Comparative study of five commercial probes for the detection of Epstein-Barr virus (EBV) by in situ hybridization in cases of nodular sclerosis Hodgki's lymphoma / Estudo comparativo de cinco sondas comerciais para detecção do vírus Epstein-Barr (EBV) por hibridização in situ em casos de linfoma de Hodgkin esclerose nodular

ABSTRACT Introduction: Epstein-Barr virus (EBV) may serve as a target in therapeutic treatments, thus reliable diagnostic results are necessary. Objective: The aim of this study was to evaluate the accuracy of EBV detection by in situ hybridization (ISH) using five commercial probes in formalin-fixed and paraffin-embedded samples of nodular sclerosis Hodgkin's lymphoma (HL), and to compare the results with immunohistochemistry (IHC) and polymerase chain reaction (PCR). Material and method: Thirty samples were selected, 28 were lymph nodes, one bone marrow and one mediastinum. The following parameters were analyzed: signal intensity; proportionality of positive cells; quality of the reaction according to comfort for evaluation, sign quality and homogeneity of labeled cells; background reaction; morphology; presence of artifacts; and positivity in other non-neoplastic cells. All samples were analyzed for EBV detection using the five probes, IHC for latent membrane protein type 1 (LMP1) and PCR for Epstein Barr virus nuclear antigen 1 (EBNA1). Statistical analyses were performed with the R1 software; Fleiss' test and Cohen Kappa index of 5% were considered significant. Results: The detection by IHC-LMP1 was 26.7% (8/30) and 66.7% (20/30) by PCR-EBNA1. All probes detected EBV. Positivity was observed in 42/90 (46.7%), 38/90 (42.2%), 45/90 (50%), 27/90 (30%) and 61/90 (67.8%) for probes A, B, C, D and E, respectively. Discussion: All five probes demonstrated positivity. Conclusion: Probe E showed better rate (67.8%), sensitivity, specificity and accuracy (100%), a very good correlation among the different observers and with PCR, besides great cost-benefits relation.

RESUMO Introdução: O vírus Epstein-Barr (EBV) pode servir como alvo nos tratamentos terapêuticos, sendo necessário resultado diagnóstico confiável. Objetivo: Avaliar a acurácia da detecção do EBV pela hibridização in situ (ISH), utilizando cinco sondas comerciais em amostras fixadas em formalina e incluídas em parafina de linfoma de Hodgkin (LH) esclerose nodular, comparando os resultados com a imuno-histoquímica (IHQ) e a reação em cadeia pela polimerase (PCR). Material e método: Trinta amostras foram selecionadas, sendo 28 linfonodos, uma medula óssea e um mediastino. Os seguintes parâmetros foram analisados: intensidade do sinal; proporcionalidade das células positivas; qualidade da reação de acordo com o conforto na avaliação, qualidade do sinal e homogeneidade das células marcadas; reação de fundo; morfologia; presença de artefatos; e positividade em outras células não neoplásicas. Todas as amostras foram analisadas para a detecção do EBV usando as cinco sondas, IHQ para proteína da membrana latente tipo 1 (LMP1) e PCR para antígeno nuclear do EBV (EBNA1). As análises estatísticas foram realizadas com o software R1; os índices de 5% para Kappa de Fleiss e Cohen foram considerados significantes. Resultados: A detecção pela IHQ-LMP1 foi de 26,7% (8/30) e 66,7% (20/30) pela PCR-EBNA1. Todas as sondas detectaram EBV. A positividade foi observada em 42/90 (46,7%), 38/90 (42,2%), 45/90 (50%), 27/90 (30%) e 61/90 (67,8%) para as sondas A, B, C, D e E, respectivamente. Discussão: Todas as sondas demonstraram positividade. Conclusão: A sonda E mostrou melhor taxa (67,8%), sensibilidade, especificidade e precisão (100%), boa correlação entre os diferentes observadores e com a PCR, além de ótimo custo/benefício.

Classificação dos tumores hematopoéticos e linfoides de acordo com a OMS: padronização da nomenclatura em língua portuguesa, 4ª edição / Classification of haematopoietic and lymphoid tumors: WHO, standardization of nomenclature in Portuguese, 4th edition

INTRODUÇÃO: A classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS) para os tumores do tecido hematopoético e linfoide (4ª edição, 2008) representa uma revisão atualização da 3ª edição publicada em 2001. A tradução da nomenclatura utilizada para identificar as entidades descritas deve ser clara, precisa e uniforme no sentido de reproduzir de forma correta as diversas entidades clinicopatológicas para clínicos, patologistas e pesquisadores envolvidos na área da onco-hematopatologia. OBJETIVO: Os autores apresentam uma proposta de atualização e padronização terminológica em língua portuguesa, com base na OMS/2008.

INTRODUCTION: The World Health Organization (WHO) classification of hematopoietic and lymphoid tissue (4th edition, 2008) tumors constitutes an updated review of the 3rd edition published in 2001. The translation of the nomenclature used to describe the entities should be clear, precise and uniform so that clinicians, pathologists and researchers involved in the onco-hematopathological area may identify them accurately. OBJECTIVE: With this purpose, the authors present an updated proposal and a terminological standardization in Portuguese based on WHO/2008.

Análise de indicadores internos e externos relevantes à resolutividade diagnóstica em laboratório de referência em imuno-histoquímica / Analysis of internal and external factors potentially relevant to the diagnosis in immunohistochemistry in a public reference laboratory

OBJETIVO: Avaliar a resolutividade da imuno-histoquímica (IHQ) no diagnóstico de neoplasias em um laboratório de referência da rede de saúde pública e determinar potenciais influências da comunicação entre a fonte requisitante e o laboratório executante sobre tal resolutividade. MATERIAL E MÉTODOS: Mil casos oncológicos oriundos de oito hospitais públicos foram submetidos a exame IHQ, sendo 500 imediatamente anteriores e 500 posteriores à intervenção para aprimoramento da comunicação entre os requisitantes e o laboratório de IHQ. A recuperação de antígenos foi realizada pelo calor úmido sob pressão, e o sistema de detecção foi o LSAB plus System. Os resultados foram expressos como positivo, negativo ou inconclusivo. Foram coletadas informações sobre recebimento do bloco de parafina e fixador utilizado, guia de requisição de serviços de diagnóstico e terapia (SADT), laudo anatomopatológico original, topografia, idade e sexo do paciente. RESULTADOS E CONCLUSÃO: Foram coradas 5.719 lâminas pela IHQ de 989 casos considerados. A IHQ mostrou-se resolutiva em 919/989 (92,9 por cento) casos. O número de antígenos por caso variou de um a 22, com média de 5,8 marcadores. A pesquisa de até cinco antígenos resolveu 534 casos e foram necessários até 10 marcadores para esclarecer 919 casos. Ainda hoje, informações básicas, como laudo anatomopatológico, idade e sexo do paciente, topografia, hipótese diagnóstica precisamente exposta, fixador e blocos de parafina em boas condições nem sempre são disponibilizadas aos laboratórios de referência. O aprimoramento dessa comunicação é essencial para a racionalização do fluxo dos exames IHQ e o incremento na qualidade da conclusão diagnóstica.

OBJECTIVES: The aim of this study was to evaluate the resolutivity of immunohistochemical (IHC) assays on neoplastic samples in a public health laboratory and to assess the influence of communication between the requiring institution and reference one on the quality of the IHC diagnosis. MATERIAL AND METHODS: One thousand oncological samples from eight public hospitals were submitted to IHC assay: 500 immediately before and 500 after an intervention demanding further information from the requiring pathologist. Antigen retrieval was performed in a pressure cooker and the detection system was LSAB plus System. The results were expressed as positive, negative or inconclusive. Information about paraffin blocks, fixatives, official requiring form, the attachment of original anatomopathological report, topography of the lesion, age and gender of the patients was collected. RESULTS AND CONCLUSION: From 989 samples, 5,719 slides were stained by IHC, leading to a resolutivity for 919/989 (92.9 percent). The number of antigen tested ranged from one to 22 - average of 5.8 for case. Panels with up to five antigens per case resolved 534 samples, whereas up to 10 markers were necessary to resolve 919 samples. Even nowadays, basic information, such as anatomopathological reports, age, gender, representative and technically superior paraffin block are not always available to the reference laboratory. The improvement of such communication is essential to rationalize the flux of immunohistochemical tests and to enhance the quality of diagnostic conclusions.

