Uso de gelatina comercial en el desarrollo de un biosensor de ureasa inmovilizada / Use of commercial gelatine in the development of a biosensor of ureasa inmovilized

RESUMEN

Introducción: Diferentes matrices han sido ensayadas en la elaboración de biosensores. En este trabajo, se describe un biosensor a ureasa inmovilizada utilizando gelatina comercial como matriz soporte, conectado a un sistema de flujo semiautomático para optimizar el proceso. Material y métodos: Para la inmovilización enzimática se utilizó como matriz gelatina comercial, y como agente polimerizador, el glutaraldehído. Se analizó el efecto de diversos sistemas buffer para la gelificación de la matriz. Para la construcción del biosensor se incorporó una alícuota de enzimas inmovilizadas en un cartucho Mobicol de 1 ml, el cual se acopló a un sistema de control de flujo semi-automático, valorándose el flujo óptimo para una apropiada relación enzima-substrato. Resultados y conclusiones: Se logró un óptimo entrampado del enzima a una concentración de ureasa de 0,4 mg/ml en gelatina disuelta en solución buffer fosfato 100mM pH=7,2 (25 mg/ml), con agregado de glutaraldehído al 1,2 por ciento (v/v) como agente polimerizador. La temperatura y flujo más apropiados para la reacción fueron 37°C y 0,035 ml/min., respectivamente. La actividad específica del enzima inmovilizada mostró linealidad con el enzima soluble, y el porcentaje de inmovilización alcanzó un 46 por ciento.