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1.
São Paulo; s.n; 2016. [111] p. ilus, tab, graf.
Tese em Português | LILACS | ID: biblio-871613

RESUMO

INTRODUÇÃO: A infecção por HIV-1 é um grave problema de saúde pública causando elevada taxa de morbidade e mortalidade. Entretanto, alguns indivíduos são considerados resistentes à infecção por HIV-1, mesmo após repetidas exposições ao vírus. Vários fatores imunológicos e genéticos podem estar associados a resistência à infecção, como ativação de componentes da imunidade inata e também devido ao baixo perfil de ativação das células T. É possível que nos indivíduos expostos e não infectados por HIV-1 (ENI) ocorra uma importante atuação das células T secretoras de IL-17 e IL-22, e também as células T reguladoras, pois são necessárias para a manutenção e homeostase das mucosas associadas ao intestino (GALT). OBJETIVO: Avaliar o fenótipo e a função de células TCD4+ e TCD8+ em casais sorodiscordante ao HIV-1, compostos por indivíduos ENI e os parceiros infectados por HIV-1. MÉTODOS: Os casais sorodiscordantes ao HIV-1, consistiam de 23 indivíduos expostos não-infectados (ENI), 14 mulheres e 9 homens, com mediana de 41 anos e 21 parceiros infectados por HIV-1 (HIV), 20 homens e 1 mulher com mediana de 41 anos. Os controles saudáveis foram 24 indivíduos (14 mulheres e 10 homens) com mediana de 37 anos. Os casais sorodiscordantes foram compostos por 16 heterossexuais e 7 homossexuais, com tempo de relacionamento de 13 anos. As frequências de células Th17, Th22 e Tc22, as células T polifuncionais foram analisadas em células mononucleares (CMNs) do sangue periférico, estimulados com peptídeos da região Gag do HIV-1 e da enterotoxina B do Staphylococcus aureus (SEB), a frequência de células T reguladoras, o perfil fenotípico de exaustão/diferenciação e a expressão da integrina alfa4?7 e CCR9 em células T, foram realizados por citometria de fluxo. RESULTADOS: No grupo HIV, as células T CD4+ e CD8+ do sangue periférico mostrou maior frequência de CD95 e PD-1 e baixa expressão de CD127 comparado ao grupo ENI e controle. A frequência de células Th17...


INTRODUCTION: The HIV-1 infection is a major public health problem causing high morbidity and mortality. However, some individuals are considered resistant to HIV-1 infection even after repeated HIV-1 exposures. Several immunologic and genetic factors could be associated with the resistance to infection, such as activation of innate immunity components and due to the low profile of T-cell activation. It is possible that in HIV-1 exposed uninfected individuals (EU) occurs an important activity of the T cells secreting IL-17 and IL-22, including regulatory T cells, which are necessary to maintenance of homeostasis of gut-associated lymphoid tissue (GALT). AIM: To evaluate the phenotype and function of CD4+ and CD8+ T cells in HIV-1-serodiscordant couples, composed by the EU individuals and the infected HIV-1 partners. METHODS: The HIV-1-serodiscordant couples consisted of 23 EU individuals, 14 women and 9 men, with a median age of 41 years and 21 partners infected by HIV-1, 20 men and 1 woman, with a median of 41 years. Healthy controls consisted of 24 individuals (14 women and 10 men) with a median age of 37 years. The serodiscordant couples were composed by 16 homosexuals and 7 heterosexuals, reporting a median relationship duration of 13 years with a single partner. The frequency of Th17, Th22 and Tc22 cells, the polyfunctional T cells were assessed in mononuclear cells (MNCs) from peripheral blood, stimulated with the peptides from the gag region of HIV-1 and enterotoxin B from Staphylococcus aureus (SEB), the frequency of regulatory T cells and the exhaustion/differentiation phenotypic profile and expression of integrin alfa4beta7 and CCR9 in T cells were assessed by flow cytometry. RESULTS: In HIV group, CD4+ and CD8+ T cells from peripheral blood showed a higher frequency of PD-1, and CD95 and low expression of CD127 compared to ENI and control groups. The frequency of Th17 cells in MNCs increased in ENI and HIV-1 groups in the unstimulated...


