Retos y oportunidades en el estudio de vesículas extracelulares: contexto institucional a nivel mundial y situación actual en Colombia / Challenges and opportunities in the study of extracellular vesicles: Global institutional context and national state of the art

Resumen En la última década se ha incrementado el número de estudios y publicaciones sobre las vesículas extracelulares y los exosomas. En Colombia, ha habido interés y avances en su estudio, lo que se evidencia en el aumento de publicaciones y proyectos de investigación. Sin embargo, este es un campo de investigación aún en desarrollo, con desafíos analíticos y limitaciones técnicas, por lo cual, en el planteamiento de los proyectos de investigación y desarrollo, es necesario considerar cuál es el estado del campo científico a nivel mundial en cuanto a la nomenclatura y la clasificación de las vesículas extracelulares, las técnicas, recursos, requisitos y especificaciones de calidad y las instituciones que regulan el campo. La respuesta a esta pregunta permitirá desarrollar estudios que cumplan con los estándares internacionales, y las exigencias y recomendaciones institucionales. Sin embargo, la información científica disponible se encuentra dispersa y no todos los aspectos son tratados a cabalidad. En este actualización se condensa la información disponible y se presentan los términos oficiales para denominar las vesículas extracelulares y la nomenclatura aceptada actualmente, así como la evolución del campo, la homogenización de los parámetros experimentales, el establecimiento de autoridades científicas, instituciones y recursos, y las recomendaciones que se han generado a nivel mundial para el desarrollo de investigaciones en vesículas extracelulares, incluidos su aislamiento, caracterización y estudio funcional. Por último, se analiza el contexto nacional de una forma crítica, teniendo en cuenta las fortalezas institucionales, los errores usualmente cometidos, y las técnicas y tecnologías analíticas disponibles.

Abstract In the last decade, the number of studies and publications on extracellular vesicles (EV) and exosomes has boomed. Colombia has displayed interest and progress in their study as shown in the increase of research project publications and products. However, this research field is still developing and has its own analytical challenges and technical limitations. For planning research projects and developing EV studies it is necessary to consider what is the state of the scientific field worldwide concerning EV nomenclature and classification, available techniques, resources, requirements and quality specifications, and the institutions that regulate the field. Answering this question will elicit EV studies that comply with international standards and respond to institutional demands and recommendations. However, the scientific information available is scattered and not all the aspects are considered in full. In this update, the available information is condensed and the official terms and currently defined nomenclature is presented, as well as the evolution of the field, the homogenization of the experimental parameters, the establishment of scientific authorities, institutions, and resources, and the recommendations generated worldwide for their development and research including their isolation, characterization, and functional studies. Finally, I analyzed the national context in a critical way, considering institutional strengths, common mistakes, and available analytical techniques and technologies.

Evaluación del desempeño de un analizador POCT con relación a los resultados de los métodos convencionales rutinarios del laboratorio clínico en un hogar de ancianos. Cali. 2014 / Performance evaluation of a POCT analyzer in relation to the results of routine conventional clinical laboratory methods in a nursing home. Cali. 2014

RESUMEN Introducción: Los análisis en el sitio de atención (POCT, por sus siglas en ingles Point-of-care testing) son pruebas de diagnóstico clínico llevadas a cabo fuera de los espacios específicamente diseñados para los análisis clínicos, que proporcionan resultados rápidos que mejoran la oportunidad en la toma de decisiones médicas. En Colombia no hay información sobre su uso y desempeño en grupos etarios específicos como los de los hogares de ancianos en Colombia. Objetivo: Evaluar el desempeño de un analizador POCT para perfil lipídico (CT, LDL-c, HDL-c, TG) y glicemia con relación a los resultados de los métodos convencionales rutinarios del laboratorio clínico en un hogar de ancianos. Materiales y métodos: Estudio descriptivo de corte transversal. Se tomaron 52 residentes a quienes se les tomaron muestras pareadas (punción venosa y digital). Se usó un instrumento estandarizado para la descripción de las características deseadas del POCT. Se aplicó estadística univariada y bivariada. Resultados: La edad promedio de los participantes fue de 78, rango 64-91 años. El POCT mostró un desempeño aceptable frente a los métodos convencionales del laboratorio clínico, especialmente TG y HDL-c. Sin embargo, se observaron diferencias estadísticamente significativas en los resultados de glicemia, CT y LDL-c entregados por el POCT en comparación con los del laboratorio clínico. Conclusiones: La POCT puede ser una opción importante para tamizaje y control de enfermedades crónicas en hogares de ancianos. Sin embargo, es necesario una estructura organizacional que garantice la calidad de las mediciones del POCT. MÉD.UIS.2021;34(2): 9-18.

ABSTRACT Introduction: Point-of-care testing (POCT) are clinical diagnostic tests carried out than laboratory analysts, outside of spaces specifically designed for clinical analysis, and they provide quick results that improve the timeliness of medical decision making. In Colombia there is no information on its use and performance in specific age groups such as those in nursing homes. Objective: To evaluate the performance of a POCT analyzer for lipid profile (CT, LDL-c, HDL-c, TG) and glycemia in relation to the results of routine conventional methods of the clinical laboratory in a nursing home. Materials and methods: Descriptive cross-sectional. 52 residents were taken to whom paired samples were applied. Glucose and lipid levels were determined. Samples collected by fingerstick were analyzed by POCT and venipuncture by conventional methods certified by the CDC in the laboratory. A standardized instrument was used to describe the desired characteristics of the POCT. Univariate and bivariate statistics were applied. The results issued by the clinical reference laboratory were compared with those of the POCT through the ICC. Results: The average age of the participants was 78, range 64-91 years. The POCT showed an acceptable performance compared to conventional clinical laboratory methods, especially TG and HDL-c. However, statistically significant differences were observed in the results of glycemia, CT and LDL-c delivered by the POCT compared to those of the clinical laboratory. Conclusions: POCT can be an important option for chronic disease screening and management in nursing homes. However, an organizational structure is necessary to ensure the quality of the POCT measurements. MÉD.UIS.2021;34(2): 9-18.

