HLA-DQA1*04: 01 is related to a higher multiple sclerosis lesion load on T2/Flair MRI sequences / O HLA-DQA1*04: 01 está relacionado com uma alta carga lesional na ressonância magnética em T2/Flair nos pacientes com esclerose múltipla

ABSTRACT Background: The genetic predisposition to multiple sclerosis (MS) is associated with HLA alleles, especially HLA-DRB1*15:01. Objective: To identify associations between findings in magnetic resonance imaging (MRI) and genetic features in a Brazilian cohort of patients with MS. Methods: We retrospectively studied data from 95 consecutive patients with MS. Two independent observers who were blinded to the clinical data identified black holes and enhanced lesions on T1 MRI sequences, and counted and measured contrast-enhanced lesions on T2 and Flair (fluid attenuation inversion recovery) sequences. Cases were classified according to lesion size, number, and volume. The HLA-DRB1, HLA-DQB1, and HLA-DQA1 alleles, and the rs4774, rs3087456, rs6897932, rs731236, and rs1033182 single nucleotide polymorphisms were identified by polymerase chain reaction amplification with sequence-specific primers using the One Lambda Inc. Kit, Canoga Park, CA, USA. Results: Patients with the HLA-DQA1*04:01 allele had lesion load (adjusted for age, sex, and MS duration) above median compared with patients with other HLA-DQA1 alleles (p=0.02). There were no differences among all the other HLA alleles and single nucleotide polymorphisms and lesion load. Conclusions: The correlation of the HLA-DQA1*04:01 allele with a higher lesion load on T2/Flair MRI sequences suggests that the presence of this allele is associated with the risk of greater MS severity.

RESUMO Antecedentes: A predisposição genética para a esclerose múltipla (EM) está associada a alelos HLA, principalmente o HLA-DRB1*15:01. Objetivo: Identificar associações entre lesões na ressonância magnética e características genéticas em uma coorte brasileira de pacientes com EM. Métodos: Estudamos retrospectivamente os dados de 95 pacientes consecutivos com EM. Dois observadores independentes que desconheciam os dados clínicos identificaram "black holes" e lesões realçadas pelo contraste nas sequências de ressonância magnética T1 e contaram e mediram as lesões nas sequências T2 e FLAIR (fluid attenuated inversion recovery). Os casos foram classificados de acordo com tamanho, número e volume da lesão. Os alelos HLA-DRB1, HLA-DQB1 e HLA-DQA1 e os polimorfismos de nucleotídeo único rs4774, rs3087456, rs6897932, rs731236 e rs1033182 foram identificados por amplificação de reação em cadeia da polimerase com iniciadores específicos de sequência usando o kit One Lambda Inc., Canoga Park, CA, EUA. Resultados: Os pacientes com alelo HLA-DQA1*04:01 apresentaram carga de lesão (ajustada para idade, sexo e duração da EM) acima da mediana em comparação com outros pacientes com demais alelos HLA-DQA1 (p=0,02). Não houve diferenças entre todos os outros alelos HLA e polimorfismos de nucleotídeo único e carga lesional. Conclusões: A correlação do alelo HLA-DQA1*04:01 com maior carga de lesão nas sequências de RM em T2 sugere que a presença desse alelo pode estar associada ao risco de maior gravidade da EM.

HLA-alleles class I and II associated with genetic susceptibility to neuromyelitis optica in Brazilian patients / Alelos HLA classes I e II associados à suscetibilidade genética a neuromielite óptica em pacientes brasileiros

ABSTRACT Objective: To study the genetic susceptibility to neuromyelitis optica (NMO) as well as the relationship between HLA genotypes and susceptibility to the disease in the southern Brazilian population. Methods: We analyzed patients with NMO, who met criteria for Wingerchuk's diagnosis of NMO, with detected serum anti-AQP4-IgG antibody. The HLA genotyping was performed by high-resolution techniques (Sanger sequencing) in patients and controls. The HLA genotypes were statistically compared with a paired control population. Results: The HLA genotyping revealed the diversity of the southern Brazilian population whose HLA profile resembled European and Asian populations. Some alleles had statistical correlations with a positive association (increased susceptibility) with NMO, particularly the HLA-DRB1*04:05 and *16:02. Conclusions: In our study, the HLA genotype was different to that previously reported for other Brazilian populations. Although our study had a small cohort, HLA genotypes were associated with increased susceptibility to NMO for HLA-DRB1*04:05 and *16:02. The alleles of HLA class I HLA-A*02:08 and *30:09, HLA-B*08:04 and *35:04 showed an association before the Bonferroni correction.

RESUMO Objetivo: Estudar a suscetibilidade genética a neuromielite óptica (NMO) assim como sua relação com o genótipo HLA na população do sul do Brasil. Métodos: Nós analisamos pacientes com NMO que preenchiam os critérios diagnósticos de Wingerchuk para NMO, com presença do anticorpo anti-AQP4-IgG no soro. O genótipo HLA foi realizado usando técnicas de alta resolução (sequenciamento de Sanger) em pacientes e controles. Genótipos HLA foram estatisticamente comparados com uma população controle pareada. Resultados: Genotipagem HLA revelou a diversidade da população sul brasileira cujo perfil HLA lembra as populações europeia e asiática. Alguns alelos tiveram correlação estatística com associação positiva (suscetibilidade aumentada) com NMO, particularmente o HLA-DRB1*04:05 e *16:02. Conclusões: Em nosso estudo, o genótipo HLA foi diferente do previamente relatado em outras populações brasileiras. Embora o número de pacientes tenha sido pequeno, HLA específicos foram associados com suscetibilidade aumentada a NMO para HLA-DRB1*04:05, *16:02. Os alelos HLA classe I HLA*02:08 e *30:09, HLA-B*08:04 e *35:04 tiveram associação antes da correção de Bonferroni.

