RESUMO
The aim of this study was to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of Aeromonas sp., and Escherichia coli isolated from samples of yellow hake (Cynoscion acoupa). We analyzed 53 Aeromonas spp. and four E. coli isolates. We observed increased resistance of E. coli to levofloxacin and sulfa-trimethoprim as well as resistance of Aeromonas spp. to ampicillin, amoxicillin-clavulanate, cefuroxime, and cefotaxime. The multiple antimicrobial resistance(MAR) index indicated multidrug resistance in 90.54% (n=48) of Aeromonas spp. isolates and in 50% (n=2) of E. coli isolates. One strain of Aeromonas spp. was resistant to all 11tested antimicrobials (MAR index = 1.00). In vitro,piperacillin + tazobactam was the most effective antimicrobial for E. coli,and cefepime and levofloxacin were the most effective antimicrobials for Aeromonas spp. Therefore, in case of illnesses caused by these microorganisms, these antimicrobials should be used. The multidrug resistance of Aeromonas spp. and E. coli in this study is elevated. This is worrisome considering the increase in bacteria resistant to multiple drugs, reducing the options for successful clinical antimicrobial use.
Assuntos
Aeromonas , Antibacterianos , Escherichia coli , Testes de Sensibilidade Microbiana , Aeromonas/efeitos dos fármacos , Aeromonas/isolamento & purificação , Aeromonas/classificação , Escherichia coli/efeitos dos fármacos , Escherichia coli/isolamento & purificação , Antibacterianos/farmacologia , Animais , Farmacorresistência Bacteriana MúltiplaRESUMO
Bacteria typically produce membrane vesicles (MVs) at varying levels depending on the surrounding environments. Gram-negative bacterial outer membrane vesicles (OMVs) have been extensively studied for over 30 years, but MVs from Gram-positive bacteria only recently have been a focus of research. In the present study, we isolated MVs from Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) and analyzed their protein composition using LC-MS/MS. A total of 316 overlapping proteins from two independent preparations were identified in our study, and topology prediction showed these cargo proteins have different subcellular localization patterns. When MVs were administered to bovine-derived macrophages, significant up-regulation of pro-inflammatory cytokines was observed via qRT-PCR. Proteome functional annotation revealed that many of these proteins are involved in the cellular protein metabolic process, tRNA aminoacylation, and ATP synthesis. Secretory proteins with high antigenicity and adhesion capability were mapped for B-cell and T-cell epitopes. Antigenic, Immunogenic and IFN-γ inducing B-cell, MHC-I, and MHC-II epitopes were stitched together through linkers to form multi-epitope vaccine (MEV) construct against MAP. Strong binding energy was observed during the docking of the 3D structure of the MEV with the bovine TLR2, suggesting that the putative MEV may be a promising vaccine candidate against MAP. However, in vitro and in vivo analysis is required to prove the immunogenic concept of the MEV which we will follow in our future studies. SIGNIFICANCE: Johne's disease is a chronic infection caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis that has a potential link to Crohn's disease in humans. The disease is characterized by persistent diarrhea and enteritis, resulting in significant economic losses due to reduced milk yield and premature culling of infected animals. The dairy industry in the United States alone experiences losses of approximately USD 250 million due to Johne's disease. The current vaccine against Johne's disease is limited by several factors, including variable efficacy, limited duration of protection, interference with diagnostic tests, inability to prevent infection, and logistical and cost-related challenges. Nevertheless, a multiepitope vaccine design approach targeting M. avium subsp. paratuberculosis has the potential to overcome these challenges and offer improved protection against Johne's disease.
