Avaliação dos efeitos modulatórios da hematopoese no envelhecimento: Papel das células tronco mesenquimais medulares / Evaluation of the modulatory effects of hematopoiesis during aging: Role of bone marrow mesenchymal stem cells

O envelhecimento é um processo fisiológico que traz consigo uma série de alterações no organismo que se estendem até o nível molecular. Diante disto, este é um processo complexo que afeta diversos tecidos, sendo um deles o hematopoético, local onde, através de interações da Célula Tronco Hematopoética (CTH) com o ambiente ao seu redor, incluindo a Célula Tronco Mesenquimal (CTM), ocorre a hematopoese. Embora já sejam descritas na literatura algumas alterações na medula óssea consequentes do envelhecimento, os mecanismos por trás de tais mudanças permanecem elusivas, principalmente no âmbito das interações celulares ocorrentes na medula óssea. Portanto, este trabalho buscou investigar como o envelhecimento afeta a regulação hematopoética no contexto de sua relação com as CTM medulares. Para esta pesquisa, foram utilizados camundongos machos isogênicos da linhagem C57BL/6, dividindoos em grupos conforme sua idade: jovens (3 ­ 5 meses) e idosos (18 ­ 19 meses). Foi realizada a caracterização do modelo através de aspectos físicos como consumo proteico, variação de peso, entre outros, seguido de avaliação bioquímica e hematológica. Adicionalmente, foram coletadas células medulares e, posteriormente, realizado o isolamento das CTMs. Para estudar a relação destas células com a hematopoese, foram realizados ensaios in vitro utilizando a linhagem celular leucêmica C1498 (TIB-49™, ATCC®) mantidas em contato com o sobrenadante das CTMs isoladas. Quanto aos parâmetros bioquímicos, os animais idosos apresentaram menores níveis de albumina, aspartato alanina transferase (ALT) e de triglicerídeos quando comparados aos animais jovens. Contrariamente, os animais idosos apresentaram um maior nível de colesterol. Na avaliação hematológica, foi constatado pelo hemograma que os animais idosos apresentaram valores comparáveis aos animais jovens, todavia, o mielograma mostrou menor celularidade geral, seguido de menor número de células da linhagem eritroide e maior número de precursores granulocíticos. Através da imunofenotipagem, foi revelado um maior número de CTHs e de precursores grânulosmonocíticos na medula de animais idosos quando comparado aos jovens, e uma menor frequência de progenitores linfoides. Na imunofenotipagem de sangue periférico de animais idosos houve uma redução no número de linfócitos B e de eritrócitos, e aumento na população de células natural killers. Na imunofenotipagem de CTMs, o marcador CD73 apresentou menor expressão nos animais idosos. Avaliando o secretoma destas células estromais, foram encontrados no sobrenadante de CTMs de animais idosos aumentos significativos nas concentrações de CXCL12 e SCF e redução de IL-11. No âmbito molecular, as CTMs de animais idosos apresentaram aumento na expressão de Akt1, Nos e Ppar-γ, e redução na expressão de Csf3 e Cdh2. Adicionalmente, quando comparado a ação das CTMs de animais idosos em relação as CTMs de animais jovens, observou-se que CTMs de animais idosos foram capazes de aumentar a expressão de Sox2, Pou5f1 e Nanog e diminuir a expressão de Cdkn1a de células da linhagem C1498. O sobrenadante de CTMs de animais idosos também resultou na maior proliferação e migração de células da linhagem C1498. Portanto, levando em consideração a importância das CTMs sobre a regulação do sistema hematopoético, pode-se concluir que, no envelhecimento, as CTMs criam um ambiente propício para a proliferação celular no qual a manutenção da pluripotência é estimulada, o que pode acarretar em uma desregulação do sítio hematopoético quando habitado por células malignas

Aging is a physiological process in which occurs a series of alterations in an organism that extend to a molecular level. It is a complex process that affects various tissues, one of them being the bone marrow, wherethrough the interactions of the hematopoietic stem cell (CTH) with its surrounding environment, including with the mesenchymal stem cell (CTM), hematopoiesis takes place. Although some aging-associated alterations in the bone marrow can be found described in the literature, the mechanisms behind said changes remain elusive, especially when regarding the cellular interactions present inside the bone marrow. Therefore, this research aimed to investigate how aging affects the regulation of hematopoiesis in the context of its interactions with bone marrow-derived CTMs. For this investigation, male isogenic C57BL/6 mice were used as animal models. These were separated in two groups according to their age: young (3 ­ 5 months) and aged (18 ­ 19 months). The animal models were characterized by their physical properties such as protein intake and weight variation, followed by biochemical and hematological evaluation. Bone marrow cells were obtained and identified through immunophenotyping, thus isolating different cell populations, including the CTMs. To study the relationship between these cells and hematopoiesis, in vitro assays were conducted utilizing the leukemic cell lineage C1498 (TIB-49™, ATCC®) maintained in contact with the supernatant of isolated CTMs. By their biochemical profile, aged mice showed lower levels of albumin, alanine-aspartate transferase (ALT) and triglycerides compared to the young group. In contrast, aged mice had a higher cholesterol level. Hematological evaluation by total blood count showed similar results between the two groups, however, the myelogram revealed that the aged animals had lower cellularity, with less frequent cells from the erythroid lineage, with an increase in granulocytic precursors. Through immunophenotyping, it was also revealed that aged mice have higher numbers of hematopoietic stem cells, while also being noted a reduced population of lymphoid progenitors. An increase in the granulomonocytic progenitors was also found. Immunophenotyping peripheral blood cells of aged mice revealed reduced numbers of B lymphocytes and erythrocytes, and an increased natural killer cell population. Additionally, the cell surface marker CD73 was found to be less expressed in aged mice CTMs. The secretome of these stromal cells obtained from aged mice showed higher levels of CXCL12 and SCF, and lower levels of IL-11when compared to the young counterparts. At a molecular level, CTMs obtained from aged mice expressed more Akt1, Nos and Ppar-γ, while the expression of Csf3 and Cdh2 was reduced. Additionally, when comparing the effects of aged mice CTMs with young mice CTMs, it was observed that the first expressed were capable of increasing the expression of Sox2, Pou5f1 and Nanog, while decreasing Cdkn1a expression in the C1498 cell lineage. The supernatant obtained from aged mice also favored the proliferation and cell migration of the C1498 cell line. Thus, considering the importance that CTMs have over the hematopoietic system, we can conclude that, in aging, CTMs create a special environment which favors cell proliferation and maintenance of pluripotency, which can result in a dysregulation of the hematopoietic tissue when malignant cells are present

