RESUMEN
BACKGROUND: Helicobacter pylori infection is presumed to be the major causal agent of chronic active gastritis in humans. The persistent infection with this pathogen would be an important factor in the pathogenesis of peptic ulcer and also gastric cancer. METHODS: We investigated relationship between H. pylori characteristics in 42 patients with normal mucosa or gastritis with minor changes and 40 patients with mild and severe gastritis. Detection and typing of vacA and cagA genes were performed using a polymerase chain reaction method. RESULTS: The analysis of vacA prevalence and the type (S1 or S2) showed non-significant differences between the two groups studied (p > 0.05). However, cagA analysis showed highly significant differences between the groups classified as normal tissue-weak gastritis and mild-severe gastritis (p < 0.0001; OR = 8.4; CI = 3.1-22.8). CONCLUSIONS: cagA status is associated to the grade of gastritis, finding higher frequencies of H. pylori cagA+ in the moderate-severe gastritis group. These highly significant differences could make cagA status a genetic marker for disease progress.(AU)
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Adolescente , Adulto , Persona de Mediana Edad , Anciano , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Infecciones por Helicobacter/microbiología , Helicobacter pylori/genética , Gastritis/microbiología , Antígenos Bacterianos/genética , Helicobacter pylori/clasificación , Helicobacter pylori/patogenicidad , Técnicas de Tipificación Bacteriana/métodos , ADN Bacteriano/análisis , Marcadores Genéticos , Virulencia , Gastritis/patología , Dispepsia/microbiología , Dispepsia/patología , Genotipo , Estudios Retrospectivos , Antígenos Bacterianos/análisis , Mucosa Gástrica/microbiología , Técnicas de Amplificación de Ácido Nucleico , Proteínas Bacterianas/genética , Proteínas Bacterianas/aislamiento & purificaciónRESUMEN
La infección genital por el virus papiloma humano (VPH) es la enfermedad de transmisión sexual de tipo viral más común en el mundo. Loas tipos virales de alto riesgo son considerados los agentes etiológicos del cáncer de cuello uterino. El objetivo de este estudio fue analizar los genotipos del VPH en un grupo de mujeres de la ciudad de La Plata, Argentina. Se estudiaron 718 hisopados y/o biopsias cervicales correspondientes a 152 muestras normales (Pap I/II), 84 muestras clasificadas como con atipías de significado incierto (ASCUS), 100 condilomas, 279 lesiones intraepiteliales de bajo grado (LGSIL), 82 lesiones intraepiteliales de alto grado (HGSIL) y 21 carcinomas de células escamosas (SCC). La detección del genoma viral se realizó por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), utilizando un protocolo anidado con los cebadores My 09/11 y Gp 05/06. La genotipificación del VPH se realizó por medio de la técnica de análisis de polimorfismos en la conformación de cadenas simples, utilizando solución de siembra de baja fuerza iónica (LIS-SSCP). La prevalencia general de la infección fue 75 por ciento, con 46 por ciento de muestras ADN-VPH positivas para el grupo Pap I/II, 69 por ciento para las clasificadas como ASCUS, 86 por ciento para los condilomas, 80 por ciento para los LGSIL, 98 por ciento para los HGSIL y 100 por ciento para los carcinomas de células escamosas. Los tipos virales más prevalentes fueron VPH 16 (35 por ciento), VPH 6/11 (27 por ciento cada uno), VPH 33 (6 por ciento) y VPH 18 (5 por ciento). En el grupo de mujeres con LGSIL, HGSIL y SCC el tipo viral más prevalente fue VPH 16, representando el 33 por ciento, 50 por ciento y 67 por ciento de las infecciones, respectivamente. En las mujeres con Pap I/II, ASCUS y condilomas los tipos virales más frecuentes fueron VPH 6 y 11. El grupo etario con mayor prevalencia de VPH fue el comprendido por mujeres de 21 a 30 años, acumulando el 32,2 por ciento de las infecciones totales. (AU)
Asunto(s)
Humanos , Papiloma , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Genoma Viral , ArgentinaRESUMEN