Praxis Bioanalítica desde la matriz epistemológica vigente en el contexto de la Salud Pública / Bioanalytic practice from the epistemological matrix in force in the context of Public Health

Con el propósito de caracterizar la praxis Bioanalítica desde la matriz epistemológica vigente, la investigación se realizó bajo el Enfoque Integrador Transcomplejo. Para el abordaje de la problemática de estudio se empleó la complementariedad metódica. El grupo humano quedó constituido por cinco docentes Bioanalistas, a los que se le realizó una entrevista focalizada y en profundidad. Entre los hallazgos se evidenció que la praxis bioanalítica fue modelada desde la modernidad como un ejercicio mecanicista, repetitivo, desarticulado de lo social y lo humano. La modernidad es reproducida en las universidades mediante una formación vertical, donde no se articula lo biológico con lo social, con lo histórico o lo cultural; ya que la malla curricular está definida por un grupo de asignaturas cargados de contenidos procedimentales, impartidos a partir de objetivos de forma aislada, que centra la atención en la enfermedad y concibe su praxis desde roles y tareas, dándole mayor énfasis al rol de analista. Desde esta perspectiva, se niega los aportes dados por la epistemología, la historia, lo sociología, antropología y la educación al saber Bioanalítico, quedando limitado su impacto en la Salud Pública. Para redimensionar la concepción social del Bioanálisis y su praxis es necesario que se asuman nuevos paradigmas y nuevas metodologías y la Transcomplejidad constituye una opción para dar respuesta a esta demanda.

In purpose to characterize the Bioanalytical praxis from the current epistemological matrix, the research was carried out under the TranscomplexIntegrative Approach. Methodical complementarity was used to address the study problem. The human group was made up of five Bioanalyst teachers, who were given a focused and in-depth interview. Among the findings, it was evident that bioanalytic praxis was modeled since modernity as a mechanistic, repetitive, disjointed exercise of the social and the human. Modernity is reproduced in universities through vertical training, where the biological is not articulated with the social, with the historical or the cultural; since the curricular mesh is defined by a group of subjects loaded with procedural content, taught from objectives in isolation, which focuses attention on the disease and conceives its praxis from roles and tasks, giving greater emphasis to the role of analyst. From this perspective, the contributions given by epistemology, history, sociology, anthropology and education to Bioanalytical knowledge are denied, leaving their impact on Public Health limited. To resize the social conception of Bioanalysis and its praxis, it is necessary to assume new paradigms and new methodologies and Transcomplexity constitutes an option to respond to this demand.

Seno preauricular, diferentes tecnicas quirúrgicas / Preauriculares Sinus, different surgical techniques

El seno preauricular es una malformación congénita que se presenta como un pequeño orificio en el oído externo, usualmente cercano al borde anterior de la rama ascendente del hélix. La mayoría son asintomáticos y no requieren tratamiento, sin embargo, una vez infectados se vuelven inflamaciones dolorosas, con secreción fétida que presentan exacerbaciones agudas recurrentes. Objetivo: brindar información actualizada sobre las ventajas de las diferentes técnicas quirúrgicas utilizadas para resolver en forma adecuada este problema congénito. Material y Métodos : el presente estudio se realizó mediante una búsqueda comprensiva de artículos con menos de 10 años de publicación en las bases de datos de MEDLINE/PubMed, Google Académico e HINARI. Se seleccionaron un total de 20 artículos, en español e inglés, entre ellos trabajos originales y metanálisis sobre el tema. Conclusión : la técnica suprauricular ha demostrado, en términos estadísticos, una tasa de recurrencia menor que la técnica clásica de sinectomía...(AU)

Análise química laboratorial da superfície de implantes após contato com pinça de titânio através do EDS ­ estudo-piloto / Chemical analysis (EDS) of dental implant surface after contact with titanium tweezers ­ a pilot study

Objetivo: analisar a composição química da superfície de três implantes antes e depois de manter contato com pinça de titânio, e verificar se níveis importantes de elementos químicos contaminantes foram adsorvidos aos implantes. Material e métodos: através de MEV (microscópio eletrônico de varredura) e EDS (espectrometria de energia dispersiva), as superfícies dos implantes foram caracterizadas quimicamente antes e após o contato com pinça de titânio utilizada rotineiramente em uma clínica odontológica. Resultados: houve presença de titânio com 99,51% de média nas superfícies antes do contato com pinça de titânio, e 99,43% de média de titânio após o contato com pinça de titânio. Elementos como ferro, silício, cloro e alumínio foram encontrados em concentrações menores do que 0,55%, tanto antes quanto depois da manipulação com a pinça. Conclusão: não houve contaminação química detectável pela metodologia empregada neste estudo da superfície dos implantes após o contato com a pinça de titânio, porém, uma amostra mais significativa e o emprego de critérios que possam definir com mais precisão as áreas de análise parecem ser necessários para resultados ainda mais consistentes.

Objective: to analyze the chemical composition surface of three implants before and after titanium tweezers contact and check whether important levels of contaminants chemical elements were adsorbed to the implants. Material and methods: through SEM (scanning electron microscope) and EDS (energy dispersive spectroscopy) the implants surfaces were characterized chemically before and after contact with titanium tweezers frequently used in dental clinic. Results: the surfaces before contact with the titanium tweezers showed the presence of titanium 99.51% average and 99.43% average of titanium after contact with the titanium clamp. Elements such as iron, silicon, chlorine and aluminum have been found in lower concentrations than 0.55%, both before and after handling with forceps. Conclusion: therefore, no chemical contamination was detected by the method used in this study of the implant surface after contact with titanium tweezers, however, a more signifi cant sample and the use of criteria that can defi ne more precisely the areas of analysis, appear to be required for further consistent results.

Metodologias de análise da composição química da superfície dos implantes / Investigational methods for chemical analysis of dental implant surfaces

Os trabalhos disponíveis na literatura apresentam resultados divergentes da análise da composição química da superfície dos implantes comerciais, por empregarem diferentes técnicas. Considerando que esta propriedade influencia na osseointegração, os cirurgiões-dentistas precisam ter confiança nas informações obtidas na literatura e nas fornecidas pelos fabricantes. Quando a análise da superfície é feita de modo correto, é possível identificar diferenças positivas e negativas na composição química entre os implantes comerciais. O objetivo do presente trabalho foi apresentar resultados das análises da composição química da superfície de implantes comerciais produzidos no Brasil e importados, e sugerir procedimentos para estas análises. Os resultados mostraram que os implantes jateados são os que possuem maior probabilidade de terem contaminantes na superfície, e a análise da composição química usando EDS (energy dispersive x-ray spectroscopy) é a técnica que apresenta menor confiabilidade.

Published papers have shown divergent results regarding the chemical composition of commercially available dental implant surfaces due to different analytical techniques. Considering that this can infl uence the osseointegration process, dental practitioners need to be confi dent on literature and fabricant information. When surface analysis is correctly employed, it is possible to identify positive and negative aspects on several chemical characteristics. The aim of this paper is to present the outcomes of national and international dental implant surfaces and to suggest procedures accordingly. It was demonstrated that sandblasted surfaces are more prone to have contaminants, and that energy dispersive X-ray spectroscopy (EDS) is the technique presenting low reliability levels.