Polimorfismos de un solo nucleótido representativos para los alelos clásicos del antígeno leucocitario humano en familias antioqueñas con diabetes mellitus tipo 1 / Classical HLA alleles tag SNP in families from Antioquia with type 1 diabetes mellitus

Resumen Introducción. La región del antígeno leucocitario humano (Human Leukocyte Antigen, HLA) se ha asociado claramente con enfermedades autoinmunitarias, como la diabetes mellitus de tipo 1. Los polimorfismos representativos de un solo nucleótido (tag Single Nucleotide Polymorphism, tag SNP) constituyen una forma alternativa de evaluar los alelos clásicos del HLA. En la población europea se ha reportado un grupo de tag SNP para múltiples alelos clásicos relacionados con la predisposición o la resistencia frente a dicha enfermedad. Objetivo. Validar la metodología basada en los tag SNP enfocada en la inferencia de alelos HLA clásicos, y evaluar su asociación con la diabetes mellitus de tipo 1 en una muestra de familias antioqueñas. Materiales y métodos. Se estudió una muestra de 200 familias antioqueñas con uno a dos hijos afectados por diabetes mellitus de tipo 1. Se genotipificaron 13 SNP mediante el ARMS-PCR (Amplification Refractory Mutation System-Polymerase Chain Reaction) con cuatro iniciadores, o mediante la PCR-RFLP (PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism). Además, se evaluó la validez de los tag SNP de 1.000 genomas reportados en europeos en una muestra de 60 individuos de la población colombiana de Medellín. Se hicieron las pruebas de desequilibrio de la transmisión, de desequilibrio de ligamiento y de equilibrio de Hardy-Weinberg. Resultados. En la población de estudio no se encontró suficiente desequilibrio de ligamiento entre los SNP y los alelos clásicos evaluados, por lo cual no fue posible inferir los alelos clásicos del HLA para el conjunto de familias con diabetes mellitus de tipo 1. El estudio de asociación evidenció que esta región aporta factores tanto de riesgo como de protección para el desarrollo de la enfermedad. Los tag SNP apropiados para la muestra de estudio se determinaron usando los SNP ubicados en la región HLA en la base de datos del 1000 Genomes Project en la mencionada población. Conclusiones. Los patrones de desequilibrio de ligamiento en la población estudiada fueron diferentes a los reportados para la población europea. A pesar de esto, se encontró evidencia clara sobre el papel de la región HLA en el riesgo de padecer diabetes mellitus de tipo 1 en la población de estudio.

abstract Introduction: The HLA region strongly associates with autoimmune diseases, such as type 1 diabetes. An alternative way to test classical HLA alleles is by using tag SNP. A set of tag SNP for several classical HLA alleles has been reported as associated with susceptibility or resistance to this disease in Europeans. Objective: We aimed at validating the methodology based on tag SNP focused on the inference of classical HLA alleles, and at evaluating their association with type 1 diabetes mellitus in a sample of 200 families from Antioquia. Materials and methods: We studied a sample of 200 families from Antioquia. Each family had one or two children with T1D. We genotyped 13 SNPs using tetra-primer ARMS-PCR or PCRRFLP. In addition, we tested the validity of the tag SNP reported for Europeans in 60 individuals from a population of Colombians living in Medellín (CLM) from the 1000 Genomes Project database. Statistical analyses included the Hardy-Weinberg equilibrium, the transmission disequilibrium and the linkage disequilibrium tests. Results: The linkage disequilibrium was low in reported tag SNP and classical HLA alleles in this CLM population. Association analyses revealed both risk and protection factors to develop type 1 diabetes mellitus. Appropriate tag SNPs for the CLM population were determined by using the genotype information available in the 1000 Genome Project database. Conclusions: Although linkage disequilibrium patterns in this CLM population were different from those reported in Europeans, we did find strong evidence of the role of HLA in the development of type 1 diabetes mellitus in the study population.

Pesticide exposure and health conditions of terrestrial pesticide applicators in Córdoba Province, Argentina / Exposición a plaguicidas y condiciones de salud de agroaplicadores terrestres de la Provincia de Córdoba, Argentina / Exposição aos agrotóxicos e condições de saúde dos aplicadores de pesticidas da Província de Córdoba, Argentina

Agricultural workers represent a population that is highly vulnerable to the toxic effects of pesticide exposure. This cross sectional study aimed to describe the health conditions of terrestrial pesticide applicators in Córdoba Province, Argentina, their work practices and socio-demographic characteristics, by means of a standardized self-administered questionnaire (n = 880). A descriptive analysis reported a high prevalence of occasional or frequent symptoms: 47.4% had symptoms of irritation, 35.5% fatigue, 40.4% headache and 27.6% nervousness or depression. Using logistic regression models, risk and protective factors were found for symptoms of irritation, medical consultation and hospitalization. Among the occupational exposure variables, marital status, length of time in the job, low level of protection with regard to the use of personal protective equipment, combined use of different pesticides and the application of the insecticide endosulfan, were associated with a higher frequency of reported symptoms and higher consultation rates and hospitalization.

