Directrices de Laboratorio para la Detección y el Diagnóstico de la Infección con el Virus COVID-19 / Laboratory Guidelines for the Detection and Diagnosis of COVID-19 Virus Infection

Los coronavirus son un grupo de virus ARN altamente diversos de la familia Coronaviridae que se dividen en 4 géneros: alfa, beta, gamma y delta, y que causan enfermedades de leves a graves en humanos y animales (1-3). Existen coronavirus humanos endémicos como los alfacoronavirus 229E y NL63 y los betacoronavirus OC43 y HKU1 que pueden causar enfermedades de tipo influenza o neumonía en humanos (1, 3). Sin embargo, dos coronavirus zoonóticos que causan enfermedades graves en humanos han emergido: el coronavirus del Síndrome respiratorio agudo grave (SARS-CoV) en 2002-2003 y el coronavirus del Síndrome respiratorio de Oriente Medio (MERS-CoV) (1-5). En enero de 2020, el agente etiológico responsable de un grupo de casos de neumonía grave en Wuhan, China, fue identificado como un nuevo betacoronavirus, distinto del SARS-CoV y MERS-CoV (6). El 11 de febrero de 2020, el Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) anunció la denominación del virus como coronavirus del síndrome respiratorio agudo grave 2 (SARS-CoV-2) (7), mientras que, el mismo día, la OMS nombró la enfermedad como enfermedad por coronavirus COVID-19 (8). Para fines de comunicación, haremos referencia a este virus como "el virus responsable de COVID-19" o "el virus COVID-19". La secuencia genómica completa de este nuevo agente está disponible y se han desarrollado diferentes protocolos de detección (9). A la luz de la circulación actual de COVID-19 en la región de las Américas, la Organización Panamericana de la Salud / Organización Mundial de la Salud (OPS / OMS) recomienda a los Estados Miembros garantizar la identificación oportuna de casos sospechosos, la toma y el envío de muestras a los laboratorios de referencia, y la implementación de protocolos de detección molecular, según la capacidad del laboratorio.

Doença de chagas: uma atualização bibliográfica / Chagas disease: a bibliographic update

É uma doença infecciosa causada por um protozoário parasita chamado Trypanosoma cruzi,nome dado por seu descobridor, o cientista brasileiro Carlos Chagas, em homenagem a outro cientista, também brasileiro, Oswaldo Cruz. Essa doença é conhecida popularmente como doença do coração crescido, além disso, os locais com mais índices dessa doença são as regiões do Norte e Sudeste e tem como formas de diagnósticos exames de sorologiaparasitários e xenodiagnóstico. E uma das principais formas de prevenção da doença vem sendo o uso de telas e repelentes.

It is an infectious disease caused by a protozoan parasite calledTrypanosoma cruzi, named after its discoverer, the Brazilian scientistCarlos Chagas, in honor of another scientist, also, Brazilian, Oswaldo Cruz. This disease is popularly known as a disease of the heart grown, in addition, the sites with the most indexes of this disease are the regions of the North and southeast and have as diagnostic methods serologica tests parasitic and xenodiagnosis. And one of the main forms of prevention of the disease has been the use of screens and repellents.

Obesidade Infantil: análises antropométricas, bioquímicas, alimentares e estilo de vida / Childhood Obesity: an anthropometric, biochemical, alimentary and lifestyle analysis / Obesidad Infantil: análisis antropométricos, bioquímicos, alimenticios y de estilo de vida

Resumo Introdução Hábitos alimentares inadequados na infância predispõem ao surgimento de doenças metabólicas na fase adulta, objetivando a identificar alterações de IMC em escolares no município de Poços de Caldas-MG-BR, com idades entre 6 a 12 anos, avaliar análises bioquímicas, dados antropométricos e padrão alimentar. Material e Métodos Estudo quantitativo de campo, desenvolvido em três escolas, uma de ensino público e duas de ensino privado, no período de 2015 a 2016, com amostragem de 104 crianças. As variáveis de interesse foram dados antropométricos, amostragem sanguínea para exames laboratoriais e formulário de padrão alimentar. Resultados: A idade média da amostra foi 9,5±0,2, sendo 53,9% meninos e 46,2% meninas. Entre as prevalências encontradas, 51,0% das crianças tiveram algum tipo de alteração no IMC, sendo 29,2% de obesidade e 25,0% de sobrepeso na escola particular frente a 6,3% obesidade e 15,6% sobrepeso na escola pública. Observou que 60,6% apresentam alteração para glicemia em jejum (113,1±1,4 mg/dl). Colesterol 51,9% de alteração (196,0±2,9 mg/dl), HDL 43,3% mostram alterados (40,5±0,4 mg/dl), LDL percebe 19,2% das crianças apresentam aumento do valor normal (143,6±4,0 mg/dl) e TG 20,2% acima do valor recomendado (158,8±10,7 mg/dl). Foi possível observar ainda uma alta significantemente estatística na ingesta alimentar dando prioridade ao grupo de açúcares. Discussão A amostra estudada apresenta alterações significativas para sobrepeso e obesidade, bem como para valores de porções alimentares, glicemia e dislipidemias. Conclusões Mostra-se importante estudo na área a fim de mapear e melhorar o perfil nutricional para diminuir os riscos aos quais as crianças estão expostas.

