Enfermedad mínima residual en leucemia mieloide aguda no promielocítica: Resultados preliminares de un estudio colaborativo internacional / Minimal residual disease in non-myelocytic acute myeloid leukemia: preliminary results of an international collaborative study

A pesar de los avances en los protocolos de tratamiento y en las medidas de soporte en pacientes con Leucemia Mieloide Aguda (LMA), 27% presentan recaídas de la enfermedad. Esto se debe, entre otras causas, a la persistencia de pequeñas cantidades de células malignas (blastos) resistentes a la terapia. Estas pequeñas cantidades de blastos remanentes se denominan Enfermedad Mínima Residual (EMR). La determinación de EMR requiere de técnicas no solo muy sensibles, sino también específicas, y permite evaluar la respuesta individual a la terapia. La introducción de la EMR como parámetro de respuesta y estratificación está bien definida en Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA). Por el contrario, aunque existen publicaciones sobre el impacto pronóstico de la EMR en LMA, aún no se encuentra incluida en forma sistemática en los protocolos nacionales actuales, entre otros motivos, por lo laborioso de la determinación y por la necesidad de validación de la misma. Debe tenerse en cuenta que el inmunofenotipo de los blastos mieloides suele ser más heterogéneo que el de los blastos en LLA, presentando, en muchos casos, subpoblaciones diferentes entre sí, lo cual dificulta su detección certera y no hay consenso definido en cuanto a la metodología más eficaz. En este trabajo describimos una nueva estrategia de marcación y análisis estandarizada en un estudio multicéntrico internacional para LMA y la utilidad de la EMR como parámetro de respuesta y de estratificación. Asimismo, detallamos los resultados preliminares de nuestra cohorte de pacientes (AU)

Despite the improvement in treatment and supportive care of patients with Acute Myeloid Leukemia (AML), 27% of them relapse. This is due to the persistence of small amounts of malignant cells (blasts) resistant to therapy, among other causes. These small amounts of blasts are called Minimal Residual Disease (MRD). The determination of MRD requires not only techniques with high sensitivity but also with high specificity, and allows to evaluate the individual response to treatment. The introduction of MRD as a response parameter is well established in Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL), and it is used in current stratification protocols. On the other hand, even though there are some reports regarding the prognostic impact of MRD in AML, it is still not included in the current national protocols due to the lack of validation of the determination, among other causes. This is due to the fact that the immunophenotype of myeloid blasts is more heterogeneous than in ALL, presenting different subpopulations, which difficults their accurate detection. Thus, there is still no consensus regarding the most effective approach. In this article, we describe a new staining and analysis strategy standardized by an international multicentric study, and the utility of EMR as a response and stratification parameter. Additionally, we show the preliminary results of our patient cohort. (AU)

Inmunofenotipos aberrantes en leucemias agudas en una población hospitalaria de Buenos Aires / Aberrant immunophenotypes in acute leukemia in a Buenos Aires hospital population

La citometría de flujo multiparamétrica es el método de elección para la caracterización inmunofenotípica de las células hematopoyéticas clonales presentes en los distintos procesos leucémicos agudos. El objetivo fue analizar la expresión de antígenos de membrana y evaluar la presencia de fenotipos aberrantes en los blastos de pacientes con diagnóstico de leucemia aguda, que permiten el monitoreo de la respuesta al tratamiento. Se revisaron los inmunofenotipos de 364 muestras de pacientes adultos derivadas a nuestro laboratorio en un período de 7 años. El inmunofenotipo se realizó por citometría de flujo con un amplio panel de anticuerpos monoclonales con el que se evaluó la expresión de antígenos de linaje linfoide, mieloide y también antígenos de maduración. De las 364 muestras estudiadas, 60.2% presentaron un fenotipo compatible con leucemia mieloide aguda (LMA), 28.8% con leucemia linfoblástica B (LLA-B), 6.6% con leucemia linfoblástica T (LLA-T) y 4.4% con leucemias agudas poco frecuentes. La presencia de fenotipos aberrantes se observó en 89% de los casos, los fenotipos aberrantes identificados fueron: 1) infidelidad de linaje: LMA (54%), LLA-B (40%), LLA-T (29%); 2) ausencia de expresión antigénica: LMA (21%), LLA-B (35%), LLA-T (70%); 3) alteración de la expresión antigénica: LMA (67%), LLA-B (66%), LLA-T (84%); 4) asincronismo madurativo: LMA (26%), LLA-B (37%) y 5) fenotipo ectópico: LLA-T 96%). El análisis por citometría de flujo multiparamétrica de las leucemias agudas permitió la identificación de fenotipos aberrantes en la mayoría de nuestros pacientes, que son de utilidad para el monitoreo de la respuesta al tratamiento.(AU)