Síndromes mielodisplásicos y sistema inmunitario / Myelodysplastic Syndrome and Immune System

Introducción: Los síndromes mielodisplásicos constituyen un grupo heterogéneo de desórdenes hematológicos clonales adquiridos, que afectan la célula madre. Se caracterizan morfológicamente por: hematopoyesis ineficaz, citopenias periféricas progresivas, displasia en uno o más linajes celulares y tendencia evolutiva a leucemia aguda. Los avances recientes en la comprensión de los mecanismos genéticos y moleculares de los síndromes mielodisplásicos, han revelado la asociación entre alteraciones inmunológicas y las mutaciones recurrentes. Las células de la respuesta inmune innata y adaptativa, así como diversos mediadores solubles liberados por ellas, pueden establecer una respuesta antitumoral protectora o, por el contrario, inducir eventos de inflamación crónica que favorezcan la promoción y progresión de esta enfermedad. Objetivos: Resumir los conocimientos actuales de la relación sistema inmune-síndromes mielodisplásicos, enfatizando en las células inmunes del microambiente de la médula ósea y su importancia en la clínica de la enfermedad. Métodos: Se realizó investigación bibliográfica-documental acerca del tema. Se consultaron las bases de datos Scielo y Pubmed. Conclusiones: La comprensión de la función dual que ejerce el sistema inmune en los síndromes mielodisplásicos, constituye un desafío y son necesarios estudios clínicos rigurosos para poder establecer el valor de la manipulación del sistema inmune como una forma posible de tratamiento de esta enfermedad(AU)

Introduction: Myelodysplastic syndromes (MDS) constitute a heterogeneous group of acquired clonal hematological disorders that affect the stem cell. These are characterized morphologically and clinically by: ineffective hematopoiesis, progressive peripheral cytopenia, dysplasia in one or more cell lineages, in most of cases and evolutionary tendency to acute leukemia. Recent advances in understanding the genetic and molecular mechanisms of MDS have revealed the association between immunological alterations and recurrent mutations. Cells of the innate and adaptive immune response, as well as various soluble mediators released by them, can establish a protective antitumor response or, on the contrary, induce events of chronic inflammation that favor the promotion and progression of this disease. Objective: To summarize the current knowledge of the immune system-MDS relationship, emphasizing the immune cells of the bone marrow microenvironment and their importance in the clinic of the disease. Methods: A bibliographic-documentary research was carried out on the subject. The Scielo and Pubmed databases were consulted. Conclusions: Understanding the dual role of the immune system in MDS constitutes a challenge and rigorous clinical studies are necessary to establish the value of manipulating the immune system as a possible form of treatment of this disease(AU)

Anemia sideroblástica una enfermedad infrecuente de causas múltiples / Sideroblastic anemia, a rare disease of multiple causes

Introducción: La anemia sideroblástica es un trastorno hematológico que altera el proceso de la hematopoyesis, en la cual se ve afectada en mayor proporción la línea eritroide. Además, se presentan alteraciones en la síntesis del grupo hemo por disfunción mitocondrial en las células de la médula ósea. Objetivo: Indagar sobre la anemia sideroblástica, sus variables y los diferentes tipos de presentación que puede tener esta enfermedad. Métodos: Se llevó a cabo una revisión de la literatura en las bases de datos MEDLINE, EMBASE, Lilacs y ScienceDirect, con los descriptores: anemia sideroblástica, hematopoyesis, anomalías congénitas y 5-aminolevulinato sintetasa, en español e inglés. Se seleccionaron 26 artículos relacionados. Se hizo un análisis y resumen de la bibliografía revisada. Análisis y síntesis de la información: Es una enfermedad de origen congénito o secundario a otros procesos como el consumo de alcohol o inducido por algunos medicamentos. Se presenta con poca frecuencia y, en su mayoría, el diagnóstico se hace mediante estudios de laboratorio, como extendido de sangre periférica, estudio de médula ósea, a los que se les pueden aplicar diversas tinciones, realizar secuenciación o incluso realizar reacción en cadena de polimerasa. Conclusión: La anemia sideroblástica es una enfermedad puede relacionarse con otras alteraciones hematológicas que modifican el metabolismo del hierro. El tratamiento curativo es la trasfusión de hemocomponentes y debe hacerse un enfoque individualizado de cada paciente según el tipo de anemia sideroblástica(AU)

