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Protein Expr Purif ; 68(2): 137-45, 2009 Dec.
Artículo en Inglés | MEDLINE | ID: mdl-19595770

RESUMEN

A long-lasting recombinant human albumin-linker-erythropoietin (EPO) is a human albumin gene fused to the N-terminal of EPO with a (GGSGG)(n)-repeated linker inserted between albumin and EPO. Albumin-EPO fusion genes were co-transfected with the dhfr gene. Albumin-EPO fusion protein has three kinds of sub-types (IALE, AD2LE, AD1LE). Albumin-EPO fusion protein was quantified with human EPO ELISA. The in vitro efficacy of albumin-EPO fusion protein was estimated using F-36E cell, and in vivo efficacy of albumin-EPO fusion protein was estimated using normocythemic mice (B6D2F1). We also determined the in vivo half-life in a Sprague-Dawley rat. A PLA program analysis result demonstrated that the albumin-EPO fusion protein IALE is about 7.8-fold more potent than rHuEPO in increasing the hematocrit of normal mice.


Asunto(s)
Clonación Molecular/métodos , Eritropoyetina/metabolismo , Proteínas Recombinantes de Fusión/biosíntesis , Albúmina Sérica/biosíntesis , Análisis de Varianza , Animales , Western Blotting , Células CHO , Recuento de Células , Línea Celular Tumoral , Cromatografía en Gel , Cricetinae , Cricetulus , Eritropoyetina/química , Eritropoyetina/genética , Semivida , Humanos , Ratones , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Ratas , Proteínas Recombinantes de Fusión/química , Proteínas Recombinantes de Fusión/genética , Proteínas Recombinantes , Reticulocitos , Albúmina Sérica/química , Albúmina Sérica/genética
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