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Imunidade Adaptativa , Citocinas , Citometria de Fluxo , Genes gag , HIV , Linfócitos
2.
Rev. Soc. Bras. Med. Trop ; 48(3): 249-257, May-Jun/2015. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-749868

RESUMO

INTRODUCTION: Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) has spread worldwide, with several subtypes and circulating recombinant forms. Brazil has an incidence of 20.5 HIV-1/acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) patients per 100,000 inhabitants; however, the Southernmost State of Rio Grande do Sul (RS) has more than twice the number of HIV-1-infected people (41.3/100,000 inhabitants) and a different pattern of subtype frequencies, as previously reported in studies conducted in the capital (Porto Alegre) and its metropolitan region. This study examined HIV-1/AIDS epidemiological and molecular aspects in the countryside of Rio Grande do Sul. METHODS: Socio-demographic, clinical and risk behavioral characteristics were obtained from HIV-1-positive adult patients using a structured questionnaire. HIV-1 subtypes were determined by nested-polymerase chain reaction (PCR) and sequencing of the pol and env genes. RESULTS: The study sample included 149 (55% women) patients with a mean age of 41.8 ± 11.9 years. Most (73.8%) patients had a low education level and reported heterosexual practices as the most (91.9%) probable transmission route. HIV-1 subtypes were detected in 26 patients: 18 (69.2%) infected with subtype C, six (23.1%) infected with subtype B and two (7.7%) infected with BC recombinant forms. CONCLUSIONS: These data highlight the increasing number of HIV-1 subtype C infections in the countryside of South Brazil. .


Assuntos
Adulto , Feminino , Humanos , Masculino , Infecções por HIV/epidemiologia , HIV-1 , Brasil/epidemiologia , Estudos Transversais , Genótipo , Genes env/genética , Genes gag/genética , Infecções por HIV/virologia , HIV-1 , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Reação em Cadeia da Polimerase , Fatores de Risco
3.
Biol. Res ; 47: 1-8, 2014. graf, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: biblio-950718

RESUMO

BACKGROUND: Human Immunodeficiency Virus Type 1 (HIV-1) viral load testing at regular intervals is an integral component of disease management in Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) patients. The need in countries like India is therefore an assay that is not only economical but efficient and highly specific for HIV-1 sub type C virus. This study reports a SYBR Green-based HIV-1 real time PCR assay for viral load testing and is designed for enhanced specificity towards HIV-1 sub type C viruses prevalent in India. RESULTS: Linear regression of the observed and reference concentration of standards used in this study generated a correlation coefficient of 0.998 (p<0.001). Lower limit of detection of the test protocol was 50 copies/ml of plasma. The assay demonstrated 100% specificity when tested with negative control sera. The Spearman coefficient of the reported assay with an US-FDA approved, Taqman probe-based commercial kit was found to be 0.997. No significant difference in viral load was detected when the SYBR Green based assay was used to test infected plasma stored at -20°C and room temperature for 7 days respectively (Wilcoxon signed rank test, p=0.105). In a comparative study on 90 pretested HIV-1 positive samples with viral loads ranging from 5,000 - 25,000 HIV-1 RNA copies/ml and between two commercial assays it was found that the later failed to amplify in 13.33% and 10% samples respectively while in 7.77% and 4.44% samples the copy number values were reduced by >0.5 log value, a figure that is considered clinically significant by physicians. CONCLUSION: The HIV-1 viral load assay reported in this study was found to be robust, reliable, economical and effective in resource limited settings such as those existing in India. PCR probes specially designed from HIV-1 Subtype C-specific nucleotide sequences originating from India imparted specificity towards such isolates and demonstrated superior results when compared to two similar commercial assays widely used in India.