Abstract Introduction Inadequate eating habits in childhood predispose to the onset of metabolic diseases in adulthood, aiming to identify changes in BMI in schoolchildren in the municipality of Poços de Caldas, MG, Brazil, aged 6 to 12 years, and to evaluate biochemical analyzes, anthropometric data and food patterns. Materials and Methods A quantitative field study, developed in three schools, one public and two private schools, from 2015 to 2016, with a sample of 104 children. The variables of interest for the study were anthropometric data, blood sampling for laboratory tests and food patterns form. Results The average age of the sample was 9.5 ± 0.2, with 53.9% boys and 46.2% girls. Among the prevalence found, 51.0% of the children had some type of alteration in BMI, being 29.2% of obesity and 25,0% of overweight in private school, compared to 6.3% of obesity and 15.6% of overweight in public school. Observed that 60.6% presented alteration to fasting glycaemia (113.1±1.4 mg/dl). Alteration of 51,9% in Cholesterol (196,0±2,9 mg/dl), HDL 43,3% altered (40,5±0,4 mg/dl), the value of LDL indicate that 19,23% of the children increased of the normal value (143,6±4,0 mg/dl) and TG 20,2% is above the recommended value (158,8±10,7 mg/dl). It was also possible to observe a statistically significant increase in food intake giving priority to the sugar group. Discussion The sample studied, presented significant alterations for overweight and obesity, as well as for food portions, glycaemia and dyslipidemia. Conclusions It seems important studies in the area are necessary to map and improve the nutritional profile to reduce the risks to which children are exposed.

Resumen Introducción Los hábitos alimenticios inadecuados en la infancia predisponen al surgimiento de enfermedades metabólicas en la fase adulta, por ello, este estudio tiene por objeto identificar los cambios del IMC en alumnos del municipio de Poços de Caldas-MGBR, con edades de 6 a 12 años, así como evaluar análisis bioquímicos, datos antropométricos y patrones de alimentación. Materiales y Métodos: Estudio cuantitativo de campo, desarrollado en tres escuelas, una pública y dos privadas, en el período 2015- 2016, con un muestreo de 104 niños. Las variables de interés correspondieron a datos antropométricos, muestreo sanguíneo para exámenes de laboratorio y formulario de patrones alimenticios. Resultados La edad promedio de la amuestra fue de 9,5±0,2, con 53,9% de niños y 46,2% de niñas. Entre las prevalencias encontradas, 51 ,0% de los infantes tuvieron algún tipo de cambio en el IMC, de los cuales 29,2 correspondía a obesidad y 25,0% a sobrepeso en las escuelas privadas versus 6,3% de obesidad y 15,6% de sobrepeso en la escuela pública. Se observó que 60,6% presentan una alteración de la glicemia en ayunas (113,1±1,4 mg/dl). Colesterol 51,9% de alteración (196,0±2,9 mg/dl), HDL con 43,3% de resultados con alteraciones (40,5±0,4 mg/dl), LDL de 19,2% de los infantes que presentan aumento del valor normal (143,6±4,0 mg/dl) y TG 20,2% por encima del valor recomendado (158,8±10,7 mg/dl). Igualmente, se pudo observar un alza significativamente estadística en la ingesta de alimentos, con prioridad para el grupo de azúcares. Discusión La muestra estudiada presenta alteraciones significativas para sobrepeso y obesidad, así como valores de porciones alimenticias, glicemia y dislipidemias. Conclusiones El estudio en esta área resulta importante con el fin de mapear y mejorar el perfil nutricional para disminuir los riesgos a los que están expuestos los niños y niñas.

Evaluation of the commercial kit SIRE nitratase for detecting resistant mycobacterium tuberculosis in Brazil

Abstract INTRODUCTION: This study aimed to evaluate a new commercial kit, Kit SIRE Nitratase-PlastLabor, for testing the drug susceptibility of clinical Mycobacterium tuberculosis isolates. METHODS: The accuracy of the Kit SIRE Nitratase was evaluated by examining the susceptibility (streptomycin, isoniazid, rifampicin, and ethambutol) of 40 M. tuberculosis isolates, using the proportion method with Lowenstein-Jensen medium or the BACTEC MGIT 960 system. RESULTS: The detection accuracy for streptomycin, isoniazid, rifampicin, and ethambutol was 95%, 97.5%, 100%, and 80%, respectively. CONCLUSIONS: The exceptional accuracy demonstrated by Kit SIRE Nitratase for isoniazid and rifampicin makes the kit an attractive option for screening M. tuberculosis strain resistance.

Transient Elastography vs Aspartate Aminotransferase to Platelet Ratio Index in Hepatitis C: A Meta-Analysis

ABSTRACT Background and rationale. Many different non-invasive methods have been studied with the purpose of staging liver fibrosis. The objective of this study was verifying if transient elastography is superior to aspartate aminotransferase to platelet ratio index for staging fibrosis in patients with chronic hepatitis C. Material and methods. A systematic review with meta-analysis of studies which evaluated both non-invasive tests and used biopsy as the reference standard was performed. A random-effects model was used, anticipating heterogeneity among studies. Diagnostic odds ratio was the main effect measure, and summary receiver operating characteristic curves were created. A sensitivity analysis was planned, in which the meta-analysis would be repeated excluding each study at a time. Results. Eight studies were included in the meta-analysis. Regarding the prediction of significant fibrosis, transient elastography and aspartate aminotransferase to platelet ratio index had diagnostic odds ratios of 11.70 (95% confidence interval = 7.13-19.21) and 8.56 (95% confidence interval = 4.90-14.94) respectively. Concerning the prediction of cirrhosis, transient elastography and aspartate aminotransferase to platelet ratio index had diagnostic odds ratios of 66.49 (95% confidence interval = 23.71- 186.48) and 7.47 (95% confidence interval = 4.88-11.43) respectively. Conclusion. In conclusion, there was no evidence of significant superiority of transient elastography over aspartate aminotransferase to platelet ratio index regarding the prediction of significant fibrosis, but the former proved to be better than the latter concerning prediction of cirrhosis.