Multiparameter flow cytometry (MFC) has become the preferred method for the lineage assignment and maturational analysis of malignant cells in acute leukemias. Multiparametric immunophenotyping analysis allows the detection of aberrant antigen expression and the analysis of heterogeneity and clonality of malignant cells in leukemias. Our objectives were to analyze the membrane antigen expression and to evaluate if the aberrant phenotypes occurrence in blasts cells of patients with acute leukemia is useful in monitoring the response to the treatment. We have retrospectively analyzed the MFC data of 364 samples sent to our laboratory in a 7 years period. For this purpose we have used a large panel of monoclonal antibodies against lymphoid, myeloid and precursors antigens. From the 364 analyzed samples, 60.2% showe d a phenotype compatible with acute myeloid leukemia (AML), 28.8% with B lymphoblastic leukemia (B-LLA), 6.6% with T lymphoblastic leukemia (T-LLA) and 4.4% with rare leukemias. Aberrant phenotypes were found in 86% of the samples. The aberrant phenotypes identified were:1) lineage infidelity AML (54%), B-ALL (40%), T-ALL (29%); 2) absence of antigen expression: AML (21%), B-ALL (35%), T-ALL (70%); 3) altered antigen expression: AML (67%), B-ALL (66%),T-ALL (84%); 4) asynchronous expression: AML (26%), B-ALL (37%) and 5) ectopic phenotype: T-ALL (96%). Multiparameter flow cytometry of acute leukemias allowed identification of aberrant phenotypes in the majority of our patients, that are helpful for monitoring treatment response.(AU)

Leucemias agudas pediátricas de inmunofenotipo inusual / Childhood acute leukemias of unusual phenotype

La mayoría de las Leucemias Agudas (LA) pediátricas pueden clasificarse como Linfoblásticas (principalmente de fenotipo B o T) o Mieloblásticas dependiendo del linaje celular de los blastos, recibiendo tratamiento específico de acuerdo a esta caracterización. La inmunotipificación de las LA se basa en la evaluación de la expresión de antígenos de superficie y/o intracitoplasmáticos de diferenciación linfoide (B o T) o mieloide (My) en los blastos, lo cual permite definir la estirpe celular y clasificar la LA de acuerdo al grado de maduración. Sin embargo, existen grupos particulares poco frecuentes de LA cuya clasificación resulta dificultosa y por eso se las denomina LA de linaje ambiguo (fenotipo mixto/indiferenciadas) y LA de linaje dendrítico. Las de fenotipo mixto son aquellas en las que los blastos expresan marcadores de más de un linaje, y las indiferenciadas aquellas que no expresan antígenos específicos para ningún linaje. Diferentes convenciones se han ido desarrollando para definir y clasificar estos fenotipos inusuales, siendo la más actualizada la propuesta por la Organización Mundial de la Salud (2008). De acuerdo a estas pautas, de 1301 casos de LA diagnosticados entre abril de 1994 y abril de 2009, 28 fueron re-clasificados como LA de linaje Ambiguo, 3 como leucemia mieloide aguda minimamente diferenciadas y 3 como LA de células dendríticas. Debido a lo infrecuente de estos casos, su caracterización resulta relevante, ya que la bibliografía presenta, en general, sólo comunicaciones esporádicas de estos fenotipos particulares. Dada la importante casuística del Hospital Garrahan y el amplio seguimiento de los pacientes, el relevamiento de estos casos inusuales permite caracterizarlos desde el inmunofenotipo, la morfología/citoquímica, la citogenética/biología molecular y evaluar su presentación clínica, evolución, respuesta al tratamiento y sobrevida libre de eventos con la finalidad de colaborar con la definición de su pronóstico y eventualmente con la elaboración de protocolos de tratamiento diferenciados para estos subgrupos de LA (AU)