Significado prognóstico dos graus histológicos do linfoma de Hodgkin do tipo esclerose nodular / Prognostic significance of histopathological grading of nodular sclerosing HodgkinÆs lymphoma

INTRODUÇAO: A esclerose nodular (EN), do tipo histológico freqüente do linfoma de Hodgkin (LH), apresenta grande variabilidade em sua composição celular. Na década de 80, pesquisadores do British National Lymphoma Investigation (BNLI) propuseram uma subclassificação histológica do LH EN. Eles identificaram dois graus histológicos - o LH EN grau I (LH EN I) e o LH EN grau II (LH EN II) - e demonstraram que os portadores de LH EN II apresentavam menor sobrevida em comparação aos portadores de LH EN I. Outros estudos, entretanto, não reproduziram esses achados. OBJETIVO: Avaliar o significado prognóstico da graduação histológica proposta pelo BNLI. MATERIAIS E MÉTODOS: Estudo retrospectivo que incluiu 69 casos de LH EN. Mais de 90 por cento dos casos foram tratados com terapia combinada ou quimioterapia exclusiva, não havendo diferença no tipo de tratamento oferecido a depender do grau histológico. RESULTADOS: Trinta e cinco casos (51 por cento) foram classificados com EN I e 34 (49 por cento) como EN II. Não observamos diferenças na distribuição de outros fatores prognósticos entre os portadores dos dois graus. Remissão completa após o tratamento inicial foi obtida em 85,7 por cento dos casos de EN I e em 82,4 por cento dos casos de EN II (p = 0,75). A probabilidade estimada de sobrevida global em cinco anos foi de 67 por cento para EN I e de 83,5 por cento para EN II (p = 0,13) e a taxa de sobrevida livre de doença em cinco anos foi de 85,2 por cento versus 87 por cento, respectivamente (p = 0,72). CONCLUSAO: Nesta população de pacientes uniformemente tratados a graduação histológica BNLI não esteve associada com o prognóstico do LH EN.

Síndrome de Kartagener: consideraçöes sobre um caso clínico / Kartagener's syndrome: critical analysis of a clinical case

A síndrome de Kartagener (SK) é afecçäo hereditária, caracterizada por alteraçöes da ultraestrutura dos cílios do epitélio respiratório, provocando disfunçäo do tapete mucociliar ao longo das vias respiratórias; na sua expressäo completa, é acompanhada de situs inversus. As rino-sinusites de repetiçäo, associadas à polipose nasal de difícil tratamento, säo desafio constante para o otorrinolaringologista. Neste trabalho, säo comentados os exames complementares úteis no diagnóstico da SK, a apresentaçäo de um caso clínico e a discussäo da dificuldade diagnóstica. Especial ênfase é colocada sobre a microscopia eletrônica de transmissäo, destinada ao estudo da ultraestrutura dos cílios do epitélio respiratório, suas dificuldades de técnica e de interpretaçäo dos resultados na SK

Doença de Kikuchi-Fujimoto associada a doença mista do tecido conjuntivo: relato de caso / Kikuchi-Fujimoto's disease associated with mixed connective tissue disease: case report

Relata-se caso de paciente jovem masculino com história de poliartrite, fenômeno de Raynaud, linfadenopatia, emagrecimento, febre, quadro cutâneo, anemia, leucopenia, linfopenia, anticorpo anti-RNP, miosite e padräo pulmonar intersticial com restriçäo, sugerindo o diagnóstico de doença mista do tecido conjuntivo (DMTC). O padräo histológico da biópsia ganglionar foi compatível com linfadenite histiocítica necrosante (doença de Kikuchi-Fujimoto), o que revela uma rara associaçäo. Essa entidade clínico-patológica é caracterizada por linfadenopatia cervical localizada e febre, que acomete principalmente mulheres jovens antes dos 30 anos. A etiologia é desconhecida. As culturas säo negativas, bem como os marcadores de auto-imunidade quando síndrome primária. Trata-se de condiçäo benigna e autolimitada, sem terapêutica específica com remissäo em até seis meses. Os autores apresentam a associaçäo de doença de Kikuchi com DMTC e descrevem revisäo de alteraçöes reumatológicas auto-imunes

