RESUMEN
Teleost IgT/Z plays a principal role in the defense mechanisms against infectious agents in the mucosal compartments and in systemic immunity. Previously, Nile tilapia (Oreochromis niloticus) IgT was discovered and characterized at transcription level. In this work, we generated a monoclonal antibody (mAb) that specifically recognized the Nile tilapia IgT. BALB/c mice were immunized with three synthetic peptides conjugated to KLH. The sequences of these peptides derived from the constant region of the Nile tilapia IgT heavy chain. ELISA and Western blotting confirmed the specificity of the polyclonal sera and the culture supernatant from a positive hybridoma clone. We observed immunoreactivity against a recombinant IgT fragment and native IgT in skin mucus. The anti-IgT mAb did not cross-react with purified tilapia IgM. Direct ELISA analysis allowed the quantification of skin mucus IgM and IgT concentrations. Flow cytometry analysis revealed differences in the percentage of IgT+ B cell populations between juveniles and adults in peripheral blood, head kidney and spleen lymphocytes and among the tissues analyzed. For further validation of the anti-IgT mAb utility, a recombinant vaccine candidate against sea lice (TT-P0 Ls) was injected into juvenile tilapia. Direct ELISA results revealed a differential secretion of skin mucus IgT and IgM after immunostimulation. In addition, the percentages of IgT+ B cells were determined at 7 days after booster and ex-vivo stimulation by flow cytometry. This mAb constitutes an important immunological tool to study the biological function and structural characteristics of tilapia IgT.
RESUMEN
Recombinant human interferon gamma (rhIFN-γ) is a promising molecule for the treatment of several diseases. A pair of conformation-specific monoclonal antibodies (mAbs) against rhIFN-γ was selected from generated hybridoma cell lines to design a sensitive, stability-indicative, sandwich-type ELISA. The main assay parameters were optimized by the checkerboard method for the highest signal-to-noise ratio: assay buffer composition, coating buffer pH and composition, coating temperature-incubation time parameters, and coating mAb concentration and conjugate dilution. Detection and quantification limits were estimated between 0.019 and 0.078 ng/mL, respectively, and recovery values were from 92.03% to 98.40%. The coefficient of variation of intra-assay precision parameters ranged from 2.32% to 9.21% while the inter-analyst variation was between 4.70% and 10.63%, supporting the method's repeatability. The ELISA was specific for correctly folded and non-aggregated molecular species, as compared to intrinsic Trp fluorescence (chemical denaturation) and optical density at 340 nm (thermal aggregation), respectively. However, the method was not sensitive to the small C-terminal degradation of full-length rhIFN-γ1-144 (losses of 6-12 amino acid residues) as compared to results with mass spectrometry and gel electrophoresis. ELISA showed good correlation with rhIFN-γ antiviral biological activity. This method was applied to the stability evaluation of rhIFN-γ in physiological buffer at low concentrations using polypropylene and glass vials also in the presence of adsorption protectant excipients. Furthermore, ELISA could be adapted to other applications such as quantification of IFN-γ in serum samples, Mycobacterium tuberculosis diagnosis, etc.
Asunto(s)
Antivirales , Interferón gamma , Humanos , Interferón gamma/análisis , Interferón gamma/metabolismo , Proteínas Recombinantes , Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática , Antivirales/química , Anticuerpos Monoclonales , Factores InmunológicosRESUMEN
RESUMEN Fundamento: en los pacientes con drepanocitosis las alteraciones de la función pulmonar son frecuentes y pueden detectarse por la espirometría. Objetivo: describir las alteraciones de la función ventilatoria en los pacientes con drepanocitosis seguidos en consulta provincial de hemoglobinopatías. Métodos: estudio observacional, descriptivo, de corte transversal. Se incluyeron 76 pacientes, seleccionados por muestreo no probabilístico accidental, de 88 adultos seguidos en el Hospital Dr. Gustavo Aldereguía Lima. Las variables estudiadas fueron: edad, sexo, tipo de hemoglobinopatía, síntomas respiratorios, antecedentes de síndrome torácico agudo, (formas clínicas y número de eventos), comorbilidades y patrón ventilatorio. Las pruebas funcionales ventilatorias se realizaron con Microspiro digital Hellige. Resultados: el grupo de edad entre 20-29 años fue el más frecuente (34,2 %). Hubo discreto predominio del sexo femenino (56,1 %) y del genotipo SS (67,1 %). El más frecuente de los síntomas respiratorios fue la disnea y entre las comorbilidades la insuficiencia cardíaca en 9,2 % de los enfermos. En 42,1 % se registró antecedentes de síndrome torácico agudo, neumonía en la mayoría de los casos. Nueve enfermos (11,8 %) presentaron trastornos obstructivos y 43 enfermos (56,6 %) un patrón restrictivo.En el genotipo SS el riesgo de tener alteraciones en la espirometría resultó tres veces mayor que el resto [OR=3,2 IC (1,7-5,9)] Conclusiones: resultó común el hallazgo de prueba funcional ventilatoria alterada con predominio del patrón restrictivo. Estas modificaciones se observaron con mayor frecuencia en pacientes con el genotipo SS.
