GENOTYPE CHARACTERIZATION OF Leishmania (Viannia) braziliensis ISOLATED FROM HUMAN AND CANINE BIOPSIES WITH AMERICAN CUTANEOUS LEISHMANIASIS / Caracterização genotípica de isolados de Leishmania (Viannia) braziliensis provenientes de biopsias de humanos e cães com leishmaniose tegumentar americana

ABSTRACT

Introduction: American tegumentary leishmaniasis (ATL) can be caused by Leishmania (Viannia) braziliensis complex. The evolution of ATL initially results in lesions and can develop into disseminated or diffuse forms. The genetic diversity of L. (V.) braziliensis in some endemic areas of Brazil has been poorly studied, such as in the state of São Paulo. This study analyzed the genetic diversity of L. (V.) braziliensis isolates collected from patients and dogs with LTA from the state of São Paulo. Methods: Leishmaniasis diagnosis was determined by PCR. The 132 biopsies were collected in different regions of Sao Paulo State, Brazil (36 municipalities). The genetic characterization of L. (V.) braziliensis isolates was tested by RFLP-PCR using DNA extracted from biopsies. The primer set amplified a specific region of Leishmania internal transcribed spacers of the ribosomal DNA locus. Results: Of the 132 samples, 52 (40%) were completely genotyped by RFLP-PCR (44 from human patients and eight from dogs). The results showed nine distinct patterns. The majority of the genotyped samples were from Sorocaba (30), and the others were distributed among 14 other municipalities. The first pattern was more frequent (29 samples), followed by pattern 2 (nine samples) and pattern 3 (three samples). Patterns 4, 6, 7, 8 and 9 were composed of two samples each and pattern 5 of one sample. Conclusion: These results suggest that polymorphic strains of L. (V.) braziliensis circulate in the state of São Paulo. These data agree with studies from other regions of Brazil, showing great variability among the natural populations of endemic foci. .

RESUMO

Introdução: A leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada pelo sub-gênero Leishmania (Viannia) braziliensis. A evolução da LTA resulta com a evolução das lesões iniciais. A diversidade genética de L. (V.) braziliensis em algumas áreas endêmicas brasileiras, como no estado de São Paulo, é pouco conhecida. Assim, este estudo teve como objetivo analisar a variabilidade genética de isolados de L. (V.) braziliensis coletados de biopsias de pacientes e cães com LTA no estado de São Paulo. Métodos: O diagnóstico da leishmaniose foi realizado por PCR. As 132 biópsias analisadas foram coletadas em diferentes regiões do Estado de São Paulo, Brasil (36 municípios). A caracterização genética de L. (V.) braziliensis foi realizada por RFLP-PCR utilizando DNA extraído das biopsias. O conjunto de iniciadores utilizado amplificou a região ITS de Leishmania. Resultados: Das 132 amostras analisadas, 52 (40%) foram completamente genotipadas por RFLP-PCR (44 de pacientes e oito de cães). Os resultados mostraram nove padrões distintos. A maioria das amostras genotipadas foi de Sorocaba (30), e as demais foram distribuídas entre 14 outros municípios. O primeiro padrão foi mais frequente (29 amostras), seguido pelo padrão 2 (nove amostras), padrão 3 (três amostras). Padrões 4, 6, 7, 8 e 9 foram compostos de duas amostras de cada um e o padrão 5, com uma amostra. Conclusão: Estes resultados sugerem que cepas polimórficas de L. (V.) braziliensis circulam no estado de São Paulo. Estes dados são concordantes com estudos em outras regiões do Brasil, mostrando grande variabilidade destas populações naturais de focos endêmicos. .