Serum soluble mediators as prognostic biomarkers for morbidity, disease outcome, and late-relapsing hepatitis in yellow fever patients.

This study described a soluble mediator storm in acute Yellow Fever/YF infection along the kinetics timeline towards convalescent disease. The analyses of the YF Viral RNAnemia, chemokines, cytokines, and growth factors were performed in YF patients at acute/(D1-15) and convalescent/(D16-315) phases. Patients with acute YF infection displayed a trimodal viremia profile spreading along D3, D6, and D8-14. A massive storm of mediators was observed in acute YF. Higher levels of mediators were observed in YF with higher morbidity scores, patients under intensive care, and those progressing to death than in YF patients who progress to late-relapsing hepatitis/L-Hep. A unimodal peak of biomarkers around D4-6 with a progressive decrease towards D181-315 was observed in non-L-Hep patients, while a bimodal pattern with a second peak around D61-90 was associated with L-Hep. This study provided a comprehensive landscape of evidence that distinct immune responses drive pathogenesis, disease progression, and L-Hep in YF patients.

Safety and immunogenicity of 17DD attenuated yellow fever vaccine in howler monkeys (Alouatta spp.).

BACKGROUND: Alouatta spp. are highly susceptible to yellow fever (YF) infection and develop an often fatal disease. The threat posed by an outbreak started in 2016 leads us to investigate vaccination as a potential tool in preventing YF in non-human primates (NHP). METHODS: Susceptible howler monkeys were immunized with three different concentrations of the human Brazilian commercial YF17DD vaccine. Post-vaccination viremia/RNAemia, immunogenicity, and safety were characterized. RESULTS: The vaccine did not produce YF clinical manifestations in any of the NHPs. After immunization, all animals seroconverted demonstrating the ability of the YF vaccine to induce humoral response in Alouatta species. CONCLUSIONS: The present work has demonstrated the safe and immunogenic profile of the existing YF 17DD vaccine in howler monkeys. This knowledge may support further studies with other susceptible monkey species and provide a possible solution for controlling epizootics and preventing the devastation of endangered species.

Inactivated and Immunogenic SARS-CoV-2 for Safe Use in Immunoassays and as an Immunization Control for Non-Clinical Trials.

Successful SARS-CoV-2 inactivation allows its safe use in Biosafety Level 2 facilities, and the use of the whole viral particle helps in the development of analytical methods and a more reliable immune response, contributing to the development and improvement of in vitro and in vivo assays. In order to obtain a functional product, we evaluated several inactivation protocols and observed that 0.03% beta-propiolactone for 24 h was the best condition tested, as it promoted SARS-CoV-2 inactivation above 99.99% and no cytopathic effect was visualized after five serial passages. Moreover, RT-qPCR and transmission electron microscopy revealed that RNA quantification and viral structure integrity were preserved. The antigenicity of inactivated SARS-CoV-2 was confirmed by ELISA using different Spike-neutralizing monoclonal antibodies. K18-hACE2 mice immunized with inactivated SARS-CoV-2, formulated in AddaS03TM, presented high neutralizing antibody titers, no significant weight loss, and longer survival than controls from a lethal challenge, despite RNA detection in the oropharyngeal swab, lung, and brain. This work emphasizes the importance of using different techniques to confirm viral inactivation and avoid potentially disastrous contamination. We believe that an efficiently inactivated product can be used in several applications, including the development and improvement of molecular diagnostic kits, as an antigen for antibody production as well as a control for non-clinical trials.

Protective Immunity of COVID-19 Vaccination with ChAdOx1 nCoV-19 Following Previous SARS-CoV-2 Infection: A Humoral and Cellular Investigation.

Infections caused by SARS-CoV-2 induce a severe acute respiratory syndrome called COVID-19 and have led to more than six million deaths worldwide. Vaccination is the most effective preventative measure, and cellular and humoral immunity is crucial to developing individual protection. Here, we aim to investigate hybrid immunity against SARS-CoV-2 triggered by the ChAadOx1 nCoV-19 vaccine in a Brazilian cohort. We investigated the immune response from ChAadOx1 nCoV-19 vaccination in naïve (noCOVID-19) and previously infected individuals (COVID-19) by analyzing levels of D-dimers, total IgG, neutralizing antibodies (Nabs), IFN-γ (interferon-γ) secretion, and immunophenotyping of memory lymphocytes. No significant differences in D-dimer levels were observed 7 or 15 days after vaccination (DAV). All vaccinated individuals presented higher levels of total IgG or Nabs with a positive correlation (R = 0.88). Individuals in the COVID-19 group showed higher levels of antibody and memory B cells, with a faster antibody response starting at 7 DAV compared to noCOVID-19 at 15 DAV. Further, ChAadOx1 nCoV-19 vaccination led to enhanced IFN-γ production (15 DAV) and an increase in activated T CD4+ naïve cells in noCOVID-19 individuals in contrast with COVID-19 individuals. Hence, our data support that hybrid immunity triggered by ChAadOx1 nCoV-19 vaccination is associated with enhanced humoral response, together with a balanced cellular response.