This study describes a fast and simple method for human papillomavirus (HPV) typing based on the polymerase chain reaction (PCR) amplification of a portion of the viral genome and single strand conformation polymorphism using low ionic strength solutions (LIS-SSCP). PCR products were obtained using My09/My11 and Gp5/Gp6 primers in a nested reaction. The band patterns corresponded to the plasmid HPV clones from HPV-6, -11, -16, -18, -31, -33 and -34. The SSCP minigels were stained with SYBR-Green II. In order to determine diagnostic applicability, 100 cervical samples were studied comprising liquid cytology and paraffin embedded biopsies from patients showing squamous intraepithelial lesions (SILs). The SSCP patterns obtained from the clinical samples and the HPV clones were similar when the same type was present. Therefore, the methodology proved to be efficient and with high reproducibility for the detection and typing of HPV in clinical samples.(AU)
Asunto(s)
Femenino , Humanos , Cuello del Útero/virología , Genoma Viral , Virus del Papiloma Humano/aislamiento & purificación , /virología , Reacción en Cadena de la Polimerasa/métodos , Polimorfismo Conformacional Retorcido-Simple , Infecciones Tumorales por Virus/virología , Biopsia , Carcinoma de Células Escamosas/virología , Displasia del Cuello del Útero/virología , Cervicitis Uterina/virología , Neoplasias del Cuello Uterino/virología , ADN de Neoplasias/aislamiento & purificación , ADN Viral/aislamiento & purificación , Colorantes , Colorantes Fluorescentes , Genotipo , Soluciones Hipotónicas , Desnaturalización de Ácido Nucleico , Concentración Osmolar , Virus del Papiloma Humano/clasificación , Virus del Papiloma Humano/genética , Adhesión en Parafina , Sensibilidad y Especificidad , Manejo de Especímenes , Frotis VaginalRESUMEN
This study describes a fast and simple method for human papillomavirus (HPV) typing based on the polymerase chain reaction (PCR) amplification of a portion of the viral genome and single strand conformation polymorphism using low ionic strength solutions (LIS-SSCP). PCR products were obtained using My09/My11 and Gp5/Gp6 primers in a nested reaction. The band patterns corresponded to the plasmid HPV clones from HPV-6, -11, -16, -18, -31, -33 and -34. The SSCP minigels were stained with SYBR-Green II. In order to determine diagnostic applicability, 100 cervical samples were studied comprising liquid cytology and paraffin embedded biopsies from patients showing squamous intraepithelial lesions (SILs). The SSCP patterns obtained from the clinical samples and the HPV clones were similar when the same type was present. Therefore, the methodology proved to be efficient and with high reproducibility for the detection and typing of HPV in clinical samples.
RESUMEN
Genital infection with human papillomavirus (HPV) is one of the most common sexually transmitted viral diseases. High risk HPV are now considered the main etiologic agent of cancer of the uterine cervix and their high-grade precursor lesions. The aim of the present study was to investigate the endemic HPV-genotype spectrum in a population of women from the city of La Plata, Argentina. With this purpose, 718 cervical scrapes or biopsies corresponding to 152 normal samples (Pap I/II), 84 samples classified as atypical squamous cells of undetermined significance (ASCUS), 100 condyloma, 279 low-grade squamous intraepithelial lesions (LGSIL), 82 high-grade squamous intraepithelial lesions (HGSIL), and 21 squamous cell carcinomas (SCC) were studied. The detection of HPV-DNA was performed by nested polymerase chain reaction, using My 09/11 and Gp 05/06. The viral genotypes were analyzed by single-stranded conformation polymorphisms, employing low ionic strength solution (LIS-SSCP). The overall prevalence of HPV infection was 75
in the analyzed population, with a frequency of 46
for normal cervix, 69
for ASCUS, 86
for condyloma, 80
for LGSIL, 98
for HGSIL and 100
for SCC. The most prevalent viral types were HPV 16 (35
), followed by HPV 6/11 (27
each one), HPV 33 (6
) and HPV 18 (5
). HPV 16 was the most prevalent viral type among women with LGSIL, HGSIL and SCC, representing 33
, 50
and 67
of the genital infections, respectively. HPV 6 and 11 were the most frequent viral types among samples classified as Pap I/II, ASCUS and condyloma. Women between 21 and 30 year old showed the highest prevalence of HPV positivity, compraising the 32.2
of total infections.
