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SLAS Discov ; 26(3): 410-419, 2021 03.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-32935608

RESUMEN

We previously developed a panel of one-step real-time quantitative reverse transcription PCR (one-step qRT-PCR; hereafter referred to as qRT-PCR) assays to assess compound efficacy. However, these high-cost, conventional qRT-PCR manual assays are not amenable to high-throughput screen (HTS) analysis in a time-sensitive and complex drug discovery process. Here, we report the establishment of an automated gene expression platform using in-house lysis conditions that allows the study of various cell lines, including primary T cells. This process innovation provides the opportunity to perform genotypic profiling in both immunology and oncology therapeutic areas with quantitative studies as part of routine drug discovery program support. This newly instituted platform also enables a panel screening strategy to efficiently connect HTS, lead identification, and lead optimization in parallel.


Asunto(s)
Automatización de Laboratorios/normas , Perfilación de la Expresión Génica/normas , Ensayos Analíticos de Alto Rendimiento/métodos , Reacción en Cadena en Tiempo Real de la Polimerasa/métodos , Antígenos de Neoplasias/genética , Antígenos de Neoplasias/inmunología , Automatización de Laboratorios/instrumentación , Proteína 3 que Contiene Repeticiones IAP de Baculovirus/genética , Proteína 3 que Contiene Repeticiones IAP de Baculovirus/inmunología , Línea Celular Tumoral , Quimiocina CCL3/genética , Quimiocina CCL3/inmunología , Descubrimiento de Drogas/métodos , Perfilación de la Expresión Génica/instrumentación , Perfilación de la Expresión Génica/métodos , Regulación de la Expresión Génica , Células HCT116 , Ensayos Analíticos de Alto Rendimiento/instrumentación , Humanos , Proteínas de la Membrana/genética , Proteínas de la Membrana/inmunología , Proteínas de Neoplasias/genética , Proteínas de Neoplasias/inmunología , Osteoblastos/citología , Osteoblastos/metabolismo , Cultivo Primario de Células , Reacción en Cadena en Tiempo Real de la Polimerasa/normas , Proteínas Ribosómicas/genética , Proteínas Ribosómicas/inmunología , Linfocitos T/citología , Linfocitos T/metabolismo
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