Assuntos
Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis , Paratuberculose , Vacinas , Humanos , Animais , Bovinos , Paratuberculose/diagnóstico , Paratuberculose/microbiologia , Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis/genética , Proteínas de Membrana , Epitopos , Cromatografia Líquida , Proteômica , Espectrometria de Massas em TandemRESUMO
In order to characterize the milk production chain and study the dairy herd health in the city of Codó, state of Maranhão, Brazil, a checklist was applied and tests were carried out to detect clinical and subclinical mastitis using mastitis test strip cup and the California mastitis test (CMT), from June to August 2019, in 295 dairy cows from 20 farms. Water and milk samples were collected for microbiological analysis. It was observed that herdsmen do not have adequate knowledge about good agricultural practices. As for milking, only 60% are performed in corrals with coverage, and as for the floor, 60% are made of clay and 40% are made of concrete. In 35% of the properties, the water used in milking management comes from wells and the rest from dams. Pre and postdipping practices, CMT, mastitis strip cup test and the adoption of a mastitis control program are not carried out on any of the properties Two cows tested positive for subclinical mastitis and one cow tested positive for tuberculosis. In the microbiological analysis of the milk, a high count of total coliforms and thermotolerants was obtained, with values between 23 to > 1,100 MPN/mL and < 3.0 to > 1,100 MPN/mL, respectively. The presence of coagulase positive staphylococci was also observed in 25% of the samples. The water samples also showed high contamination by total coliforms between 4.1 to > 2.419.6 MPN/mL and 40% showed the presence of Escherichia coli. These results reflect the need for more investments in technical assistance and technical training for these producers.(AU)
Este estudo teve como objetivo caracterizar a cadeia produtiva do leite e estudar a sanidade do rebanho leiteiro do município de Codó, estado do Maranhão, Brasil, através da aplicação de um checklist e da realização de exames para detecção de mastite clínica e subclínica pelos métodos da caneca do fundo escuro e California mastitis test (CMT), no período de junho a agosto de 2019, em 295 vacas leiteiras procedentes de 20 propriedades. Coletaram-se amostras de leite e água da ordenha para análises microbiológicas. Observou-se que os ordenhadores não possuem conhecimento adequado sobre as boas práticas agropecuárias. Quanto à realização da ordenha, apenas 60% realizam-na em currais com cobertura; quanto ao piso, 60% são de terra batida e 40% de concreto. A água utilizada no manejo da ordenha é proveniente de poços em 35% das propriedades e as demais de açudes. As práticas de pré e pós-dipping e os testes CMT e caneca de fundo escuro e a adoção de programa de controle da mastite não são realizados em nenhuma das propriedades. Diagnosticaram-se duas vacas com mastite subclínica e uma com tuberculose e verificou-se elevada contaminação por coliformes totais e termotolerantes nas análises microbiológicas do leite, variando entre 23 NMP/mL a >1.100 NMP/mL e < 3.0 a > 1.100 NMP/mL, respectivamente, e presença de estafilococos coagulase positivos em 25% das amostras. As amostras de água também apresentaram elevada contaminação por coliformes totais entre 4,1 NMP/mL a > 2.419,6 NMP/mL e 40% apresentaram presença de Escherichia coli. Esses resultados refletem a necessidade de mais investimentos em assistência técnica e treinamento técnico para esses produtores.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Leite/microbiologia , Gado , Inocuidade dos Alimentos , Técnicas Microbiológicas , Coagulase , Normas de Qualidade de Alimentos , Escherichia coli , Método de Tubulação Múltiplo , Lista de Checagem , MastiteRESUMO
O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade microbiológica da carne mecanicamente separada (CMS ) e derivados de pescado (fishburguer, nugget de peixe e linguiça de peixe) de cinco municípios da Baixada Maranhense. As contagens obtidas para coliformes totais nas amostras de CMS e derivados variaram de 43 a >1100 NMP/g. As contagens de coliformes termotolerantes variaram de 35 a >1100 NMP/g Em uma amostra de fish burguer do município de Bacurituba foi encontrado o valor de 3 x 103 UFC/g. Amostras provenientes dos cinco municípios apresentaram contaminação, encontrando-se em condições higiênico-sanitárias insatisfatórias, podendo representar riscos à saúde pública. Devem ser adotadas junto à comunidade envolvida na pesca artesanal e na produção desses alimentos, boas práticas de fabricação e condições adequadas de manipulação, armazenamento e conservação.
Assuntos
Coliformes/análise , Higiene dos Alimentos , Produtos Pesqueiros/análise , Produtos Pesqueiros/microbiologia , Produtos da Carne/análise , Produtos da Carne/microbiologia , Staphylococcus/isolamento & purificação , Técnicas Bacteriológicas/análiseRESUMO
As mudanças nos hábitos alimentares dos brasileiros vêm ocorrendo de forma significativa e o que se observa é o aumento de refeições fora de casa, que se configura como um risco à saúde dos consumidores, em virtude das doenças transmitidas por alimentos. A maionese caseira é um alimento amplamente consumido e susceptível a contaminação por micro-organismos. Portanto, objetivou-se investigar a presença de Salmonella sp. e quantificar coliformes termotolerantes em maioneses caseiras comercializadas em food trucks da cidade de São Luís - MA. Das 20 amostras analisadas, nenhuma apresentou Salmonella sp mas quatro (20%) apresentaram coliformes termotolerantes, tendo, portanto, qualidade higiênica inadequada. É necessária a adoção de medidas educativas junto aos manipuladores de alimentos e a fiscalização efetiva dos estabelecimentos.