Introduction: Sideroblastic anemia is a hematological disorder that alters the hematopoiesis process. This condition affects, to a great extent, the erythroid line. In addition, alterations occur in the synthesis of the heme group due to mitochondrial dysfunction in the bone marrow cells. Objective: To investigate sideroblastic anemia, its variables and the different types of presentation of this disease. Methods: A literature review was carried out in the MEDLINE, EMBASE, Lilacs and ScienceDirect databases, using the descriptors anemia sideroblástica [sideroblastic anemia], hematopoyesis [hematopoiesis], anomalías congénitas [congenital anomalies] and 5-aminolevulinato sintetasa [5-aminolevulinate synthetase], in Spanish and English. Twety-six articles related to the topic were selected. An analysis and summary of the revised bibliography was carried out. Information analysis and synthesis: It is a disease of congenital origin or secondary to other processes such as alcohol consumption or induced by some medications. It occurs infrequently and its diagnosis is mostly made through laboratory studies, such as peripheral blood smear and bone marrow study, to which various stains can be applied, as well as sequencing or even polymerase chain reaction. Conclusion: Sideroblastic anemia is a disease that can be related to other hematological alterations that modify iron metabolism. The curative treatment is the transfusion of blood components. An individualized approach should be used according to the type of sideroblastic anemia(AU)

Síndromes MonoMAC e Emberger em paciente com mutação no gene GATA2 / MonoMAC and Emberger syndromes in a patient with GATA2 mutation

As mutações que ocorrem no gene GATA2 podem ocasionar um amplo espectro de doenças genéticas. Os pacientes podem ter anormalidades na hematopoiese, na linfangiogenesis e na resposta imunológica. Os fenótipos incluem algumas síndromes caracterizadas por monocitopenia e infecção por micobactéria (síndrome MonoMac), síndrome mielodisplásica familiar, leucemia mieloide crônica ou aguda, síndrome de Emberger (linfedema primário), e mais raramente neutropenia, anemia aplástica e deficiência isolada de células NK. A idade da apresentação clínica pode variar desde a infância até a idade adulta. A deficiência autossômica dominante de GATA2 pode permanecer clinicamente silenciosa por décadas, ou mesmo durante toda a vida. Descrevemos o caso de uma jovem brasileira que apresentou a maioria dos problemas ligados à mutação no gene GATA2, observando-se as duas síndromes: MonoMAC e Emberger.

GATA2 mutations may cause a wide spectrum of genetic disorders. Patients may have several abnormalities in hematopoiesis, lymphangiogenesis and immune response. The phenotypes include monocytopenia and mycobacterial infection (MonoMAC) syndrome, familial myelodysplastic syndrome (MDS), chronic or acute myeloid leukemia (CML or AML), Emberger syndrome and, more rarely, neutropenia, aplastic anemia and isolated NKcell deficiency. Age at clinical onset ranges from early childhood to late adulthood. Autosomal dominant GATA2 deficiency may remain clinically silent for decades or even for life. We report a case of a Brazilian young patient who had most of the problems related to GATA2 mutation as well as MonoMAC and Emberger syndromes.

CCAAT/enhancer-binding protein alpha (CEBPA) gene haploinsufficiency does not alter hematopoiesis or induce leukemia in Lck-CALM/AF10 transgenic mice

Although rare, CALM/AF10 is a chromosomal rearrangement found in immature T-cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL), acute myeloid leukemia, and mixed phenotype acute leukemia of T/myeloid lineages with poor prognosis. Moreover, this translocation is detected in 50% of T-ALL patients with gamma/delta T cell receptor rearrangement, frequently associated with low expression of transcription factor CCAAT/enhancer-binding protein alpha (CEBPA). However, the relevance of CEBPA low expression for CALM/AF10 leukemogenesis has not yet been evaluated. We generated double mutant mice, which express the Lck-CALM/AF10 fusion gene and are haploinsufficient for the Cebpa gene. To characterize the hematopoiesis, we quantified hematopoietic stem cells, myeloid progenitor cells, megakaryocyte-erythrocyte progenitor cells, common myeloid progenitor cells, and granulocyte-macrophage progenitor cells. No significant difference was detected in any of the progenitor subsets. Finally, we tested if Cebpa haploinsufficiency would lead to the expansion of Mac-1+/B220+/c-Kit+ cells proposed as the CALM/AF10 leukemic progenitor. Less than 1% of bone marrow cells expressed Mac-1, B220, and c-Kit with no significant difference between groups. Our results showed that the reduction of Cebpa gene expression in Lck-CALM/AF10 mice did not affect their hematopoiesis or induce leukemia. Our data corroborated previous studies suggesting that the CALM/AF10 leukemia-initiating cells are early progenitors with lymphoid/myeloid differentiating potential.