Assuntos
Humanos , RNA Viral/sangue , Infecções por HIV/diagnóstico , HIV-1/isolamento & purificação , Carga Viral/métodos , Compostos Orgânicos , Kit de Reagentes para Diagnóstico/economia , Sequência de Bases/genética , Genes gag/genética , Modelos Lineares , Sensibilidade e Especificidade , HIV-1/classificação , Estatísticas não Paramétricas , Gerenciamento Clínico , Limite de Detecção , Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real , Invenções , Índia
4.
Braz. j. med. biol. res ; 45(2): 104-112, Feb. 2012. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-614579

RESUMO

Few studies have reported the molecular epidemiological characterization of HIV-1 in the Northern region of Brazil. The present study reports the molecular and epidemiological characterization of 31 HIV-1 isolates from blood donors from the State of Amazonas who donated blood between April 2006 and March 2007. Serum/plasma samples from all donors were screened for HIV antibodies by ELISA and the results confirmed by Western blot analysis. Genomic DNA was extracted from the buffy coat using the Super Quik-Gene-DNA Isolation kit. Nested PCR was performed on the env, gag, and pol regions of HIV-1 using the Gene Amp PCR System 9700. Sequencing reactions were performed using the inner PCR primers and the DYEnamic™ ET Dye Terminator Kit, and phylogenetic analysis was performed using the gag, pol, and env gene sequences. We collected samples from 31 blood donors who tested positive for HIV-1 in confirmatory experiments. The male:female ratio of blood donors was 3.4:1, and the mean age was 32.4 years (range: 19 to 61 years). Phylogenetic analysis showed that subtype B is the most prevalent among Northern Brazilian HIV-1-seropositive blood donors. One HIV-1 subtype C and one circulating recombinant form (CRF_BF) of HIV-1 were identified in the State of Amazonas. This is the first study showing the occurrence of a possible "homogenous" subtype C in this region of Brazil. This finding could contribute to a better characterization of the HIV-1 strains that circulate in the country.


Assuntos
Adulto , Feminino , Humanos , Pessoa de Meia-Idade , Adulto Jovem , Doadores de Sangue , Infecções por HIV/virologia , HIV-1 , Sequência de Bases , Western Blotting , Brasil/epidemiologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Genes env/genética , Genes gag/genética , Genes pol/genética , Infecções por HIV/epidemiologia , HIV-1 , Dados de Sequência Molecular , Filogenia , Reação em Cadeia da Polimerase
5.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 101(8): 881-885, Dec. 2006. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-440576

RESUMO

Genetic variability of human immunodeficiency virus type - 1(HIV-1) is a potential threat for both diagnosis and treatment of HIV/AIDS, as well as the development of effective vaccines. Up to now, HIV subtypes circulating among HIV-positive patients in the state of Espírito Santo were not known. In the present study, blood samples from 100 therapy-naïve HIV-1 infected patients were collected and the HIV subtype was determined through the Heteroduplex Mobility Assay (HMA). Ninety-seven out of 100 studied samples were subtyped by HMA, 73 samples (75.2 percent) were from subtype B, 9 (9.3 percent) from subtype F, 3 (3.1 percent) from subtype C, 6 (6.2 percent) Benv/Fgag, and another 6 (6.2 percent) Fenv/Bgag, what suggests that recombinant viruses were present in the studied samples. Twenty-eight percent of the subtype B samples were represented by the Brazilian B" subtype, which were identified by RFLP with Fok I. Data presented here demonstrate that the epidemiological characteristics of the HIV epidemic in the state of Espírito Santo are similar to those from the other Southeastern states and helped to better understand the genetic polymorphism of HIV in Brazil.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Variação Genética , Genes env/genética , Genes gag/genética , Infecções por HIV/virologia , HIV-1 , Brasil , Análise Heteroduplex , HIV-1 , Reação em Cadeia da Polimerase , Polimorfismo de Fragmento de Restrição
6.
West Indian med. j ; 54(5): 279-282, Oct. 2005. ilus
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-472833

