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1.
Plant Cell Rep ; 22(7): 502-8, 2004 Feb.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-14551732

RESUMO

Transgenic plants are potentially safe and inexpensive vehicles to produce and mucosally deliver protective antigens. However, the application of this technology is limited by the poor response of the immune system to non-particulate, subunit vaccines. Co-delivery of therapeutic proteins with carrier proteins could increase the effectiveness of the antigen. This paper reports the ability of transgenic Arabidopsis thaliana plants to produce a fusion protein consisting of the B subunit of the Escherichia coli heat-labile enterotoxin and a 6 kDa tuberculosis antigen, the early secretory antigenic target ESAT-6. Both components of the fusion protein were detected using GM1-ganglioside-dependent enzyme-linked immunosorbant assay. This suggested the fusion protein retained both its native antigenicity and the ability to form pentamers.


Assuntos
Antígenos de Bactérias/biossíntese , Antígenos de Bactérias/genética , Arabidopsis/genética , Toxinas Bacterianas/biossíntese , Toxinas Bacterianas/genética , Enterotoxinas/biossíntese , Enterotoxinas/genética , Proteínas de Escherichia coli , Sequência de Aminoácidos , Antígenos de Bactérias/isolamento & purificação , Proteínas de Bactérias , Toxinas Bacterianas/química , Toxinas Bacterianas/isolamento & purificação , Sequência de Bases , DNA Recombinante/genética , Enterotoxinas/química , Enterotoxinas/isolamento & purificação , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Liofilização , Dados de Sequência Molecular , Plantas Geneticamente Modificadas , Subunidades Proteicas , Proteínas Recombinantes de Fusão/biossíntese , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/isolamento & purificação , Vacinas contra a Tuberculose/genética , Vacinas contra a Tuberculose/imunologia , Vacinas contra a Tuberculose/isolamento & purificação , Vacinas de Plantas Comestíveis/genética , Vacinas de Plantas Comestíveis/imunologia , Vacinas de Plantas Comestíveis/isolamento & purificação
2.
Plant Cell Rep ; 21(10): 1020-6, 2003 Jun.
Artigo em Inglês | MEDLINE | ID: mdl-12835913

RESUMO

Epitopes often require co-delivery with an adjuvant or targeting protein to enable recognition by the immune system. This paper reports the ability of transgenic tomato plants to express a fusion protein consisting of the B subunit of the Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LTB) and an immunocontraceptive epitope. The fusion protein was found to assemble into pentamers, as evidenced by its ability to bind to gangliosides, and had an average expression level of 37.8 microg g(-1) in freeze-dried transgenic tissues. Processing of selected transgenic fruit resulted in a 16-fold increase in concentration of the antigen with minimal loss in detectable antigen. The species-specific nature of this epitope was shown by the inability of antibodies raised against non-target species to detect the LTB fusion protein. The immunocontraceptive ability of this vaccine will be tested in future pilot mice studies.


Assuntos
Toxinas Bacterianas/metabolismo , Enterotoxinas/metabolismo , Proteínas de Escherichia coli , Escherichia coli/genética , Solanum lycopersicum/genética , Sequência de Aminoácidos , Antígenos de Bactérias/genética , Antígenos de Bactérias/imunologia , Antígenos de Bactérias/metabolismo , Toxinas Bacterianas/genética , Toxinas Bacterianas/imunologia , Vacinas Bacterianas/imunologia , Sequência de Bases , Enterotoxinas/genética , Enterotoxinas/imunologia , Ensaio de Imunoadsorção Enzimática , Escherichia coli/imunologia , Frutas/genética , Expressão Gênica , Dados de Sequência Molecular , Plantas Geneticamente Modificadas , Ligação Proteica , Subunidades Proteicas/genética , Subunidades Proteicas/imunologia , Subunidades Proteicas/metabolismo , Proteínas Recombinantes de Fusão/genética , Proteínas Recombinantes de Fusão/imunologia , Proteínas Recombinantes de Fusão/metabolismo , Especificidade da Espécie , Transgenes/genética
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