Assuntos
Coliformes/análise , Contaminação de Alimentos/análise , Higiene dos Alimentos , Salmonella/isolamento & purificação , Técnicas Bacteriológicas/análiseRESUMO
Para evitar a ocorrência de doenças transmitidas por alimentos, são indispensáveis boas práticas de manipulação. Este trabalho objetivou avaliar a contaminação ambiental em uma unidade de alimentação e nutrição. Foram coletadas 32 amostras de superfícies que entram em contato com os alimentos e foi feita a contagem de Staphylococcus coagulase positiva, determinação do Número Mais Provável de coliformes totais e termotolerantes e pesquisa de E. coli. Em nenhuma das amostras foi encontrado Staphylococcus coagulase positiva. Seis amostras foram positivas para coliformes totais. Dessas, cinco foram positivas coliformes termotolerantes e três para E. coli. As condições higiênico-sanitárias encontradas são insatisfatórias, uma vez que E. coli tem origem fecal. É importante a adoção de medidas educativas junto aos manipuladores de alimentos.
Assuntos
Carga Bacteriana , Contaminação de Equipamentos , Inocuidade dos Alimentos , Utensílios de Alimentação e Culinária , Contaminação de Alimentos , Manipulação de AlimentosRESUMO
[{"text": "O aumento no consumo de pescados\r\ndevido a mudanças nas dietas alimentares\r\nfez com que a pescada amarela\r\n(Cynoscion acoupa) se tornasse\r\numa das espécies mais consumidas\r\nno Maranhão. Apesar dos benefícios\r\nnutricionais, esse consumo traz\r\nconsigo riscos à saúde pública quando\r\nocorre contaminação. O objetivo\r\ndesta pesquisa foi verificar a presença\r\nde Listeria monocytogenes e Vibrio\r\nparahaemolyticus em amostras\r\nde pescada amarela (C. acoupa) vendidas\r\nnas feiras e supermercados de\r\nSão Luís/ MA. Foram coletadas 30\r\namostras de filés de pescada amarela\r\nem feiras e supermercados e o\r\nprocessamento dessas amostras foi\r\nfeito no Laboratório de Microbiologia\r\nde Alimentos e Água da Universidade\r\nEstadual do Maranhão.\r\nAs análises microbiológicas foram\r\nrealizadas segundo o Manual de Métodos\r\nde Análise Microbiológica de\r\nAlimentos. Constatou-se a ausência\r\nde V. parahaemolyticus e ausência\r\nde L. monocytogenes em 100% das\r\namostras. Pode-se concluir, assim,\r\nque os resultados estão de acordo\r\ncom a RDC nº 12 de 2001, da ANVISA,\r\ne que, apesar das amostras não\r\napresentarem os patógenos investigados,\r\nfaz-se necessária a criação\r\nde parâmetros para essas bactérias,\r\ncomo forma de prevenção dos riscos\r\nà saúde pública.(AU)", "_i": "pt"}]
Assuntos
Animais , Vibrio parahaemolyticus/isolamento & purificação , Contaminação de Alimentos/prevenção & controle , Alimentos de Rua , Conservação de Alimentos/métodos , Listeria monocytogenes/isolamento & purificação , Temperatura , Amostras de Alimentos , Armazenamento de Alimentos/métodos , PeixesRESUMO
CONTEXT AND OBJECTIVE: Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) has attracted the interest of researchers because of similarities between paratuberculosis and Crohn's disease (CD). The aim of this study was to evaluate the frequency of MAP through cultures, histology and polymerase chain reaction (PCR) on intestinal biopsies from Brazilian CD patients. Quantitative real time PCR (qRT-PCR) was performed on positive samples. DESIGN AND SETTING: Analytical cross-sectional study with control group at two federal universities. METHODS: Fresh samples were collected from 25 patients; five with CD, eight with ulcerative colitis (UC) and 12 controls with non-inflammatory bowel disease (nIBD). Formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) samples from 143 patients were also collected: 44 CD, 49 UC and 56 nIBD. RESULTS: None of the fresh samples was positive for MAP. Five FFPE samples (one CD, two UC and two nIBD) and three fresh samples (one in each group) were positive through IS900-PCR. qRT-PCR was performed on these eight samples. Among the FFPE samples, there were 192.12 copies/μl in the CD group, 72.28 copies/μl in UC and 81.43 copies/μl in nIBD. Among the fresh samples, there were 432.99 copies/μl, 167.92 copies/μl and 249.73 copies/μl in the CD, UC and nIBD groups, respectively. The highest bacterial load was in the CD group. CONCLUSION: This study does not provide evidence for a role of MAP in the etiology of CD, although MAP DNA was detected in all three patient groups. This is the first report of MAP presence in human intestinal biopsies in Brazil.