Perfil bioquímico sérico de equinos clinicamente sadios da raça Campeiro / Serum biochemical profile from clinically healthy Campeiro horses

Amostras de sangue foram obtidas de 138 equinos registrados da raça Campeiro, com idade média de 9,7±5,4 anos, sendo 14 machos (10,15%) e 124 fêmeas (89,85%). Observaram-se valores médios da atividade sérica de GGT: 13,73±4,08 U/L; AST: 246,34±72,87U/L; ALT: 5,13±1,18U/L; FA: 284,32±53,33UI/L; CK: 132,54±72,25U/L; LDH: 511,38±143,65U/L; e das concentrações séricas de ureia: 38,65±12,62mg/dL e de creatinina: 1,24±0,24mg/dL. Os valores médios de AST, FA, ALT, ureia e creatinina foram semelhantes aos propostos na literatura para outras raças. Os valores de CK, GGT e LDH foram superiores aos comumente utilizados como referências. Não houve diferença nas concentrações de nenhum dos componentes séricos avaliados nas diferentes idades analisadas. Maiores valores médios nas concentrações de ureia e menores de creatinina foram observados nas fêmeas em relação aos machos, assim como a maior atividade sérica de FA em fêmeas gestantes em relação às éguas vazias. O perfil bioquímico sérico de equinos sadios da raça Campeiro apresenta variações peculiares que devem ser levadas em consideração na interpretação de exames laboratoriais.(AU)

Blood samples were obtained from 138 equines of the Campeiro breed with mean ages of 9.7±5.4 years, including 14 males (10.15%) and 124 mares (89.85%). Mean values of serum of GGT: 13.73 ± 4.08U/L; AST: 246.34±72.87U/L; ALT 5.13±1.18U/L; FA: 284.32±53.33IU/L; CK: 132.54±72.25U/L; LDH: 511.38±143.65U/L; and serum urea: 38.65±12.62mg/dL and creatinine: 1.24±0.24mg/dL were observed. The mean values of AST, FA, ALT, urea and creatinine were similar to those proposed in the literature for other breeds. The CK values, GGT, and LDH were higher than those commonly used as references. There was no difference in the concentrations of any of the serum components evaluated at different ages analyzed. Further average values in the lower urea concentrations and creatinine were observed in females compared to males, as well as the higher serum activity of FA in pregnant mares in relation to non-pregnant. Serum biochemical profile of healthy horses of the Campeiro breed presents peculiar variations that must be taken into consideration in the interpretation of laboratory tests.(AU)

Pleural effusion adenosine deaminase: a candidate biomarker to discriminate between Gram-negative and Gram-positive bacterial infections of the pleural space

OBJECTIVES: Delay in the treatment of pleural infection may contribute to its high mortality. In this retrospective study, we aimed to evaluate the diagnostic accuracy of pleural adenosine deaminase in discrimination between Gram-negative and Gram-positive bacterial infections of the pleural space prior to selecting antibiotics. METHODS: A total of 76 patients were enrolled and grouped into subgroups according to Gram staining: 1) patients with Gram-negative bacterial infections, aged 53.2±18.6 years old, of whom 44.7% had empyemas and 2) patients with Gram-positive bacterial infections, aged 53.5±21.5 years old, of whom 63.1% had empyemas. The pleural effusion was sampled by thoracocentesis and then sent for adenosine deaminase testing, biochemical testing and microbiological culture. The Mann-Whitney U test was used to examine the differences in adenosine deaminase levels between the groups. Correlations between adenosine deaminase and specified variables were also quantified using Spearman’s correlation coefficient. Moreover, receiver operator characteristic analysis was performed to evaluate the diagnostic accuracy of pleural effusion adenosine deaminase. RESULTS: Mean pleural adenosine deaminase levels differed significantly between Gram-negative and Gram-positive bacterial infections of the pleural space (191.8±32.1 U/L vs 81.0±16.9 U/L, p<0.01). The area under the receiver operator characteristic curve was 0.689 (95% confidence interval: 0.570, 0.792, p<0.01) at the cutoff value of 86 U/L. Additionally, pleural adenosine deaminase had a sensitivity of 63.2% (46.0-78.2%); a specificity of 73.7% (56.9-86.6%); positive and negative likelihood ratios of 2.18 and 0.50, respectively; and positive and negative predictive values of 70.6% and 66.7%, respectively. CONCLUSIONS: Pleural effusion adenosine deaminase is a helpful alternative biomarker for early and quick discrimination of Gram-negative from Gram-positive bacterial infections of the pleural space, which is useful for the selection of antibiotics.

Implantação de um método para determinação da atividade da transcetolase eritrocitária para avaliação indireta da tiamina / Implementation of a method for determining the erythrocyte transketolase activity for indirect evaluation of thiamin

O teste de ativação da transcetolase eritrocitária (TK-E) pelo pirofosfato de tiamina (TPP) exógeno é um método indireto para mensurar a tiamina (vitamina B1). A diminuição da atividade da transcetolase eritrocitária e o aumento da estimulação in vitro com o TPP maior do que 17 % indicam deficiência de tiamina. Este é um método plausível, pois são nos eritrócitos que estão concentradas a maior parte desta vitamina. Em virtude de surtos de beribéri que tem ocorrido no Brasil desde 2006, o Instituto Adolfo Lutz (IAL), como Laboratório Central de Saúde Pública, propôs a implantação desse método para auxiliar na investigação de novos surtos ou de casos isolados. Foram avaliados o teste de precisão, a linearidade, a estabilidade do hemolisado e da amostra, e estimados os limites de detecção e de quantificação. A atividade da TK-E sem ativação pelo TPP foi de 0,732 UI/gHb e com ativação foi de 0,827 UI/gHb. Todos os resultados dos parâmetros avaliados neste estudo apresentaram-se dentro dos critérios de aceitabilidade garantindo-se a confiabilidade do método. Fica, assim, disponível mais um ensaio bioquímico para a Rede Pública de Saúde, mas ainda necessário definir os valores de referência para estabelecer os limites clínicos da deficiência de tiamina.

