17DD Yellow Fever Revaccination and Heightened Long-Term Immunity in Populations of Disease-Endemic Areas, Brazil.

We evaluated the duration of neutralizing antibodies and the status of 17DD vaccine-specific T- and B-cell memory following primary and revaccination regimens for yellow fever (YF) in Brazil. We observed progressive decline of plaque-reduction neutralization test (PRNT) seropositivity and of the levels of effector memory CD4+ and CD8+ T cells, as well as interferon-γ+CD8+ T cells, 10 years after primary vaccination. Revaccination restored PRNT seropositivity as well as the levels of effector memory CD4+, CD8+, and interferon-γ+CD8+ T cells. Moreover, secondary or multiple vaccinations guarantee long-term persistence of PRNT positivity and cell-mediated memory 10 years after booster vaccination. These findings support the relevance of booster doses to heighten the 17DD-YF-specific immune response to guarantee the long-term persistence of memory components. Secondary or multiple vaccinations improved the correlates of protection triggered by 17DD-YF primary vaccination, indicating that booster regimens are needed to achieve efficient immunity in areas with high risk for virus transmission.

Comprehensive landscape of neutralizing antibody and cell-mediated response elicited by the 1/5 fractional dose of 17DD-YF primary vaccination in adults.

The present study aimed at evaluating the YF-specific neutralizing antibody profile besides a multiparametric analysis of phenotypic/functional features of cell-mediated response elicited by the 1/5 fractional dose of 17DD-YF vaccine, administered as a single subcutaneous injection. The immunological parameters of each volunteer was monitored at two time points, referred as: before (Day 0) [Non-Vaccinated, NV(D0)] and after vaccination (Day 30-45) [Primary Vaccinees, PV(D30-45)]. Data demonstrated high levels of neutralizing antibodies for PV(D30-45) leading to a seropositivity rate of 93%. A broad increase of systemic soluble mediators with a mixed profile was also observed for PV(D30-45), with IFN-γ and TNF-α presenting the highest baseline fold changes. Integrative network mapping of soluble mediators showed increased correlation numbers in PV(D30-45) as compared to NV(D0) (532vs398). Moreover, PV(D30-45) exhibited increased levels of Terminal Effector (CD45RA+CCR7-) CD4+ and CD8+ T-cells and Non-Classical memory B-cells (IgD+CD27+). Dimensionality reduction of Mass Cytometry data further support these findings. A polyfunctional cytokine profile (TNF-α/IFN-γ/IL-10/IL-17/IL-2) of T and B-cells was observed upon in vitro antigen recall. Mapping and kinetics timeline of soluble mediator signatures for PV(D30-45) further confirmed the polyfunctional profile upon long-term in vitro culture, mediated by increased levels of IFN-γ and TNF-α along with decreased production of IL-10. These findings suggest novel insights of correlates of protection elicited by the 1/5 fractional dose of 17DD-YF vaccine.

Exploratory study of humoral and cellular immunity to 17DD Yellow Fever vaccination in children and adults residents of areas without circulation of Yellow Fever Virus.