RESUMEN
BACKGROUND: Helicobacter pylori infection is presumed to be the major causal agent of chronic active gastritis in humans. The persistent infection with this pathogen would be an important factor in the pathogenesis of peptic ulcer and also gastric cancer. METHODS: We investigated relationship between H. pylori characteristics in 42 patients with normal mucosa or gastritis with minor changes and 40 patients with mild and severe gastritis. Detection and typing of vacA and cagA genes were performed using a polymerase chain reaction method. RESULTS: The analysis of vacA prevalence and the type (S1 or S2) showed non-significant differences between the two groups studied (p > 0.05). However, cagA analysis showed highly significant differences between the groups classified as normal tissue-weak gastritis and mild-severe gastritis (p < 0.0001; OR = 8.4; CI = 3.1-22.8). CONCLUSIONS: cagA status is associated to the grade of gastritis, finding higher frequencies of H. pylori cagA+ in the moderate-severe gastritis group. These highly significant differences could make cagA status a genetic marker for disease progress.
RESUMEN
Aunque los datos de las alteraciones genéticas que conducen al desarrollo de cáncer colorectal son abundantes, las alteraciones genéticas específicas para cada clase de tumor no han sido demostradas. El fenotipo cáncer colorectal es originado por la acumulación de diferentes alteraciones genéticas. La naturaleza de esas alteraciones, su orden de aparición y sus asociaciones, varian ampliamente de un tumor a otro, sugiriendo que el concepto de un modelo único de carcinogénesis no es aplicable a estos tumores. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la asociación entre las mutaciones en los protooncogenes K-ras y c-erbB-2 con diferentes variables clinicopatológicas en 54 muestras de adenocarcinomas de colon. La detección de la activación de K-ras en 16 casos fue hecha mediante PCR alelo específica. Para la detección de la amplificación genética en c-erbB-2 se empleó un método de coamplificación por PCR con gen de copia única como referencia. Fueron detectadas mutaciones en K-ras en 16 casos (29,63 por ciento) y amplificación en c-erbB-2 en una muestra (1,85 por ciento). El análisis estadístico mostró una asociación significativa entre frecuencia de mutaciones en el codón 12 de K-ras y el estadio B de Dukes (p<0.005). Por otra parte, no se encontró asociación alguna con los otros parámetros estudiados. Estos resultados indicarian que la activación del protooncogén K-ras podría ocurrir en estadíos tempranos de la enfermedad. (Au)
Asunto(s)
Humanos , Masculino , Femenino , Genes ras/genética , Genes erbB-2/genética , Adenocarcinoma/genética , Neoplasias del Colon/genética , Regulación Neoplásica de la Expresión Génica , Adenocarcinoma/patología , Neoplasias del Colon/patología , Mutación , Amplificación de Genes , Reacción en Cadena de la PolimerasaRESUMEN
Se estudio en forma prospectiva, randomizada y doble ciego una serie de 40 ratas Wistar, analizando el efecto de los glucocorticoides en anastomosis colonicas. Se observo una diferencia estadisticamente significativa, entre ambos grupos, visualizandose que las tratadas con dexametasona presentaban mayores complicaciones, especialmente dehiscencias parciales o totales de las anastomosis. Se describe el mecanismo de accion de los glucocorticoides y se discute su probable influencia en los resultados obtenidos
Asunto(s)
Animales , Ratas , Estudio Comparativo , Colon , Corticoesteroides , Ligadura , Método Doble CiegoRESUMEN
Although data on genetic alterations leading to development of colorectal cancer are abundant, no specific genetic alteration has been demonstrated for each class of tumor. The colorectal cancer phenotype is originated from an accumulation of different genetic alterations. The nature of these alterations, their order of appearance, and their associations vary greatly from one tumor to another, suggesting that the concept of a unique model of carcinogenesis is not applicable to these tumors. The aim of the present work was to study the association between K-ras and c-erbB-2 mutations and different clinicopathological variables in fifty-four samples from adenocarcinomas of the colon. The detection of K-ras activation was performed by specific enriched PCR. The genomic differential polymerase chain reaction with the single copy reference gene was employed for the detection of c-erbB-2 gene amplification. K-ras mutations were detected in 16 cases (29.63
) and c-erbB-2 amplifications in 1 sample (1.85
). Statistical analysis showed a significant association between K-ras codon 12 mutation frequency and Dukes stage B (p < 0.05). On the other hand, there was no association in relation to the other studied parameters. These results could indicate the occurrence of K-ras activation in early stages of the disease.