Evaluation of methods for the quantification of ether extract contents in forage and cattle feces

ABSTRACT The objective of this study was to compare the estimates of ether extract (EE) contents obtained by the Randall method and by the high-temperature method of the American Oil Chemist's Society (AOCS; Am 5-04) in forages (n = 20) and cattle feces (n = 15). The EE contents were quantified by using the Randall extraction or AOCS method and XT4 filter bags or cartridges made of qualitative filter paper (80 g/m²) as containers for the samples. It was also evaluated the loss of particles, and concentration of residual chlorophyll after extraction and the recovery of protein and minerals in the material subjected to extraction. Significant interaction was observed between extraction method and material for EE contents. The EE estimates using the AOCS method were higher, mainly in forages. No loss of particles was observed with different containers. The chlorophyll contents in the residues of cattle feces were not affected by the extraction method; however, residual chlorophyll was lower using the AOCS method in forages. There was complete recovery of the protein and ash after extraction. The results suggest that AOCS method produces higher estimates of EE contents in forages and cattle feces, possibly by providing greater extraction of non-fatty EE.

Especificaciones de calidad en base a error total: ¿Cuál es la mejor elección? / Quality specifications based on total error: What's the best choice? / Especificações de qualidade com base em erro total: Qual é a melhor escolha?

El objetivo del trabajo fue evaluar el desempeño anual de los métodos, en términos de error total (ET), las distintas especificaciones de calidad disponibles y el modelo Seis Sigma para calificar desempeño. Se evaluaron analitos con variabilidad biológica (VB), muy baja, baja, media y alta. Se calculó el ET (ETc) y el sigma (s) mensual a dos niveles de control; el ET permitido (ETp) para cada analito se obtuvo de 8 fuentes (metas biológicas y regulatorias). Se consideró desempeño aceptable cuando ETc

The aim of this work was to evaluate the annual performance of the methods in terms of total error (TE), the different quality specifications available, and the Six Sigma model to qualify performance. Analytes with very low, low, medium and high biological variability (BV) were evaluated. TE (TEc) and sigma (s) were calculated monthly at two levels of control; allowable TE (TEa) for each analyte was obtained from 8 sources (biological and regulatory goals). Acceptable performance was considered when TEc

O objetivo do trabalho foi avaliar o desempenho anual dos métodos em termos de erro total (ET), as diferentes especificações de qualidade disponíveis e o modelo Seis Sigma para qualificar desempenho. Foram avaliados analitos com variabilidade biológica (VB) muito baixa, baixa, média e alta. Calculou-se ET (ETc) e o sigma (s) mensal a dois níveis de controle; o ET permitido (ETp) para cada analito foi obtido de 8 fontes (metas biológicas e regulatórias). Levou-se em consideração o desempenho aceitável quando ETc < ETp e s≥3. Foi observada a estabilidade analítica durante o período de avaliação. Não foram alcançadas as metas biológicas para analitos com VB muito baixa, algo semelhante aconteceu para analitos com VB baixa e média; com VB alta alcançaram todas as especificações. O desempenho s e a regra de controle de Westgard dependeram do ETp escolhido; para magnésio, com CLIA (ETp=25%) se obteve s >10 (World Class) e simples regra (13s), com VB mínima s <3 e multirregra. Conclui-se que a aceitação do desemperno do método e as regras de controle dependeram do ETp escolhido, sem disporem nesse meio de metas mínimas a alcançar. O monitoramento mensal do ETc mostrou a estabilidade analítica com variabilidade típica de cada método.

Antioxidant activity of bioactive extracts obtained from rhizomes of Cyperus digitatus Roxb / Actividad antioxidante de extractos obtenidos a partir de rizomas de Cyperus digitatus Roxb

Members of the family Cyperaceae such as Cyperus alopecuroides, Cyperus articulatus, Cyperus scariosus and Cyperus rotundus possess significant amount of studies about their antioxidant activities and other properties. Nevertheless, the plant Cyperus digitatus belonging to the genus Cyperus lacks of studied about any kind of intrinsic activity. Different extracts and fractions were obtained from the rhizomes of Cyperus digitatus, and a Phytochemical screening and the content of phenols and flavonoids and the antioxidant properties (FRAP, DPPH and beta-Carotene bleaching) were quantified in each of theextracts and fractions. Of all the extracts obtained, the BE and AqE extracts showed the best antioxidant potential, meanwhile, none of the fractions obtained from the EAE extract show a relevant activity.

Los miembros de la familia Cyperaceae, tales como Cyperus alopecuroides, Cyperus articulatus, Cyperus scariosus y Cyperus rotundus poseen una cantidad significativa de estudios sobre sus actividades antioxidantes y otras propiedades. Sin embargo, la planta Cyperus digitatus perteneciente al género Cyperus carece de estudio de cualquier tipo de actividad intrínseca. Razón por la cual se estudió sus propiedades antioxidantes (FRAP, DPPH y blanqueamiento del beta-caroteno), cuantificación de contenido fenolico y flavonoides totales en extractos y fracciones obtenidos de los rizomas de Cyperus digitatus, y un perfil fitoquímico. De todos los extractos obtenidos, BE y AqE mostraron el mejor potencial antioxidante, por otra parte ninguna de las fracciones obtenidas a partir del extracto EAE mostro una actividad relevante.

Evaluación del desempeño analítico de tres métodos de cuantificación de hemoglobina A1c / Analytical performance evaluation of three methods for hemoglobin A1c quantification / Avaliação do desempenho analítico do três métodos de quantificação de hemoglobina A1c

El laboratorio debe garantizar la exactitud de los resultados de HbA1c cumpliendo con los requisitos analíticos internacionales de calidad, cada vez más estrictos y asegurar que una variación de HbA1c de 0,5 puntos porcentuales (%-NGSP) o más entre dos controles consecutivos de un paciente diabético se deba a una variación clínica y no a una variación analítica. En este trabajo se evaluó el desempeño analítico de tres métodos comerciales para HbA1c: inmunoturbidimétrico, enzimático y cromatográfico de intercambio catiónico. Para tal fin, se procesaron por cada método distintos controles comerciales de HbA1c, con trazabilidad al método de referencia IFCC, determinándose en cada caso Coeficiente de Variación Total, Bias, Error Total, Valor de Referencia del Cambio y cambio clínico significativo de HbA1c en el punto crítico 7,0%-NGSP. En las condiciones analíticas de este trabajo, solamente el método inmunoturbidimétrico tuvo un desempeño analítico aceptable, permitiendo atribuir un cambio de 0,5%-NGSP a una variación clínica significativa del paciente. Frente a las recomendaciones internacionales sobre el uso de HbA1c en el control y diagnóstico de diabetes, es indiscutible la importancia de elegir un método que satisfaga los requerimientos analíticos mínimos de calidad para asegurar la utilidad clínica del resultado de HbA1c.