The present investigation comprised two independent observational arms to evaluate the influence of pre-existing flavivirus humoral immunity and the age-impact on 17DD-YF vaccination immunity. Flavivirus (YFV; DENV; ZIKV) serology and YF-specific cellular immunity was evaluated in 288 children/9Mths-4Yrs and 288 adults/18-49Yrs residents of areas without YFV circulation. Data demonstrated that flavivirus seropositivity at baseline was higher in Adults as compared to Children (26%;87%;67% vs 6%;13%;15%, respectively). The heterologous flavivirus seropositivity (DENV; ZIKV) did not impact the YF-specific cellular immune response at baseline. However, higher levels of NCD4, EMCD8, IFN-MCD8, NCD19 and nCMCD19 were observed in subjects with pre-existing YFV seropositivity. Primary vaccination of YFV-seronegative volunteers led to higher levels of YF-neutralizing antibodies in Adults as compared to Younger Children (9Mths-2Yrs). Although similar seropositivity rates observed amongst Children and Adults at D30-45, lower rates were observed in Younger Children (9Mths-2Yrs) at D365 (94%;95%;100% vs 87%;96%;99%, respectively). A progressive decline in antibody levels were reported at D365, being more expressive in Children as compared to Adults. All age-subgroups exhibited at D30-45 increased levels of eEfCD4, EMCD4, IFN-MCD8 and nCMCD19 together with a decrease of eEfCD8 and CMCD8. While an increase of EMCD8 were observed in all subgroups at D30-45, a declined duration at D365 was reported only in Younger Children (9Mths-2Yrs). Biomarker signatures further support that only Younger Children (9Mths-2Yrs) presented a progressive decline of EMCD8 at D365. Together, these findings demonstrated that regardless the similarities observed in YF-neutralizing antibodies, the age impacts the duration of cellular immune response to primary 17DD-YF vaccination.

Corrigendum: Duration of Humoral and Cellular Immunity 8 Years After Administration of Reduced Doses of the 17DD-Yellow Fever Vaccine.

[This corrects the article DOI: 10.3389/fimmu.2019.01211.].

Short-Lived Immunity After 17DD Yellow Fever Single Dose Indicates That Booster Vaccination May Be Required to Guarantee Protective Immunity in Children.

The Yellow Fever (YF) vaccination is recommended for people living in endemic areas and represents the most effective strategy to reduce the risk of infection. Previous studies have warned that booster regimens should be considered to guarantee the long-term persistence of 17DD-YF-specific memory components in adults living in areas with YF-virus circulation. Considering the lower seroconversion rates observed in children (9-12 months of age) as compared to adults, this study was designed in order to access the duration of immunity in single-dose vaccinated children in a 10-years cross-sectional time-span. The levels of neutralizing antibodies (PRNT) and the phenotypic/functional memory status of T and B-cells were measured at a baseline, 30-45 days, 1, 2, 4, 7, and 10 years following primary vaccination. The results revealed that a single dose induced 85% of seropositivity at 30-45 days and a progressive time-dependent decrease was observed as early as 2 years and declines toward critical values (below 60%) at time-spans of ≥4-years. Moreover, short-lived YF-specific cellular immunity, mediated by memory T and B-cells was also observed after 4-years. Predicted probability and resultant memory analysis emphasize that correlates of protection (PRNT; effector memory CD8+ T-cells; non-classical memory B-cells) wane to critical values within ≥4-years after primary vaccination. Together, these results clearly demonstrate the decline of 17DD-YF-specific memory response along time in children primarily vaccinated at 9-12 months of age and support the need of booster regimen to guarantee the long-term persistence of memory components for children living in areas with high risk of YF transmission.

Duration of Humoral and Cellular Immunity 8 Years After Administration of Reduced Doses of the 17DD-Yellow Fever Vaccine.

The present study aims to determine whether 17DD-YF-specific humoral and cellular immunological memory is maintained 8-years after primary vaccination with subdoses (10,447IU;3,013IU;587IU;158IU;31IU). For this purpose, this follow-up study was carried out in a subset of volunteers (n = 98) originally enrolled in the dose-response study in 2009 and 46 non-vaccinated controls. Our results demonstrated that vaccinees, who had seroconverted following primary vaccination and had not been revaccinated, present similar neutralizing antibodies levels and YF-specific cellular memory, particularly CMCD4 and EMCD8 as compared to the reference full dose (27,476IU). Although, PRNT seropositivity rates were similar across subgroups (94, 82, 83, 94, 80, and 91%, correspondingly), only doses above 587IU elicited similar iterative proportion of seropositivity rates, calculated as a progressive decrease on seropositivity rates along time (89, 80, 80, and 91%, respectively) as compared to 158IU and 31IU (68 and 46%, respectively). Noteworthy were the strong positive correlations ("EMCD4,EMCD8" and "TNFCD8,IFNCD8") observed in most subdoses, except for 31IU. Major similarities underscored the preserved antibody titers and the outstanding levels of EMCD8, relevant correlates of protection for YF-specific immunity. These findings provide evidences to support the regular use of dose sparing strategy for YF vaccine in adults.