Estudo do polimorfismo genético do vírus e do hospedeiro na Hepatite A aguda e fulminante

Na infecção pelo vírus da hepatite A, a maioria dos pacientes desenvolvem uma doença branda ou assintomática. No entanto, alguns pacientes podem progredir para uma doença mais grave que é caracterizada pela rápida degradação do fígado, coagulopatia e encefalopatia hepática, conhecida como falência hepática aguda (ALF). A infecção pelo HAV se apresenta como uma interação dinâmica entre fatores do vírus e do hospedeiro que em conjunto é responsável pela diversidade no desfecho clínico da doença. Apresentações incomuns de infecções prevalentes foram muitas vezes atribuídas a fatores específicos do hospedeiro. Estudos de associações genômicas (GWAS) provaram ser uma ótima abordagem na identificação de alelos de risco que estão relacionados a tais síndromes. Neste estudo, 31 variações nucleotídicas humanas, incluindo variações de um único nucleotídeo (SNP) e inserções, associadas à infecção pelo HAV foram caracterizadas numa coorte com casos clássicos e de ALF. Todos os casos de hepatite A foram identificados pelo PCR em tempo real otimizado para a região 5' não codificante do HAV A população amostral dos GWAS consistiu em indivíduos expostos a surtos intradomiciliares e casos esporádicos de hepatite A no Brasil. Ao todo 321 amostras foram coletadas das quais 164 foram utilizadas nos estudos de variabilidade genética do hospedeiro. As análises de \201Codds ratio\201De \201Cdata mining\201D sugeriram que os SNPs INFL3 rs rs8099917, TGFbeta1 rs1800469, ABCB1 rs1045642, IL10 rs1800871 (IL10b), TNF\2013alpha rs1799964 (TNF\2013alpha a), TNF\2013alpha rs1800630 (TNF\2013alpha b) foram significantemente associados à gravidade da doença. Muitas das variantes identificadas neste estudo estão relacionadas a genes importantes na patofisiologia da infecção pelo HAV. Entender como os fatores do hospedeiro influenciam a resposta imune à infecção viral fornece novas oportunidades para controlar esta doença e o desenvolvimento de terapêuticas eficientes

Avaliação de diferentes coletores de fluido oral para detecção de anticorpos contra o vírus da Hepatite A, e sua aplicação em áreas difícil acesso

Uma estratégia adotada por diferentes países para a redução no número de casos novos de hepatite A é a vacinação. No entanto, o mosaico no perfil epidemiológico da doença no Brasil tem dificultado o estabelecimento de um programa nacional de vacinação unificado. Para determinação de políticas nacionais de vacinação, os resultados de estudos epidemiológicos precisam ser cuidadosamente considerados. E para este monitoramento epidemiológico, a utilização do fluido oral é de grande relevância devido à característica indolor e não-invasiva da coleta. Atualmente, existem vários métodos disponíveis para coleta de fluido oral. Contudo, poucos estudos investigam qual o coletor ideal para detecção de baixos títulos de anticorpos e seu uso em áreas de difícil acesso. Por tais razões, o presente estudo teve como objetivo a avaliação de diferentes coletores de fluido oral para detecção da resposta imune humoral contra o vírus da hepatite A e sua aplicação em estudo epidemiológico em áreas de difícil acesso. Para isto, 90 amostras pareadas de soro e fluido oral foram coletadas de voluntários com diferente estado imunitário em condições ideais de coleta (painel de otimização); e 224 amostras pareadas coletadas em áreas de difícil acesso (estudo epidemiológico) O soro foi coletado por punção venosa e o fluido oral foi obtido utilizando 3 dispositivos comerciais: Salivette®, OraSure® e ChemBio®. Soro e fluido oral foram submetidos a um imunoblot comercial (ImmunoComb® II HAVAb) para detecção de anticorpos anti-HAV totais. O painel de otimização demonstrou que o coletor de fluido oral com melhor desempenho foi o ChemBio® (100% de concordância), seguido pelo Orasure® (95,4%) e pelo Salivette® (90,8%). Posteriormente, o coletor com melhor desempenho, ChemBio® foi avaliado sob condições precárias de armazenagem. A prevalência geral para amostras de soro e fluido oral foi semelhante, 80,8% e 79%, respectivamente. Os dados por faixa etária demonstraram uma forte tendência do aumento da infecção pelo HAV de acordo com o aumento da idade e revelou, tanto no soro quanto no fluido oral, que 50% dos indivíduos entre 0-10 anos estão susceptíveis à infecção. Um acompanhamento dessas amostras foi realizado para avaliar a estabilidade do fluido oral, e foi observado que 210 dias após a coleta foi possível detectar anticorpos anti-HAV. Com isso, podemos concluir que tal método pode ser utilizado na avaliação do estado imunitário de indivíduos em áreas isoladas ou em populações urbanas, orientando a realização de estudos epidemiológicos e auxiliando no estabelecimento de um programa de controle da doença, bem como a seleção dos grupos etários candidatos a receber a vacina contra hepatite A.