The laboratory must guarantee the accuracy of HbA1c results meeting the increasingly strict international analytical quality standards and assuring that an HbA1c variation of 0.5 percentage points (%-NGSP) or more between two consecutive controls of a diabetic patient is due to a clinical variation and not to an analytical variation. In this paper, the analytical performance of three commercial methods for HbA1c: Immunoturbidimetric, Chromatographic and Enzymatic Cation Exchange, were evaluated. For this purpose, commercial controls with assigned values traceable to the IFCC reference method for HbA1c were processed. For each methodology, total Coefficient of Variation (CV%), Bias%, Total Error (TE%), Change Reference Value and Clinically Significant Change (CSC) at the critical point of HbA1c 7.0%-NGSP were determined. Within the analytical conditions of this study, only the immunoturbidimetric method had an acceptable analytical performance, allowing attribute a change in 0.5%-NGSP to a significant clinical variation. Faced with international recommendations on the use of HbA1c on control and diagnosis of diabetes, the importance of choosing a method that meets the minimum analytical quality requirements to ensure the clinical utility of HbA1c result is undeniable.

O laboratório deve garantir a precisão dos resultados da HbA1c cumprindo com os requisitos analíticos internacionais de qualidade cada vez mais exigentes e garantir que uma variação de HbA1c de 0,5 pontos percentuais (% - NGSP) ou mais entre duas verificações consecutivas de um doente diabético seja devido a uma variação clínica e não a uma variação analítica. Neste trabalho foi avaliado o desempenho analítico de três métodos comerciais para HbA1c: imunoturbidimétrico, enzimático e cromatográfico de intercâmbio catiônico. Para esse fim, foram processados diversos controles comerciais de HbA1c por cada método, com rastreabilidade ao método de referência IFCC, determinando em cada caso Quociente de Variação Total, Bias, Erro Total, Valor de Referência da Alteração e Alteração Clinicamente Significativa de HbA1c no ponto crítico 7,0%-NGSP. Nas condições de análise deste estudo, apenas o método imunoturbidimétrico teve um desempenho analítico aceitável, permitindo atribuir uma alteração de 0,5%-NGSP a uma variação clínica significativa do paciente. Perante as recomendações internacionais sobre o uso da HbA1c no controle e diagnóstico da diabetes, é inegável a importância de escolher um método que atenda os requisitos analíticos mínimos de qualidade de análise para garantir a utilidade clínica do resultado HbA1c.

Assessment of analytical techniques for characterization of crystalline clopidogrel forms in patent applications

The aim of this study was to evaluate two important aspects of patent applications of crystalline forms of drugs: (i) the physicochemical characterization of the crystalline forms; and (ii) the procedure for preparing crystals of the blockbuster drug clopidogrel. To this end, searches were conducted using online patent databases. The results showed that: (i) the majority of patent applications for clopidogrel crystalline forms failed to comply with proposed Brazilian Patent Office guidelines. This was primarily due to insufficient number of analytical techniques evaluating the crystalline phase. In addition, some patent applications lacked assessment of chemical/crystallography purity; (ii) use of more than two analytical techniques is important; and (iii) the crystallization procedure for clopidogrel bisulfate form II were irreproducible based on the procedure given in the patent application.

Este trabalho tem como objetivo avaliar dois aspectos importantes em um pedido de patente de formas cristalinas de fármacos: (i) caracterização físico-química das formas cristalinas e (ii)o procedimento de preparo da forma II do fármaco clopidogrel, um blockbuster de vendas. Realizaram-se buscas em bancos de dados patentários on line. Os resultados mostraram que (i) a maioria dos pedidos de patente de formas cristalinas do clopidogrel não se adequam com proposta do INPI devido ao número insuficiente de técnicas analíticas utilizadas na caracterização da fase cristalina. Ainda, em alguns pedidos de patente não há a presença da avaliação da pureza química/cristalográfica; (ii) a importância de se utilizar mais de duas técnicas de avaliação e (iii) que não foi possível a reprodução da cristalização com o procedimento apresentado no pedido de patente.

Nanochips y nanosensores para eldiagnóstico temprano de cáncer oral: una revisión / Nanochips and nanosensors for harly oral cancer diagnosis: a review

Antecedentes: El cáncer oral es una de las enfermedades más agresivas y con mayor probabilidadde metástasis; en estadios iniciales es generalmente indetectable y de baja consulta,por lo que se dificulta realizar un tratamiento conservador. Existen diversas técnicas delaboratorio con base en microscopía (como inmunofluorescencia), inmunohistoquímica yotras que facilitan el diagnóstico temprano de la enfermedad. Adicionalmente, los avancesen nanomedicina brindan nuevas herramientas de detección a partir de cambios moleculares(biomarcadores) que presentan las células en proceso de malignización. Objetivo:Describir las características clínicas y moleculares de lesiones premalignas y cáncer oral ylos métodos de diagnóstico usando nanotecnología (nanochips, nanosensores, etc.), comoun método eficaz para la detección temprana del cáncer. Método: Se buscó literatura sobrenanotecnología y diagnóstico de cáncer oral en bases de datos como Science Direct yPubMed; la información de cada uno de los artículos se sintetizó con resúmenes individualespor los investigadores, se agrupó y redactó. Resultados: Se seleccionaron 46 artículos que,de acuerdo con su contenido, se agruparon según su temática principal; toda la informaciónse relacionó en una tabla por subtemas en Excel® 2007. Conclusiones: La literatura revisadasugiere que las herramientas nanotecnológicas pueden ser una alternativa útil y rápida,aunque por el momento costosa, para la detección puntual de biomarcadores presentes enestadios iniciales del cáncer oral. Cabe mencionar que su aplicación clínica en países comoColombia es limitada por factores como insuficientes recursos asignados a la investigacióny poca investigación en esta temática...

Background: Oral cancer is one of the most aggressive diseases with a high likelihood ofmetastases; it is undetectable during initial stages with low medical visits, making it difficultto provide conservative treatment. Several techniques such as microscopy (using for instanceimmunofluorescence) and immunohistochemistry make early diagnosis and cancerdetection easier. In addition, advances in nanomedicine offer new tools to detect molecularchanges (biological markers/biomarkers) in cells during a malignant process. Purpose:Describe molecular and clinic characteristics of premalignant lesions and oral cancer, aswell as techniques involving nanotechnology (lab-on-a-chip devices, nanosensors, etc.) aseffective methods for early cancer diagnosis. Methods: A literature review on nanotechnologyand oral cancer using databases such as Science Direct and PubMed was carried out;data from each article were summarized, grouped, and described. Results: 46 articles wereselected and grouped according to their main topic; data were compiled in an Excel 2007spreadsheet. Conclusions: The literature reviewed suggests that tools using nanotechnologycan be a useful and a quick alternative, though expensive, to detect specific biomarkers thatare present in early stages of oral cancer. It is important to point out that their clinical usein countries like Colombia is still limited by factors like the lack of resources allocated forresearch and the little research carried out on this subject...