ABSTRACT Foundation: in patients with sickle cell disease, lung function abnormalities are frequent and can be detected by spirometry. Objective: to describe the disturbances of the respiratory functions in patients with sickle cell disease followed in a provincial consultation of hemoglobinopathies. Methods: observational, descriptive, cross-sectional study. Seventy six patients, selected by accidental non-probabilistic sampling, of 88 adults followed at the Dr. Gustavo Aldereguía Lima Hospital were included. The variables studied were: age, sex, type of hemoglobinopathy, respiratory symptoms, history of acute thoracic syndrome, (clinical forms and number of events), comorbidities and ventilatory pattern. Functional ventilatory tests were performed with Hellige digital Microspiro. Results: the age group between 20-29 years was the most frequent (34.2%). There was a discrete female predominance (56.1%) and the SS genotype (67.1%). The most frequent of the respiratory symptoms was dyspnea and among the comorbidities heart failure in 9.2% of the patients. In 42.1% there was a history of acute chest syndrome, pneumonia in most cases. Nine patients (11.8%) presented obstructive disorders and 43 patients (56.6%) a restrictive pattern. In the SS genotype the risk of having spirometry alterations was three times higher than the rest [OR = 3.2 IC (1.7-5.9)] Conclusion: the finding of altered respiratory functional test with a predominance of the restrictive pattern was common. These modifications were observed more frequently in patients with the SS genotype.
RESUMEN
Fundamento: la mortalidad hospitalaria es un indicador sanitario clásicamente utilizado en el control de la calidad asistencial. Las enfermedades respiratorias ocupan un importante lugar como causas de muerte en los hospitales. Objetivo: describir la mortalidad por afecciones respiratorias en el Hospital General Universitario Dr. Gustavo Aldereguía Lima de Cienfuegos. Métodos: estudio descriptivo que incluyó todos los pacientes mayores de 18 años fallecidos por enfermedades respiratorias, en el hospital de Cienfuegos, desde el 2010 hasta el 2014. Se analizó: edad, sexo, estadía hospitalaria, servicio donde fallecieron, causa de muerte, enfermedades asociadas. Resultados: el estudio mostró un ascenso de pacientes admitidos en el hospital por afecciones respiratorias, con incremento en la mortalidad por dichas enfermedades (36,2 %). Predominó el sexo masculino (54,7 %), los mayores de 75 años con un 62, 5 %, así como los internados en salas de medicina interna (39, 2 %). El 48,8 % de los pacientes fallecieron en las primeras 72 horas. Las afecciones respiratorias predominantes fueron: neumonía/ bronconeumonía, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y cáncer de pulmón respectivamente; el 63,4 % de los casos presentaron enfermedades asociadas, fundamentalmente cardiovasculares (26, 6 %). Conclusiones: las afecciones respiratorias provocan alto grado de mortalidad hospitalaria, las causas más frecuente son la neumonía/bronconeumonía, fundamentalmente en el sexo masculino y en pacientes mayores de 75 años.
Background: in-hospital mortality is a health indicator commonly used as a measure of quality of care. Respiratory diseases are a major cause of deaths in hospitals. Objective: to describe mortality from respiratory diseases at the Dr. Gustavo Aldereguía Lima University General Hospital in Cienfuegos. Methods: a descriptive study of all patients over 18 years old who died from respiratory diseases in the hospital of Cienfuegos from 2010 to 2014 was conducted. The variables analyzed were: age, sex, length of stay, services where the patients died, cause of death, and associated diseases. Results: there was an increase in patients admitted for respiratory diseases and a higher mortality from these diseases (36.2%). Males (54.7%), patients over 75 years (62.5%), and those admitted to internal medicine wards (39.2%) predominated. Forty eight point eight percent died within the first 72 hours. The most common respiratory conditions were: pneumonia/bronchopneumonia, chronic obstructive pulmonary disease, and lung cancer, respectively. Sixty three point four percent of the cases developed associated diseases, mainly cardiovascular conditions (26.6%). Conclusions: respiratory diseases are responsible for high in-hospital mortality; the most common causes are pneumonia/bronchopneumonia, mainly in males and in patients older than 75 years.
RESUMEN
Antibodies have been one of the proteins widely expressed in tobacco plants for pharmaceutical purposes, which demand contaminant free preparations. Rubisco constitutes 40-60% of tobacco leaf soluble proteins; therefore it is the major potential protein contaminant of plantibodies, while mycotoxins are toxic compounds that could be introduced during the biomass production and post-harvest stages with important consequences to human health. The objective of this paper was to investigate whether Rubisco and mycotoxins are present in Plantibody HB-01 preparations used in the immunopurification of the hepatitis B surface antigen. Rubisco was purified from Nicotiana tabacum yielding 154 microg of protein per gram of leaves and purity over 95%. Among mouse monoclonal antibodies generated against this enzyme, the CBSS.Rub-2 was selected for its immunodetection. It recognizes a conserved sequential epitope of Rubisco large subunit with an affinity constant of 0.13 x 10(8)M(-1). Rubisco quantification limit was 1 microg spreading to the measurement of this contaminant less than 4% of plantibodies samples. Additionally, according to a Reverse Phase-HPLC used to measure the level of adventitiously introduced contaminants, it can be concluded that aflatoxins B1, B2, G1 and G2 were undetected in the purified Plantibody HB-01 samples.
