C5aR contributes to the weak Th1 profile induced by an outbreak strain of Mycobacterium tuberculosis.

C5a anaphylatoxin is a component of the complement system involved in the modulation of T-cell polarization. Herein we investigated whether C5a receptors, C5aR and C5L2, modulate the cytokine profiles induced by Mycobacterium tuberculosis (Mtb). We analyzed the impact of both receptors on T helper cell polarization induced by the multidrug resistant outbreak strain named M, which is a poor IFN-γ inducer compared with the laboratory strain H37Rv. To this aim, we first blocked C5aR or C5L2 of peripheral blood monocytes (Mo) from patients with tuberculosis and healthy donors, then we stimulated the Mo either with H37Rv or the M strain, and finally we analyzed cytokine profiles of Mo/macrophages (MