RESUMO
Introducción: Existen factores de riesgo que se asocian a desarrollo cáncer de tiroides diferenciado; la Tiroglobulina es una proteína ligada al tamaño tumoral, su rol dentro de las patologías oncológicas es controversial. El objetivo del estudio fue determinarsi las variaciones del gen de Tiroglobulina se asocian a la presencia de cáncer tiroideo. Métodos:Este estudio observacional de casos y controles se realizó con muestra no probabilística con muestras de patología de casos de cáncertiroideo diagnosticados en elHospital Oncológico Solón Espinosa Ayala de Quito. Se estableció un grupocontrol con voluntarios sanos. Se mide las variaciones SER734Ala y ARG1980 trp del gen de la Tiroglobulina. Se comparan las frecuencias con Chi cuadrado. Resultados:Un total de 51casos de cáncertiroideo y 50 controles. Variaciones en SER734Ala en el grupo de casos fueron homocigotos 24/51casos (53.3% (IC95% 38.8 -67.9%)en el grupo controlfueron24/50(53.3% (IC95% 38.8-67.9%)P=0.83. La variaciónheterocigotaARG1980 trp fueron en el grupo de casos 47/51(92.2%IC95% 84.3 -100%), en los controles 35/50(70% IC95% 56.6-83.4%)P=0.004. Conclusión:Se demostró que lasvariaciones del gen de laTiroglobulina pueden presentarse en pacientes con Cáncer Tiroideo en igual frecuencia que en voluntarios sanos
Introduction: There are risk factors associated with the development of differentiated thyroid cancer; Thyroglobulin is a protein linked to tumor size, its role in oncological pathologies is controversial. The objective of the study was to determine whether variations in the thyroglobulin gene are associated with the presence of thyroid cancer. Methods: This observational case-control study was conducted with a non-probabilistic sample with pathology samples from thyroid cancer cases diagnosed at the Solón Espinosa Ayala Oncological Hospital in Quito. A control group with healthy volunteers was established. The SER734Ala and ARG1980 trp variations of the Thyroglobulin gene are measured. The frequencies werecompared with Chi square. Results:A total of 51 thyroid cancer cases and 50 controls. Variations in SER734Ala in the group of cases were homozygous 24/51 cases (53.3% (CI95% 38.8 -67.9%) in the control group were 24/50 (53.3% (CI95% 38.8-67.9%) P = 0.83. Heterozygous ARG1980 trp were in the case group 47/51 (92.2% 95% CI 84.3 -100%), in the controls 35/50 (70% 95% CI 56.6-83.4%) P = 0.004. Conclusion:It was shown that variations of the Thyroglobulin gene couldoccur in patients with Thyroid Cancer in the same frequency as in healthy volunteers
Assuntos
Humanos , Tireoglobulina , Neoplasias da Glândula Tireoide , Componentes do Gene , VoluntáriosRESUMO
O parto pré-termo é uma das grandes intercorrências obstétricas, sendo a maior causa de morbidade e mortalidade perinatal. Dentre os diferentes fatores envolvidos no seu desencadeamento, a infecção intra-amniótica parece representar um papel central. As infecções desencadeiam resposta inflamatória nos tecidos materno e fetal, mediada pela produção de citocinas inflamatórias. As citocinas induzem a liberação de prostaglandinas, aumentando a contratilidade uterina, favorecendo a rotura das membranas fetais, a modificação e dilatação da cérvice e, finalmente, o parto pré-termo. A síntese de citocinas depende de controle genético. Diversos polimorfismos relacionados a genes humanos codificadores de citocinas são reconhecidos e associados a fenótipos de alta, média e baixa produção desses fatores. Assim sendo, a relação entre determinados genótipos e a ocorrência e/ou características de diferentes patologias tem sido investigada. Este tipo de abordagem pode contribuir para o conhecimento da patogenia, permitindo o reconhecimento de parâmetros preditivos e a definição de novas estratégias terapêuticas.