Erythrocyte transketolase activation test (TK-E) by exogenous thiamine pyrophosphate (TPP) is an indirect method to measure thiamine (vitamin B1). The decrease in the erythrocyte transketolase activity and the increase of in vitro stimulation with TPP greater than 17 % indicate thiamine deficiency. It is a reasonable method as the major portion of this vitamin are concentrated in erithrocytes. Due to the beriberi outbreaks that have occurred in Brazil since 2006, the Adolfo Lutz Institute (IAL), as a Central Public Health Laboratory, proposed the implementation of this method to give support to the investigation on the new outbreaks or isolated cases. The evaluated parameters were precision, linearity, hemolysate and sample stability, and the limits of detection and quantification were estimated. The TK-E activity without activation by TPP was 0.732 UI/gHb, and with activation was 0.827 UI/gHb. All of the results obtained from the evaluated parameters showed to be within the eligibility criteria, ensuring the reliability of the proposed methods. Thus, this method showed to be adequate as biochemical assay for the Public Health Network. However, there is a need to define the reference values to establish the clinical limits of thiamine deficiency.

Caso familiar com diagnóstico para doença de Fabry / Familiar case with diagnostics for Fabry disease

A doença de Fabry é uma enfermidade genética ligada ao cromossomoX e de caráter progressivo, causada pela deficiênciaparcial ou total da enzima alfa galactosidase A (?-Gal A). Habitualmenteo diagnóstico é tardio em função das complicaçõespatológicas provocadas pela deficiência da enzima. OBJETIVO:Neste estudo, descrevemos os aspectos clínicos de um caso familiaratravés do acompanhamento ao longo de 3 anos, duranteo tratamentopela reposição enzimática. MÉTODOS: O métodoadotado foi indutivo, relacionado ao estudo de caso familiarde pacientes com doença de Fabry. Quanto à natureza das informações,a pesquisafoi qualitativa, utilizando-se, quanto aoseu objetivo, à pesquisa exploratória. Com relação as fonte deinformação e procedimento de coleta, a pesquisa caracteriza-secomo sendo bibliográfica e documental. A amostra foi compostapor três pacientesque realizamacompanhamento quinzenalpara aplicação de terapia de reposição enzimática. O critério deinclusão para a pesquisa partiu do pressuposto de se considerarque a doença de Fabry é uma afecção rara e que a família estudadacontempla com riqueza manifestações clínicas, capazesde caracterizar a doença de Fabry. RESULTADOS: Os principaissintomas clínicos relatados pelos pacientes foram: crisede dor generalizada, fadiga, acroparestesia, febre, mialgia, dorabdominal, hipohidrose, intolerância ao frio, calor e ao exercíciofísico. Esses sintomas segundo os pacientes surgiram nainfância e foram amenizados após o uso da terapia de reposiçãoenzimática, propiciando uma melhor qualidade de vida para osmesmos. Também, se observou sinais específicos desta patologianos pacientes, como córnea verticillata e angioqueratoma. Atravésda genotipagem se verificou a semelhança da mutação entre os pacientes do estudo, demonstrando padrão típico de herançarecessiva ligada ao cromossomo X. CONCLUSÃO: Os pacientesdeste estudo apresentaram quadro clínico semelhante,sendoque a sintomatologia iniciou na infância. Córnea verticillata eangioqueratoma umbilical foram sinais encontrados nos pacientes do sexo masculino e são considerados manifestações clínicas frequentes desta patologia. A herança encontrada nesta amostra tem um padrão típico de herança recessiva ligada ao cromossomo X. Desta forma, apesar de ser uma afecção rara na população em geral, o diagnóstico precoce e a terapia de reposição enzimática permitem a evolução clínica favorável e a melhoria da qualidade de vida do paciente.(AU)

Fabry disease is a genetic disorder linked to the X chromosomeand progressive, caused by partial or total deficiency of alphagalactosidase A (?-Gal A). Usually the diagnosis is delayed dueto the pathological complications caused by deficiency of theenzyme. OBJECTIVE: In this study, we describe the clinicalaspects of a family case by monitoring for over three years,during the treatment by enzyme replacement. METHODS:The method adopted was inductive, related to the study of afamily case with patients with Fabry disease. About the nature ofthe information, the research was qualitative, using, as its goal,the exploratory research. Regarding the source of informationand collection procedure, the research is characterized asbibliographical and documentary. The sample was composed ofthree patients submitted to biweekly monitoring for applicationof enzyme replacement therapy. The inclusion criterion forthe research assumed to consider that Fabry disease is a raredisease and that the studied family contemplates with wealththe clinical manifestations, able to characterize the Fabrydisease. RESULTS: The main clinical symptoms related bypatients were: generalized pain crisis, fatigue, acroparesthesia,fever, myalgia, abdominal pain, hypohidrosis, intolerance tocold, heat and exercise. These symptoms according to patientsemerged in childhood and were alleviated after the use ofenzyme replacement therapy, providing a better quality of lifefor them. Also, we found specific signs of this disease in patients,as verticillata cornea and angiokeratoma. By genotyping, it wasfound the similarity of the mutation among patients in thestudy, showing typical pattern of recessive inheritance linkedto chromosome X. CONCLUSION: The patients in this study showed similar clinical condition, and the symptoms began inchildhood. Verticillata cornea and umbilical angiokeratomasigns were found in male patients and are considered commonclinical manifestations of this pathology. The heritage found inthis sample has a typical pattern of recessive inheritance linkedto chromosome X. Thus, despite being a rare disease in generalpopulation, early diagnosis and enzyme replacement therapyallow favorable clinical evolution and improved patient qualityof life.(AU)

Clinical and laboratory description of a series of cases of acute viral myositis / Descrição clínico-laboratorial de uma série de casos de Miosite Aguda Viral