The majority of childhood acute leukemias (AL) can be classified as lymphoblastic (mainly phenotype B or T) or myeloblastic, depending on the cell lineage of the blasts, requiring specific treatment according to this characterization. Immunotypification of AL is based on surface and/or intracytoplasmic antigen expression with lymhoid (B or T) or myeloide (My) blast differentiation, allowing definition of cell lineage and classification of the AL according to the grade of maturation. Nevertheless, there are rare cases of AL that are difficult to classify, denominated AL of ambiguous lineage (mixed/undifferentiated lineage) and acute dendritic cell leukemia. In AL of the mixed phenotype, the blasts express markers of more than one lineage and in undifferentiated AL, the blasts lack antigen expression of any specific lineage. Different conventions have tried to define and classify these unusual phenotypes, among which the most recent proposal of the World Health Organization (2008). According to the criteria of the latter, of 1301 cases of AL diagnosed between April 1994 and April 2009, 28 were re-classified as AL of ambiguous lineage, 3 as minimally differentiated acute myeloid leukemia, and 3 as acute dendritic cell leukemia. Characterization of these cases is important, as in the literature only sporadic reports of these rare phenotypes are found. Given the large number of patients with a long follow-up of the Garrahan Hospital, a review of these unusual cases allowed characterization from the point of view of the immunophenotype, morphology/cytochemistry, cytogenetics/molecular biology and to evaluate clinical presentation, evolution, response to treatment, and event-free survival to help define the prognosis and develop protocols for the treatment of these subgroups of AL (AU)

Linfomas cutáneos primarios: Parte I / Primary cutaneous lymphomas: Part I

Realizamos una revisión de la bibliografía sobre los linfomas cutáneos primarios tomando como base la nueva clasificación donde EORTC y OMS aunaron conceptos y criterios para ella. Destacamos que los linfomas cutáneos de células T tienen una mayor agresividad, tienen tendencia a lesiones más generalizadas y agresivas, y dentro de los más frecuentes del grupo se encuentran la micosis fungoide con todas sus variantes y el síndrome de Sézary. El linfoma T paniculítico con fenotipo alfa/beta debe ser considerado como tal, siendo la forma gamma/delta CD4- y CD8- con coexpresión CD56 incluido en la categoría de linfoma T gamma/delta. Los linfomas cutáneos de células B son menos agresivos y sus lesiones tienen preferencia por la zona de cabeza y cuello. En ellos se debe investigar por serología, infecciones previas, en especial por Borrelia burgdorferi. Las nuevas aclaraciones sobre los diferentes linfomas B, principalmente en los primarios difusos y en los perifoliculares, facilita la elección de una terapéutica más o menos agresiva. Se avanza cada día más en el estudio de estas patologías, debiéndose realizar un estudio exhaustivo clínico y laboratorial donde se incluya el estudio inmunohistoquímico e inmunogenético, sin los cuales no se llega a realizar un acertado diagnóstico. Cada entidad definida como linfoma tiene como característica el hecho de presentar un inmunofenotipo, un inmunogenotipo y un conjunto de anormalidades moleculares que la hacen diferenciable de otro tipo de linfoma, lo que permite diagnosticarlo, estadificarlo y predecir su comportamiento biológico. Múltiples terapéuticas en uso y/o en fase de investigación cambiarán en un futuro cercano la evolución de los linfomas cutáneos primarios. Podemos mencionar los anticuerpos monoclonales. Los anti CD20 (rituximab) son los más efectivos y los más estudiados. Dentro de otros se encuentran ya en estudios avanzados alemtuzumab (anti CD52), epratuzumab (anti CD22), apolizumab (anti HLA-DR) y galiximab...(AU)

We have a bibliographic revision of primary cutaneous limphomas using the EORTC and WHO new classification in order to unify concepts. Cutaneous T cell like lymphomas (C+CL) have a higher aggressiveness with a generalized and aggressive tendency; being the most frecuents all varieties of micosys fungoide (MF) and Sézary sindrome. Those lymphomas with a/ß phenotype must be estrictly considered as a subcutaneous panniculiticlike + cell lymphoma; and those with ?/d phenotype as +/NK cell lymphoma; wich has a very agressive clinical course. Cutaneous B cell lymphomas are less aggressive and its lesions are preferably situated in head and neck, in this cases previous infections must be investigated, specially Borrelia burgdoferi infections. The new classifications of diferents B lymphomas, principally betwen primary cutaneous and folliculars, facilitates the selection of a correct therapy. The study of these pathologies advances every day. It is very important to include immunihistochemical, immunogenetic and immunophenotype studies so as rech bo the correct diagnosis and classification of the lymphomas. New therapies and new combination of therapies will offer a promising future.(AU)