Los trabajadores agrícolas son una población altamente vulnerable a los efectos tóxicos de la exposición a plaguicidas. Con el objetivo de describir las condiciones de salud de agroaplicadores terrestres de plaguicidas de la Provincia de Córdoba, Argentina, sus prácticas laborales y características sociodemográficas, se realizó un estudio transversal, mediante cuestionario (n = 880). Un análisis descriptivo reportó alta prevalencia de sintomatología ocasional o frecuente: 47,4% síntomas irritativos, 35,5% cansancio, 40,4% cefalea y 27,6% ansiedad o depresión. Mediante modelos logísticos se detectaron factores protectores y de riesgo que explican la presencia de síntomas irritativos, la consulta médica y la hospitalización. El estado civil, la antigüedad en la tarea, el nivel de protección considerando uso de equipo de protección personal, la exposición múltiple a plaguicidas y la aplicación del insecticida endosulfán, se asociaron a mayor frecuencia de reporte de síntomas, consultas médicas y hospitalizaciones por causas relacionadas con la exposición a plaguicidas.

Os trabalhadores agrícolas são uma população altamente vulnerável aos efeitos tóxicos da exposição a pesticidas. Este estudo transversal teve o objetivo de descrever as condições de saúde de aplicadores terrestres de pesticidas da Província de Córdoba, Argentina, suas práticas de trabalho e características sociodemográficas, por meio de um questionário padronizado autoadministrado (n = 880). A análise descritiva relatou alta prevalência de sintomas ocasionais ou frequentes: 47,4% sintomas irritativos, 35,5% fadiga, 40,4% dor de cabeça e 27,6% ansiedade ou depressão. Mediante modelos logísticos foram detectados os fatores protetores e do risco que explicam a presença de sintomas irritativos, consulta médica e hospitalização. O estado civil, anos de trabalho, o nível de proteção considerando o uso de equipamentos de proteção individual, a exposição a vários pesticidas e aplicação do inseticida endosulfan, foram associados com maior frequência de sintomas, consultas médicas e hospitalização por causas relacionadas à exposição ao agrotóxico.

PPARγ induces growth inhibition and apoptosis through upregulation of insulin-like growth factor-binding protein-3 in gastric cancer cells

Peroxisome proliferator activator receptor-gamma (PPARγ) is a ligand-activated transcriptional factor involved in the carcinogenesis of various cancers. Insulin-like growth factor-binding protein-3 (IGFBP-3) is a tumor suppressor gene that has anti-apoptotic activity. The purpose of this study was to investigate the anticancer mechanism of PPARγ with respect to IGFBP-3. PPARγ was overexpressed in SNU-668 gastric cancer cells using an adenovirus gene transfer system. The cells in which PPARγ was overexpressed exhibited growth inhibition, induction of apoptosis, and a significant increase in IGFBP-3 expression. We investigated the underlying molecular mechanisms of PPARγ in SNU-668 cells using an IGFBP-3 promoter/luciferase reporter system. Luciferase activity was increased up to 15-fold in PPARγ transfected cells, suggesting that PPARγ may directly interact with IGFBP-3 promoter to induce its expression. Deletion analysis of the IGFBP-3 promoter showed that luciferase activity was markedly reduced in cells without putative p53-binding sites (-Δ1755, -Δ1795). This suggests that the critical PPARγ-response region is located within the p53-binding region of the IGFBP-3 promoter. We further demonstrated an increase in PPARγ-induced luciferase activity even in cells treated with siRNA to silence p53 expression. Taken together, these data suggest that PPARγ exhibits its anticancer effect by increasing IGFBP-3 expression, and that IGFBP-3 is a significant tumor suppressor.

Skeletal muscle major histocompatibility complex class I and II expression differences in adult and juvenile dermatomyositis

OBJECTIVE: To analyze major histocompatibility complex expression in the muscle fibers of juvenile and adult dermatomyositis. METHOD: In total, 28 untreated adult dermatomyositis patients, 28 juvenile dermatomyositis patients (Bohan and Peter's criteria) and a control group consisting of four dystrophic and five Pompe's disease patients were analyzed. Routine histological and immunohistochemical (major histocompatibility complex I and II, StreptoABComplex/HRP, Dakopatts) analyses were performed on serial frozen muscle sections. Inflammatory cells, fiber damage, perifascicular atrophy and increased connective tissue were analyzed relative to the expression of major histocompatibility complexes I and II, which were assessed as negatively or positively stained fibers in 10 fields (200X). RESULTS: The mean ages at disease onset were 42.0±15.9 and 7.3±3.4 years in adult and juvenile dermatomyositis, respectively, and the symptom durations before muscle biopsy were similar in both groups. No significant differences were observed regarding gender, ethnicity and frequency of organ involvement, except for higher creatine kinase and lactate dehydrogenase levels in adult dermatomyositis (p<0.050). Moreover, a significantly higher frequency of major histocompatibility complex I (96.4% vs. 50.0%, p<0.001) compared with major histocompatibility complex II expression (14.3% vs. 53.6%, p=0.004) was observed in juvenile dermatomyositis. Fiber damage (p=0.006) and increased connective tissue (p<0.001) were significantly higher in adult dermatomyositis compared with the presence of perifascicular atrophy (p<0.001). The results of the histochemical and histological data did not correlate with the demographic data or with the clinical and laboratory features. CONCLUSION: The overexpression of major histocompatibility complex I was an important finding for the diagnosis of both groups, particularly for juvenile dermatomyositis, whereas there was lower levels of expression of major histocompatibility complex II than major histocompatibility complex I. This finding was particularly apparent in juvenile dermatomyositis.

