Enfermedad de Chagas del sistema nervioso central en un paciente con SIDA demostrada por métodos cuantitativos moleculares / Chagas disease affecting the central nervous system in a patient with AIDS demonstrated by quantitative molecular methods

Although infrequent, Trypanosoma cruzi reactivation is possible among patients with HIV/AIDS infection that develop a tumor-like or granulomatous lesion in the CNS. We report the case of a 60 years old male patient with HIV/AIDS and low CD4 lymphocytes count with cerebellar symptoms and mild paresis, associated to supra and infratentorial hypodense lesions and positive serology tests both to T. gondii and Trypanosoma cruzi. Empirical therapy against toxoplasmosis was prescribed together with antiretroviral therapy but without a favorable response. Brain Chagas disease was confirmed by quantitative PCR in the CSF but he died despite nifurtimox treatment. Despite its rare occurrence, Chagas disease affecting the CNS is possible among patients with HIV/AIDS infection. Epidemiological exposure, a positive Chagas serological test and the image pattern of brain lesions support the suspicion. Diagnosis can be confirmed by molecular test in CSF samples, including new quantitative methods. Despite an adverse prognosis, specific therapy can be attempted besides antiretroviral treatment.

La reactivación de la infección por Trypanosoma cruzi es un diagnóstico infrecuente pero posible en pacientes con infección por VIH/SIDA y una lesión de tipo tumoral o granulomatosa en el sistema nervioso central. Presentamos el caso clínico de un paciente de 60 años con VIH/SIDA y recuentos bajos de linfocitos CD4, con síntomas cerebelosos y paresia leve, lesiones hipodensas supra e infratentoriales y serología positiva para Toxoplasma gondii y T. cruzi. Se trató empíricamente como una toxoplasmosis cerebral y con terapia antiretroviral, sin respuesta clínica. La enfermedad de Chagas cerebral se confirmó por RPC cuantitativa en el LCR. El paciente falleció a pesar de recibir terapia con nifurtimox. Apoyan la posibilidad de un Chagas cerebral en pacientes con VIH/SIDA, la exposición epidemiológica, la serología positiva y el patrón de distribución de las lesiones en las imágenes. El diagnóstico puede mejorarse con técnicas moleculares cuantitativas en LCR. A pesar de su mal pronóstico, se puede intentar una terapia específica junto al tratamiento antiretroviral.

Polimorfismos en los genes de dihidrofolato-reductasa ( dhfr ) y dihidropteroato-sintasa ( dhps ) y modelado estructural del gen dhps en aislamientos colombianos de Toxoplasma gondii / Gene polymorphisms in the dihydrofolate reductase ( dhfr ) and dihydropteroate synthase ( dhps ) genes and structural modelling of the dhps gene in Colombian isolates of Toxoplasma gondii

Introducción. No existen reportes sobre las variaciones en la secuencia de los genes blanco de los medicamentos anti- Toxoplasma en aislamientos provenientes de Suramérica. Objetivo. Clonar y secuenciar los genes de la dihidrofolato-reductasa ( dhfr ) y la dihidropteroato-sintetasa ( dhps ) de la cepa de referencia RH y de dos aislamientos colombianos de Toxoplasma gondii. Materiales y métodos. Se obtuvieron dos aislamientos de T. gondii en líquido céfalorraquídeo de pacientes colombianos positivos para HIV con toxoplasmosis cerebral. Se extrajo el ADN de los genes dhfr y dhps y se amplificaron mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los productos fueron clonados en el vector pGEM-T y secuenciados. Resultados. Se encontró un cambio de adenina por guanina (A « G) en la posición 235 del exón 2 del gen dhps , dos cambios de guanina por citocina (G « C) en las posiciones 259 y 260 y un cambio de timina por guanina (T « G) en la posición 371 del exón 4 del gen dhps. Por análisis bioinformático, en este último exón se identificó un polimorfismo no sinónimo en la región codificante, que podría llevar al cambio de una Glu (CAA o CAG) por una His (codificada por los codones AAU o AAC). Se calculó el modelo estructural de la enzima dihidropteroato-sintetasa (DHPS) de T. gondii y se identificaron las modificaciones en la estructura secundaria ocasionadas por las mutaciones. Conclusiones. La metodología estandarizada puede servir como base para la búsqueda de polimorfismos en muestras de pacientes con diferentes manifestaciones clínicas de toxoplasmosis y para establecer su posible relación con los cambios en la sensibilidad a los antifolatos y la reacción al tratamiento.