Protein malnutrition effects of perivascular bone marrow microenvironment on the regulation of hematopoiesis / Efeitos da desnutrição proteica sobre o microambiente perivascular medular na regulação da hematopoese

Protein malnutrition (PM) causes anemia and leukopenia by reduction of hematopoietic precursors and impaired production of mediators that induce hematopoiesis, as well as structural and ultrastructural changes in the bone marrow (BM) extracellular matrix. Hematopoiesis occurs in the bone marrow (BM) in distinct regions called niches, which modulate the processes of differentiation, proliferation and self-renewal of the hematopoietic stem cell (HSC). The perivascular niche, composed mainly by mesenchymal stem cells (MSC) and endothelial cells (EC), is the major modulator of HSC and its function extends to the migration of mature hematopoietic cells into the peripheral blood through the production of cytokines and growth factors. Thus, our hypothesis is that PM changes the perivascular niche and our objective is to evaluate whether PM affects the modulatory capacity of MSC and EC on hematopoiesis. C57BL/6 male mice were divided into Control and Malnourished groups, which received for 5 weeks, respectively, a normal protein diet (12% casein) and a low protein diet (2% casein). After this period, animals were euthanized, nutritional and hematological evaluations were performed, featuring the PM. We performed leukemic myelo-monoblasts cells transplantation and observed that these cells have a lower proliferation rate and are rather in the cell cycle G0/G1 phases in malnourished mice, indicating that the BM microenvironment is compromised in PM. MSC were isolated, characterized and differentiated in vitro into EC cells, which were evidenced by CD31 and CD144 markers. We performed the quantification of HSC and hematopoietic progenitors, as well as some regulators of proliferation and differentiation, ex vivo and after cultures with MSC or EC. We observed that PM reduces HSC and hematopoietic progenitors ex vivo. In PM, MSC promote increase in HSC and suppress hematopoietic differentiation, whereas ECs induce cell cycle arrest. Additionally, we verified that PM affects granulopoesis by decreasing the expression of G-CSFr in granule-monocytic progenitors. Thus, we conclude that PD compromises hematopoiesis due to intrinsic alterations in HSC, as well as alterations in the medullary perivascular niche

A desnutrição proteica (DP) provoca anemia e leucopenia decorrente da redução de precursores hematopoéticos e comprometimento da produção de mediadores indutores da hematopoese. A hematopoese ocorre na medula óssea (MO) em regiões distintas chamadas de nichos, que modulam os processos de diferenciação, proliferação e auto renovação da célula tronco hematopoiética (CTH). O microambiente perivascular, composto principalmente por células tronco mesenquimais (CTM) e células endoteliais (CE), é o principal modulador das CTH e sua função se estende até a migração das células hematopoiéticas maduras para o sangue periférico, através da produção de citocinas e fatores de crescimento. Dessa forma, nossa hipótese é que a DP altera o microambiente perivascular e objetivamos avaliar se a DP afeta a capacidade modulatória das CTM e CE sobre a hematopoese. Utilizamos camundongos C57BL/6 machos, divididos em grupos Controle e Desnutrido, sendo que o grupo Controle recebeu ração normoproteica (12% caseína) e o grupo Desnutrido recebeu ração hipoproteica (2% caseína), ambos durante 5 semanas. Após este período, os animais foram eutanasiados, foi realizada a avaliação nutricional e hematológica, caracterizando a DP. Realizamos transplantes de mielomonoblastos leucêmicos e observamos que estas células apresentam menor taxa de proliferação e se encontram em maior quantidade nas fases G0/G1 do ciclo celular em camundongos desnutridos, indicando que o microambiente medular está comprometido. Isolamos CTM, que foram caracterizadas e diferenciadas in vitro em CE, o que foi evidenciado pelos marcadores CD31 e CD144. Quantificamos CTH e progenitores hematopoéticos, bem como reguladores de proliferação e diferenciação, ex vivo e após culturas com CTM ou CE. Observamos que a DP reduz CTH e progenitores hematopoéticos ex vivo. Na DP, as CTM promovem incremento de CTH e suprimem a diferenciação hematopoética, enquanto que as CE induzem parada no ciclo celular. Adicionalmente, observamos que a DP afeta a granulopoese por diminuição da expressão de G-CSFr nos progenitores grânulo-monocíticos. Dessa forma, concluímos que a DP compromete a hematopoese por alterações intrínsecas na CTH, como também por alterações ocasionadas no microambiente perivascular medular

Insulin Substrate Receptor (IRS) proteins in normal and malignant hematopoiesis

The insulin receptor substrate (IRS) proteins are a family of cytoplasmic proteins that integrate and coordinate the transmission of signals from the extracellular to the intracellular environment via transmembrane receptors, thus regulating cell growth, metabolism, survival and proliferation. The PI3K/AKT/mTOR and MAPK signaling pathways are the best-characterized downstream signaling pathways activated by IRS signaling (canonical pathways). However, novel signaling axes involving IRS proteins (noncanonical pathways) have recently been identified in solid tumor and hematologic neoplasm models. Insulin receptor substrate-1 (IRS1) and insulin receptor substrate-2 (IRS2) are the best-characterized IRS proteins in hematologic-related processes. IRS2 binds to important cellular receptors involved in normal hematopoiesis (EPOR, MPL and IGF1R). Moreover, the identification of IRS1/ABL1 and IRS2/JAK2V617F interactions and their functional consequences has opened a new frontier for investigating the roles of the IRS protein family in malignant hematopoiesis. Insulin receptor substrate-4 (IRS4) is absent in normal hematopoietic tissues but may be expressed under abnormal conditions. Moreover, insulin receptor substrate-5 (DOK4) and insulin receptor substrate-6 (DOK5) are linked to lymphocyte regulation. An improved understanding of the signaling pathways mediated by IRS proteins in hematopoiesis-related processes, along with the increased development of agonists and antagonists of these signaling axes, may generate new therapeutic approaches for hematological diseases. The scope of this review is to recapitulate and review the evidence for the functions of IRS proteins in normal and malignant hematopoiesis.

