Resolvendo um caso de ABO discrepante através da genotipagem rápida por PCR-RFLP / Solving an ABO complex discrepancy by rapid genotyping using PCR-RFLP

RESUMO

O uso das reaçöes de hemaglutinaçäo para identificar discrepâncias ABO pode consumir um grande tempo e dificultar sua interpretaçäo. Com o conhecimento da base molecular dos antígenos do grupo sangüíneo ABO, o PCR-RFLP foi usado para elucidar um caso complexo de discrepância ABO. Materiais e Métodos: Um bebê do sexo feminino com sete meses de idade foi admitido no hospital com o diagnóstico de mielofibrose e anemia. Os testes pré-transfusionais usando o gel-teste demonstraram ser a paciente do grupo sangüíneo A, com teste de antiglobulina direto e pesquisa de anticorpos negativos. A paciente tinha um resultado prévio de tipagem AB. Nos testes de saliva foram detectados as substâncias A e B. Como testes imuno-hematológicos se mostraram inconclusivos, o PCR-RFLP foi feito usando amostras de sangue da paciente e da mäe. Após extraçäo do DNA genômico, dois fragmentos específicos do gene ABO (exon 6 e 7) foram ampliados usando os primers mo-46/mo-57 e mo-71/mo101 e digeridos com as enzimas Kpn I e Hpa II. Os produtos digeridos foram analisados por eletroforese em gel de agarose. Resultados: Após o PCR-RFLP na amostra do bebê, foram encontrados os fragmentos 309, 252, 223, 204, 150, 137 e 119 pb, confirmando o genótipo A2B, e na amostra da mäe foram encontrados os fragmentos 309, 252, 223, 150 e 137 pb, confirmando, também, o genótipo A2B. Conclusäo: Nos casos de discrepância ABO, a determinaçäo do grupo sangüíneo ABO pode ser feita pelo PCR-RFLP