Introduction: There are no reports describing polymorphisms in target genes of anti- Toxoplasma drugs in South American isolates. Objective: This study sought to perform cloning and sequencing of the dihydrofolate reductase ( dhfr ) and dihydropteroate-synthase ( dhps ) genes of the reference Rh strain and two Colombian isolates of Toxoplasma gondii . Materials and methods: Two isolates were obtained from the cerebrospinal fluid of HIV-infected patients with cerebral toxoplasmosis. A DNA extraction technique and PCR assay for the dhfr and dhps genes were standardized, and the products of amplification were cloned into Escherichia coli and sequenced. Results: One polymorphism (A « G) was found at position 235 of exon 2 in the dhps gene. In addition, two polymorphisms (G « C) at positions 259 and 260 and one polymorphism (T « G) at position 371 within exon 4 of the dhps gene were detected. In this last exon, a bioinformatic analysis revealed a non-synonymous polymorphism in the coding region that could lead to the substitution of Glu (CAA or CAG) for His (encoded by codons AAU or AAC). A structural model of the T. gondii DHPS protein was calculated, and the results revealed modifications in secondary structure due to mutations. Conclusions: The methods described in this study can be used as a tool to search for polymorphisms in samples from patients with different clinical manifestations of toxoplasmosis and to examine their relationship with the therapeutic response.

Líquido cefalorraquidiano no diagnóstico da esquistossomose raquimedular / Cerebrospinal fluid in the diagnosis of spinal schistosomiasis

As três espécies de esquistossoma podem comprometer o sistema nervoso. O S. mansoni é responsável pela esquistossomose no Brasil, sendo a mielopatia uma forma grave desta helmintose. O propósito deste trabalho é analisar as alterações do líquido cefalorraquidiano (LCR) para dar mais subsídios para o diagnóstico da esquistossomose raquimedular. Fizeram parte deste estudo 22 amostras de LCR de pacientes com esquistossomose espinal. Os resultados das análises destas amostras mostraram que a associação de alterações do LCR com quadro inflamatório e RIFI-IgM positiva ocorreu em 88 por cento dos pacientes, que o eosinófilo esteve presente em apenas 7 amostras (36,8 por cento), e que 3 dos 22 pacientes estudados apresentaram LCR normal. Conclui-se que o exame de LCR é coadjuvante muito útil para o diagnóstico da neuroesquistossomose.

Polymerase chain reaction for the laboratory diagnosis of aseptic meningitis and encephalitis

A protocol for testing cerebrospinal fluid specimens using a range of PCR assays for the diagnosis of central nervous system infection was developed and used to test prospectively 383 specimens. PCR assays were used for the detection of adenovirus, Borrelia burgdorferi, enteroviruses, Epstein Barr virus, cytomegalovirus, herpes simplex virus, human herpes virus type 6, JC virus, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, lymphocytic choriomeningitis virus, measles virus, mumps virus, Mycobacterium sp., Mycoplasma pneumoniae, Toxoplasma gondii and varicella zoster virus. Of the 383 specimens tested in this study, 46 (12.0 percent) were found to be positive. The microorganisms detected were CMV, enterovirus, Epstein Barr virus, herpes simplex virus, human herpes virus type 6, JC virus, L. monocytogenes, Mycobacterium genus, Toxoplasma gondii and varicella zoster virus. The introduction of the PCR protocol described has improved the diagnosis of a range of central nervous system infections in our laboratory. We believe however that further evaluation of these assays in immunocompromised patients is necessary to better determine the predictive value of positive PCR results in these patient groups

El micrometodo de concentracion para diagnostico de la borreliosis / Concentration micromethod for the diagnosis of borreliosis

Las fiebres recurrentes son producidas por espiroquetas del genero Borrelia y transmitidas a otros por garrapatas y piojos. Nosotros hemos estudiado la sensibilidad y especificidad de un micrometodo de concentracion para el diagnostico de la Borreliosis en sangre. Se tomo sangre de ratones que fueron inoculados previamente con una cepa de Borrelia de origen humano. Tubos de micro-hematocrito fueron llenados con sangre, centrifugados y observados a traves del microscopio. La observacion se realiza en la interface de los globulos rojos y el plasma. El micrometodo se muestra mas sensible cuando los niveles de bacteremia son bajos

Cisticercosis cerebral. Elevación de la inmunoglobulina G y su correlación clínica / Cerebral cysticercosis: the clinical correlation of immunoglobulin G levels

La cisticercosis cerebral es una enfermedad pleomórfica y heterogénea. El diagnóstico se realiza mediante métodos de imagen y por estudios inmunológicos. La severidad de la reacción inflamatoria se mide a través de los estudios en LCR. Realizamos un estudio prospectivo en 44 pacientes con cisticercosis cerebral, con la finalidad de evaluar la elevación de la inmunoglobulina G en el LCR. Los pacientes con cisticercosis mixta, parenquimatosa y subaracnoidea (Grupo III) tuvieron un promedio mayor de inmunoglobulina G, que aquellas con cisticercosis parenquimatosa (Grupo II) o con calcificaciones (Grupo I) (p< 0.001). Pensamos que la IgG puede ser un parámetro clínico) más para valorar el curso de la enfermedad.