El trasplante alogénico haploidéntico: un traje hecho a la medida de nuestras condiciones y necesidades / Haploidentical allogeneic transplant: a tailored suit based on our conditions and needs

El trasplante de progenitores hematopoyéticos alogénico (TPHalo) es un tratamiento potencialmente curativo para muchos pacientes afectados por trastornos hematológicos, ya sean de naturaleza maligna o no. A pesar de ello, hallar al mejor donante posible en el momento apropiado para llevar a cabo el TPHalo se ha convertido progresivamente en uno de los problemas logísticos más difíciles de solventar para la realización de este proceder. Es en este contexto que se inserta la aplicación del TPHalo con el empleo de donantes haploidénticos. La forma que más fuerza toma para abordar este tipo de trasplante en la actualidad es la descrita por los investigadores de la Universidad Johns Hopkins, de Baltimore, Estados Unidos, en la cual se emplea un tratamiento condicionante no mieloablativo y una profilaxis de enfermedad de injerto contra huésped (EICH) que incluye la aplicación de altas dosis de ciclofosfamida los días +3 y +4. Se le señalan resultados muy alentadores en cuanto a la mortalidad no relacionada con la recaída, de ocurrencia de EICH, así como de probabilidades de recaída, sobrevida libre de progresión y sobrevida global. Por ello su realización está permitiendo acceder a numerosos y potenciales donantes. Su actual perfil en cuanto a resultados terapéuticos, accesibilidad, costos económicos y potenciales beneficios a un número superior de pacientes, lo convierte en una alternativa viable y significativa para Cuba(AU)

Allogeneic stem cell transplantation is a potentially curative treatment for many patients affected by haematological disorders, whether malignant or nonmalignant. In spite of this, finding the best donor possible at the appropriate time to carry out the transplantation has gradually become one of the most difficult logistic problems to be solved for this procedure. It is in this context where the application of the procedure is inserted with the use of haploidentical donors. The most forceful way to tackle this type of transplant today is the one described by researchers at Johns Hopkins University in Baltimore, USA, where a nonmyeloablative conditioning treatment and a prophylaxis of graft-versus-host disease (GVHD) are used, including the application of high doses of cyclophosphamide on the days +3 and +4. Results are very encouraging in terms of mortality not related to relapse, the occurrence of GVHD, as well as the probability of relapse, progression-free survival and overall survival. Therefore, its implementation is allowing access to many potential donors. Its current profile in terms of therapeutic results, accessibility, economic costs and potential benefits to a greater number of patients makes it a viable and significant alternative for a country with characteristics like ours(AU)

Relação entre os efeitos de glicocorticoides e leucotrienos sobre a granulopoiese em medula óssea de camundongos normais e alérgicos / Relationship between the effects of glucocorticoids and leukotrienes on granulopoiesis in bone marrow of normal and allergic mice

A produção de eosinófilos (eosinopoiese) na medula óssea (MO) murina é aumentada in vitro por glicocorticoides (GC) e por cisteinil-leucotrienos (CisLT), produtos da 5-lipoxigenase (5-LO), na presença do fator de crescimento para eosinófilos, Interleucina(IL)-5. A eosinofilia da MO, induzida in vivo por sensibilização e provocação alérgica (S/P), é bloqueada pelo RU486, antagonista do receptor de GC, e pela dietilcarbamazina (DEC), inibidora da 5- LO. O efeito da DEC sobre a eosinopoiese requer tanto a 5-LO como a NO sintase indutível (iNOS), necessária à indução de apoptose via CD95. A Prostaglandina(PG)E2, ativadora da via iNOS/CD95, suprime a eosinopoiese, induzindo apoptose em eosinófilos imaturos em cultura; em contrapartida, o ácido retinóico all-trans (ATRA) induz a apoptose de eosinófilos por outro mecanismo, independente de iNOS. Os GC e os CisLT protegem eosinófilos imaturos da apoptose induzida tanto pela PGE2 como pelo ATRA. Nesta trabalho evidenciamos que a eosinopoiese é regulada por GC e CisLT, os quais, atuando sobre receptores distintos, funcionam de forma integrada em animais S/P, induzindo numa primeira fase a eosinofilia da MO in vivo, mas atenuando numa segunda fase as respostas da MO à reexposição aos CisLT ex vivo. Os alvos de GC e CisLT na regulação da eosinopoiese foram melhor caracterizados, assim como os mecanismos de articulação funcional in vivo entre essas vias. Por outro lado, GC e produtos da 5-LO também têm efeitos sobre a produção de neutrófilos em cultura de MO (neutropoiese). Esta é estimulada por GC, na presença do fator estimulante de colônias GM (GM-CSF). Apesar de um efeito antagônico sobre a eosinopoiese, o ATRA, assim como os GCs, na presença de GM-CSF, estimula a neutropoiese. Finalmente, o Leucotrieno (LT)B4 estimula a hematopoiese, tanto na presença como na ausência de GM-CSF, por um mecanismos sensível à deficiência de 5-LO.