Determinación sérica de cobre, cinc y relación sérica CU/ZN en pacientes con artritis reumatoide / Determination serum copper, zinc and serum ratio Cu / Zn in patients with rheumatoid arthritis

El presente estudio tiene por objetivo comparar los niveles séricos de cobre (Cu), cinc (Zn) y el cociente molar Cu/Zn en 129 pacientes con artritis reumatoide (RA), en 94 individuos sanos como grupo control (GC) y 21 pacientes con enfermedades reumáticas no artríticas (NER), como la fibromialgia, espondilitis anquilosante entre otras. Las concentraciones séricas de Cu y Zn fueron analizadas por espectroscopía de absorción atómica en llama acoplada a un sistema de inyección en flujo continuo (EAA/FIA). Los resultados muestran un incremento significativo (p<0,05), del cobre sérico en los pacientes con AR en comparación con los otros grupos (NER y GC), este aumento fue directamente proporcional a la actividad inflamatoria de la enfermedad. El nivel medio de cinc sérico mostró una disminución progresiva. Asimismo, el detrimento sérico del cinc está relacionado con la evolución de la enfermedad o la pérdida de capacidad funcional del paciente con los niveles alterados de cobre observados en pacientes con AR activo y en etapa temprana de la enfermedad (p<0,05). Los cocientes molares de Cu/Zn fueron de 1,88; 1,14 y 1,18 para la AR, GC, y NER, respectivamente, demostrando que su modificación es más notoria que evaluar cada oligoelemento por separado. Estos hallazgos sugieren que existe una redistribución tanto del cobre como del cinc en muchos compartimientos del cuerpo, como respuesta inflamatoria. Por lo que niveles séricos de Cu, Zn y Cu/Zn molar puede ser un criterio valioso para la evaluación clínica y posiblemente, para el estudio y seguimiento de los pacientes con AR.

The aim of this study was to measure the serum levels of copper (Cu) and zinc (Zn) in 129 patients with rheumatoid arthritis (RA), in 94 healthy subjects (HS) and in 21 patients with non-rheumatic diseases (NRD) such as osteoarthritis, fibromyalgia, and ankylosing spondylitis. Serum concentrations of Cu and Zn were measured by flow injection analysis/flame atomic absorption spectroscopy (FIA/FAAS). The Cu/Zn molar ratio in serum also was evaluated in these patients. The result shown that the average concentration of serum copper in patients with RA was significantly increased (p <0.05), on comparing with other patients. This increase was directly proportional to staging or disease progression while zinc concentration was significantly lower in patients with RA, but no differences were found between the stages of the disease. The values of Cu/Zn ratio were 1.88, 1.14 and 1.18, for AR, HS, and NRD patients, respectively. In conclusion, in patients with RA serum copper tend to increase and serum Zn tend to decrease and Cu/Zn molar ratio increases significantly (p<0.05). In conclusion, our results suggest that serum Cu, Zn and Cu/Zn molar ratio could be valuable criteria for clinical evaluation and possibly follow-up study of patients with RA.

Caracterização analítica de sucos e néctares de laranja adoçados com sacarose e edulcorantes / Analytical characterization of orange juices and nectars sweetened with sucrose and sweet flavoring agents

Objetivo: Caracterizar físico-quimicamente, sucos não adoçados e néctares de laranja adoçados com sacarose ou edulcorantes, quanto ao seu pH, acidez titulável (AT) e teor de sólidos solúveis totais (SST) e avaliar a correlação desta última propriedade com as demais. Método: Analisaram-se alíquotas de três lotes de dois sucos de laranja e de dois néctares com adição de sacarose ou dois com edulcorantes. Água mineral foi empregada como controle. O teor de SST foi determinado em refratômetro de Abbé. O pH foi registrado em peagômetro digital, enquanto a AT foi quantificada titulando-se amostras das bebidas com NaOH 0,1 M até o alcance dos pHs 5,5 e 7,0. Os dados foram submetidos ao teste de correlação de Pearson, análise de regressão, análise de variância e teste de Tukey (alfa = 0,05). Resultados: Os teores de SST apresentaram forte correlação com a AT, sendo a relação entre elas do tipo quadrática. Embora os valores de pH não sejam dependentes da presença de sacarose ou edulcorantes, se as bebidas são isentas dos mesmos, significativamente maior quantidade de base foi necessária para que se atingissem os pHs 5,5 e 7,0. Conclusão: Sucos e néctares de laranja apresentaram valores semelhantes de pH, os quais não se correlacionaram com a presença de sacarose ou edulcorantes nas bebidas. A acidez titulável foi maior para o suco e menor para os néctares, independentemente do fato de possuírem sacarose ou edulcorantes em sua composição. A elevação do teor de sólidos solúveis totais não implicou em redução da acidez titulável das bebidas.

Objective: To characterize physically and chemically, non-sweetened orange juices and orange nectars sweetened with sucrose or sweet flavoring agents, with respect to their pH, titratable acidity (TA) and total soluble solids content (TSSC), as well as to evaluate the correlation of the latter property with the others. Method: Aliquots of three lots of two orange juices and two orange nectars containing sucrose and two containing sweet flavoring agents were evaluated. Mineral water was used as a control. The TSSC was determined using an Abbe refractometer. The pH was recorded using a digital pH meter, while TA was quantified by titrating samples of the beverages with 0.1 M NaOH until reaching pHs 5.5 and 7.0. Data were subjected to Pearson's correlation test, regression analysis, analysis of variance and Tukey's test (alpha=0.05). Results: TSSC values presented a strong correlation with TA, and these properties exhibited a quadratic relationship. Although the pH values were not dependent on the presence of sucrose or sweet flavoring agents, a significantly greater amount of base was necessary to reach pHs 5.5 and 7.0 in the beverages without sucrose or flavoring agents. Conclusion: Orange juices and nectars presented similar pH values, which was not associated with the presence of sucrose or sweet flavoring agents in the beverages. Higher TA values were obtained for the juice and lower for the nectars, regardless of containing sucrose or sweet flavoring agents. The increase of TSSC did not implicate in decrease of TA in the beverages.