Sarcomas primarios de mama / Primary sarcomas of the breast

Los sarcomas primarios de mama son extremadamente raros y representan menos del 1% de lostumores mamarios comunicados en la literatura. Entre los años 1999 y 2004 se diagnosticaron ennuestra institución 1315 tumores malignos de mama, entre ellos nueve correspondieron a sarcomas primarios:tres angiosarcomas, un leiomiosarcoma, un sarcoma fibromixoide de bajo grado, un dermatofibrosarcoma, unliposarcoma, un osteosarcoma y un tumor maligno de la vaina de los nervios periféricos. Se revisaron los preparadoshistológicos, teñidos con técnicas de rutina y de inmunoperoxidasa, estableciéndose la fracción de crecimiento(FC) y sobre-expresión de proteína p53. Se estudiaron también las historias clínicas de las pacientespara determinar tipos de evolución (favorable y desfavorable). La incidencia observada (0.7%) es similar a lasya publicadas por otros autores. La FC se correlacionó con la evolución, siendo un factor pronóstico desfavorablecuando fue mayor o igual al 30%. La mayoría de los tumores (67%) mostró sobre-expresión de proteína p53(mayor o igual al 20% de tinción nuclear) pero esto no demostró tener una relación directa con la evolución decada neoplasia. (AU)

Primary sarcomas of the breast are extremely rare with less than1% of all malignant tumours of the breast reported in literature. At our Institution 1315 malignanttumours of the breast were diagnosed between 1999-2004; nine of them corresponded to primary sarcomas:angiosarcoma (3), leiomyosarcoma (1), low-grade fibromyxoid sarcoma (1), dematofibrosarcoma protuberans (1),liposarcoma (1), osteosarcoma (1), malignant peripheral nerve sheath tumour (1). Histopathological specimensstained with routine techniques and immunoperoxidase were reviewed; proliferation index and p53 over-expressionwere also determined. Patients´ clinical reports were also reviewed to determine prognosis (favorable andunfavorable). The incidence observed (0.7%) is similar to those already published by others authors. Proliferationindex was correlated with type of evolution, being an unfavourable prognosis factor when it was equal ormajor to 30%. Most of the tumours (67%) showed p53 (mayor or equal to 20% of nuclear staining) over-expressionbut this did not show a direct relationship with the evolution of each neoplasm. (AU)

Sarcomas primarios de mama / Primary sarcomas of the breast

Los sarcomas primarios de mama son extremadamente raros y representan menos del 1% de lostumores mamarios comunicados en la literatura. Entre los años 1999 y 2004 se diagnosticaron ennuestra institución 1315 tumores malignos de mama, entre ellos nueve correspondieron a sarcomas primarios:tres angiosarcomas, un leiomiosarcoma, un sarcoma fibromixoide de bajo grado, un dermatofibrosarcoma, unliposarcoma, un osteosarcoma y un tumor maligno de la vaina de los nervios periféricos. Se revisaron los preparadoshistológicos, teñidos con técnicas de rutina y de inmunoperoxidasa, estableciéndose la fracción de crecimiento(FC) y sobre-expresión de proteína p53. Se estudiaron también las historias clínicas de las pacientespara determinar tipos de evolución (favorable y desfavorable). La incidencia observada (0.7%) es similar a lasya publicadas por otros autores. La FC se correlacionó con la evolución, siendo un factor pronóstico desfavorablecuando fue mayor o igual al 30%. La mayoría de los tumores (67%) mostró sobre-expresión de proteína p53(mayor o igual al 20% de tinción nuclear) pero esto no demostró tener una relación directa con la evolución decada neoplasia. (AU)