CONTEXTO E OBJETIVO: Mycobaterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) tem atraído o interesse de pesquisadores devido às semelhanças entre a paratuberculose e a doença de Crohn (CD). Este estudo objetivou avaliar a frequência de MAP por meio de cultura, histologia e reação da polimerase em cadeia (PCR), em biópsias intestinais de pacientes brasileiros com CD. PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR) foi realizada nas amostras positivas. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal analítico com grupo controle realizado em duas universidades federais. MÉTODOS: Amostras frescas foram coletadas de 25 pacientes; cinco com CD, oito com colite ulcerativa (UC) e 12 controles sem doença inflamatória intestinal (nIBD). Também foram coletadas 149 amostras fixadas em parafina (FFPE): 44 CD, 49 UC e 56 nIBD. RESULTADOS: Nenhuma das amostras frescas foi positiva para MAP. Cinco amostras FFPE (uma CD, duas UC e duas nIBD) e três amostras frescas (uma de cada grupo) foram positivas por IS900-PCR. qRT-PCR foi realizada nessas oito amostras. Nas amostras FFPE, havia 192,12 cópias/μl no grupo CD, 72,28 cópias/μl no UC e 81,43 cópias/μl no nIBD. Nas amostras frescas, havia 432,99 cópias/μl, 167,92 cópias/μl e 249,73 cópias/μl nos grupos CD, UC e nIBD, respectivamente. A maior carga bacteriana foi encontrada no grupo CD. CONCLUSÃO: Este estudo não fornece evidências do papel de MAP na etiologia da CD, embora DNA de MAP tenha sido detectado em pacientes dos três grupos. Este é o primeiro relato da presença de MAP em biópsias intestinais humanas no Brasil.
Assuntos
Humanos , Masculino , Feminino , Pré-Escolar , Criança , Adolescente , Adulto , Pessoa de Meia-Idade , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Adulto Jovem , Doenças Inflamatórias Intestinais/microbiologia , Colite Ulcerativa/microbiologia , Doença de Crohn/microbiologia , Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis/isolamento & purificação , Estudos de Casos e Controles , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Estudos Transversais , Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis/patogenicidade , Análise de Sequência de DNA/métodosRESUMO
CONTEXT AND OBJECTIVE: Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) has attracted the interest of researchers because of similarities between paratuberculosis and Crohn's disease (CD). The aim of this study was to evaluate the frequency of MAP through cultures, histology and polymerase chain reaction (PCR) on intestinal biopsies from Brazilian CD patients. Quantitative real time PCR (qRT-PCR) was performed on positive samples. DESIGN AND SETTING: Analytical cross-sectional study with control group at two federal universities. METHODS: Fresh samples were collected from 25 patients; five with CD, eight with ulcerative colitis (UC) and 12 controls with non-inflammatory bowel disease (nIBD). Formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) samples from 143 patients were also collected: 44 CD, 49 UC and 56 nIBD. RESULTS: None of the fresh samples was positive for MAP. Five FFPE samples (one CD, two UC and two nIBD) and three fresh samples (one in each group) were positive through IS900-PCR. qRT-PCR was performed on these eight samples. Among the FFPE samples, there were 192.12 copies/µl in the CD group, 72.28 copies/µl in UC and 81.43 copies/µl in nIBD. Among the fresh samples, there were 432.99 copies/µl, 167.92 copies/µl and 249.73 copies/µl in the CD, UC and nIBD groups, respectively. The highest bacterial load was in the CD group. CONCLUSION: This study does not provide evidence for a role of MAP in the etiology of CD, although MAP DNA was detected in all three patient groups. This is the first report of MAP presence in human intestinal biopsies in Brazil.
Assuntos
Colite Ulcerativa/microbiologia , Doença de Crohn/microbiologia , Doenças Inflamatórias Intestinais/microbiologia , Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis/isolamento & purificação , Adolescente , Adulto , Idoso , Idoso de 80 Anos ou mais , Estudos de Casos e Controles , Criança , Pré-Escolar , Estudos Transversais , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis/patogenicidade , Reação em Cadeia da Polimerase/métodos , Análise de Sequência de DNA/métodos , Adulto JovemRESUMO
Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the causative agent of paratuberculosis. Insertion sequence IS900 is used for the identification of MAP. The objective of this study was to verify the genetic conservation of IS900 sequences in raw milk samples. To evaluate genetic conservation, 206 quarter milk samples and 16 bulk-tank milk samples were collected. DNA extraction and IS900 PCR were performed in all samples. Six samples amplified the expected fragment. To confirm the identity of the amplified fragments, PCR products were cloned and sequenced. The resulting sequences were compared with other MAP sequences from GenBank, and it was possible to identify eight polymorphic regions and to form five distinct haplotypes. The number of mutations in each haplotype was verified. IS900 sequence is a very well-conserved sequence that could be used as tool for the molecular detection of this agent and epidemiological purposes. The results showed the first genetic analysis on Brazilian isolates of MAP.