de Aminoácidos , Análise de Sequência de DNA , Rotavirus , Adulto , Proteínas do Capsídeo/química , Gastroenterite/virologia , Genótipo , Lactente , Animais , Pessoa de Meia-Idade , Antígenos Virais/genéticaRESUMO
Chronic kidney disease is characterized by a progressive reduction of glomerular filtration rate and/or the appearance of proteinuria, and subsequently the progressive retention of organic waste compounds called uremic toxins (UT). Over the last decades, a large number of such compounds have been identified and their effects on organs and tissues, especially the cardiovascular system, has been demonstrated. In this review, we present the current classification of UT, as proposed by the EUTox Group, and the effects of some of the probably most important UTs, such as phosphate, FGF-23, PTH, AGEs, indoxyl sulfate and para-cresyl sulfate. We provide an overview on therapeutic approaches aimed to increase their extracorporeal removal via convective and/or adsorptive strategies and to lower their intestinal production/ absorption via dietetic and pharmacological interventions. The recognition that multiple toxins contribute to the uremia supports the need for new therapeutic targets, with a potentially positive impact on CKD progression and survival.
A doença renal crônica (DRC) caracteriza-se pela redução progressiva da filtração glomerular e/ou presença de proteinúria, e subsequente retenção progressiva de compostos orgânicos, denominados toxinas urêmicas. Nas últimas décadas, um grande número destes compostos foi identificado, assim como seus efeitos adversos no organismo, sobretudo no sistema cardiovascular. Nesta revisão, apresentamos a classificação das toxinas urêmicas, proposta pelo grupo europeu de estudo em toxinas urêmicas (EUTox), e discutiremos os efeitos de algumas das principais toxinas, como ADMA, fosfato, FGF-23, PTH, AGEs, indoxil sulfato e para-cresil sulfato. Além disso, abordaremos as principais estratégias terapêuticas para aumentar a remoção das toxinas urêmicas por métodos convectivos e/ou adsortivos; e para diminuir a produção e absorção intestinal dessas toxinas por meio de intervenções dietéticas e farmacológicas, respectivamente. A compreensão de que múltiplas toxinas contribuem para a uremia expõe a necessidade de novos alvos-terapêuticos, com potencial impacto positivo na progressão da DRC e na sobrevida dos pacientes.
Assuntos
Humanos , Insuficiência Renal Crônica/complicações , Fatores de Crescimento de Fibroblastos , Guanidinas , Indicã , Leptina , Hormônio Paratireóideo , Fosfatos , Insuficiência Renal Crônica/etiologia , Insuficiência Renal Crônica/terapia , Toxinas Biológicas , Ácido Úrico , Uremia/complicaçõesRESUMO
Lung cancer causes 1.4 million deaths worldwide while non-small-cell lung cancer (NSCLC) represents 80-85% of the cases. Cisplatin is a standard chemotherapy against this type of cancer; however, tumor cell resistance to this drug limits its efficacy. Sea anemones produce compounds with pharmacological activities that may be useful for augmenting cisplatin efficacy. This study aimed to evaluate the pharmacological activities of crude venom (CV) from the sea anemone Bunodeopsis globulifera and four derived fractions (F1, F2, F3 and F4) to test their increase efficiency cisplatin cytotoxicity in human lung adenocarcinoma cells. Results Pre-exposure to CV, F1 and F2 fractions increases cisplatin cytotoxicity in human lung adenocarcinoma cells under specific conditions. Exposure to CV at 50 μgmL-1 induced a reduction of approximately 50% in cell viability, while a similar cytotoxic effect was observed when cell culture was exposed to F1 at 25 μgmL -1 or F2 at 50 μgmL-1. The cell culture exposure to F1 (10 μgmL-1) fraction combined with cisplatine (25 μM) provoked a decrease in MTT reduction until 65.57% while F2 (25 μgmL-1) fraction combined with cisplatin (10 μM) provoked a decrease in MTT reduction of 72.55%. Conclusions The F1 fraction had the greatest effect on the lung adenocarcinoma cell line compared with CV and F2. The combination of antineoplastic drugs and sea anemone toxins might allow a reduction of chemotherapeutic doses and thus mitigate side effects.