Primary sarcomas of the breast are extremely rare with less than1% of all malignant tumours of the breast reported in literature. At our Institution 1315 malignanttumours of the breast were diagnosed between 1999-2004; nine of them corresponded to primary sarcomas:angiosarcoma (3), leiomyosarcoma (1), low-grade fibromyxoid sarcoma (1), dematofibrosarcoma protuberans (1),liposarcoma (1), osteosarcoma (1), malignant peripheral nerve sheath tumour (1). Histopathological specimensstained with routine techniques and immunoperoxidase were reviewed; proliferation index and p53 over-expressionwere also determined. Patients´ clinical reports were also reviewed to determine prognosis (favorable andunfavorable). The incidence observed (0.7%) is similar to those already published by others authors. Proliferationindex was correlated with type of evolution, being an unfavourable prognosis factor when it was equal ormajor to 30%. Most of the tumours (67%) showed p53 (mayor or equal to 20% of nuclear staining) over-expressionbut this did not show a direct relationship with the evolution of each neoplasm. (AU)

Rearreglos de genes de cadenas pesadas de las inmunoglobulinas en las gammapatias monoclonales / Immunoglobulin heavy chain gene rearrangements in the monoclonal gammopathies

Las neoplasias de células plasmáticas resultan de la expansión de un clon de células B que secreta inmunoglobulinas, conocido como componente monoclonal o componente M. Las neoplasias malignas incluyen al mieloma múltiple y la macroglobulinemia de Waldenstr÷m, y la condición premaligna comprende las gammapatías monoclonales de significado incierto (MGUS). El MGUS presenta un componente monoclonal sin evidencia de mieloma múltiple, macroglobulinemia de Waldenstr÷m, amiloidosis primaria u otros desórdenes. El diagnóstico se basa en la combinación de características patológicas, radiológicas y clínicas. Aproximadamente el 25% de las gammapatías monoclonales de significado incierto desarrollarán mieloma múltiple, amiloidosis sistémica, macroglobulinemia o enfermedades linfoproliferativas malignas, indicando que sería una condición premielomatosa. El objetivo del presente trabajo es establecer la utilidad clínica de la inmunofenotipificación por citometría de flujo (CF) y la detección de clonalidad por biología molecular. Se estudiaron 32 pacientes, siete con diagnóstico de mieloma múltiple y veinticinco con gammapatía monoclonal em estudio, los cuales fueron divididos en cuatro grupos basados en los datos clínicos y los resultados de CF. Em el grupo de pacientes con CF no diagnóstica, se realizó la detección de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR), detectándose monoclonalidad en el 59% de los casos. El estudio de los rearreglos de los genes de las cadenas pesadas de las IgH mediante PCR incrementa la sensibilidad de detección de monoclonalidad. (AU)

Evolucion de la leucemia linfatica cronica: valor predictivo del inmunofenotipo, el CD23 soluble y la morfologia / Evolution of chronic lymphocytic leukemia: predictive value of immunophenotype, soluble CD23 and morphology

Some prognostic factors are useful in chronic lymphocytic leukemia (CLL): lymphocyte doubling time, clinical stage and bone marrow pattern infiltration, while others, such as the percentage of CD38+ cells, are under study and require confirmation. The objective of this study was to evaluate whether there is an association between morphology, lymphocyte immunophenotype, soluble CD23 (sCD23) and progression free survival (PFS). A total of 36 non-treated patients were enrolled. We analysed prospectively: morphology (typical, mixed and PL-CLL); immunophenotypic profile (Matutes score); sCD23 plasma levels; clinical stage; lymphocyte doubling time; beta 2 microglobulin and karyotype abnormalities. Disease progression (need of treatment, progression to advanced stages, development of bulky organomegaly) and death related to disease were considered as events. Md of follow-up 24 mo. RESULTS: Stage 0: 11/36, PFS 80%; I: 10/36 PFS 90%; II: 13/36; III and IV: 2/36. SLE > or = II PFS 37%. p = 0.023. Lymphocyte doubling time < 12mo. 7/31; > 12mo. 24/31. PFS 28% vs. 80% p < 0.001. Karyotype: normal 13/28, abnormal 15/28. PFS 92% vs. 54% p = 0.053. Trisomy 12: positive 7/30, negative 23/30, PFS 66% vs. 65%. beta 2 microglobulin: normal 9/35; high 26/35. PFS 100% vs. 53% p = 0.006. sCD23 < 350 Ul/ml: 15/32; > 350 Ul/ml: 17/32. PFS 92% vs. 53% p = 0.005. Immunophenotype: Score 5: 15/36, Score 4: 19/36, PFS 64%. Score 3: 2/36. p = 0.516. Morphology: typical 17/35, mixed 17/35, PFS 81% vs. 57%, p = 0.099. PL-CLL 1/35. CONCLUSIONS: sCD23 was suitable to predict PFS, specially useful for early stages without additional markers of active disease. Morphology (excluding PL-CLL) and immunophenotype, two common tools, were not useful for the study purpose (AU)