Frecuencia de alelos HLA de clase I y II en una cohorte de pacientes con espondiloartritis provenientes del noroccidente colombiano / Frequency of HLA alleles class I and II in a cohort of northwestern Colombian patients with spondyloarthritis

Introducción. Las espondiloartritis son enfermedades reumatológicas crónicas que afectan el esqueleto axial y las articulaciones periféricas, con varias manifestaciones extraarticulares. La asociación con el HLA-B27 sigue siendo uno de los vínculos más fuertes conocidos entre estas entidades y el complejo mayor de histocompatibilidad; sin embargo, la distribución mundial del HLA-B27 varía considerablemente y se han descrito asociaciones con genes no HLA-B27. Objetivo. Conocer la frecuencia de alelos HLA de clase I y II en pacientes con espondiloartritis provenientes del noroccidente colombiano y su frecuencia en las manifestaciones clínicas y radiológicas específicas. Materiales y métodos. Se condujo un estudio descriptivo, observacional, de corte transversal, retrospectivo y prospectivo entre 2005 y 2008 de 56 pacientes colombianos con espondiloartritis. Se identificaron los alelos correspondientes a los loci HLA de clase I y II (HLA-B, HLADQB1 y HLADRB). Se analizó su frecuencia con las manifestaciones clínicas axiales, periféricas, extraarticulares y radiológicas. Resultados. Se encontró una baja frecuencia de HLA-B27 en la población total (50 %), aunque fue el alelo más frecuente, junto con HLA-DRB4*01 (35,7 %) y HLA-DQB1*0501 (28,6 %), en todos los pacientes en general y en cada una de las manifestaciones clínicas y radiológicas. Se resalta la alta frecuencia de HLA-B27 y HLA-DRB4*01 (64,3 %) en pacientes con dactilitis, hallazgo novedoso sin previa descripción. Conclusión. Los alelos HLA-B27, HLA-DRB4*01 y HLA-DQB1*0501 fueron frecuentes en los diferentes subtipos de espondiloartritis y en las manifestaciones clínicas axiales, periféricas y extraarticulares específicas, además de la sacroiliítis radiológica.

Introduction. Spondyloarthritis is a chronic rheumatic disease that affect the axial skeleton and peripheral joints, along with several extra-articular manifestations. The association with HLA-B27 remains one of the strongest known links between these entities and the major histocompatibility complex. However, the global distribution of HLA-B27 varies considerably and furthermore, associations with non-HLA-B27 genes have been described. Objective. The frequency of HLA class I and II was determined in a population of patients with spondyloarthritis with respect to detection in the clinical setting and by radiology. Materials and methods. A descriptive, observational, cross-sectional, retrospective and prospective study was conducted in 56 patients from northwestern Colombia. Each was diagnosed with spondyloarthritis between 2005 and 2008. In each case, alleles were identified for the loci HLA class I and II (HLA-B; HLADQB1 and HLADRB). The frequency of these alleles in the axial, peripheral, extraarticular and radiological manifestations. Results.The frequency of HLA-B27 was 50% overall, and it was the most frequent allele. The two other alleles were HLA.DRB4*01 at 35.7% and HLA-DQB1*0501 at 28.6%, as detected in each of the clinical and radiological manifestations. A high frequency of HLA-B27 and HLA-DRB4*01 (64.3%) was noted in patients with dactylitis. Conclusion. The alleles HLA-B27, HLA-DRB4*01 and HLA-DQB1*0501 were common in the different subtypes of spondyloarthritis and were frequent in the specific clinical axial, peripheral and extraarticular clinical manifestations, as well as radiological sacroiliitis.

Estudo de HLA classes I e II em trinta pacientes equatorianos com artrite reumatoide em comparação com alelos de indivíduos sadios e afetados com outras doenças reumáticas / Study of class I and II HLA alleles in 30 ecuadorian patients with rheumatoid arthritis compared with alleles from healthy and affected subjects with other rheumatic diseases

INTRODUÇÃO: A artrite reumatoide (AR) é uma doença inflamatória crônica sistêmica autoimune que provém de uma desordem incapacitante. Até hoje, a etiologia da AR é desconhecida. No entanto, já se cogitou a existência de indivíduos geneticamente passíveis de tê-la. Muitos estudos já foram realizados em todo o mundo, como, por exemplo, na Polônia, Argentina, Chile, México, Brasil, Colômbia, entre outros países, com relação à influência entre os alelos HLA-DR e a doença, mas não no Equador. OBJETIVO: O principal objetivo deste estudo foi determinar a participação dos alelos de HLA classes I e II em pacientes com AR. PACIENTES E MÉTODOS: Esta pesquisa foi desenvolvida em 30 pacientes adultos com AR, previamente diagnosticados de acordo com os critérios de classificação do Colégio Norte-Americano de Reumatologia (ACR, 1987) e 28 controles. Para a tipificação de HLA classes I e II, adotou-se a técnica PCR-SSP, e as significâncias estatísticas foram avaliadas pelo teste de Qui-Quadrado. RESULTADOS: O HLA-DR4 está presente em 76,7 por cento dos pacientes, com uma frequência alélica de 45 por cento, enquanto apenas 21 por cento dos sujeitos controle o apresentaram. O teste de Qui-Quadrado confirma que as variáveis HLA-DR4 e RA estão altamente vinculadas (X² = 11,38, P = 0,00074). CONCLUSÃO: Há frequência maior de HLA-DR4 e HLA-DR14. Os resultados encontrados são similares aos encontrados em outros estudos. Porém, seria desejável aumentar o tamanho da amostra para encontrar um maior número de perfis genéticos e de alelos envolvidos.