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Humanos , Animais , Adenocarcinoma , Toxinas Biológicas/análise , Farmacologia/instrumentação , Neoplasias Pulmonares/patologiaRESUMO
Of the 102 samples collected from mammals and birds, both domestic and captive wild, 48 were found to be positive for Clostridium perfringens. Most of the mammal isolates (84.38%) appeared to have been collected from clinically affected animals, while 33.33% of the bird samples were from clinically affected and 21.43% from apparently healthy birds infected with C. perfringens. Isolates revealed high sensitivity to ciprofloxacin, enrofloxacin and norfloxacin. Among the isolated C. perfringens, 30 (62.50%) showed DNase production. Hemolytic activity was recorded in 14 (24.16%) of the isolates and 28 (58.33%) showed phospholipase C production. All the phospholipase C positive isolates revealed the presence of cpa gene encoding alpha (α) toxin. Of the 102 samples collected from mammals and birds, both domestic and captive wild, 48 were found to be positive for Clostridium perfringens. Most of the mammal isolates (84.38%) appeared to have been collected from clinically affected animals, while 33.33% of the bird samples were from clinically affected and 21.43% from apparently healthy birds infected with C. perfringens. Isolates revealed high sensitivity to ciprofloxacin, enrofloxacin and norfloxacin. Among the isolated C. perfringens, 30 (62.50%) showed DNase production. Hemolytic activity was recorded in 14 (24.16%) of the isolates and 28 (58.33%) showed phospholipase C production. All the phospholipase C positive isolates revealed the presence of cpa gene encoding α toxin.(AU)
Assuntos
Animais , Toxinas Biológicas , Infecções por Clostridium/veterinária , Clostridium perfringens/isolamento & purificação , Clostridium perfringens/patogenicidade , Aves , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Índia , Animais Domésticos , MamíferosRESUMO
O principal fator larvicida do Bacillus sphaericus (Bs) para culicídeos é a toxina binária (Bin), produzida sob a forma de um cristal, durante a esporulação. Esta toxina, ativada por meio da ação de proteases no lúmen intestinal, reconhece e liga-se a receptores específicos no intestino de larvas por meio de sua subunidade BinB, etapa crítica no seu modo de ação e essencial para a atividade larvicida. Os receptores em Culex pipiens, C. quinquefasciatus e Anopheles gambiae, denominados Cpm1, Cqm1, e Agm3, respectivamente, são alfa glicosidases de 66 kDa ligadas à membrana apical do epitélio intestinal por uma âncora de glicosilfosfatidilinositol (GPI). Larvas de Aedes aegypti expressam a alfaglicosidase Aam1, ortóloga ao receptor Cqm1 que, no entanto, não apresenta capacidade de ligação à toxina Bin. O principal objetivo deste trabalho foi caracterizar a base molecular da interação da toxina Bin do Bs com alfaglicosidases em larvas de culicídeos vetores. Para tal, a sequência protéica de Cqm1 foi alinhada a sequências ortólogas e parálogas de Ae. aegypti e An. gambiae, o que indicou trechos mais conservados na porção N-terminal e divergentes na porção C-terminal. A banálise funcional de fragmentos protéicos de 45 kDa da porção N-terminal de proteínas ortólogas e parálogas à Cqm1 sugeriu que o epitopo de ligação à toxina Bin está potencialmente localizado nesta região e que o estado conformacional nativo das proteínas é determinante para sua funcionalidade. Em seguida, foram avaliadas algumas características das alfa glicosidases Cqm1 e Aam1 de 66 kDa que podem estar envolvidas na sua capacidade de ligação à toxina Bin. Os resultados mostraram que as proteínas possuem diferenças estruturais e conformacionais que podem ter um papel determinante para a interação com a toxina Bin. A análise do padrão de glicosilação das proteínas revelou que a Aam1 posssui glicosilações em sua cadeia polipeptídica ao contrário da Cqm1 e que a ligação do receptor Cqm1...
