A Robust Disease Scoring Method to Screen Eucalyptus for Resistance Against the Aggressive Leaf Pathogen Teratosphaeria destructans.

Shoot and leaf blight caused by Teratosphaeria destructans is one of the most devastating foliar diseases on Eucalyptus. Therefore, breeding for resistance to this disease is considered urgent. Differences in susceptibility to T. destructans have been observed in the field but a robust inoculation protocol has, until recently, been unavailable and a disease scoring method for precise phenotyping has not been established. A first objective of this study was to determine the optimal conidial concentration for T. destructans inoculations on a susceptible Eucalyptus host. This concentration was then used to determine differences in susceptibility of six genotypes of Eucalyptus grandis × E. urophylla to the pathogen by assessing the percentage of infected stomata using electron microscopy and the percentage of leaf area covered by lesions (PLACL) using image processing. In addition, we developed a disease susceptibility index (SI) of six categories ranging from highly resistant (SI = 0) to highly susceptible (SI = 1.5 to 2). The more resistant genotypes were moderately resistant, with an SI value of 0.49 to 0.54 and a PLACL of 6.5 to 9%. In contrast, the more susceptible genotype scored an SI of 1.52 and PLACL of 48%. Host susceptibility was also assessed relative to the sporulation of the pathogen. This showed that the percentage of sporulation was not significantly correlated with host resistance. Overall, the results provide the basis for rigorous screening and selection of resistant genotypes to the disease caused by T. destructans using artificial inoculation.

Comparison of the Infection Biology of Teratosphaeria destructans and Teratosphaeria epicoccoides on Eucalyptus.

Leaf blight caused by Teratosphaeria destructans is one of the most important diseases of Eucalyptus planted in the subtropics and tropics. In contrast, the better-known T. epicoccoides, though also a primary pathogen of Eucalyptus, causes less damage to trees in these areas. Although T. destructans is an aggressive pathogen, nothing is known about its infection biology. In this study, the conditions for infection and disease development caused by T. destructans and T. epicoccoides were evaluated and compared on a Eucalyptus grandis × E. urophylla hybrid clone. The optimal temperature for germination ranged from 25 to 30°C for T. destructans and 15 to 20°C for T. epicoccoides. The germination of these pathogens was favored under conditions of light and high levels of RH. Penetration by T. destructans and T. epicoccoides occurred via stomata, and the hyphae colonized the intercellular spaces of infected leaves. Symptoms were clearly visible 3 weeks after inoculation by both pathogens, and reproductive structures started to develop in substomatal cavities at 4 weeks after inoculation. The results of this study will facilitate the establishment of rapid screening trials based on artificial inoculations aimed at reducing the impact of disease caused by T. destructans.

Caracterização do efeito imunomodulatório das células mesenquimais indiferenciadas na resposta inflamatória a Porphyromonas gingivalis / Role of periodontal-derived mesenchymal stem cells in Porphyromonas gingivalis infection

O objetivo deste estudo foi caracterizar as respostas das células mesenquimais indiferenciadas derivadas do ligamento periodontal (PDLSCs) ao extrato proteico total de Porphyromonas gingivalis (PgPE) e avaliar seu impacto nas propriedades biológicas das células leucêmicas promielocíticas humanas HL-60. PDLSCs enriquecidas com CD105 foram semeadas em placas de 6 poços durante 24h. Em seguida, as células foram desafiadas com PgPE (0 e 2 mg/ml) durante 3h (período de exposição). Os sobrenadantes foram então descartados; PDLSCs foram lavadas com PBS e cultivadas por 18h adicionais. Por fim, os sobrenadantes foram coletados. Os níveis de citocinas e quimiocinas nos sobrenadantes foram avaliados por ensaios multiplex. Na sequência, o efeito dos sobrenadantes derivados de PDLSCs (tratadas ou não com PgPE) sobre a ativação, o recrutamento e a resposta inflamatória de HL-60 foi avaliado. PDLSCs responderam ao tratamento com PgPE. RANTES, eotaxina e IP-10 (proteína produzida por IFN-?) foram detectados apenas em sobrenadantes de PDLSCs/PgPE. Além disso, PgPE induziu maior secreção de proteína quimiotática de neutrófilos (MCP)-1, intérferon (IFN)-?, interleucina (IL)-6, IL-8 e IL-1ra (p> 0,05). O recrutamento de HL-60D aumentou 4,7 vezes quando estas células foram expostas a sobrenadantes PDLSCs/PgPE, enquanto que os sobrenadantes de PDLSCs não afetaram a quimiotaxia de HL-60D. Sobrenadantes PDLSCs promoveram uma redução de 16% na produção de espécies de oxigênio reativo (ROS) por HL-60D estimuladas por PMA (p=0,013). Em contraste, sobrenadantes PDLSCs/PgPE promoveram um aumento de 1,78±1,04 vezes (p=0,046) na produção de ROS. Finalmente, tanto sobrenadantes PDLSCs, como sobrenadantes PDLSCs/PgPE, não influenciaram a produção de fator de necrose tumoral (TNF)-? e IL-1? pelas HL-60D em resposta ao lipopolissacarídeo (LPS). Esses achados sugerem um importante papel das PDLSCs no reconhecimento de P. gingivalis, recrutamento de células imunes inatas e ativação de mecanismos antimicrobianos.