ABSTRACT OBJECTIVE: Describe the clinical and laboratory profile, follow-up, and outcome of a series of cases of acute viral myositis. METHOD: A retrospective analysis of suspected cases under observation in the emergency department was performed, including outpatient follow-up with the recording of respiratory infection and musculoskeletal symptoms, measurement of muscle enzymes, creatine phosphokinase (CPK), lactate dehydrogenase (LDH), transaminases (AST and ALT), blood count, C-reactive protein, and erythrocyte sedimentation rate in the acute phase and during follow-up until normalization. RESULTS: Between 2000 and 2009, 42 suspected cases were identified and 35 (27 boys) were included. The median age was 7 years and the diagnosis was reported in 89% in the first emergency visit. The observed respiratory symptoms were cough (31%), rhinorrhea (23%), and fever (63%), with a mean duration of 4.3 days. Musculoskeletal symptoms were localized pain in the calves (80%), limited ambulation (57%), gait abnormality (40%), and muscle weakness in the lower limbs (71%), with a mean duration of 3.6 days. There was significant increase in CPK enzymes (5507 ± 9180 U/L), LDH (827 ± 598 U/L), and AST (199 ± 245 U/L), with a tendency to leukopenia (4590 ± 1420) leukocytes/mm3. The complete recovery of laboratory parameters was observed in 30 days (median), and laboratory and clinical recurrence was documented in one case after 10 months. CONCLUSION: Typical symptoms with increased muscle enzymes after diagnosis of influenza and self-limited course of the disease were the clues to the diagnosis. The increase in muscle enzymes indicate transient myotropic activity related to seasonal influenza, which should be considered, regardless of the viral identification, possibly associated with influenza virus or other respiratory viruses.

RESUMO OBJETIVO: Descrever o perfil clínico-laboratorial, o acompanhamento e o desfecho de uma série de casos de miosite aguda viral. MÉTODO: Foi conduzida uma análise retrospectiva de casos suspeitos, em observação em unidade de emergência, e seguimento ambulatorial com o registro de sintomas de infecção respiratória, sintomas músculo-esqueléticos, determinação de enzimas musculares, creatina-fosfoquinase (CPK), desidrogenase lática (DHL), transaminases (AST e ALT), hemograma, proteína C reativa e velocidade de hemossedimentação, na fase aguda e no acompanhamento, até a normalização. RESULTADOS: Entre 2000 e 2009, 42 casos suspeitos foram identificados e 35 (27 meninos) foram incluídos. A mediana de idade foi de sete anos e o diagnóstico relatado em 89%, na primeira visita de emergência. Os sintomas respiratórios observados foram: tosse (31%), coriza (23%) e febre (63%), com duração média de 4,3 dias. Os sintomas músculo-esqueléticos foram: dor localizada nas panturrilhas (80%), deambulação limitada (57%), marcha anormal (40%) e fraqueza muscular nos membros inferiores (71%), com duração média de 3,6 dias. Observou-se elevação importante das enzimas CPK (5.507 ± 9.180) U/l, DHL (827 ± 598) U/l e AST (199 ± 245) U/l e tendência a leucopenia (4.590 ± 1.420) leucócitos/mm3. A recuperação completa dos parâmetros laboratoriais foi observada em 30 dias (mediana) e a recaída clínica e laboratorial em um caso após 10 meses. CONCLUSÃO: Os sintomas típicos com enzimas musculares elevadas após diagnóstico de influenza e o curso autolimitado foram os indícios para o diagnóstico. A elevação de enzimas musculares indica a atividade miotrópica transitória relacionada à influenza sazonal que deve ser considerada, a despeito da identificação viral, possivelmente associada com o vírus influenza ou outros vírus respiratórios.

Influência do estrógeno e do interferon γ sobre a expressão da indoleamina-2,3-dioxigenase em cultura de células de placenta e embriões de ratas Wistar / Estrogen and interferon γ influence on 2, 3 indoleamine-dioxygenase expression in culture of placenta and fetal cells from Wistar rats

A indoleamina 2,3-dioxigenase (IDO) é uma enzima responsável por catabolizar o aminoácido triptofano. Sua presença no ambiente uterino placentário está relacionada à tolerância imunológica ao semi-aloenxerto, pois impede a proliferação de células imunológicas maternas, seja pela falta do aminoácido, ou pela ação de alguns catabólitos oriundos da quebra do triptofano, como o ácido quinolínico, que é tóxico principalmente para os linfócitos T. Pouco se conhece sob a influência de substâncias (hormônios e citocinas) presentes na interface materno fetal e a expressão dessa enzima. Por esta razão, formulou-se a hipótese de que hormônios e interleucinas presentes na região uteroplacentária poderiam exercer algum efeito na expressão da IDO. Células oriundas da interface materno fetal de ratas Wistar foram mantidas em cultivo, onde receberam suplementação com estradiol e interferon-γ. A expressão da enzima foi avaliada pela técnica de citometria de fluxo nos períodos de 4, 24 e 48 horas e confirmação da presença proteica por imuno-histoquímica. Os resultados mostraram um aumento na expressão de IDO após a adição de estrógeno (9,03±0,81/11,25±0,25) e interferon-γ (9,03±0,81/20,43±0,60). O efeito do interferon-γ já era esperado como relatado na literatura, contudo, a elevação da expressão da IDO pela adição do estrógeno constitui nova informação sobre possíveis mecanismos envolvidos na ativação da enzima. O melhor esclarecimento desses achados poderia contribuir para uma melhor compreensão da participação dessa enzima na tolerância materno-fetal e para uma futura modulação terapêutica da mesma...

The indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) is an enzyme responsible for catabolizing the tryptophan. Its presence in the placental uterine environment is related to immunological tolerance to the semi-allograft because it prevents proliferation of maternal immune cells, either by the lack of this amino acid or by the action of its catabolites, such as the quinolinic acid, which is particularly toxic for T lymphocytes. Little is known regarding the influence of hormones and cytokines on the expression of IDO in the maternal fetal interface. Therefore, the hypothesis that some hormones and interleukins present in uteroplacental region could have an effect on the expression of IDO on cultured cells was tested. Cells derived from the fetal maternal interface from Wistar rats were kept in culture and supplemented with estradiol and interferon-γ. Expression of the enzyme was assessed by flow cytometry at periods of 4, 24 and 48 hours and confirmation of the presence of protein by immunohistochemistry. The results showed an increasing of IDO expression after the addition of estrogen (9.03±0.81 to 11.25±0.25) and interferon-γ (9.03±0.81 to 20.43±0.60). The effect of interferon-γ was expected as reported in the literature, however, elevated IDO expression by estrogen represents new information on possible mechanisms involved in the enzyme activation. These findings could provide a better understanding of IDO contribution on maternal-fetal tolerance and may collaborate to future therapeutic modulation of this enzyme...