Protective effects of deferasirox and N-acetyl-L-cysteine on iron overload-injured bone marrow

Using an iron overload mouse model, we explored the protective effect of deferasirox (DFX) and N-acetyl-L-cysteine (NAC) on injured bone marrow hematopoietic stem/progenitor cells (HSPC) induced by iron overload. Mice were intraperitoneally injected with 25 mg iron dextran every 3 days for 4 weeks to establish an iron overload (Fe) model. DFX or NAC were co-administered with iron dextran in two groups of mice (Fe+DFX and Fe+NAC), and the function of HSPCs was then examined. Iron overload markedly decreased the number of murine HSPCs in bone marrow. Subsequent colony-forming cell assays showed that iron overload also decreased the colony forming capacity of HSPCs, the effect of which could be reversed by DFX and NAC. The bone marrow hematopoiesis damage caused by iron overload could be alleviated by DFX and NAC.

Síndrome mielodisplásico Un reto en medicina clínica-hematología / Myelodysplastic syndrome A challenge in clinical medicine-hematology

En este número de Acta Médica Colombiana, se presenta uno de los primeros estudios descriptivos de los síndromes mielodisplásicos (SMDs) en nuestro medio (1). Los SMDs constituyen una patología neoplásica de difícil abordaje clínico por su complejidad y por las limitadas posibilidades de terapia específica, dado que usualmente se presentan en pacientes de edad avanzada con otras comorbilidades, con mediana para edad de presentación de 70 años (80% de los casos en mayores de 60 años) poco frecuente en adultos jóvenes; su incidencia en la población general es de cinco casos por 100 000 personas por año, llegando a 25-50 casos por 100 000 después de los 60 años, pudiendo haber subregistro en nuestro medio (2-7). El SMD muestra un amplio espectro clínico e historia natural, desde enfermedades poco sintomáticas hasta enfermedades agresivas análogas a los estados de leucemia aguda, lo cual dificulta las decisiones terapéuticas y ha conllevado a sistemas de clasificación de riesgo buscando terapias adaptadas a cada situación (2, 4, 5). En los SMDs se tiene un proceso clonal de la célula madre hematopoyética pluripotencial, caracterizado por médula ósea normo, hipo o hipercelular con hematopoyesis inefectiva, con displasia en al menos una de las líneas hematopoyéticas y manifestaciones de falla hematológica: citopenias variables en la sangre periférica e incremento del riesgo de evolución hacia leucemia mieloide aguda. Ocurren de novo en la mayoría de los casos o puede ser secundario, asociado a la acción mutagénica de terapias previas (2, 4).

Preoperative Imaging Modalities to Predict the Risk of Regional Nodal Recurrence in Well-Differentiated Thyroid Cancers

Introduction Thyroid cancer incidence has increased in the previous 2 decades. Preoperative identification of lymph node metastasis is a suggested risk factor associated with recurrence following thyroidectomy. Objectives We aimed to evaluate the accuracy of preoperative radiologic investigations of nodal status in determining the postoperative risk of regional nodal recurrence in cases of well-differentiated thyroid cancer. Methods This is a case series. We retrospectively reviewed data, including preoperative ultrasonography and/or computed tomography results, on patients who underwent total thyroidectomy for thyroid cancer at our hospital between 2006 and 2012. Prognostic factors for predicting recurrence, including age, sex, tumor diameter, and nodal diameter, were evaluated. Results Total thyroidectomy was performed on 24 male and 74 female patients (median age, 43 years). The median follow-up time was 21 months. Sixty-eight patients had papillary thyroid cancer, and 30 had follicular cancer. Nodal recurrence was evident in 30% of patients, and 4% of patients died. Identification of lymph node involvement during preoperative radiologic investigations was strongly prognostic for recurrence: 35.3% of patients with positive preoperative ultrasonography findings and 62.5% of those with positive preoperative computed tomography findings had recurrence (p = 0.01). Conclusions Preoperative identification of lymph node metastasis on radiologic studies was correlated with an increased risk of regional nodal recurrence in well-differentiated thyroid cancer. Computed tomography was superior to ultrasonography in detecting metastatic nodal involvement preoperatively and is therefore recommended for preoperative assessment and postoperative follow-up. .