Preterm birth is a major obstetric incident and one of the main causes of perinatal mortality and morbidity. Among the different factors involved in its unleashing, intra-amniotic infection seems to play a central role. The infections unleash inflammatory response in both maternal and fetal tissues, mediated by the production of inflammatory cytokines. They also lead to liberation of prostaglandin, which increases myometrial contractility, favoring the rupture of fetal membrane, alteration and dilation of the cervix and, finally, preterm birth. The production of cytokines depends on genetic control. Many polymorphisms related to human genes that codify cytokines are recognized and associated with phenotypes of high, medium and low production of such factors. Thus, the relation between certain genotypes and the occurrence and/or characteristics of several pathologies has been the focus of investigations. This approach may contribute with a better understanding of the pathogenesis, allowing the identification of predictive parameters and the establishment of new intervention strategies.
Assuntos
Feminino , Gravidez , Citocinas/genética , Complicações Infecciosas na Gravidez/metabolismo , Líquido Amniótico/metabolismo , Líquido Amniótico/microbiologia , Nascimento Prematuro/genética , Nascimento Prematuro/imunologia , Nascimento Prematuro/metabolismo , Trabalho de Parto Prematuro/genética , Trabalho de Parto Prematuro/imunologia , Trabalho de Parto Prematuro/metabolismo , Componentes do Gene , Polimorfismo GenéticoRESUMO
Papaya meleira virus (PMeV) is the causal agent of papaya (Carica papaya L.) sticky disease, which has been detected through analysis of its double-stranded RNA (dsRNA) genome from plant latex. In this work we demonstrate that PMeV dsRNA is protected during 25 days when latex is diluted in citrate buffer pH 5.0 (1:1 v/v) and maintained at -20ºC. At the same temperature, some protection was observed for pure latex or latex diluted in ultra-pure water. Conversely, the dsRNA was almost completely degraded after 25 days when maintained at 25ºC, indicating the need for freezing. The proper procedures to collect and store papaya latex described here will contribute to efficient and large scale use of molecular diagnosis of PMeV.
Papaya meleira virus (PMeV) é o agente etiológico da meleira do mamoeiro (Carica papaya L.), cujo diagnóstico é feito através da detecção do RNA dupla-fita (dsRNA) viral a partir do látex das plantas. Neste trabalho é demonstrado que o dsRNA do PMeV é protegido durante 25 dias quando diluído em tampão citrato pH 5.0 (1:1 v/v) seguido de armazenamento à -20ºC. Nesta mesma temperatura, o dsRNA foi parcialmente protegido quando o látex foi diluído em água ultra-pura ou mantido puro. Ao contrário, quando as amostras foram mantidas à 25ºC, observou-se uma degradação progressiva do dsRNA, com ausência de bandas após 25 dias, indicando a necessidade do congelamento do látex. Os procedimentos de coleta e armazenamento do látex descritos neste trabalho contribuem para a eficiência e uso em larga escala do diagnóstico molecular do PMeV.