Short-lived immunity after 17DD Yellow Fever single dose indicates that booster vaccination may be required to guarantee protective immunity in children

A vacinação contra a febre amarela (YF) é recomendada para pessoas que vivem em áreas endêmicas e representa a estratégia mais eficaz para reduzir o risco de infecção. Estudos anteriores alertaram que os regimes de reforço devem ser considerados para garantir a persistência a longo prazo dos componentes de memória específicos da 17DD-YF em adultos que vivem em áreas com circulação do vírus da YF. Considerando as menores taxas de soroconversão observadas em crianças (9 a 12 meses de idade) em comparação aos adultos, este estudo foi desenvolvido para acessar a duração da imunidade em crianças vacinadas em dose única em um período de 10 anos de seção transversal . Os níveis de anticorpos neutralizantes (PRNT) e o status fenotípico / de memória funcional das células T e B foram medidos no início, 30 a 45 dias, 1, 2, 4, 7 e 10 anos após a vacinação primária. Os resultados revelaram que uma dose única induziu 85% de soropositividade entre 30 e 45 dias e uma diminuição progressiva dependente do tempo foi observada em apenas 2 anos e diminui para valores críticos (abaixo de 60%) em períodos de tempo ≥ 4 anos . Além disso, a imunidade celular específica de YF de curta duração, mediada pelas células T e B de memória, também foi observada após 4 anos. A análise de probabilidade prevista e a memória resultante enfatizam que os correlatos de proteção (PRNT; células T CD8 + com memória efetiva; células B com memória não clássica) diminuem para valores críticos dentro de ≥4 anos após a vacinação primária. Juntos, esses resultados demonstram claramente o declínio da resposta da memória específica da 17DD-YF ao longo do tempo em crianças vacinadas principalmente entre 9 e 12 meses de idade e suportam a necessidade de um regime de reforço para garantir a persistência a longo prazo dos componentes da memória para crianças que vivem em áreas com alto risco de transmissão YF.

Análise Exploratória Multiparamétrica de Biomarcadores Fenotípicos e Funcionais da Imunidade Vacinal Antiamarílica 17DD

A Febre Amarela (FA) é uma grande ameaça à saúde global, podendo ocorrer surtos de grande impacto na saúde pública. Por não possuir um tratamento específico, a vacinação é a principal medida de controle e prevenção. Este estudo avaliou o impacto da imunidade prévia para Flavivírus e a influência da idade na resposta imune específica para FA em indivíduos primovacinados com a dose padrão da vacina 17DD. Além disso, também incluiu a caracterização do perfil de anticorpos neutralizantes, de mediadores solúveis e de biomarcadores fenotípicos e funcionais em adultos submetidos à primovacinação com a dose fracionada da vacina 17DD. Os resultados demonstraram taxas de soropositividade mais altas para FA, DENGUE e ZIKA em adultos em comparação com as crianças (26%;87%;67% vs 6%;13%;15%, respectivamente). Além disso, a soropositividade prévia para Flavivírus (DENGUE;ZIKA) não impactou na resposta imune celular específica para FA na linha de base do estudo. Entretanto, níveis mais elevados de NCD4, EMCD8, IFN-MCD8, NCD19 e nCMCD19 foram observados em indivíduos com soropositividade pré-existente para FA. Também foi observado que a primovacinação para FA induz um aumento dos níveis de anticorpos neutralizantes para FA no D30-45 com uma redução no D365 independentemente da faixa etária. Embora as taxas de soropositividade tenham sido semelhantes entre crianças e adultos no D30-45, taxas mais baixas foram observadas em crianças (9Meses-2Anos) no D365 (94%;95%;100% vs 87%;96%;99%). Além disso, um aumento de EMCD8 foi observado em todos os subgrupos no D30-45, entretanto uma redução no D365 foi relatada apenas em crianças (9Meses-2Anos). A assinatura de biomarcadores também demonstrou que apenas crianças (9Meses-2Anos) apresentam um declínio progressivo de EMCD8 no D365. Dessa forma, os resultados demonstraram que, independentemente das semelhanças observadas nos anticorpos neutralizantes para FA, a idade afeta a duração da resposta imune celular específica induzida pela primovacinação antiamarílica 17DD. Em relação ao perfil de anticorpos neutralizantes em adultos submetidos à primovacinação com a dose fracionada da vacina 17DD, os resultados demonstraram um aumento da taxa de soropositividade no D30-45 em comparação com o D0 (0%;92%, respectivamente). Além disso, a primovacinação com a dose fracionada da vacina antiamarílica 17DD induz um perfil misto e polifuncional de produção de mediadores solúveis. Também foi observado um aumento de células TCD4+ e TCD8+ Efetoras Terminais (CD45RA+CCR7-), bem como células B de Memória Não Clássica (IgD+CD27+) após a primovacinação com a dose fracionada da vacina antiamarílica 17DD. Em conjunto, os resultados fornecem evidências científicas positivas sobre a resposta imune induzida pela dose fracionada da vacina antiamarílica 17DD e contribuem para o suporte do uso da estratégia em situações emergenciais.