Foreign Bodies in the Ear, Nose and Throat: An Experience in a Tertiary Care Hospital in Central Nepal

Introduction A foreign body (FB) is an object or substance foreign to the location where it is found. FBs in the ear, nose, and throat are a common problem frequently encountered in both children and adults. Objective To analyze FBs in terms of type, site, age, and gender distribution and method of removal. Methods A retrospective study was performed in a tertiary care hospital in the central part of Nepal. The study period was from June 2013 to May 2014. The information was obtained from hospital record books. Results A total of 134 patients had FBs in the ear, nose, or throat; 94 were males and 40 were females. Of the 134 patients, 70 (52.23% ) had FB in the ear, 28 (20.89% ) in the nose, and 36 (26.86% ) in the throat. The FB was animate (living) in 28 (40% ) patients with FB in the ear and 1 (3.5% ) patient with FB in the nose, but the FB was inanimate (nonliving) in any patient with FB in the throat, in 42 (60% ) patients with FB in the ear FB, and in 27 (96.4% ) patients with FB of the nose. The FB was removed with or without local anaesthesia (LA) in 98 (73.13% ) patients, and only 36 patients (26.86% ) required general anaesthesia (GA). The most common age group affected was <10 years. Conclusion FBs in the ear and nose were found more frequently in children, and the throat was the most common site of FB in adults and elderly people. Most of the FBs can be easily removed in emergency room or outpatient department. .

Gestação, consumo de álcool e fumo, exposições ocupacionais materna e paterna e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos

Objetivo: Avaliar o consumo de fumo e de álcool maternos, a exposição ocupacional materna e paterna e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos na população brasileira. Objetivos Específicos: Determinar a magnitude de associação entre a exposição materna ao fumo durante o período pré-concepcional, gestacional e lactação e o desenvolvimento de leucemias agudas em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição materna a bebidas alcóolicas durante o período pré-concepcional e gestacional e o desenvolvimento de leucemias agudas em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição ocupacional materna durante o período pré-concepcional, gestacional e os dois primeiros anos de vida e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição ocupacional paterna durante o período pré-concepcional, gestacional materno e os dois primeiros anos de vida da criança e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos.

Gestação, consumo de álcool e fumo, exposições ocupacionais materna e paterna e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos / Pregnancy, alcohol consumption and smoking, maternal and paternal occupational exposures and the development of leukemia in children under 2 years

Avaliar o consumo de fumo e de álcool maternos, a exposição ocupacional materna e paterna e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos na população brasileira. Objetivos Específicos: Determinar a magnitude de associação entre a exposição materna ao fumo durante o período pré-concepcional, gestacional e lactação e o desenvolvimento de leucemias agudas em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição materna a bebidas alcóolicas durante o período pré-concepcional e gestacional e o desenvolvimento de leucemias agudas em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição ocupacional materna durante o período pré-concepcional, gestacional e os dois primeiros anos de vida e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos; Determinar a magnitude de associação entre a exposição ocupacional paterna durante o período pré-concepcional, gestacional materno e os dois primeiros anos de vida da criança e o desenvolvimento de leucemias em menores de 2 anos...

Alteraciones hematológicas en la diabetes mellitus / Blood disorders in diabetes mellitus

Although it has been treated in a limited way the relationship between diabetes and hematopoietic system, there is evidence demonstrating thedeleterious effect of hyperglycemia on the three cell lines: red blood cells, white cells and platelets. Different forms of anemia associated with hyperglycemia are analyzed and erythrocyte alterations observed in diabetes. In chronic decompensated patients have been demonstrated alterationsof monocytes, lymphocytes and polymorphonuclear particularly, with decreased chemotaxis, adherence, phagocytosis and opsonization. Hyperglycemia determines a prothrombotic state by platelet hyperreactivity, which is a marker of inflammation...

Las trombopoyetinas en el tratamiento de la púrpura trombocitopénica inmunitaria y otras trombocitopenias / Thrombopoietines in the treatment of the thrombocytopenic purpura and other thrombocytopenics

La purpura trombocitopénica inmunitaria y las trombocitopenias secundarias representan condiciones patológicas graves cuyo tratamiento plantea diversos grados de dificultad. La aproximación terapéutica convencional ha sido la administración de esteroides, la esplenectomía y el uso de inmunoglobulina intravenosa u otros tipos de anticuerpos (e.g., anti-D). La mejor comprensión de la fisiología y fisiopatología de la trombopoyesis aunado a los avances en biología molecular ha permitido el desarrollo de una nueva aproximación terapéutica, la aplicación de las trombopoyetinas sintéticas o no inmunogénicas. Dentro de este grupo resaltan dos compuestos: el romiplostin (una proteína de fusión) y el eltrombopag (un compuesto sintético de bajo peso molecular). Ambas se encuentran disponibles comercialmente. Los estudios clínicos indican que estos medicamentos tienen un efecto satisfactorio en el tratamiento de las trombocitopenias, particularmente en los casos refractarios a los tratamientos convencionales.

Immune thrombocytopenic purpura and the secondary thrombocytopenias are conditions potentially severe with diverse degrees of treatment difficulties. Steroids administration, splenectomy and the use of intravenous immunoglobulin and other antibodies (e.g., anti-D) had been the conventional therapy. The better understanding of the thrombopoiesis physiology and physiopathology togetter with the biology advances have permitted the development of a new terapheutic approach: the use of synthetic or nonimmunogenic thrombopoietines. Among this group highlights composites: romiplostim (a fusion protein) and eltrombopag (a synthetic composite with low molecular wheigt). Both are already available and produce a satisfactory effect particularly in nonrespondent cases to the conventional treatment.