Assuntos
Carica/genética , Componentes do Gene , Técnicas In Vitro , Látex/análise , Látex/isolamento & purificação , Reação em Cadeia da Polimerase Via Transcriptase Reversa , Biodegradação Ambiental , Eletroforese , Amostras de Alimentos , Métodos , MétodosRESUMO
Integrons classe 1 e cassetes gênicos vêm sendo apontados como importantes mecanismos para a emergência da multi-resistência em bactérias Gram-negativas, contudo, a maioria dos estudos não acessa a funcionalidade destas estruturas. Em Pseudomonas aeruginosas, os conhecidos sistemas de efluxo MexAB-OprM, MexCD-OprJ, MexEF-OprN e MexXY-OprM contribuem de forma significativa para multi-resistência, e a porina OprD tem sido considerado o principal determinante intrínseco de resistência a imipenem nesta espécie. Isolados clínicos de P. aeruginosas, Klebsiella pneumonie e Vibrio cholerae carreiam com freqüência integrons classe 1. O presente estudo tem como objetivo determinar o padrão de transcrição/expressão dos principais determinantes da multi-resistência em P. aeruginosas, incluindo mecanismos intrínsecos e adquiridos. Além disto, objetivou-se acessar o papel dos integrons e cassetes gênicos neste fenótipo de resistência em outras espécies, V. cholerae e K. pneumoniae, 17 isolados clínicos multi-resistentes de P. aeruginosas carreando íntegrons classe 1 com distintos arranjos gênicos foram analisados. Todo os arranjos gênicos, o gene da porina OprD e os genes reguladores das bombas foram seqüenciados. A transcrição de vários arranjos gênicos clonados (aacA4-blaoxa-2-gcuD, dfrB7-aacA4, dfrB7-aacA4-blaoxa-2 e aadB-aacA4-blacarb-4), dos quatro principais sistemas de efluxo (mexAB-oprM, mexAB-oprM, mexCD-oprJ, mexXY-oprM e mexEF-oprN) e do gene da porina oprD foi avaliada por PCR em tempo real. O padrão de transcrição do arranjo gcu14-blaGes1/aacA4 presente em PS1 e PS26 também foi determinado por PCR em tempo real e Northem blot. A expressão dos novos alelos de cassetes Gênicos encontrados em V. cholerae (qnrVC1), K. pneumoniae(arr-5) e P. aeruginosa (arr-4) foi verificada através do fenótipo de resistência e da busca de sinais traducionais presentes nestas estruturas. A maioria dos isolados apresentou aumento nos níveis de transcrição de mex XY, enquanto que mexEF-oprN estava reprimida em todos os isolados MexCD apresentou transcrição basal em 8/17 amostras e 4/17 estavam com transcrição elevada. OprD teve uma transcrição diminuída em grande parte dos isolados, corroborando com a resistência a imipenem observada, e alguns isolados com transcrição aumentada da oprD apresentavam várias mutações no gene estrutural. De um modo geral, os perfis de resistência estavam de acordo com a expressão de todas as bombas, contudo, a correlação entre a transcrição da bomba e a integridade de seu gene regulador não foi observada, indicando a participação de reguladores adicionais para todas estas quatro bombas. Há uma correlação entre o efeito da posição do cassete e o nível de transcrição, já que cassetes mais próximos do promotor Pc eram até 3X mais transcritos que cassetes mais distais. A influência da configuração do Pc nos níveis de transcrição também foi determinada, de forma que a versão forte foi responsável por um aumento de 2X em relação à versão fraca considerando o mesmo cassete gênico em uma mesma posição (aacA4). Foi mostrado que o cassete fusionado blages-1/aacA4 presente em PS1 e PS26 era transcrito como um RNAm policistrônico, e foi possível observar o efeito da posição do cassete. O fenótipo de resistência das transformantes corroborava com a expressão dos arranjos gênicos clonados. Promotores internos foram caracterizados em vários cassetes, e PaadB e Pcarb-4 mostraram ser funcionais. A presença da ORF-11 no sítio att/1 de vários dos cassetes gênicos e o fenótipo de resistência destes isolados sugere fortemente o papel desta seqüência regulatória putativa em eventos pós-transcricionais. Esta seqüência regulatória também foi identificada nos novos alelos descritos, qnrVC1, arr-4 e arr-5, e apóia o perfil de resistência observados nos isolados selvagens de V. cholerae, P.aeruginosa e K.pneumoniae. Além disso, foi identificada, pela primeira vez, uma ORF-11-like em potencial (ORF-15) que poderia aumentar a expressão dos cassetes dfrB7. Em conclusão, este estudo foi original na determinação do padrão de transcrição de cassetes fusionados, e no estabelecimento do efeito da posição do cassete no nível de transcrição em isolados selvagens de P. aeruginosa (PS1 e PS26). Verificou-se que a multi-resistência destes isolados era multifatorial, e que uma regulação pós-transcricional influenciava o fenótipo final de resistência. Considerando os isolados de P. aeruginosa, os cassetes gênicos em integrons de classe 1 tinham um papel secundário no perfil de resistência.