Asunto(s)
Aflatoxinas/análisis , Anticuerpos contra la Hepatitis B/aislamiento & purificación , Planticuerpos/aislamiento & purificación , Ribulosa-Bifosfato Carboxilasa/análisis , Aflatoxinas/química , Animales , Anticuerpos Monoclonales/genética , Anticuerpos Monoclonales/aislamiento & purificación , Western Blotting , Cromatografía Líquida de Alta Presión/métodos , Cromatografía Líquida de Alta Presión/estadística & datos numéricos , Contaminación de Medicamentos , Ensayo de Inmunoadsorción Enzimática , Anticuerpos contra la Hepatitis B/genética , Antígenos de Superficie de la Hepatitis B/inmunología , Humanos , Ratones , Planticuerpos/genética , Plantas Modificadas Genéticamente , Nicotiana/genética , Nicotiana/inmunologíaRESUMEN
Se realiza el estudio a un grupo de pacientes afectados de diferentes formas clínicas de tuberculosis que ingresaron en el Hospital Provincial Clinicoquirúrgico Docente "Dr. Gustavo Aldereguía Lima", durante el período comprendido desde julio de 1995 hasta junio de 1996, y se analizaron las funciones del personal de enfermería en la atención a estos pacientes, y se destacó en el último trimestre los aspectos relacionados con la aplicación del proceso de atención de enfermería, su evaluación, y de qué forma influyó la aplicación de este proceder en la evolución de los pacientes estudiados(AU)
We conducted a study of a group of patients suffering from various clinical forms of tuberculosis, who had been admitted to the Provincial Clinical Surgical Teaching Hospital "Dr. Gustavo Aldereguía" from July 1995 to June 1996. We analyzed the functions of nurses in taking care of these patients and we underlined those aspects related to the application and evaluation of nursing care process and its impact on the recovery of the studied patients(AU)
Asunto(s)
Humanos , Atención de Enfermería/métodos , Personal de Enfermería , Tuberculosis/epidemiología , HospitalizaciónRESUMEN
Se evaluó longitudinalmente la actividad hemolítica del sistema complemento por la vía clásica, vía alternativa, actividad funcional del factor B, C1q, C3 y C4, así como la detección de inmunocomplejos circulantes (ICC) mediante la prueba de desviación del C1q y el método de precipitación con polietilenglicol 6 000 al 3,75 %, en 94 muestras de 49 pacientes adultos con leucemia mieloide aguda. Se observó un aumento en la actividad del sistema complemento por ambas vías y en la concentración de los componentes estudiados en la fase blástica de los diferentes estadios clínicos. Se demostraron niveles elvados de ICC tanto en la fase blástica como en la remisión
Asunto(s)
Adulto , Humanos , Masculino , Femenino , Complejo Antígeno-Anticuerpo , Activación de Complemento , Leucemia Mieloide AgudaRESUMEN
El Consejo de Actividades Científicas del HPCQD Dr Gustavo aAldereguía Lima de Cienfuegos invita a mesa redonda a un epidemiólogo, dos internistas y un neumólogo, para dar respuesta a una serie de interrogantes sobre la influenza y un probable brote epidémico en el país y en la provincia. Se analizan entre otros aspectos relacionados con ésta enfermedad; cuales son las principales características epidemiológicas y la situación actual de la influenza en la provincia, como se transmite y produce la enfermedad, cuales son sus principales complicaciones, terapeútica a seguir y efectividad de la vacunación
Asunto(s)
Gripe Humana/complicaciones , Gripe Humana/prevención & control , Gripe Humana/terapiaRESUMEN
Se cuantificaron los niveles de las 3 clases principales de inmunoglobulinas (Igs) en 24 pacientes con la enfermedad de Hodgkin (EH). Se demostró una diferencia significativa cuando se compararon los resultados de las Igs estudiados con los obtenidos en 30 individuos normales. Además se observó, en pacientes clasificados histológicamente como de celularidad mixta, un mayor porcentaje con valores disminuidos de las Igs en los estadios III y IV; en la esclerosis nodular los niveles de inmunoglobulinas se mantuvieron dentro de los límites normales. Se obtuvo un mayor porcentaje de disminución de los valores de Igs en los pacientes con síntomas generales de EH que en los enfermos asintomáticos. Estos resultados nos sugieren la importancia de la medición de estos elementos en el seguimiento y proceso evolutivo de los pacientes