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Aedes , Culex , Toxinas BiológicasRESUMO
Bacillus cereus es un bacilo Gram-positivo de amplia distribución en la naturaleza y asociado a diversos tipos de alimentos que, bajo ciertas circunstancias causa patologías de diversa índole. Se han descrito cepas diarrogénicas y eméticas basándose en el tipo de toxinas producidas. Con el fin de determinar el riesgo de salud que representa en esta bacteria, se determinó el potencial toxigénico de cepas aisladas a partir de quesos maduros con especias, quesos crema con especias y leches deshidratadas expendidas en San José, Costa Rica, mediante un PCR múltiple con oligonucleótidos específicos para los genes codificantes de las toxinas HBL y Nhe. A partir de 45 muestras recolectadas, se obtuvieron 15 aislamientos de B. cereus, (60 por ciento provenientes de queso crema con especias, 7 por ciento de leche deshidratada y 13 por ciento de queso maduro con especias). Todas las cepas estudiadas presentaron al menos uno de los genes analizados, seis de ellas provenientes de leches deshidratadas y quesos crema, exhibieron evidencia molecular de los genes nheB, nheA, nheC, hblD, hblA y hblC lo cual permite confirmar la correlación descrita para la presencia de los operones codificantes para la HBL y la Nhe. No obstante, la no detección de un gen no puede considerarse como prueba definitiva de su ausencia dado que existen polimorfismos en las secuencias de los genes aquí analizados. Los resultados demuestran que múltiples cepas de B. cereus encontradas en lácteos comprados en Costa Rica contienen los genes necesarios para sintetizar toxinas, por lo tanto es importante el manejo adecuado de estos productos ya que eventualmente pueden representar un riesgo para la salud pública.
Bacillus cereus is a Gram positive rod widely distributed in nature and associated to different types of food that, under some circumstances, may cause pathology to human beings. Diarrheic and emetic strains have been described based on the type of toxins produced. In order to determine the risk to health represented by this bacteria, the toxigenic potential of strains isolated from cheese with spices, spread cheese with spices and dehydrated milk, all sold in San José, Costa Rica, were determined using a multiplex PCR technique with oligonucleotides specific for the genes coding toxins HBL and Nhe. From 45 samples collected, 15 isolates of B cereus were obtained (60 percent coming from spread cheese with spices 7 percent from dehydrated milk and 13 percent from cheese with spices). All the strains analyzed presented at least one of the genes analyzed; six of them, coming from dehydrated milk and spread cheese, showed molecular evidence of the genes nheB, nheA, nheC, hblD, hblA y hblC, confirming the correlation described for the presence of operons codifying for HBL and Nhe. Nevertheless, the no detection of a gene cannot be considered as a definitive proof of its absence, given the existence of polymorphism in the sequences of the genes analyzed. The results obtained show that multiple of the B cereus strains found in lactic products from Costa Rica have the necessary genes for synthesizing toxins, so the correct handling of these products is very important since they can represent a risk for public health.
Assuntos
Bacillus cereus , Leite/microbiologia , Queijo/microbiologia , Toxinas Biológicas/análise , Análise de AlimentosRESUMO
Microcistinas (MCs) são heptapeptídeos cíclicos produzidos por cianobactérias e possuem potente hepatotoxicidade e atividade promotora de tumor. Em intoxicações agudas induzidas por MCs ocorre infiltração leucocitária no foco inflamatório. Embora os mecanismos de hepatotoxicidade não são claros, o recrutamento de neutrófilos no fígado pode contribuir ao dano tecidual e desenvolvimento tumoral causados por xenobióticos. O objetivo dessa tese foi investigar os efeitos de três estruturalmente distintas MCs (MC-LA, MC-YR e MC-LR) nas seguintes funções de neutrófilos: síntese e expressão de moléculas de adesão, rolamento, adesão, migração e liberação de citocinas e de ROS. Nos ensaios de migração em bolsa de ar, as três MCs induziram similarmente a migração leucócitos in vivo em tecido subcutâneo de ratos e diferencialmente a secreção citocinas pró-inflamatórias (CINC, IL-1β, TNF-α, VEGF-α e MIP) no exsudato. Concentrações elevadas de CINC-2αβ foram encontradas nos exsudatos inflamatórios de animais após injeção de MC-LA, MC-LR ou MC-YR. MIP-2 elevou-se apenas em exsudatos de animais expostos a MC-LR. Não foram observadas alterações em secreção de IL-1β, TNF-α e VEGF-α...