Impacto de la medición de creatinina en la estimación de la velocidad de filtración glomerular / Impact of creatinine measurement on glomerular filtration rate estimation / Impacto da medição de creatinina na estimativa da velocidade de filtração glomerular

Con el objeto de detectar precozmente la enfermedad renal crónica, muchas sociedades científicas han recomendado incorporar a los informes de laboratorio la velocidad de filtración glomerular (VFG) estimada por fórmulas asociadas a creatinina plasmática (Cr) como marcador de función renal. Frente a la variedad de metodologías disponibles en Argentina, los bioquímicos se encuentran frente al dilema de la elección del método a utilizar para cuantificar Cr. El objetivo de este trabajo es analizar si la VFG estimada por fórmulas a partir de Cr dosadas por diferentes métodos son comparables. Si bien no se observaron diferencias estadísticamente significativas entre las Cr cuantificadas por los métodos Jaffé cinético (JC), Jaffé cinético con compensación (JCCC) y enzimático (ENZ), no se obtuvo una correlación adecuada entre los mismos. Se observó que el método de Jaffé cinético sin compensación arrojó resultados de creatinina sérica, que al trasladarse a ecuaciones que determinan la VFG, dejaron un margen de error inaceptable (circunstancia que no se obser­vó de igual forma en el JCCC). Se concluye que la VFG estimada por fórmulas a partir de Cr dosadas por los métodos JC y JCCC, tomando como referencia el método enzimático, no son comparables.

In order to do early detection of chronic renal disease, many scientific societies have recommended to report a GFR estimate usinga prediction equation associated with serum creatinine measurement, as a marker of renal function. Faced with the wide variety of available creatinine measurement, as a marker of renal function. Faced with the wide variety of available creatinine methodologies in this country, professionals have a dilemma: the choice of which method must be used to quantify creatinine. The purpose of this study is to analyze whether the estimates of GFR usingcreatinine measures by different methods are comparable. Although no statistically significant differences between Cr quantified by Kinetic Jaffe method (JC), compensated kinetic Jaffe (JCCC) and enzymatic (ENZ) were observed, no good correlation was obtained between them. It was observed that the kinetic Jaffe method without compensation showed results that, beingincorporated in equations that determine the GFR, left an unacceptable margin of error (a circumstance that was not observed in the JCCC). Conclusion: GFRestimated with formulas usingcreatinine measured by JC and JCCC compared to ENZ are not comparable.

Visando detectar precocemente a doençã renal crônica, muitas sociedades científicas têm recomendado incorporar aos relatórios de laboratório a velocidade de filtração glomerular (VFG) estimada por fórmulas associadas a creatinina plasmática (Cr) como marcador de função renal. Frente à variedade de metodologias disponíveis na Argentina, os bioquímicos se encontram frente ao dilema da seleção do método a utilizar para quantificar Cr. O objetivo deste trabalho é analisar se a VFGestimada por fórmulas a partir de Cr dosadas por diferentes métodos são comparáveis. Embora não se observassem diferenças estatisticamente significativas entre as Cr quantificadas pelos métodos Jaffé cinético (JC), Jaffé cinético com compensação (JCCC) e enzimático (ENZ), não foi obtida uma correlação adequada entre os mesmos. Observouse que o método de Jaffe cinético sem compensação deuresultados de creatinina sérica, que ao se trasladarem para equações que determinam a VFG, deixaram uma margem de erro inaceitável (circunstância que não se observoude igual forma no JCCC). Conclusão: a VFGestimada por fórmulas a partir de Cr dosadas pelos métodos JC e JCCC, tomando como referência o método enzimático, não são comparáveis.

Intervalos de referencia de determinaciones bioquímicas en el laboratorio central del Hospital de Trelew / Reference intervals of biochemical determinations in the central laboratory in Trelew Hospital / Intervalos de referencia de determinagóes bioquímicas no laboratorio central do Hospital de Trelew

El objetivo del presente trabajo fue establecer los intervalos de referencia de las determinaciones: glucosa, urea, colesterol, proteínas totales, albúmina, ácido úrico, creatinina, hematocrito y hemoglobina en el Laboratorio Central del Hospital Zonal de Trelew. La población bajo estudio fueron pacientes mayores de 18 años atendidos por consultorio externo entre diciembre de 2008 y marzo de 2009. El estudio fue completado entre marzo y abril de 2011. Las determinaciones se realizaron con un autoanalizador de química clínica Metrolab 2300 plus y un contador hematológico Sysmex 2100. Se comprobó que los valores de las determinaciones se ajustaran a una distribución normal y se realizó el cálculo de los fractiles 0,025 y 0,975 para la obtención del intervalo de referencia (IR) del 95%. En un caso se utilizó transformación logarítmica de los datos y para dos categorías se aplicó el método no paramétrico. Para los valores de referencia inferior y superior se establecieron los intervalos con un 90% de confianza (IC). Los valores de referencia obtenidos fueron: glucosa de 0,74 a 1,07 g/L, urea de 0,19 a 0,51 g/L, colesterol de 1,21 a 2,43 g/L, proteínas totales de 6,45 a 7,99 g/dL, albúmina de 3,62 a 4,61 g/dL, creatinina de 0,57 a 1,10 mg/dL, ácido úrico para el sexo femenino de 18,69 a 51,93 mg/L y para el sexo masculino de 30,50 a 62,92 mg/L, hematocrito para sexo femenino de 37 a 45% y para el sexo masculino de 40 a 50%, hemoglobina para el sexo femenino de 11,70 a 15,17 g/dL y para el sexo masculino de 13,09 a 17,19 g/dL. Los valores de ácido úrico, hematocrito y hemoglobina se separaron por sexo para dar continuidad a la política del laboratorio y de los fabricantes de CAICYTtivos, que consiste en considerar las diferencias existentes entre ambos sexos. Dentro del rango dado por el fabricante se obtuvieron los resultados para glucosa, albúmina y hemoglobina; sobre el mismo, para urea, colesterol, proteínas y ácido úrico y por debajo del mismo para creatinina.

The aim of the present work was to establish the reference intervals of the following determinations, glucose, urea, cholesterol, total proteins, albumin, uric acid, creatinine, hematocrite and hemoglobin in the Central Laboratory of Trelew Zonal Hospital. The population under study was defined as 18-year-old or older patients that came to the laboratory from the ambulatory consulting room since December 2008 to March 2009, and then between March and April 2011. Blood samples were processed with a Metrolab 2300 plus clinical chemistry autoanalyser and a Sysmex 2100 hematological counter. After checking if the result distribution applied to a normal distribution, fractiles 0.025 and 0.975 were calculated to obtain a 95% Reference Interval (RI). In one case, a logarithmic transformation of the results was needed and for two categories a non-parametric method was used. For the upper and lower reference values, the intervals were calculated at 90% confidence (CI) The reference values obtained were; 0.74-1.07 g/L glucose, 0.19-0.51 g/L urea, 1.21-2.43 g/L cholesterol, 6.45-7.99g/dL total proteins, 3.62-4.61 g/dL albumin and 0.57-1.10 mg/dL creatinine, 18.69 - 51.93 mg/L uric acid in women, and 30.50 - 69.92 mg/L in men; 37 - 45% hematocrite in women and 40 - 50% in men; 11.70 - 15.17 g/dL hemoglobin in women and 13.09 - 17.19 g/dL hemoglobin in men. Uric acid, hematocrite and hemoglobin values were calculated according to sex in order to offer concordance with commercial kit and the laboratory policies which consist in considering the significant differences between both sexes. The results obtained for glucose, albumin and hemoglobin were within the reference interval given by the commercial kits; urea, cholesterol, total protein and uric acid were above it; and creatinine reference interval was lower than the reference interval from the commercial kits.