INTRODUCTION: Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic systemic inflammatory autoimmune disease that originates from a disabling disorder. To date, the etiology of RA is unknown. However, the existence of genetically susceptible individuals was considered. Many studies have been performed worldwide, for example, in Poland, Argentina, Chile, Mexico, Brazil, and Colombia, among others, regarding the influence between HLA-DR alleles and disease, but not in Ecuador. OBJECTIVE: The aim of this study was to determine the involvement of Class I and II HLA alleles in patients with RA. PATIENTS AND METHODS: This study was conducted in 30 adult patients with RA previously diagnosed, according to the classification criteria of the American College of Rheumatology (ACR, 1987) and 28 controls. For Class I and II HLA typing, we adopted the PCR-SSP, and statistical significances were evaluated by Chi-Square. RESULTS: HLA-DR4 is present in 76.7 percent of patients, with an allele frequency of 45 percent, while only 21 percent of control subjects presented it. The chi-square confirms that HLA-DR4 and RA variables are highly bound (X2 = 11.38, P = 0.00074). CONCLUSION: There is increased frequency of HLA-DR4 and HLA-DR14. The results are similar to those found in other studies. But it would be desirable to increase the sample size in order to find a greater number of genetic profiles and alleles involved.

Frequência dos alelos HLA de Classe I e classe II em indivíduos com contratura de Dupuytren no Estado de São Paulo / Frequency of HLA Class I and Class II subjects with Dupuytren's contracture in the State of Sao Paulo

A contratura de Dupuytren é uma doença do tecido conectivo, resultante de um desequilíbrio fibroproliferativo, em que se formam nódulos e cordões fibrosos na fáscia palmar. Com a evolução da doença os cordões se retraem longitudinalmente em direção aos dedos causando a contratura digital que determina o aspecto característico da doença, levando ao diagnóstico diferencial com hanseníase. Sua incidência é maior na raça branca de origem européia, atingindo principalmente adultos do sexo masculino com idade superior a 50 anos. Muitos fatores de risco têm sido associados à contratura de Dupuytren, como fumo, álcool, trauma local, epilepsia e Diabetes mellitos, entre outros. Embora de etiologia desconhecida, é bem aceito o papel hereditário desta patologia. Estudos com marcadores genéticos, sugerem a associação do HLA-DR3 e autoanticorpo para o colágeno na contratura de Dupuytren. Recentemente foi demonstrada associação genética significativa entre HLA-DRB1*15 e risco de desenvolver a doença em pacientes do Norte Europeu. Assim, o presente estudo teve por objetivo, identificar a Freqüência dos alelos HLA de classe I e classe II em pacientes com a contratura de Dupuytren, atendidos no Instituto Lauro de Souza Lima. Ao mesmo tempo, investigar a presença de algum alelo que pudesse sugerir associação com fator de risco para o desenvolvimento da doença nessa população. Trata-se de um estudo inédito não havendo até o momento, estudo associando HLA e doença de Dupuytren na população brasileira. Para isso foram estudados 25 pacientes com diagnóstico da contratura de Dupuytren, com média etária de 54,24 anos e 443 controles saudaveis de mesma etnia e regiao geográfica. Foi possível observar a predominância do sexo masculino (68%) em relação ao feminino e a manifestação mais tardia no grupo das mulheres, concordadndo com dados da literatura. Foi também constatado alto índice de atividades manuais de moderada a pesada no grupo estudado e a descendência européia na totalidade...

Estudo dos polimorfismos do HLA e microssatélites na infecção pelo HIV-1/AIDS / Study of HLA and microsatellite markers polymorphisms in the HIV-1 disease

Fatores genéticos do hospedeiro podem promover resistência à infecção pelo HIV-1 e o retardo no curso da doença. O polimorfismo do HLA é considerado determinante na infecção do HIV-1 e AIDS. Os genes HLA, localizados na região de classe I do MHC, ganham destaque nos estudos de associação como fortes candidatos à patogenia da AIDS. A informação do perfil polimórfico do HLA nas diferentes populações contribui significativamente para o melhor entendimento do curso natural da infecção pelo HIV-1 e, conseqüentemente, na elaboração de vacinas e medicamentos para o tratamento da AIDS. Objetivo: Identificar variações genéticas no MHC e verificar associações com a patogenia da AIDS em indivíduos infectados pelo HIV-1 na população de Salvador, BA. Material e Métodos: Trata-se de um estudo de Coorte e estudo Transversal de comparação de freqüência gênica. Os marcadores do MHC (microssatélites D6S105 (classe I). DRACA (classe II) e TNF-delta, (classe III) e os genes HLA-A, -B e -C) foram genotipados por dois métodos distintos, ambos precedidos por PCR. Após a PCR, os produtos amplificados dos microssatélites foram separados por eletroforese em capilar e os alelos foram denominados de acordo co o tamanho dos fragmentos amplificados. A tipagem do HLA foi feita pelo método SSO. Após a amplificação dos éxons 2 e 3 para os loci HLA-A, -B e -C foi feita a hibridização com sondas que possuem as seqüências de nucleotídeos iguais aos éxons amplificados. Os resultados foram interpretados através de um software que estabeleceu a genotipagem do HLA. As análises estatísticas foram feitas através do Teste exato de Fischer e Mann-Whitney para comparação das variáveis categóricas e contínuas, respectivamente. Resultados: O presente estudo não demonstrou associação entre os polimorfismos do MHC e a progressão para AIDS. Nossos dados sugerem associação do microssatélite TNF-delta com resistência à infecção pelo HIV-1 e modulação da carga viral plasmática e contagem...