Evaluación del desempeño analítico de tres métodos de cuantificación de hemoglobina A1c / Analytical performance evaluation of three methods for hemoglobin A1c quantification / Avaliação do desempenho analítico do três métodos de quantificação de hemoglobina A1c

El laboratorio debe garantizar la exactitud de los resultados de HbA1c cumpliendo con los requisitos analíticos internacionales de calidad, cada vez más estrictos y asegurar que una variación de HbA1c de 0,5 puntos porcentuales (%-NGSP) o más entre dos controles consecutivos de un paciente diabético se deba a una variación clínica y no a una variación analítica. En este trabajo se evaluó el desempeño analítico de tres métodos comerciales para HbA1c: inmunoturbidimétrico, enzimático y cromatográfico de intercambio catiónico. Para tal fin, se procesaron por cada método distintos controles comerciales de HbA1c, con trazabilidad al método de referencia IFCC, determinándose en cada caso Coeficiente de Variación Total, Bias, Error Total, Valor de Referencia del Cambio y cambio clínico significativo de HbA1c en el punto crítico 7,0%-NGSP. En las condiciones analíticas de este trabajo, solamente el método inmunoturbidimétrico tuvo un desempeño analítico aceptable, permitiendo atribuir un cambio de 0,5%-NGSP a una variación clínica significativa del paciente. Frente a las recomendaciones internacionales sobre el uso de HbA1c en el control y diagnóstico de diabetes, es indiscutible la importancia de elegir un método que satisfaga los requerimientos analíticos mínimos de calidad para asegurar la utilidad clínica del resultado de HbA1c.

The laboratory must guarantee the accuracy of HbA1c results meeting the increasingly strict international analytical quality standards and assuring that an HbA1c variation of 0.5 percentage points (%-NGSP) or more between two consecutive controls of a diabetic patient is due to a clinical variation and not to an analytical variation. In this paper, the analytical performance of three commercial methods for HbA1c: Immunoturbidimetric, Chromatographic and Enzymatic Cation Exchange, were evaluated. For this purpose, commercial controls with assigned values traceable to the IFCC reference method for HbA1c were processed. For each methodology, total Coefficient of Variation (CV%), Bias%, Total Error (TE%), Change Reference Value and Clinically Significant Change (CSC) at the critical point of HbA1c 7.0%-NGSP were determined. Within the analytical conditions of this study, only the immunoturbidimetric method had an acceptable analytical performance, allowing attribute a change in 0.5%-NGSP to a significant clinical variation. Faced with international recommendations on the use of HbA1c on control and diagnosis of diabetes, the importance of choosing a method that meets the minimum analytical quality requirements to ensure the clinical utility of HbA1c result is undeniable.

O laboratório deve garantir a precisão dos resultados da HbA1c cumprindo com os requisitos analíticos internacionais de qualidade cada vez mais exigentes e garantir que uma variação de HbA1c de 0,5 pontos percentuais (% - NGSP) ou mais entre duas verificações consecutivas de um doente diabético seja devido a uma variação clínica e não a uma variação analítica. Neste trabalho foi avaliado o desempenho analítico de três métodos comerciais para HbA1c: imunoturbidimétrico, enzimático e cromatográfico de intercâmbio catiônico. Para esse fim, foram processados diversos controles comerciais de HbA1c por cada método, com rastreabilidade ao método de referência IFCC, determinando em cada caso Quociente de Variação Total, Bias, Erro Total, Valor de Referência da Alteração e Alteração Clinicamente Significativa de HbA1c no ponto crítico 7,0%-NGSP. Nas condições de análise deste estudo, apenas o método imunoturbidimétrico teve um desempenho analítico aceitável, permitindo atribuir uma alteração de 0,5%-NGSP a uma variação clínica significativa do paciente. Perante as recomendações internacionais sobre o uso da HbA1c no controle e diagnóstico da diabetes, é inegável a importância de escolher um método que atenda os requisitos analíticos mínimos de qualidade de análise para garantir a utilidade clínica do resultado HbA1c.

Prevalência de carbapenemases em enterobactérias resistentes a carbapenêmicos em quatro hospitais terciários de Porto Alegre / Prevalence of carbapenemases in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae in four tertiary care hospitals in Porto Alegre

INTRODUÇÃO: A disseminação de Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) no Brasil e a recente detecção de bactérias produtoras de New Delhi metalo-β-lactamase (NDM-1) em hospital terciário do sul do Brasil indicam a necessidade da avaliação da presença destas enzimas em enterobactérias resistentes a carbapenêmicos (ERC).OBJETIVO: Avaliar prevalência de carbapenemases nas ERC em quatro hospitais terciários de Porto Alegre, por meio de PCR multiplex em tempo real. MÉTODOS: Estudo descritivo, período de abril a dezembro de 2013. Isolados bacterianos de pacientes internados foram identificados pelo sistema automatizado VITEK 2, com realização do teste de suscetibilidade aos antimicrobianos. Amostras com isolados de ERC foram encaminhadas ao laboratório de referência para análise por PCR em tempo real para identificação de carbapenemases. RESULTADOS: Total de 701 isolados. As ERC predominantes foram K. pneumoniae (47% das amostras positivas) e Enterobacter cloacae (18%). As carbapenemases mais frequentes foram KPC (48%), OXA-48-like (3%) e NDM (2%). Em 47% das amostras não foi identificado o mecanismo de resistência. Isolados originados de culturas de vigilância foram associados com maior positividade para carbapenemases do que isolados de amostras clínicas (p<0,0001). Isolados de ERC pertencentes ao grupo Proteae (Proteus spp., Morganella spp., Providencia spp.) foram associados a menor positividade para carbapenemase do que isolados de outras ERC (p<0,0001). CONCLUSÃO: KPC foi a carbapenemase mais frequentemente detectada. A circulação de uma enzima OXA-48-like foi demonstrada, um achado novo e preocupante. O achado da carbapenemase NDM também é preocupante devido ao seu potencial de disseminação. Esses dados e outros estudos poderão contribuir para um entendimento maior da epidemiologia das ERC.