O objetivo do presente trabalho foi estabelecer os intervalos de referencia das determinagóes: glicose, ureia, colesterol, proteínas totais, albumina, ácido úrico, creatinina, hematocrito e hemoglobina no Laboratorio Central do Hospital Zonal de Trelew. A populagao sob estudo foram pacientes de mais de 18 anos atendidos através de consultorio externo entre dezembro do ano 2008 e margo de 2009. O estudo foi completado entre margo e abril de 2011. As determinagóes foram realizadas com um auto-analisador de química clínica Metrolab 2300 plus e um contador hematológico Sysmex 2100. Comprovouse que os valores das determinagóes se ajustaram a uma distribuigao normal e se realizou o cálculo dos quantis 0,025 e 0,975 para a obtengao do intervalo de referencia (IR) de 95%. Num caso foi utilizada transformagao logarítmica dos dados e para duas categorias se aplicou o método nao paramétrico. Para os valores de referencia inferior e superior foram estabelecidos os intervalos com 90% de confianga (IC). Os valores de referencia obtidos foram: glicose de 0,74 a 1,07 gr/L, ureia de 0,19 a 0,51 gr/L, colesterol de 1,21 a 2,43 g/L, proteínas totais de 6,45 a 7,99 gr/dL, albumina de 3,62 a 4,61 gr/dL, creatinina de 0,57 a 1,10 mg/dL, ácido úrico para o sexo feminino de 18,69 a 51,93 mg/L e para o sexo masculino de 30,50 a 62,92 mg/l, hematocrito para sexo feminino de 37 a 45% e para o sexo masculino de 40 a 50%, hemoglobina para o sexo feminino de 11,70 a 15,17 g/dL e para o sexo masculino de 13,09 a 17,19 g/dL. Os valores de ácido úrico, hematocrito e hemoglobina foram separados por sexo para dar continuidade a política do laboratorio e dos fabricantes de reagentes, que consiste em considerar as diferengas existentes entre ambos os sexos. Dentro do intervalo dado pelo fabricante foram obtidos os resultados para glicose, albumina e hemoglobina; superior ao mesmo para ureia, colesterol, proteínas e ácido úrico e inferior ao mesmo para creatinina.

Variabilidad biológica de aldolasa sérica: su utilidad en la interpretación de los resultados / Biological variation of serum aldolase: its use for interpretation of the results / Variabilidade biológica de aldolase sérica: sua utilidade na interpretagáo dos resultados

El objetivo de este trabajo fue determinar la variabilidad biológica (VB) de Aldolasa (ALD) en individuos sanos, el índice de individualidad (II) del analito y evaluar la utilidad del intervalo de referencia poblacional (IRP) considerando al IRP de los analitos útil cuando el II es > 1,4 y de poca utilidad si es <0,6. También se evaluó el valor de referencia para el cambio (VRC) en la interpretación de dos determinaciones seriadas del mismo individuo, especialmente en el seguimiento de enfermedades músculo-esqueléticas en las que los niveles de creatinquinasa (CK) permanecen dentro del intervalo de referencia, mientras que los de ALD están elevados. Se obtuvieron 8 muestras de sangre de 10 individuos aparentemente sanos en días diferentes según protocolo preestablecido. Se determinó la actividad de ALD por método enzimático UV y se calcularon los parámetros de VB, II y VRC. Se obtuvo una VB intraindividual: 31%; VB interindividual: 21%, II 1.47 y VRC 90%. De acuerdo a los coeficientes de VB y el II obtenidos, los IRP son útiles para la interpretación de los resultados de ALD. Un resultado seriado será estadísticamente diferente del dato previo cuando el mismo tenga una diferencia mayor al 90% en relación al valor previo. El VRC entre dos determinaciones seriadas debe ser calculado en cada laboratorio con su propia variabilidad analítica para una correcta interpretación de los resultados.

The aim of this study was to determine the Biological Variation (BV) of Aldolase (ALD) in healthy patients, the individuality index (II) of the analyte and to assess how useful the population reference interval (PRI) is for the interpretation of the results, considering PRI useful when the II is >1.40 and useless when it is <0.6. Reference change values (RCV) were also assessed in the interpretation of two serial measurements of the same individual, specially in the monitoring of patients in which the serum level of Creatine Kinase (CK) remain within the reference range while ALD values are increased. Eight bloodsam-ples were obtained from ten apparently healthy subjects in different days according to a predetermined protocol. ALD activity was measured by an enzymatic UV method and BV, II and RCV were calculated. Intraindividual BV was 31 %, interindividual BV 21 %, II 1.47 and RCV 90%. Based on the results obtained for BV and II, PRIs are useful for the interpretation of ADL results. A serial result will be statistically different from the previous one when the variability between both results is higher than 90%. RCV must be determined in each laboratory using their own analytical variability in order to obtain a correct interpretation of the results.

O objetivo deste trabalho foi determinar a variabilidade biológica (VB) de Aldolase (ALD) em individuos saudáveis, o índice de individualidade (II) do analito e avaliar a utilidade do intervalo de referencia populacional (IRP) considerando o IRP dos analitos útil quando o II é > 1,4 e de pouca utilidade se é <0,6. Também foi avaliado o valor de referencia da variagáo (VRV) na interpretagáo de duas determinagóes seriadas do mesmo individuo, especialmente no seguimento de doengas músculo-esqueléticas nas quais os níveis de creatinoquinase (CK) permanecem dentro do intervalo de referencia, enquanto que os de ALD estáo elevados. Foram obtidas 8 amostras de sangue de 10 individuos aparentemente saudáveis em dias diferentes conforme protocolo preestabelecido. Determinou-se a atividade de ALD por método enzimático UV e se calcularam os parámetros de VB, II e VRC. Foi obtida uma VB intra-individual: 31 %; VB interindividual: 21 %, II 1.47 e VRV 90%. De acordo com os coeficientes de VB e o II obtidos, os IRP sáo úteis para a interpretagáo dos resultados de ALD. Um resultado seriado será estatisticamente diferente do dado prévio quando o mesmo tenha uma diferenga maior a 90% em relagáo ao valor prévio. O VRV entre duas determinagóes seriadas deve ser calculado em cada laboratório com sua própria variabilidade analítica para uma correta interpretagáo dos resultados.

