[Establishment of a preclinical neuroblastoma model in immunocompetent mice]. / Establecimiento de un modelo preclínico de neuroblastoma en ratones inmunocompetentes.

RESUMEN

OBJETTIVO: Desarrollar un modelo animal de neuroblastoma (NB) que posibilite estudios relacionados con la inmunidad tumoral. MATERIAL Y METODOS: Se utilizaron dos tipos de células NB. La línea 36769 procedía del ratón TH-MYCN+ en el que la sobreexpresión del gen MYCN está gobernada por el promotor de la tirosín hidroxilasa de rata. La línea 4040 procedía de ratones TH-MYCN+/ALK+, que además expresan una mutación activadora del gen ALK. De cada tipo celular se implantaron 1x106 neurosferas en ratones 129/SVJ (mismo fondo genetico que los donantes, n=8), mediante inyección ortotópica en glándula suprarrenal izquierda por abordaje intraperitoneal, a través de laparotomía transversa supraumbilical. Se realizó seguimiento clínico diario postquirúrgico de los animales hasta su sacrificio a las 4 semanas. La presencia de tumor se confirmó macroscópicamente. La pieza tumoral se extirpó y se procesó para estudios de inmunidad celular y mediadores moleculares de tolerancia. Se investigó la existencia de metástasis por citometría de flujo en bazo, médula ósea y sangre periférica. RESULTADOS: 1) En todos los ratones trasplantados se generó NB ortotópico. 2) La pieza tumoral se encontró infiltrada por diversas subpoblaciones inmunes, con inmunofenotipo efector, regulador y supresor, similar a la situación descrita en los NB humanos. Además, los mediadores moleculares del microambiente apuntan a un estado de tolerancia protumoral. CONCLUSIONES: La implantación ortotópica de neurosferas NB en ratones singénicos nos ha permitido generar un modelo de NB en el que ha sido posible estudiar la inmunidad tumoral.