Estudo de base populacional na Amazônia Brasileira: avaliação da resposta de anticorpos naturalmente adquiridos contra a Duffy binding protein (DBP) de Plasmodium vivax

O processo de invasão dos eritrócitos pelo Plasmodium vivax envolve a interação da região II da Duffy binding protein (DBPII) e o antígeno Duffy receptor para quimiocinas (DARC) expresso na superfície dos eritrócitos. Devido à importância da PvDBP em garantir o parasitismo nos eritrócitos, faz-se um importante candidato à vacina antimalárica. Sendo assim, realizamos um estudo longitudinal de base populacional para avaliar a dinâmica da infecção por malária e a persistência de anticorpos naturalmente adquiridos contra a PvDBPII durante 16 meses em uma população urbana do município de Mâncio Lima, estado do Acre. No total, 1326 indivíduos foram envolvidos no estudo, onde 1100 indivíduos participaram da linha de base e, 1120 indivíduos após 16 meses, com uma contribuição de 2237 amostras. A prevalência de malária na população foi de 9,6% (127/1326), com predominância de infecção causada por P. vivax (74%). Em relação a resposta de anticorpos anti-PvDBPII, 22,5% (299/1326) foram respondedores à PvDBPII. A regressão logística múltipla mostrou que as variáveis preditoras à positividade para PvDBPII foram idade, episódios prévios de malária e malária recente. Após 16 meses, houve uma redução significativa da frequência de anticorpos anti-PvDBPII de 24,7% (272/1100) para 15,8% (177/1120), que coincidiu com a diminuição dos casos de malária. Pelo acompanhamento de 894 indivíduos identificamos que 70,0% (626/894) foram não respondedor persistente (NRP) com resposta de anticorpos negativa em todo momento, 17,4% (156/894) respondedor transiente (RT), que teve flutuação na resposta de anticorpos anti-PvDBPII e apenas 12,5% (112/894) foram respondedor persistente, ou seja, tinham resposta de anticorpos positiva no período de 16 meses do estudo. Pela análise de regressão logística múltipla as variáveis preditoras para a persistência de anticorpos contra a PvDBPII foram as mesmas associadas com a positividade (idade, episódios prévios de malária e tempo desde a última malária). Em conclusão, o presente trabalho reforça que a PvDBPII tem baixa imunogenicidade, pois apenas 20% dos indivíduos respondem a PvDBPII, e confirmam estudos prévios realizados na região amazônica onde tanto a presença quanto a persistência de anticorpos contra a PvDBPII estão associados com exposição (idade, número de episódios prévios de malária e malária recente).