Assuntos
Humanos , Animais , Ratos , Ativação de Neutrófilo/imunologia , Cianobactérias/crescimento & desenvolvimento , Espécies Reativas de Oxigênio , Técnicas In Vitro , Inflamação/imunologia , Microcistinas/análise , Microcistinas/química , Microcistinas/toxicidade , Estresse Oxidativo , Toxinas Biológicas/análise , Microbiologia da Água , Bioensaio , Coleta de Amostras Sanguíneas , Centrifugação , Citometria de Fluxo , Reação em Cadeia da PolimeraseRESUMO
INTRODUÇÃO: O aracnídeo Phoneutria nigriventer, também conhecido por aranha-armadeira, possui um veneno complexo, contendo vários peptídeos que ativam canais iônicos nas células. Dentre estes, só dois neuropeptídeos, Tx2-5 e Tx2-6, destacam-se por relaxar o músculo liso trabecular do corpo cavernoso, induzindo ereção peniana em camundongos e ratos. Este efeito tem sido associado à produção de oxido nítrico pela ativação de óxido nítrico sintases. No entanto, faltam estudos mais amplos para determinar o papel de Tx2-6 na indução da ereção. OBJETIVOS: Identificar os genes diferencialmente expressos no tecido erétil de camundongos após indução da ereção pela Tx2-6 utilizando microarranjos de oligonucleotídeos. Validação dos resultados obtidos nos microarranjos por PCR quantitativa e imuno-histoquímica. MATERIAIS E MÉTODOS: Camundongos machos e adultos da linhagem Swiss foram divididos em dois grupos: controle (n=10), inoculados pela via intracavernosa com 20 l de solução salina; e tratado (n=10), os quais receberam 0,006gg/animal do peptídeo Tx2-6 diluído em 20 l de salina pela via intracavernosa. Uma hora após o início da ereção no grupo tratado todos os animais foram sacrificados e retirou-se o pênis. Este último foi dividido em dois fragmentos, uma parte do material foi congelada em nitrogênio líquido e mantida a 80°C até a extração do RNA para os experimentos de microarranjos e PCR quantitativa; outra parte foi utilizada para avaliação imuno-histoquímica. RESULTADOS: No grupo tratado a ereção foi observada 30-45 minutos após aplicação de Tx2-6 e mantida durante 120 minutos. Os camundongos de grupo controle não apresentaram nenhum indício de ereção. Nos experimentos de microarranjos, onde foram analisados 34.000 genes representando o genoma total do camundongo, identificou-se 3.803 (12,3%) genes com expressão diferencial de pelo menos ±1,5 vez entre os grupos (1.823 genes superexpressos e 1.980 genes subexpressos no grupo tratado...
INTRODUCTION: The Phoneutria nigriventer arachnid, also known as armed-spider, has a complex venom, composed by several peptides that affect cellular ionic channels. Among these, only two neuropeptides, Tx2-5 and Tx2-6 induce penile erection in mice and rats and this effect has been associated with the production of nitric oxide by the activation of nitric oxide synthases. Moreover, there is a scarcity of studies focusing on the role of Tx2-6 in the induction of erection. OBJECTIVES: To identify the differently expressed genes in the erectile tissue of mice after erection induction by Tx2-6 using oligonucleotide microarrays. To validate microarray results by quantitative PCR and immunohistochemistry. MATERIALS AND METHODS: Swiss adult male mice were divided in two groups: control (n=10) were injected intracavernously with 20 gl of saline solution; and treated (n=10) were injected intracavernously with 0.006gg/mouse of the Tx2-6 peptide diluted in 20 gl of saline solution. After checking the penile erection in the treated group, all mice were sacrificed one hour after the beginning of erection for the removal of the penis. Penile organ was divided into two fragments, one piece was immediately frozen in liquid-nitrogen and stored at -80°C until RNA extraction to make the microarray and quantitative PCR experiments; the other was reserved for immunohistochemistry analysis. RESULTS: In the treated group, erection was noticed 30-45 minutes after Tx2-6 inoculation and lasted for 120 minutes. Control mice did not present any sign of erection. Considering as differentially expressed genes with a ±1.5 fold expression difference, of the 34,000 genes on the microarray we identified 3,803 (12.3%) genes differentially expressed between the groups (1,823 genes up-regulated and 1,980 genes down-regulated in the treated group compared to controls). The ednrb, sparc, fn1, sstr2, pdgfr genes were selected for validation of microarray results by using quantitative PCR and...