Oligonucleotide imt504 induces an immunogenic phenotype and apoptosis in chronic lymphocytic leukemia cells

Los oligonucleótidos (ODNs) de tipo PyNTTTTGT estimulan directamente las células B y las células dendríticas plasmacitoides del sistema inmune de primates. En este trabajo, investigamos la habilidad del IMT504, prototipo de los ODN tipo PyNTTTTGT, para regular la expresión demoléculas de superficie y la apoptosis en células B de leucemia linfocítica crónica (LLC). La expresión de lasmoléculas de superficie CD25, CD40, CD80 y CD86 fue aumentada al incubar las células B-LLC con IMT504. La co-estimulación con IL-2 provocó un aumento mayor. Las células B-LLC activadas fueron buenas estimuladorasde las células T en cultivo mixto de linfocitos alogeneicos y la co-estimulación con IL-2 mejoró esta capacidad. La apoptosis de las células B-LLC también fue estimulada por incubación con IMT504. En este caso, la coestimulación con IL-2 no fue significativa. Más aún, las células B-LLC de todos los pacientes estudiados,desarrollaron un fenotipo inmunogénico y entraron en apoptosis luego de la incubación in vitro con IMT504,independientemente del estado mutacional de sus genes IgVH , un indicador del pronóstico de la patología. (AU)

Oligonucleotide imt504 induces an immunogenic phenotype and apoptosis in chronic lymphocytic leukemia cells

Los oligonucleótidos (ODNs) de tipo PyNTTTTGT estimulan directamente las células B y las células dendríticas plasmacitoides del sistema inmune de primates. En este trabajo, investigamos la habilidad del IMT504, prototipo de los ODN tipo PyNTTTTGT, para regular la expresión demoléculas de superficie y la apoptosis en células B de leucemia linfocítica crónica (LLC). La expresión de lasmoléculas de superficie CD25, CD40, CD80 y CD86 fue aumentada al incubar las células B-LLC con IMT504. La co-estimulación con IL-2 provocó un aumento mayor. Las células B-LLC activadas fueron buenas estimuladorasde las células T en cultivo mixto de linfocitos alogeneicos y la co-estimulación con IL-2 mejoró esta capacidad. La apoptosis de las células B-LLC también fue estimulada por incubación con IMT504. En este caso, la coestimulación con IL-2 no fue significativa. Más aún, las células B-LLC de todos los pacientes estudiados,desarrollaron un fenotipo inmunogénico y entraron en apoptosis luego de la incubación in vitro con IMT504,independientemente del estado mutacional de sus genes IgVH , un indicador del pronóstico de la patología. (AU)

Problemática en la detección del inmunofenotipo en patología tumoral: aspectos técnicos y diagnósticos / The problem in immunophenotype detection in tumoral pathology technical and diagnostical aspects

En este estudio revisamos 416 casos de tumores malignos con el fin de evaluar las contribuciones y los problemas relacionados con la determinación del inmunofenotipo. De éstos pudimos resolver 338 casos y observamos que la mayor contribución de esta determinación fue en aquellos casos que requirieron: diagnóstico de estirpe tumoral, tipificación de linfomas y diagnóstico diferencial entre carcinoma y linfoma. En los 78 casos restantes no pudimos determinar el inmunofenotipo debido a: condiciones inadecuadas de las muestras en el 71 por ciento (incluyendo denaturalización del antígeno, material insuficiente y alteraciones tisulares como necrosis y hemorragia) y en 29 por ciento debido a la falta de antisuero específico, problemas técnicos y otras causas

Inmunofenotipos aberrantes en leucemias agudas en una población hospitalaria de Buenos Aires. / [Aberrant immunophenotypes in acute leukemia in a Buenos Aires hospital population].