Malacoplasia do intestino grosso, bexiga e retroperitônio: relato de caso / Malacoplakia of large bowel, bladder and retroperitoneum: report of a case

Os autores relatam um caso de malacoplasia acometendo o intestino grosso, bexiga e retropertônio, doença rara, principalmente pelo comprometimento de mais de um órgäo. Trata-se do segundo caso observado em nosso Serviço, envolvendo os mesmos órgäos. Estudam os meios diagnósticos e terapêuticos e däo ênfase à associaçäo sulfametoxazol-trimetoprim (SMZ-TM) e ácido ascórbico, que se mostrou eficiente a longo prazo na resoluçäo da enfermidade

Tumor neuroectodérmico primitivo torácico em adulto / Adult thoracic primitive neuroectodermal tumor

O diagnóstico preciso dos tumores de pequenas células redondas, entre os quais se inclui o tumor neuroectodérmico primitivo torácico, permanente como desafio, tanto para o clínico e o oncologista quanto para o radiologista e o patologista. Diferentes termos têm sido utilizados para denominar tumores desse grupo, na dependência de sual localizaçäo e diferenciaçäo neural. Com o avanço dos métodos imuno-histoquímicos e citogenéticos de diagnóstico, alguns desses tumores, até entäo considerados como entidades distintas, tendem, atualmente, a ser classificados como patologia única, porém com modo e local de apresentaçäo variáveis. Assim, tumores como neuroepitelioma periférico, neuroblastoma do adulto, tumor de Askin, neuroblastoma periférico e tumor neuroctodérmico primitivo, provavelmente viräo a se dominar, simplesmente, tumor neuroectodérmico primitivo periférico. A localizaçäo mais comum do tumor neuroectodermico primitivo perférico é a torácica, e a faixa etária de maior incidência está próxima da adolescência. Este estudo relata os achados clínicos, radiológicos e laboratoriais de cinco adultos (três mulheres e dois homens) atendidos no Hospital Heliópolis, Säo Paulo, SP, durante período de cinco anos (1991 a 1995), com diagnóstico de tumor neuroectodérmico primitivo periférico torácico confirmado por meio de exame anatomopatológico e estudo imuno-histoquímico. A idade média de acometimento foi de 34 anos, variando entre 17 e 57 anos, e a localizaçäo mais comum foi em parede torácica n=3), seguida pela regiäo mediastinal posterior (n=2). Todos os pacientes estavam sintomáticos. Foram realizadas radiografias simples e tomografia computadorizada em todos os pacientes

Reaçäo granulomatos associada a metástase de carcinoma epidermóide: importância da utilizaçäo de múltiplos métodos em patologia diagnóstica / Granulomatous reaction associated with metastatic epidermoid carcinoma: the importante of the use of multiple methods in diagnostic pathology

Os autores descrevem um caso de carcinoma epidermóde metastático em linfonodo cervical. Devido a presença de intensa reaçäo granulomatosa associada e a similaridade das células neoplásticas com as células epitelóides houve dificuldade diagnósticoa com base somente na análise histológica e citológica (biopsia aspirativa por agulha fina). Estudo por imunoperoxidase e microscopia eletrônica definiram o diagnóstico. É discutida a importância da utilizaçäo de múltiplos métodos em patologia cirúrgica e a patogênese da reaçäo granulomatosa associada as neoplasias malignas

Lesöes endocárdicas direitas determinadas por cateteres venosos centrais / Right endocardial lesions caused by central venous catheters

No Departamento de Patologia da FMUSP durante o período de janeiro de 1974 a junho de 1985, foram realizadas 3296 autópsias especiais em indivíduos com patologias diversas. Nessas 3296 autópsias encontramos 72 casos (2,2%) que apresentavam lesöes endocárdicas em câmaras direitas decorrentes da utilizaçäo de cateter venoso central instalados com finalidade de infusäo, medida de pressäo venosa central ou nutriçäo parenteral. Desses 72 casos, 24 (33%) tiveram lesöes consideradas sépticas sob o ponto de vista histológico. A embolia pulmonar apareceu como complicaçäo implicada à lesäo endocárdica em 28 casos (38,8%)