RESUMO

The subtypes of 141 isolates of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) from Jamaica were determined by a combination of env and gag heteroduplex mobility analysis (HMA) genotyping. The majority of HIV-1 isolates were subtype B (131/141, 93.0); one (0.8) isolate each of subtypes C, D and E was found and 7 (4.9) were indeterminate. These results and the failure of the sets of primers used to amplify some of the HIV-1 isolates provide strong evidence of genetic diversity of the HIV/AIDS epidemic in Jamaica. Surveillance of the circulating HIV-1 genetic subtypes is a pre-requisite for developing regional vaccine strategies and understanding the transmission patterns of the virus. This is the first study of its kind in Jamaica and the findings complement data from other Caribbean countries. This work supports the view of colleagues from the French and Spanish-speaking Caribbean that an epidemiological network supported by regional laboratories will help track this epidemic accurately with positive outcomes for the public.


Los subtipos de 141 aislados del virus tipo 1 de la inmunodeficiencia humno (VIH-1) en Jamaica, fueron determinados combinando la genotipificación por análisis de heterodúplex (HMA) en los genes env y gag. La mayor parte de los aislados HIV-1 fueron del subtipo B (131/141, 93.0%), se halló uno (0.8%) aislado para cada uno de los subtipos C, D y E, en tanto que 7 (4.9%) fueron indeterminados. Estos resultados y el fallo de los conjuntos de primers usados para amplificar algunos de los aislados de VIH-1, ofrecen fuerte evidencia de la diversidad epidémica del VIH/SIDA en Jamaica. La vigilancia de los subtipos genéticos de VIH-1 en circulación, constituye un pre-requisito, tanto para desarrollar estrategias de vacunas a nivel regional, como para entender los patrones de transmisión del virus. Este es el primer estudio de este tipo en Jamaica, y nuestros hallazgos complementan los datos obtenidos en otros países del Caribe. Coincidimos con nuestros colegas del Caribe francófono e hispano-parlante en cuanto a que una red epidemiológica apoyada por los laboratorios regionales, nos ayudaría a continuar rastreando esta epidemia con exactitud, y con resultados positivos para el público.


Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , HIV-1 , Genes env , Genes gag , Infecções por HIV/epidemiologia , HIV-1 , Amostragem , DNA Viral/análise , Incidência , Infecções por HIV/diagnóstico , Jamaica/epidemiologia , Medição de Risco , Países em Desenvolvimento , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Sensibilidade e Especificidade
7.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 56(2): 135-142, abr. 2004. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-360675

RESUMO

Amostras de sangue de 12 animais soropositivos pelo teste de imunodifusão em gel de agarose e que não apresentavam sinais clínicos sugestivos de infecção pelo vírus da artrite-encefalite caprina (CAEV) foram coletadas para isolamento viral. Mácrofagos derivados de monócitos foram co-cultivados com células de membrana sinovial caprina (MSC), resultando em cinco amostras que apresentaram efeito citopático característico do tipo persistente, semelhante ao observado para o CAEV. Uma técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) foi padronizada para amplificar parte do gene gag do genoma pró-viral, codificante para a proteína do capsídeo viral (p25). As cinco amostras foram amplificadas pela PCR e três delas, BR-UFMG/PL1, BR-UFMG/PL2 e BR-UFMG/PL3, foram seqüenciadas diretamente dos seus produtos de PCR. O alinhamento múltiplo das seqüências obtidas com outras de lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), obtidas no GenBank, e o dendrograma revelaram que as novas amostras de CAEV são únicas e distintas das demais amostras de LVPR, possuindo maior identidade de nucleotídeos e aminoácidos entre si e com as amostras de CAEV do que com a do vírus maedi-visna.