Antinuclear antibodies and HLA class II alleles in Jamaican patients with systemic lupus erythematosus / Anticuerpos antinucleares y aleles HLA de clase II en pacientes Jamaicanos con lupus eritematoso sistémico

OBJECTIVE: The relationship between human leukocyte antigens class II (HLA) and antinuclear antibodies was investigated in Jamaican patients with Systemic Lupus Erythematosus (SLE). METHODS: Samples of blood of 82 patients with SLE and 75 healthy controls were tested for antinuclear antibodies using the fluorescent antinuclear antibody (FANA) test, counterimmunoelectrophoresis (CIEP) and the Crithidia luciliae immunofluorescence test (CL-IFT). A DNA-based HLA typing method was used to determine the frequencies of alleles of HLA-DRB1, DRB3, DRB4 and DRB5 in patients and healthy controls. RESULTS: The FANA test was positive in all of the sera from patients with SLE. Anti-dsDNA antibodies were present in 49% (40/82), anti-Sm/RNP 44% (36/82) and anti-Ro/La 43% (35/82) of the sera from SLE patients. The frequency of HLA-DR4 was significantly lower in SLE patients than in healthy controls (2/82, 2% vs 15/75, 20%; RR = 0.12; p = 0.0004; CP = 0.005) but no other HLA-DRB1 SLE associations were found. A positive HLA-DR3 anti-Ro/La antibody association was found in the patients with SLE (9/21, 43% vs 5/55, 9%; odds ratio (OR) = 7.5; CP = 0.01). In contrast, possession of HLA-DR6 was negatively associated with the absence of anti-dsDNA antibodies (9/32, 28% vs 27/44, 61%; OR = 0.2; CP = 0.05). CONCLUSION: The HLA-DR6 allele is associated with the absence of antinuclear antibodies and HLA-DR3 with the presence of anti-Ro/La antibodies in Jamaican patients with SLE. However, these results and those of previous studies of Jamaican patients suggest that the HLA-DR3 association with the development of SLE reported in other populations might in fact reflect the association of HLA-DR3 with anti-Ro/La antibodies. Further investigations are needed to determine whether HLA-DRB antinuclear antibody associations define clinical subsets of SLE in Jamaican patients.

OBJETIVO Se investigó la relación entre los antígenos de leucocito humano (human leukocyte antigens o HLAs). Clase II y los anticuerpos antinucleares en pacientes jamaicanos con lupus eritematoso sistémico (LES). MÉTODOS: Se examinaron muestras de sangre de 82 pacientes con LES y 75 controles saludables para determinar la presencia de anticuerpos antinucleares, usando la prueba del anticuerpo antinuclear fluorescente (FANA), la contrainmunoelectroforesis (CIEP) y el test de inmunofluorescencia con Crithidia luciliae (CL-IFT). Un método de tipificación HLA basado en el ADN fue usado para determinar las frecuencias de aleles de HLA-DRB1, DRB3, DRB4 y DRB5 tanto en los pacientes como en los controles saludables. RESULTADOS: La prueba FANA fue positiva en todos los sueros de pacientes con LES. Anticuerpos anti-dsADN se hallaban presentes en 49% (40/82), anti-Sm/RNP en 44% (36/82) y anti-Ro/La en 43% (35/82) de los sueros de los pacientes de LES. La frecuencia de HLA-DR4 fue significativamente más baja en los pacientes con LES que en los controles saludables (2/82, 2% vs 15/75, 20%; RR = 0.12; p = 0.0004; CP = 0.005) pero no se hallaron otras asociaciones de LES con HLA-DRB1. Se halló una asociación positiva de anticuerpos HLA-DR3 anti-Ro/La en los pacientes con LES (9/21, 43% vs 5/55, 9%; odds ratio (OR) = 7.5; CP = 0.01). En contraste con ello, la posesión de HLA-DR6m estuvo asociada negativamente con la ausencia de anticuerpos anti-dsADN (9/32, 28% vs 27/44, 61%; OR = 0.2; CP = 0.05). CONCLUSIÓN: El alele HLA-DR6 está asociado con la ausencia de anticuerpos antinucleares y el de HLA-DR3 con la presencia de anticuerpos anti-Ro/La en pacientes jamaicanos con LES. Sin embargo, estos resultados al igual que los de los previos estudios de pacientes jamaicanos, sugieren que la asociación HLA-DR3 con el desarrollo de LES reportado en otras poblaciones podría de hecho reflejar la asociación de HLA-DR3 con anticuerpos anti-Ro/La. Se requieren investigaciones ulteriores a fin de determinar si las asociaciones de anticuerpo antinuclear HLA-DRB definen subconjuntos de LES en pacientes jamaicanos.