Multiparameter flow cytometry (MFC) has become the preferred method for the lineage assignment and maturational analysis of malignant cells in acute leukemias. Multiparametric immunophenotyping analysis allows the detection of aberrant antigen expression and the analysis of heterogeneity and clonality of malignant cells in leukemias. Our objectives were to analyze the membrane antigen expression and to evaluate if the aberrant phenotypes occurrence in blasts cells of patients with acute leukemia is useful in monitoring the response to the treatment. We have retrospectively analyzed the MFC data of 364 samples sent to our laboratory in a 7 years period. For this purpose we have used a large panel of monoclonal antibodies against lymphoid, myeloid and precursors antigens. From the 364 analyzed samples, 60.2

showed a phenotype compatible with acute myeloid leukemia (AML), 28.8

with B lymphoblastic leukemia (B-LLA), 6.6

with T lymphoblastic leukemia (T-LLA) and 4.4

with rare leukemias. Aberrant phenotypes were found in 86

of the samples. The aberrant phenotypes identified were:1) lineage infidelity AML (54

), B-ALL (40

), T-ALL (29

); 2) absence of antigen expression: AML (21

), B-ALL (35

), T-ALL (70

); 3) altered antigen expression: AML (67

), B-ALL (66

),T-ALL (84

); 4) asynchronous expression: AML (26

), B-ALL (37

) and 5) ectopic phenotype: T-ALL (96

). Multiparameter flow cytometry of acute leukemias allowed identification of aberrant phenotypes in the majority of our patients, that are helpful for monitoring treatment response.

Fine needle aspiration for flow cytometry immunophenotyping of non Hodgkin lymphoma

The aim was to evaluate the usefulness of lymph node biopsies obtained by fine needle aspiration (FNA) for immunophenotyping of non Hodgkin lymphoma (NHL). Seventeen superficial and deep lymph node samples were fractioned for conventional cytological examination and immunophenotyping studies. Out of ten NHL, nine were readily detected by flow cytometry (FC), while failure on the remaining case was due to selective loss of large cell population, which is liable to occur with this procedure. A single case, which proved negative for all markers employed, was finally diagnosed by immunohistochemistry as germ cell tumor. The other six cases, presenting lymphoid population without phenotypic abnormalities, were diagnosed by cytology and/or histology as Hodgkin disease or hyperpiasic disorders. To conclude, FC immunophenotyping seems to improve the efficacy of FNA in NHL diagnosis, whereas for Hodgkin disease and hyperplasic disorders, classic morphological criteria are more useful for differential diagnosis. Although FNA for FC immunophenotyping cannot replace histopathological examination for NHL diagnosis, it proves to be a useful tool for staging and follow up, making surgical procedures for sample collection unnecesary.(AU)

Concurrencia de marcacion citoquimica e inmune de diferentes linajes celulares en casos de leucemias agudas / Concurrence of cytochemical and immune patterns of different cellular lineages in cases of acute leukemia

Se registra la sinonimia entre leucemia mixta, bilineal, biclonal e híbrida, diferenciándola de leucemia bifenotípica. Se define leucemia aguda mixta (LA mixta) como aquella en la que coexistem 1) dos caracteres citoquímicos de línea diferente, o 2) uno de ellos y más de uno inmunológico opuesto, o 3) más de uno inmunológico opuesto a otra línea inmune. Se aportan 7 casos (5 de LA mixta común y 2 de viraje postratamiento). Se concluye que el carácter mixto de una leucemia aguda empeora el pronóstico y se discute la selección de la terapÛutica. (AU)

Análisis de factores pronósticos en leucemia linfática crónica. Valor predictivo del inmunofenotipo, el CD23 soluble y la morfología / Predictive factors in chronic lymphocytic leukemia. Value of immunophenotype, SCD23 and morphology

