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Elife ; 5: e12068, 2016 Feb 20.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-26896675

RESUMO

The Drosophila genome contains >13000 protein-coding genes, the majority of which remain poorly investigated. Important reasons include the lack of antibodies or reporter constructs to visualise these proteins. Here, we present a genome-wide fosmid library of 10000 GFP-tagged clones, comprising tagged genes and most of their regulatory information. For 880 tagged proteins, we created transgenic lines, and for a total of 207 lines, we assessed protein expression and localisation in ovaries, embryos, pupae or adults by stainings and live imaging approaches. Importantly, we visualised many proteins at endogenous expression levels and found a large fraction of them localising to subcellular compartments. By applying genetic complementation tests, we estimate that about two-thirds of the tagged proteins are functional. Moreover, these tagged proteins enable interaction proteomics from developing pupae and adult flies. Taken together, this resource will boost systematic analysis of protein expression and localisation in various cellular and developmental contexts.


Assuntos
Proteínas de Drosophila/análise , Proteínas de Drosophila/genética , Drosophila/química , Drosophila/genética , Biblioteca Gênica , Genoma de Inseto , Coloração e Rotulagem/métodos , Estruturas Animais/química , Animais , Animais Geneticamente Modificados/genética , Entomologia/métodos , Genes Reporter , Proteínas de Fluorescência Verde/análise , Proteínas de Fluorescência Verde/genética , Processamento de Imagem Assistida por Computador , Biologia Molecular/métodos , Imagem Óptica , Proteínas Recombinantes de Fusão/análise , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética
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