Estudo retrospectivo de 207 casos de tumores mamários em gatas / A retrospective study of 207 cases of mammary tumors in queens

Este estudo teve como objetivos determinar os tumores mais prevalentes em gatos e relacionar os tumores mamários a alguns de seus fatores prognósticos. Os arquivos do Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) foram revisados e um total de 1.427 protocolos de biopsias e necropsias de felinos, entre 2000 e 2011, foi encontrado. Com base nas informações dos arquivos, foi estabelecida a relação entre os tumores e alguns fatores como sexo, idade, raça, estado reprodutivo, uso de contraceptivos, número e localização das glândulas afetadas, ulcerações, tamanho do neoplasma, metástases distantes e para os linfonodos. Assim, observou-se que os tumores de mama foram o segundo diagnóstico mais prevalente, após os tumores de pele. Todos os gatos com tumores mamários eram fêmeas, sendo os sem raça definida e os idosos os mais afetados. Os neoplasmas malignos foram diagnosticados com maior frequência, seguidos pelos tumores não neoplásicos e pelos neoplasmas benignos. Os tumores menores eram, na sua maioria, carcinomas. Ulcerações estavam presentes não só em neoplasmas malignos, mas também em alterações não neoplásicas. Metástases distantes foram encontradas principalmente nos pulmões e na pele.

This study aimed to determine the most prevalent mammary tumors in cats and associate them to some prognostic factors. The files from the Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) of the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) were reviewed, and 1.427 feline biopsies and autopsy protocols between the years 2000 and 2011 were found. Based on the information retrieved from the files, a relationship was established among the tumors and some prognostic factors such as sex, age, breed, reproductive status, use of contraceptives, number and location of affected glands, ulcers, size of the neoplasm, distant metastases, and affected lymph nodes. Thus, it was observed that mammary cancer is the second most prevalent diagnosis, following skin tumors. All cats with mammary tumors were female, being the elderly and mixed breed the most affected. Malignant neoplasms were the most frequently diagnosed, followed by non-neoplastic tumors, and benign neoplasms. Smaller tumors were mostly carcinomas. Ulcerations were present not only in malignant neoplasms but also in non-neoplastic changes. Distant metastases were found mainly to the lungs and skin.

Estudo histológico da placenta murina com enfoque em seu potencial hematopoético / Histological study of murine placenta with a focus on their potential hematopoietic

As células-tronco hematopoéticas (CTH), encontradas na medula óssea de mamíferos adultos, são formadas durante a embriogênese, em múltiplos locais anatômicos, migrando de um sítio para outro onde são expandidas e diferenciadas até seu estabelecimento definitivo na medula óssea. Recentemente, estudos in vitro têm demonstrado que a placenta possui potencial hematopoético, revelando a presença de progenitores multipotentes e autorrenováveis. Não obstante a importância destes trabalhos, a maioria empregou métodos in vitro, o que não significa que in vivo este potencial se expresse em algum momento. No entanto, há dados que mostraram focos de eritropoese placentária observadas em 10,5 dias-pós-coito (dpc) formando maciços celulares no labirinto que, depois, se configuravam no interior de vasos. Dentro desse cenário, nos propusemos a aprofundar essa questão a partir de um maior detalhamento morfológico in situ de placentas de camundongo em diferentes idades gestacionais, avaliando a efetiva participação da placenta na hematopoese. Para tal, foi feita uma análise histológica da placenta de camundongos Swiss Webster entre 9,5 e 11,5 dpc, através de cortes seriados e da utilização de colorações convencionais e específicas, bem como empregando marcações com anticorpos ou por lectinas conjugadas a FITC. Foi dada ênfase às células sanguíneas encontradas neste período, procurando por possíveis focos de atividade hematopoética, ao mesmo tempo em que se fez necessário uma caracterização morfológica deste órgão, cuja literatura em camundongos é escassa. Células maiores e mais globosas que as células eritróides imaturas oriundas do saco vitelínico foram observadas circulando nos vasos sanguíneos fetais da placenta, sendo que em algumas áreas, tais células não pareciam estar envolvidas por endotélio e pareciam estar aderidas umas às outras. Numerosos brotamentos de células imaturas de morfologia trofoblástica foram observados, exibindo adesões largas ou sob a forma de pedículos de adesão com endotélio e/ou trofoblasto adjacente, com algumas células hemoglobinizadas. Ainda, em algumas áreas, foram observados conjuntos de células eritróides de aspecto trofoblástico formando aglomerados diferenciais em meio à massa trofoblástica, com células aderidas e com diferentes graus de hemoglobinização. Esses achados encontravam-se principalmente à região de labirinto próxima às células trofoblásticas gigantes e espongiotrofoblasto. Aglomerados hematopoéticos semelhantes aos brotamentos de CTH da região de aorta-gônadas-mesonefros (AGM) e vasos umbilicais e vitelínicos também foram encontrados próximos à face fetal da placenta. A imunomarcação revelou a presença de eritropoietina na decídua, a qual pode ter então papel importante na indução da eritropoese encontrada, bem como de fator de von Willebrand em células que se projetavam para dentro da circulação fetal. Ainda, células de aspecto trofoblástico no interior dos vasos fetais foram Sca-1 positivas. A utilização de lectinas permitiu caracterizar, ao menos parcialmente, os resíduos de açúcar presentes nos diferentes endotélios e na barreira materno-fetal. Em conclusão, os resultados do presente estudo trazem contribuições originais ao estudo morfológico da placenta na metade da gestação, contribuindo para a compreensão da participação da placenta na ontogenia do sistema hematopoético em mamíferos.