En LLC se reconocen factores pronósticos útiles como la duplicación linfocitaria, el estadio clínico y el patrón de infiltración medular. Otros, como el porcentaje de células CD38+, están en estudio y requieren confirmación. El objetivo del presente trabajo fue evaluar si existe asociación entre morfología, inmunofenotipo linfocitario, CD23 soluble (SL) y sobrevida libre de eventos (SLE). Se evaluaron prospectivamente 36 pacientes sin tratamiento. Se determinaron: morfología típica, mixta y LLC-PL; inmunofenotipo linfocitario (score de Matutes); niveles plasmáticos de CD23 SL; estadio clínico, duplicación linfocitaria; ß2 microglobulina y alteraciones citogenéticas. Se consideró evento: progresión de enfermedad (necesidad de tratamiento, evolución a estadios avanzados, desarrollo de organomegalia voluminosa) y muerte por enfermedad. Mediana de seguimiento 24 meses. Resultados: estadio 0: 11/36, SLE 80 por ciento; I: 10/36 SLE 90 por ciento; II: 13/36: III y IV: 2/36. SLE >= II 37 por ciento. p= 0.023. Duplicación linfocitaria: <12m 7/31, >12m 24/31. SLE 28 por ciento vs 80 por ciento p<0.001. Citogenético: normal 13/28; anormal 15/28. SLE 92 por ciento vs 54 por ciento p=0.053. +12 positiva 7/30, negativa 23/30. SLE 65 por ciento vs 66 por ciento. ß2 microglobulina normal 9/35, elevada 26/35; SLE 100 por ciento vs 53 por ciento p=0.006. D23 SL < 350 Ul/ml 15/32, > 350 Ul/ml 17/32. SLE 92 por ciento vs 53 por ciento p=0.005. Inmunofenotipo: Score 5: 15/36, Score 4: 19/36, SLE 64 por ciento. Score 3: 2/36. p=0.516. Morfología típica 17/35, mixta 17/35. SLE 81 por ciento vs. 57 por ciento p=0.099. LLC-PL 1/35. El CD 23 SL resultó adecuado para predecir SLE, particularmente útil en estadios iniciales sin otros marcadores de actividad. La morfología y el fenotipo linfocitario, dos variables accesibles, no fueron útiles para el propósito del estudio. (AU)

Diagnóstico inmunofenotípico de leucemias agudas por citometría de flujo / Immunophenotyic diagnosis of the acute leukemias by flow cytometry

La caracterización del inmunofenotipo de las células leucémicas es esencial para el diagnóstico de las leucemias agudas. El objetivo del presente trabajo fue analizar el inmunofenotipo de los blastos de pacientes que ingresaron al IIHEMA con el diagnóstico de leucemia aguda en el período 12/94 a 12/96. Para tal fin, estudiamos el patrón inmunofenotípico de 128 casos de leucemia aguda (58 casos de LMA, 27 casos de LLA-B, 7 casos de LLA-T, 16 casos de LLA-My, 3 casos de LMA-Ly, 16 casos de leucemias de linaje mixto y 1 caso de leucemia indiferenciada) utilizando como método la citometría de flujo. Esta técnica es bastante reciente en el país (hay sólo 22 citómetros). El servicio de citometría de flujo del IIHEMA, que comenzó a funcionar en noviembre de 1994, es uno de los centros con mayor experiencia en el diagnóstico oncohematológico, debido al gran número de pacientes referidos. De los 58 casos de LMA, en 13 la expresión del antígeno HLA-DR, resultó negativa... (TRUNCADO)(AU)

Diagnóstico inmunofenotípico de leucemias agudas por citometría de flujo / Immunophenotyic diagnosis of the acute leukemias by flow cytometry

La caracterización del inmunofenotipo de las células leucémicas es esencial para el diagnóstico de las leucemias agudas. El objetivo del presente trabajo fue analizar el inmunofenotipo de los blastos de pacientes que ingresaron al IIHEMA con el diagnóstico de leucemia aguda en el período 12/94 a 12/96. Para tal fin, estudiamos el patrón inmunofenotípico de 128 casos de leucemia aguda (58 casos de LMA, 27 casos de LLA-B, 7 casos de LLA-T, 16 casos de LLA-My, 3 casos de LMA-Ly, 16 casos de leucemias de linaje mixto y 1 caso de leucemia indiferenciada) utilizando como método la citometría de flujo. Esta técnica es bastante reciente en el país (hay sólo 22 citómetros). El servicio de citometría de flujo del IIHEMA, que comenzó a funcionar en noviembre de 1994, es uno de los centros con mayor experiencia en el diagnóstico oncohematológico, debido al gran número de pacientes referidos. De los 58 casos de LMA, en 13 la expresión del antígeno HLA-DR, resultó negativa... (TRUNCADO)