BACKGROUND: The spread of Klebsiella pneumoniae carbapenemase (KPC) in Brazil and the recent detection of bacteria producing New Delhi metallo-β-lactamase (NDM-1) in a tertiary care hospital in Porto Alegre indicate the need to evaluate the presence of these enzymes in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE). AIM: To evaluate the prevalence of carbapenemases in CRE in four tertiary care hospitals in Porto Alegre using multiplex real-time PCR.METHODS: Descriptive study from April to December 2013. Bacterial isolates from hospitalized patients were identified by VITEK 2 automated system, with antimicrobial susceptibility testing. Samples with CRE isolates were sent to the reference laboratory for analysis using real-time PCR for identification of carbapenemases. RESULTS: Total of 701 isolates. The predominant CRE were K. pneumoniae (46% of positive samples) and Enterobacter cloacae (18%). The most frequent carbapenemases were KPC (48%), OXA-48-like (3%), and NDM-1 (2%). In 47% of the samples no carbapenemase was identified. Isolates originated from surveillance cultures were associated with higher positivity for carbapenemases than isolates from clinical samples (p<0.0001). CRE isolates belonging to the Proteae group (Proteus spp., Morganella spp., Providencia spp.) were associated with less positivity for carbapanemase than isolates of other CRE (p<0.0001). CONCLUSION: KPC was the most frequently detected carbapenemase. The movement of an OXA-48-like enzyme was demonstrated, a novel and worrisome finding. The finding of carbapenemase NDM is also worrisome due to its dissemination potential. These data and further studies may contribute to a better understanding of the epidemiology of CRE.

Superoxide dismutase 2 as a marker to differentiate tuberculous pleural effusions from malignant pleural effusions

OBJECTIVES: Our previous study demonstrated that superoxide dismutase levels were higher in tuberculous pleural effusions than in malignant pleural effusions, but that this difference could not be used to discriminate between the two. The objective of the present study was to investigate the levels of superoxide dismutase 2 in pleural effusions and to evaluate the diagnostic significance of pleural effusion superoxide dismutase 2. METHODS: Superoxide dismutase 2 concentrations were determined in pleural effusions from 54 patients with tuberculous pleural effusion and 33 with malignant pleural effusion using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kit. Pleural effusion interferon gamma and tumor necrosis factor alpha levels were also analyzed by ELISA. The Mann-Whitney U test was used to evaluate the significance of differences. Associations between superoxide dismutase 2 concentrations and sex, age and smoking habits were assessed using Spearman's or Pearson's correlation coefficient analysis. Receiver operator characteristic analysis was performed to evaluate the value of superoxide dismutase 2 levels in the discrimination of tuberculous pleural effusion from malignant pleural effusion. RESULTS: Superoxide dismutase 2 levels were significantly higher in patients with tuberculous pleural effusion compared with those with malignant pleural effusion ...

Biomarcadores diagnósticos de tuberculose em pleurologia / Diagnostic biomarkers of tuberculosis in pleurologia

Atualmente o diagnóstico de tuberculose pleural pode ser realizado com a dosagem de biomarcadores diagnósticos no líquido pleural, especificamente com a dosagem da enzima adenosina desaminase. Os quadros clínico, laboratorial, imagem e citopatologia sugestivos sempre devem ser valorizados no conjunto do diagnóstico. Tal abordagem elege somente o procedimento de toracocentese como necessário para início do diagnóstico. Na maioria das apresentações clínicas, procedimentos cirúrgicos mais invasivos (biopsias pleurais), com complicações potencialmente fatais, não precisam ser realizados para exame histopatológico

Currently the diagnosis of pleural tuberculosis can be performed with the dosage of diagnostic biomarkers in pleural fluid, specifically the enzyme adenosine deaminase. The clinical, imaging and cytology suggestive should always be valued in the set of diagnosis together laboratory measurements. This approach selects only a thoracentesis procedure for early diagnosis. In most clinical presentations, more invasive surgical procedures (pleural biopsies) with life-threatening complications for histopathological examination

Comparación de los métodos de ELISA e IFI para la detección de la Enfermedad de Chagas en muestras seropositivas del Banco de Sangre del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen en el 2010 / Comparison of ELISA and IFI methods for detection of Chagas disease in seropositive samples of the Blood Bank at the National Hospital Guillermo Almenara Irigoyen in 2010

OBJETIVO: Comparar los métodos de ELISA e IFI para la detección de la Enfermedad de Chagas en muestras seropositivas del Banco de Sangre del Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen en el 2010. MATERIAL y METODOS: Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo en 22,589 donantes de Banco de Sangre del Hospital Guillermo Almenara Irigoyen durante el año 2010, para lo cual se realizó el test de ELISA (Chagas biokit). La muestra de estudio estuvo constituida por el total de donantes reactivos e indeterminados para el ELISA (N=183), a los cuales se les realizó un segundo ensayo, y para los casos no concordantes entre el1er y 2do ELISA se le realizó un tercer ensayo y posteriormente se les realizó inmunofluorescencia indirecta (IFI) para Chagas, Se recolectaron datos sociodemográficos de los donantes como edad, sexo y procedencia. Los datos fueron registrados en una base de datos; y analizada; con el programa Excel para Macintosh. RESULTADOS: Se analizaron 183 casos, 134 eran de sexo masculino (73.2 por ciento). La proporción de donantes reactivos confirmados para enfermedad de Chagas fue de 2.2 por 10,000 en el Hospital Nacional Guillermo Almenara Irigoyen en el año 2010. La edad promedio de los donantes reactivos fue de 35.7 años. El antecedente de donación previa estuvo presente sólo en el 2.2 por ciento. La mayoría de los donantes era procedente de la provincia de Lima (157; 85.5 por ciento). El 87.4 por ciento (160) de los sueros fueron reactivos en el 1er ELISA, 54.6 por ciento (100) en el 2do ELISA, 57.4 por ciento en el resultado final ELISA y sólo el 2.7 por ciento en IFI y el goldstandard. La tasa de concordancia entre el ELISA e IFI fue del 31.1 por ciento (57). Todos los casos confirmados con la prueba goldstandard fueron del sexo masculino, y la edad promedio fue de 27.2 años. Sólo el 5 por ciento de los sueros reactivos para Chagas con la prueba de ELISA fueron realmente reactivos cuando se utilizó el goldstandard...