Alternative method for quantification of alfa-amylase activity / Alternativa para quantificação de alfa-amilase

A modification of the sensitive agar diffusion method was developed for macro-scale determination of alfa-amylase. The proposed modifications lower costs with the utilisation of starch as substrate and agar as supporting medium. Thus, a standard curve was built using alfa-amylase solution from Aspergillus oryzae, with concentrations ranging from 2.4 to 7,500 U.mL-1. Clear radial diffusion zones were measured after 4 hours of incubation at 20 °C. A linear relationship between the logarithm of enzyme activities and the area of clear zones was obtained. The method was validated by testing α-amylase from barley at the concentrations of 2.4; 60; 300 and 1,500 U.mL-1. The proposed method turned out to be simpler, faster, less expensive and able to determine on a macro-scale α-amylase over a wide range (2.4 to 7,500 U.mL-1) in scientific investigation as well as in teaching laboratory activities.

Modificações foram propostas ao método sensível de difusão em ágar para a macrodeterminação de alfa-amilase. As modificações propostas diminuem os custos, com a utilização de amido como substrato e ágar como meio solidificante. Assim, foi construída uma curva padrão utilizando uma solução de alfa-amilase de Aspergillus oryzae com concentrações variando de 2,4 a 7.500 U.mL-1. Em seguida, as zonas claras de difusão radial foram mensuradas depois de 4 horas de incubação a 20 °C. Foi obtida uma relação linear entre o logaritmo da atividade enzimática e os diâmetros das zonas claras. O método foi validado utilizando-se soluções de alfa-amilase de cevada nas concentrações de 2,4; 60; 300 e 1.500 U.mL-1. O método tornou-se mais simples, rápido, com baixo custo e passível de ser utilizado para macrodeterminação de alfa-amilase em ampla faixa (2,4 a 7.500 U.mL-1) na investigação científica e para fins didáticos em aulas práticas.

Separación de poblaciones de glóbulos rojos senescentes por gradientes preformados de Percoll / Separation of populations of senescent red blood cells by Percoll performed gradients

Los mecanismos que determinan la senescencia de los eritrocitos han sido extensamente estudiados, sin embargo, no se han logrado conclusiones definitivas debido a la ausencia de una técnica que permita el aislamiento de grupos etáreos bien definidos. Los métodos más comúnmente empleados se basan en el aumento de densidad de los eritrocitos durante el envejecimiento. En este trabajo desarrollamos una técnica para la separación de glóbulos rojos de distintas edades empleando gradientes preformados de Percoll, un polímero sintético con propiedades fisicoquímicas adecuadas para trabajar con células vivas. En las suspensiones eritrocitarias obtenidas se realizaron determinaciones hematológicas, actividades de enzimas antioxidantes y el ensayo de eritrofagocitosis. Los valores de los parámetros hematológicos evaluados fueron significativamente mayores en las suspensiones de glóbulos rojos jóvenes. Las actividades enzimáticas mostraron una disminución de la capacidad antioxidante en las poblaciones de eritrocitos senescentes. Este proceso favorecería la interacción de los hematíes envejecidos con las células fagocíticas, demostrada median­te el ensayo de eritrofagocitosis. Los resultados obtenidos indican que el método de gradientes de Percoll permite una adecuada separación de las suspensiones eritrocitarias de distintas edades, con una eficiencia comparable a la observada en la técnica de centrifugación diferencial considerada de referencia.

The mechanisms that determine the senescence of the erythrocytes have been extensively studied; however. definitive conclusions have not been achieved mainly because of the lack of a technique that allows the isolation of well-defined etarian groups. The methods most commonly used for separating erythrocytes from different ages are based on the increase in density that these cells present during their aging. In the present work we have developed a technique for obtaining red blood cells from different ages using Percoll preformed gradients, a synthetic polymer with adequate physic-chemic properties to work with lives cells. In the erythrocytes suspensions we have made hematological determinations. activities of antioxidants enzymes and the essay of erythrophagocytosis. The values of the hematological parameters were significantly higher in the suspensions of young red blood cells. In the measurements of the enzymatic activity we observed a decrease of the antioxidant capacity in the populations of senescent erythrocytes. This process would promote the interaction between the old erythrocytes and the phagocyte cells, demonstrated by the erythrophagocytosis essay. The results obtained indicate that the method Percoll density gradients allows an appropriate separation of the erythrocytes suspensions of different ages with a comparable efficiency to that observed in the technique differential centrifugation, considered as reference.

Determinación de paraquat en orina utilizando un sistema de inyección en flujo continuo / Determination of paraquat in urine samples by flow-injection analysis

El paraguat es un herbicida que pertenece al grupo de los biperidilos. Su determinación cuantitativa en orina es muy importante para diagnosticar la supervivencia de pacientes intoxicados. Muchos centros hospitalarios utilizan pruebas semicuantitativas para la determinación de paraquat en muestras biológicas. Sin embargo, éstas suelen carecer de precisión y exactitud. Por tanto, el desarrollo de métodos alternativos simples, exactos, precisos y accesibles podría resultar muy útil en instituciones hospitalarias. Sobre la base de estas consideraciones, se propone un método de análisis por inyección en flujo y detección espectrofotométrica para la determinación cuantitativa de paraquat en muestras de orina. La determinación se basa en la formación de un producto coloreado (600 nm) posterior a la reducción de paraquat con glucosa en un medio alcalino, mediante un sistema en línea. Bajo las condiciones óptimas de operación, la ley de Beer se cumple en el intervalo 1-50 µg mL-1 de paraquat con un coeficiente de correlación >0,999. La frecuencia de análisis fue de 12 h-1 con una desviación estándar relativa del 2,8% para una solución muestra que contiene 10 µg mL-1 de paraquat (n=3). El estudio de recuperación osciló entre 97,9 y 102,1%. El método analítico fue aplicado satisfactoriamente al análisis de muestras de dos pacientes intoxicados con paraquat.

Paraguat is a herbicide beloging to the bipyridinium group.The quantitative determination of paraquat in urine of humans is very important to diagnose survival of intoxicated patients. Many hospitals use semi-quantitative tests for determining paraquat in biological samples. However, they often lack precision and accuracy. Therefore, the development of simple, precise, accurate and accessible alternative methods could be very useful in hospital institutions. Based on these considerations, a flow-injection spectrophotometric procedure is proposed for paraquat determination in urine samples. The determination is based on the formation of a coloured product (600 nm) after on-line reduction of paraquat with glucose in alkaline medium. Under optimal conditions of operation, Beer's law is obeyed in a concentration range of 1-50 µg mL-1 of paraquat with a correlation coefficient >0.999. The analytical frequency was 12 h-1 and the relative standard deviation was 2.8% for a sample solution containing 10 µg mL-1 paraquat (n=3). Recovery studies were between 97.9 and 102.1%. The analytical method was satisfactorily applied in the analyses of samples from two intoxicated patients.