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Animais , Cobaias , Camundongos , Regulação da Expressão Gênica , Ereção Peniana , Venenos de Aranha , Toxinas BiológicasRESUMO
Apresenta, pela primeira vez em um único volume, o resultado de diversas pesquisas com diferentes perspectivas sobre as reais possibilidades do uso de venenos e de toxinas de origem animal na indústria biotecnológica. Animal Toxins é composto por 39 artigos, em inglês, assinados por especialistas renomados de várias nacionalidades. O estado da arte em compostos obtidos a partir de venenos de animais marinhos, aranhas e escorpiões, lagartas, serpentes, entre outros, são o foco desta publicação que visa a atender cientistas, estudantes e pesquisadores da universidade, da indústria farmacêutica e de biotecnologia interessados em toxicologia. Os venenos e toxinas de origem animal foram selecionados ao longo de milhões de anos de evolução para atuarem de forma rápida e eficaz no organismo da vítima, o que resultou em um repertorio maciço de moléculas capazes de se ligarem a alvos específicos. A possibilidade de utilização dessas toxinas em processos biotecnológicos fez com que esses venenos e toxinas sejam considerados como uma das mais promissoras fontes de compostos bioativos naturais.
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Animais Venenosos , Biotecnologia , Toxinas Biológicas/isolamento & purificaçãoRESUMO
Undergraduate students from the health area often handle piercing-cutting instruments in their academic activities, which exposes them to the risk of contracting infections. This study aimed to analyze accidents with biological material among these students. Out of 170 accidents registered, 83 (48.8 percent) occurred with Dentistry students, 69 (40.6 percent) with Medical students, 11 (6.5 percent) with Nursing students and in 06 (3.5 percent) of the cases there was no such information in the files. Most accidents, 106 (62.4 percent), occurred with students from private schools and 55 (32.3 percent) with those from public schools. Percutaneous accidents occurred in 133 (78.2 percent) exposures and there was immediate search for specialized health care in only 38 (21.3 percent) accidents. In 127 (74.7 percent) accidents, the immunization schedule against hepatitis B was complete. Therefore, schools need to offer courses and specific class subjects regarding biosafety measures, including aspects related to immunization, especially the vaccine against hepatitis B.
La manipulación de instrumentos punzo cortantes por estudiantes del área de la salud es frecuente en la actividad académica, lo que los expone al riesgo de adquirir infecciones. Este estudio tuvo como objetivo analizar los accidentes con material biológico ocurridos en alumnos del área de la salud. De los 170 accidentes registrados, 83 (48,8 por ciento) ocurrieron con alumnos del curso de Odontología, 69 (40,6 por ciento) de Medicina, 11 (6,5 por ciento) de Enfermería y en 06 (3,5 por ciento) no había información en la ficha de atención. La mayoría, 106 (62,4 por ciento), ocurrió con alumnos de escuelas privadas y 55 (32,3 por ciento) de públicas. Los accidentes percutáneos ocurrieron en 133 (78,2 por ciento) exposiciones y en 38 (21,3 por ciento) accidentes la búsqueda por atención especializada fue inmediata. En 127 (74,7 por ciento) accidentes el esquema de vacunas contra hepatitis B estaba completo. Así es imprescindible que las escuelas ofrezcan cursos y/o disciplinas específicas sobre medidas de bioseguridad incluyendo aspectos relacionados a campañas de vacunación y en especial la vacuna contra hepatitis B.