Influência do fator mecânico na formação de lesões cervicais não cariosas / Influence of the mechanical factor on the formation of non-carious cervical lesions

Lesões cervicais não cariosas têm etiologia multifatorial, com ênfase na ação de ácidos, abrasivos e cargas mecânicas aplicadas à distância do local da lesão, mas que concentram tensão na região cervical, que é o local da lesão. O mecanismo de ação das cargas aplicadas à distância não foi ainda elucidado. Pensou-se que seria mediado por micro fraturas que fariam se desprender fragmentos de tecido (abfração); mas isto não explicaria a formação de lesões produzidas na presença de compressão, mesmo concentrada, nem a interação sinérgica na presença de ácidos. Além disso, as fraturas nunca foram localizadas no tecido. Uma outra hipótese considera os tecidos dentários como esponjas rígidas, deformáveis, capazes de expelir a sua própria água quando comprimidos ou absorver fluidos circundantes quando tracionados. Quando a carga fosse removida e o tecido recuperasse sua forma original, o fluido faria o caminho inverso. Assim, a ciclagem mecânica forçaria a circulação de fluidos circundantes no tecido e, se fossem ácidos, facilitaria a dissolução do tecido, tanto sob tração quanto sob compressão. A proposta do estudo foi avaliar a penetração de fluido traçador (nitrato de prata a 10 %) no esmalte de espécimes submetidos ou não a cargas cíclicas excêntricas que provocam compressão ou tração. Os espécimes foram construídos a partir de incisivos bovinos, cortados em paralelepípedos de 3x3x8,2 mm, com entalhe na dentina para formar um pescoço de 2x2 mm de seção transversal. Os espécimes, exceto uma faixa central do esmalte vestibular de 1,5x5 mm foram protegidos da penetração do traçador com verniz. Foram aplicados 1.200 ciclos mecânicos de carga excêntrica para produzir tensões de tração ou compressão no esmalte, com 5 s de carga de 40 N e 25 s sem carga. Um grupo controle não recebeu nem carga nem exposição ao traçador; outro controle recebeu apenas exposição ao traçador, sem carga; outros dois grupos controles receberam carga (de tração ou compressão) enquanto imersos em água e, imediatamente depois, foram expostos ao traçador durante 600 min. Os dois grupos teste foram expostos simultaneamente aos ciclos de carga (de tração ou de compressão) e ao traçador. A prata do traçador foi precipitada por exposição a fixador radiográfico e, posteriormente, à luz de fotopolimerizador (5 min). Para localizar o traçador os espécimes foram micro tomografados, radiografados e, posteriormente, foram cortados longitudinalmente para obter uma fatia central de 1 mm de espessura para avaliação em lupa, com luz refletida ou transmitida. A micro tomografia foi ineficaz devido aos artefatos formados. As radiografias marcaram apenas as regiões de maior concentração do traçador. A avaliação dos cortes em lupa binocular permitiu concluir que existem variações de padrão de coloração natural do esmalte de incisivos bovinos, que todos os espécimes expostos ao traçador, independentemente do grupo experimental, apresentaram alguma infiltração, pelo menos numa camada fina e uniforme da superfície exposta. Além da fina camada marcada, existe variação de padrões de penetração do traçador, mesmo entre os que receberam um mesmo tratamento experimental, o que pode ser devido a variações inevitáveis no histórico de cada dente. Isto, apesar de se tornar um inconveniente para identificar um possível efeito de bombeamento, poderia ser identificado também como um indicador de que podem existir diferenças na velocidade e profundidade de penetração no esmalte de outras moléculas como, por exemplo, as dos ácidos. Em resumo, o corante traçador penetrou no esmalte dos espécimes de incisivos bovinos sem diferenças claras de padrão de penetração entre os diferentes grupos e pode ser um método eficaz para comprovar a hipótese de circulação forçada, mas exigirá novos estudos.

Evaluations of Conflicts Between Latino Values and Autonomy Desires Among Puerto Rican Adolescents.

Puerto Rican adolescents (N = 105; Mage  = 15.97 years, SD = 1.40) evaluated hypothetical situations describing conflicts between Latino values (family obligations and respeto) and autonomy desires regarding personal, friendship, and dating activities. Adolescents judged that peers should prioritize Latino values over autonomy, which led to greater feelings of pride than happiness. However, they believed that teens would prioritize autonomy over Latino values, which led to greater feelings of happiness than pride. Adolescents reasoned about autonomy desires as personal issues, whereas reasoning about Latino values was multifaceted, including references to conventions and concerns for others. Furthermore, judgments and reasoning depended on the type of autonomy desire and Latino value and sometimes, by participants' age and sex.

Associations among solicitation, relationship quality, and adolescents' disclosure and secrecy with mothers and best friends.

Disclosure and secrecy with mothers and best friends about personal, bad behavior, and multifaceted (e.g., staying out late) activities were examined using daily diaries among 102 ethnically diverse, urban middle adolescents (M = 15.18 years, SD = .89). Adolescents disclosed more and kept fewer secrets from best friends than from mothers and more frequently disclosed and kept secrets about their personal than their bad behavior and multifaceted activities. Better daily relationship quality was associated with more disclosure about personal and multifaceted activities and less secrecy about bad behaviors for both mothers and best friends. Overall, when mothers solicited information, adolescents disclosed more but also kept more secrets from them, whereas best friends' solicitation was mostly associated with more disclosure.