Assuntos
Animais , Vírus da Artrite-Encefalite Caprina , Genes gag , Cabras , Reação em Cadeia da Polimerase
8.
Mem. Inst. Oswaldo Cruz ; 98(4): 461-463, June 2003. ilus, tab
Artigo em Inglês | LILACS | ID: lil-344235

RESUMO

We analyzed, by env and gag heteroduplex mobility assay, 149 human immunodeficiency virus (HIV-1) positive samples collected in Ceará during the year 2000. The prevalence of subtype B was 81.2 percent and the prevalence of subtype F and B/F recombinants were both 2.7 percent. Eight (5.4 percent) and 12 (8 percent) out of 149 samples showed indeterminate results in the env and gag analysis respectively. By FokI restriction fragment length polymorphism, 34 percent of the subtype B samples were identified as the typical Brazilian subtype B.In the present study, we identified HIV-1 subtype F and B/F in Ceará for the first time. Our results contribute to the understanding of HIV in Brazil, and may prove useful for the development of vaccine candidates


Assuntos
Criança , Adolescente , Adulto , Humanos , Masculino , Feminino , Pessoa de Meia-Idade , DNA Viral , Genes env , Genes gag , Infecções por HIV , HIV-1 , Brasil , Variação Genética , Análise Heteroduplex , Reação em Cadeia da Polimerase , Polimorfismo de Fragmento de Restrição , Prevalência
9.
Pesqui. vet. bras ; 18(3/4): 119-126, jul.-dez. 1998. ilus, tab
Artigo em Português | LILACS | ID: lil-361978

RESUMO

Realizou-se a análise de parte do gene gag, que codifica para as proteínas do capsídeo viral, de 5 amostras de CAEV isolados de animais naturalmente infectados do Rio Grande do Sul, Brasil. As amostras foram analisadas por PCR e clivagem com enzimas de restrição (DdeI, HaeIII e NdeI). Fragmentos de aproximadamente 600 pb foram amplificados na PCR e submetidos à digestão enzimática. Os perfis obtidos foram comparados com as seqüências gag de 6 lentivírus de pequenos ruminantes.Os resultados obtidos permitiram separar as amostras em 3 grupos distintos. Os fragmentos observados foram diferentes dos descritos previamente


Assuntos
Animais , Genes gag , Infecções por Lentivirus/virologia , Vírus da Artrite-Encefalite Caprina/genética , Vírus da Artrite-Encefalite Caprina/isolamento & purificação , Brasil , Biologia Molecular/métodos , Cabras , Conformação Molecular
10.
Rev. Fed. Odontol. Colomb ; 54(189): 71-9, sept.-dic. 1996. ilus
Artigo em Espanhol | LILACS | ID: lil-201637

RESUMO

El presente artículo de revisión se centra en las consideraciones fundamentales sobre la biología molecular del virus de la inmunodeficiencia humana, el principal de los retrovirus que infectan a los hombres, destacando sus aspectos constitutivos así como genéticos y las alteraciones con la célula huésped. Se presenta además los aspectos morfofuncionales básicos de los linfocitos T CD4 y las interacciones que a nivel de membrana se producen para favorecer la infección por el virus y que explican su fisiopatología. Finalmente, se destacan los eventos intracelulares que conducen a la replicación y ensamblaje viral que producen la muerte celular y explican la inmunosupresión del huésped


Assuntos
Humanos , Infecções por HIV/imunologia , Infecções por HIV/fisiopatologia , HIV/genética , Biologia Molecular , DNA/fisiologia , Genes env/fisiologia , Genes gag/fisiologia , Genes Reguladores/fisiologia , Genes vif/fisiologia , Genes vpr/fisiologia , Genes vpu/fisiologia , Receptores de Antígenos de Linfócitos T alfa-beta/fisiologia , Receptores de HIV/fisiologia , Infecções por Retroviridae/fisiopatologia , Linfócitos T/fisiologia
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