Suscetibilidade genética na hanseníase: análise molecular de HLA classe II e classe III / Genetic susceptibility in leprosy: molecular analysis of HLA classroom II and classroom III

Diversos estudos têm demonstrado a influência da variabilidade genética humana na capacidade de resposta ao M. leprae, agente etiológico causador da hanseníase. Através de diferentes técnicas a genética moderna tem contribuído para a determinação de regiões importantes associadas à doença, dentre elas o cromossomo 6p21, apontando principalmente a associação da região HLA/TNF. Na hanseníase, o estudo de SNPs no gene de TNF(alfa) tem mostrado diferentes tipos de associações, dependendo da população estudada. Paralelamente, relatos têm demonstrado que alelos HLA-DRB1 desempenham um importante papel no desenvolvimento da doença. Assim sendo, vista a possibilidade da predisposição genética ser um dos fatores responsáveis pelo desenvolvimento da hanseníase, o presente estudo teve como objetivo analisar o papel da região HLA/TNF na doença mediante distintas abordagens. Primeiramente, para as análises do lócus HLA-DR foi realizado um estudo do tipo caso-controle englobando 1269 indivíduos pertencentes à população brasileira. Para a posterior confirmação dos resultados obtidos foi então realizado um estudo de replicação utilizando-se o método de TDT com 194 famílias vietnamitas. Para as análises da região TNF foi realizado um estudo do tipo caso-controle com 1170 indivíduos pertencentes à população brasileira onde foram analizados os SNPs nas posições +252 do gene de LTA e -863, -308 e -238 do gene de TNF(alfa). Testes de varredura e análise haplotípica foram aplicados com os respectivos SNPs. Os resultados encontrados para o lócus HLA-DR corroboram achados prévios mostrando a associação do alelo HLA-DRB1 15 com suscetibilidade a hanseníase na população brasileira. Adicionalmente, devido ao alto poder amostral utilizado nesta análise assim como o estudo de replicação, foi possível se observar os alelos HLA-DRB1 10 e HLA-DRB1 04 associados com suscetibilidade e resistência a doença, respectivamente. Na região TNF, os resultados obtidos sugerem que os haplótipos -863C/-...

Correlações da expressão de MHC-I e II, C5b-9 e fenotipagem de células inflamatórias em tecido muscular na dermatomiosite juvenil (DMJ) / Correlations of the expression of MHC-I and II, C5b-9 and inflammatory cells phenotyping in juvenile dermatomyositis

37 fragmentos musculares de 35 pacientes com o diagnóstico de DMJ foram estudados com o objetivo de avaliar a expressão de MHC classes I e II, C5b-9 e fenotipagem das células inflamatórias CD4, CD8, CD20 e CD68 em tecido muscular e correlacionar com os principais parâmetros clínicos, laboratoriais, histológicos e terapêuticos desta doença. Os achados foram comparados à expressão em oito casos de polimiosite (PM), cinco de dermatomiosite (DM) e quatro de / Thirty seven muscle biopsy specimens from patients with JDM were analyzed in order to assess the expression of MHC-I and II, C5b-9, CD4, CD8, CD20 and CD68 and to correlate with the clinical, laboratorial, histological and therapeutical parameters. These findings were compared to the expression in five dermatomyositis (DM), eight polymyositis (PM) and four dystrophy cases...

An epitope variable-reservoir model for HIV-1 infection

Se presenta un modelo de infección por VIH-1 basado en el concepto de inmunodominancia. Además de viriones mutantes y células T-CD4, se considera también reservorios virales, entre ellos macrófagos y células dendríticas foliculares. También se considera ataque citotóxico contra los reservorios y ataque extracelular sobre los viriones, ambos coordinados por las células T-CD4. En primer lugar, se trabaja sólo con una variable viral, y se usan ciertas aproximaciones para obtener un modelo fácilmente manipulable, para el cual se encuentra un criterio de estabilidad que rige el paso de progresión a regresión de la infección. Este criterio mantiene su validez para el modelo sin uso de aproximaciones, esto es, dos epítopes que mutan al azar, cada uno de ellos con dos variantes. Los resultados sugieren: a) que el papel jugado por los reservorios en el mantenimiento de la infección es muy importante, b) que mantener el ataque de las células citotóxicas sobre los reservorios infectados facilita la labor del sistema inmune, y c) que la terapia debería orientarse preferiblemente hacia estos objetivos.