O manuseio de instrumentos perfurocortantes por estudantes da área da saúde é freqüente na atividade acadêmica, o que os expõe ao risco de adquirir infecção. Este estudo teve como objetivo analisar os acidentes com material biológico, ocorridos com alunos de graduação da área da saúde. Dos 170 acidentes registrados, 83 (48,8 por cento) ocorreram com alunos do curso de odontologia, 69 (40,6 por cento) de medicina, 11 (6,5 por cento) de enfermagem e em 6 (3,5 por cento) não havia a informação na ficha de atendimento. A maioria (106-62,4 por cento) ocorreu com alunos de escolas privadas e 55(32,3 por cento) de escolas públicas. Os acidentes percutâneos ocorreram em 133 (78,2 por cento) exposições e em apenas 38 (21,3 por cento) acidentes a procura pelo atendimento especializado foi imediata. Em 127 (74,7 por cento) acidentes o esquema vacinal contra hepatite B estava completo. Assim, torna-se imprescindível que as escolas ofereçam cursos e/ou disciplinas específicas sobre medidas de biossegurança, incluindo aspectos relacionados à vacinação e em especial à vacina contra hepatite B.
Assuntos
Adolescente , Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Acidentes de Trabalho/estatística & dados numéricos , Comportamentos Relacionados com a Saúde , Vacinas contra Hepatite B/administração & dosagem , Hepatite B/imunologia , Hepatite B/prevenção & controle , Imunização/estatística & dados numéricos , Eliminação de Resíduos de Serviços de Saúde/estatística & dados numéricos , Estudantes de Medicina/estatística & dados numéricos , Toxinas BiológicasRESUMO
Nonstructural protein 4 (NSP4), encoded by group A rotavirus genome segment 10, is a multifunctional protein and the first recognized virus-encoded enterotoxin. The NSP4 gene has been sequenced, and five distinct genetic groups have been described: genotypes A-E. NSP4 genotypes A, B, and C have been detected in humans. In this study, the NSP4-encoding gene of human rotavirus strains of different G and P genotypes collected from children between 1987 and 2003 in three cities of West Central region of Brazil was characterized. NSP4 gene of 153 rotavirus-positive fecal samples was amplified by reverse transcriptase-polymerase chain reaction and then sequenced. For phylogenetic analysis, NSP4 nucleotide sequences of these samples were compared to nucleotide sequences of reference strains available in GenBank. Two distinct NSP4 genotypes could be identified: 141 (92.2 percent) sequences clustered with NSP4 genotype B, and 12 sequences (7.8 percent) clustered with NSP4 genotype A. These results reinforce that further investigations are needed to assess the validity of NSP4 as a suitable target for epidemiologic surveillance of rotavirus infections and vaccine development.
Assuntos
Criança , Pré-Escolar , Humanos , Glicoproteínas/genética , Infecções por Rotavirus/virologia , Rotavirus/genética , Toxinas Biológicas/genética , Proteínas não Estruturais Virais/genética , Sequência de Bases , Brasil , Fezes/virologia , Genótipo , Filogenia , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Rotavirus/classificação , Análise de Sequência de RNARESUMO
O presente trabalho visa desenvolver métodos analíticos que permitam determinar as concentrações de oxitetraciclina por Cromatografia Liquida de Alta Eficiência, no leite, plasma e liquido sinovial, alem de analisar as concentrações correspondentes em gado leiteiro em lactação portadoras de doenças do casco submetidos aos tratamentos intramuscular e tópico. Adicionalmente, são tecidos comentários sobre a eficácia clinica destes tratamentos. Desta forma, objetivando determinar a depuração de oxitetraciclina no organismo dos animais tratados, a concentração no sitio de ação e a quantidade residual em leite, as amostras biológicas foram colhidas e quantificadas em diferentes tempos pré e pós-administração do fármaco. Os métodos analíticos validados apresentaram linearidade, limite de detecção, quantificação, exatidão, precisão e recuperação adequadas a quantificação do antibiótico nas matrizes estudadas. Através da administração do medicamento por via intramuscular, observou-se resíduos acima dos limites máximos (1OOppb) estabelecidos pela legislação brasileira para oxitetraciclina no leite ate 120 horas após a última administração do medicamento pelo esquema seriado de doses. Já pela via tópica, não foram observados valores residuais na matriz biológica. Do ponto de vista clinico, o tratamento tópico foi eficiente nos animais tratados, levando a cura das lesões. Com relação ao tratamento intramuscular, não foram observados resultados satisfatórios, pois a maioria das lesões não regrediu após as administrações.