Concentração de lactato e glicemia em cadelas e neonatos nascidos de cesariana / Lactato concentration in bitch and canine neonates born through cesarean section

Avaliaram-se a concentração de lactato e a glicemia em sete cadelas em trabalho de parto submetidas à cesariana e em seus respectivos neonatos. O lactato materno foi mensurado utilizando-se medidor portátil e pelo método enzimático colorimétrico. Nos neonatos avaliou-se também o peso ao nascimento. Os valores de lactato materno e neonatal foram estatisticamente diferentes, sendo mais elevado nos neonatos. Ao nascimento, as cadelas e os neonatos encontravam-se normoglicêmicos, e não se observou correlação entre a glicemia de ambos. Os valores de lactato obtidos pelo o analisador portátil (3,5±0,6mmol/L) foram mais altos do que os obtidos pelo método enzimático colorimétrico (1,6±0,6mmol/L). Observou-se correlação significativa entre o peso do neonato e a concentração de lactato, isto é, os filhotes de menor peso apresentaram maior concentração de lactato.

This work evaluated the concentration of lactate and blood glucose in seven bitches in labor subject to caesarean section and in their newborns. The lactate concentration was measured using a portable analyzer and enzymatic colorimetric method. In neonates, the birth weight was evaluated. The maternal and neonatal lactate values were statistically different, being higher in newborns. At birth, the bitches and the newborns had normal glucose status, and no correlation was observed between blood glucose in either. The lactate concentration obtained by the portable analyzer (3.5±0.6mmol/L) was higher than that obtained with the enzymatic colorimetric method (1.6±0.6mmol/L). There was significant correlation between the neonate weight and lactate concentration and in puppies with lighter weight there was a higher concentration of lactate.

Análise epidemiológica e emprego do teste rápido da urease em pacientes com úlcera péptica perfurada / Epidemiological analysis and use of rapid urease test in patients with perforated peptic ulcers

OBJETIVO: Analisar o perfil epidemiológico de pacientes com úlcera péptica gastroduodenal perfurada e verificar se a presença do H. pylori nas secreções peritoneais e intraluminais desses pacientes pode ser avaliada pelo teste rápido da urease. MÉTODOS: Realizou-se estudo prospectivo, transversal, descritivo, com dados de pacientes atendidos em um hospital de abrangência regional, em portadores de úlcera péptica perfurada. Coletou-se, no transoperatório, amostras de líquido peritoneal (na proximidade da perfuração) e da secreção intraluminal, sendo encaminhadas para cultura e teste rápido de urease. RESULTADOS: Quatorze pacientes foram analisados. A média etária foi 41,06 anos, todos homens, brancos (71,4%), tabagistas (57,2%), IMC < 30 (85,7%), com história prévia de dispepsia (78,6%). Sorologia para H. pylori foi positiva em 84,6% dos casos. O teste rápido da urease foi positivo em 78,6% das amostras do tubo digestivo e em 42,8% das amostras da cavidade peritoneal; 41,6% foram positivos em ambos os locais, 50% somente na cavidade digestiva e 8,4% exclusivamente na cavidade peritoneal. Dos 11 pacientes com sorologia positiva para H. pylori 100% apresentaram positividade em pelo menos um dos sítios pesquisados. CONCLUSÃO: Verificou-se que a incidência foi menor que a esperada. Há associação significativa entre a infecção pelo H. pylori e a ocorrência de perfuração. A presença deste patógeno pode ser avaliada tanto pela sorologia quanto pela realização do teste rápido da urease do fluido coletado na cavidade peritoneal e na luz gástrica/duodenal.

OBJECTIVE: To analyze the epidemiological profile of patients with gastroduodenal ulcer perforation and verify if the presence of H. pylori in the peritoneal and intraluminal secretions of these patients can be assessed by rapid urease test. METHODS: We conducted a prospective, descriptive, cross-sectional study with data from patients in a hospital at a regional level, in patients with peptic ulcer. During surgery, we collected peritoneal fluid samples (in the vicinity of the perforation) and intraluminal secretion, sending them for culture and rapid urease test. RESULTS: Fourteen patients were analyzed. The average age was 41.06 years, all men, Whites (71.4%), smokers (57.2%), BMI <30 (85.7%), with a history of dyspepsia (78.6%). Serology for H. pylori was positive in 84.6% of cases. The rapid urease test was positive in 78.6% of the samples of the digestive tract and 42.8% of samples from the peritoneal cavity; 41.6% were positive at both sites, 50% only in the digestive cavity and 8.4% only in the peritoneal cavity. Of the 11 patients with positive serology for H. pylori, 100% were positive in at least one of the sites surveyed. CONCLUSION: It was found that the incidence was lower than expected. There is significant association between infection with H. pylori and the occurrence of perforation. The presence of this pathogen can be assessed both by serology and by the realization of the rapid urease test from fluid collected in the peritoneal cavity and the gastric / duodenal lumen.

Thermostability of xylanolytic enzymes produced by Lentinula edodes UFV70

Xylanolytic enzymes produced by Lentinula edodes UFV70, cultivated in eucalyptus sawdust/rice bran medium, were stable at 50, 60 and 65ºC for 21 hours, losing only 15-25% activity. Fungus incubation at 50ºC for 12 hours and at 65ºC for 24 hours increased the amount of xylose produced.