Como entender a associaçäo entre o sistema HLA e as doenças auto-imunes endócrinas / How to understand the association of the HLA system and autoimmune endocrine disorders

A introduçäo de nova nomenclatura para os componentes do complexo principal de histocompatibilidade (Major Histocompatibility Complex - MHC) e a descriçäo de novos métodos moleculares para a tipificaçäo dos alelos do MHC contribuíram, grandemente, para o entendimento e identificaçäo do extenso polimorfismo do sistema. No entanto, para o näo especialista, essas novas aquisições têm dificultado o entendimento do papel do MHC em associaçäo com as doenças. Assim, neste artigo, foram revisados os conceitos atuais acerca dos genes e moléculas do MHC, os métodos de tipificaçäo desses marcadores de histocompatibilidade e a nomenclatura vigente para os componentes do sistema. Esses aspectos säo extremamente importantes para o entendimento do polimorfismo do MHC, dando embasamento para a compreensäo dos mecanismos propostos de associaçäo desses marcadores com as doenças auto-imunes endócrinas como diabetes mellitus do tipo 1, doença de Graves e tireoidite de Hashimoto, doença de Addison, síndrome poliglandular auto-imune e insuficiência ovariana prematura

Inmunodepresión secundaria a traumatismo encefalocraneano / Immunodepression induced by traumatic brain injury

Introducción: Los pacientes que sobreviven a la injuria inicial por trauma severo presentan con elevada frecuencia complicaciones infecciosas, sépticas y disfunción multiorgánica. El traumatismo de cráneo (TEC) parece ser un factor de riesgo independiente en relación con la aparición de esas complicaciones. Los mecanismos causales estarían relacionados a una parálisis de la inmunidad celular inducida por el TEC. Objetivos: Analizar el grado de alteración de la competencia inmunológica en pacientes con TEC severo, determinado por los niveles plasmáticos de las citokinas IL-10, IL-6 y TNF-Ó y el nivel de expresión de HLA-DR de los monocitos sanguíneos CD14+. Pacientes y métodos: Se incorporaron 15 pacientes ingresados con TEC severo (GCS ¾ 8). Ninguno de los pacientes había recibido corticoides ni catecolaminas. Trece voluntarios normales se utilizaron como controles...

Tipagem HLA-classe II de pacientes portadores de Diabetes mellitus insulino-dependentes / Class-II HLA typing of patients with Diabetes mellitus insulin-dependent

Uma forte associaçäo entre Diabetes Melitus Insulino Dependente (Insulin Dependent Diabetes Mellitus - IDDM) e certos antígenos do complexo HLA (Human Leucocytes Antigens - Antígenos Leucocitários Humanos), tem sido descrita em várias populaçöes. Numerosos trabalhos vêm sendo realizados no sentido de avaliar a susceptibilidade genética ao IDDM, segerindo que o envolvimento do complexo HLA é de suma importância, mesmo que outros genes (ainda desconhecidos) também desempenhem importante papel no desenvolvimento da doença. Progressos na área de Biologia Molecular permitiram análises estabelecendo que em caucasianos a susceptibilidade está associada com os haplótipos DRB1*03 - DQA1*0501 - DQB1*0201 e DRB1*04 - DQA1*0301 - DQB1*0302 enquanto que os haplótipos DRB1*1501 - DQA1*0102 - DQB1*0602 säo altamente protetores. Os objetivos deste trabalho foram realizar a tipagem HLA por métodos de Biologia Molecular dos locos DRB1, DQA1 e DQB1 de 23 pacientes portadores de Diabetes Melitus Insulino-Dependente, para avaliar a presença de alelos que pudessem conferir susceptilidade à doença. A metodologia utilizada foi SSO-PCR, padronizada para o 12th International Histocompatibility Workshop (1996). A tipagem HLA dos alelos DRB1*, DQA1* e DQB1*, permitiu a análise parcial desses locos, visto que a tipagem completa ficou prejudicada em alguns casos por dificuldades na interpretaçäo dos resultados, ou por variaçöes dos sinais emitidos pelas sondas de oligonucleotídeos. Mesmo näo tendo sido possível detectar todos os locos em questäo, os resultados revelaram que os pacientes possuíam locos dos haplótipos que predispöem à IDDM, destacando o papel do Laboratório de Análises Clínicas na definiçäo de susceptibilidades genéticas à certas doenças

Autoimmune and non-autoimmune thyroid diseases have different patterns of cellular HLA class II expression

CONTEXT: Surface HLA-DR antigen is usually only expressed by antigen-presenting cells (APC). In autoimmune thyroid disease, follicle cells function as APC, thus expressing HLA-DR. However, non-autoimmune thyroid diseases may also express surface class II antigens. OBJECTIVE: To evaluate the presence and pattern of HLA class II expression in autoimmune and non-autoimmune thyroid disorders. DESIGN: Retrospective: histopathological and immunohistochemical analysis. LOCATION: Referral center, university hospital. SAMPLE: Ten histologically normal thyroids, 11 GravesÆ disease, 7 HashimotoÆs thyroiditis, 10 atoxic multinodular goiter and 3 toxic adenomas were analyzed by immunohistochemistry, using a monoclonal antibody anti-HLA-DR. MAIN MEASUREMENTS: The presence of these antigens in thyroid follicular cells and their relation to inflammatory infiltrate was evaluated. The pattern of HLA-DR expression in thyroid follicular cells was analyzed: membrane, cytoplasmic or both. RESULTS: Although HLA-DR antigens were sparsely present in one of the 8 normal thyroids, in 6 of the 9 atoxic multinodular goiter and in 2 of the 3 toxic adenomas a net positivity could be seen in large areas. In all 5 HashimotoÆs thyroiditis and in 7 of the 10 GravesÆ disease cases. This expression occurred in follicle cells either in contact with inflammatory cells or not. In non-autoimmune thyroid disease, HLA-DR positivity was essentially cytoplasmic, whereas in GravesÆ disease and Hashimoto thyroiditis it was mainly in cell membranes. CONCLUSIONS: It is suggested that the HLA class II expression on the surface of follicle cells could be related to auto-antigen presentation to the immune system by these cells, leading to inflammation