Partial genetic characterization of Seoul hantavirus in rats from Buenos Aires City, Argentina, and generation of a Seoul recombinant nucleoprotein antigen

ABSTRACT

Hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS) is a severe infectious disease characterized by fever, hemorrhage, renal impairment, and thrombocytopenia. At least seven hantaviruses cause HFRS Hantaan, Seoul (SEOV) (distributed worldwide), Dobrava/Belgrade, Saaremaa, Amur, Thailand and Puumala. To investigate the epidemiology of HFRS and virus transmission in Argentina, we constructed a prokaryotic plasmid encoding the SEOV rNP, of 430 amino acids. After expression, the rNP was tested as an antigen for use in an enzyme-linked immunosorbent assay for infection diagnosis. To determine the current level of virus transmission in wild brown rats or Norway rats (Rattus norvegicus) captured in Buenos Aires City, Argentina, we tested tissues from rats that were determined to be serologically positive for the SEOV, and the viral genome were detected by RT-PCR using specific primers for two fragments of M segment-encoding Gn and Gc proteins. The viral genome was detected in 11 of 21 seropositive rats (52.4 per cent) captured in two parklands. Sequence analysis of a 333-nt region of the Gc-encoding M segment revealed 97 per cent and 96 per cent identity with strains of SEOV from Baltimore and Brazil, respectively. Our genetic data confirm a very low diversity among SEOV virus strains...(AU)

RESUMO

A febre hemorrágica com síndrome renal (FHSR) é uma doença grave, caracterizada por febre, hemorragia, falência renal e trombocitopenia. Pelo menos sete hantavírus causam a FHSR Hantaan, Seoul (SEOV) (de distribuição global), Dobrava-Belgrade, Saaremaa, Amur, Thailand e Puumala. Para investigar a epidemiologia da FHRS e a transmissão viral na Argentina, criamos um plasmídio procariótico que "codifica" a nucleoproteína recombinante do vírus SEOV de 430 aminoácidos. Após a expressão, a nucleoproteína recombinante foi testada como antígeno para uso em ensaio imunoenzimático (ELISA) para diagnóstico da infecção. Para determinar o nível atual de transmissão viral em populações de ratos-marrons ou ratazanas (Rattus norvegicus) capturadas na cidade de Buenos Aires, Argentina, testamos tecidos de ratos selecionados para serem sorologicamente positivos para o vírus SEOV, e o seu genoma viral foi detectado após submetido a RT-PCR utilizando primers específicos para dois fragmentos de proteínas Gn e Gc codificadas pelo segmento M. O genoma viral foi detectado em 11 das 21 ratazanas soropositivas (52,4 por cento), previamente capturadas em dois parques. A análise sequencial de uma região gênica (333 nt) do segmento M "codificador" da proteína Gc apresentou 97 por cento e 96 por cento de similaridade com as cepas de SEOV coletadas em Baltimore e no Brasil, respectivamente. Os dados genéticos levantados confirmam a informação de que há uma diversidade muito pequena entre as cepas do vírus SEOV...(AU)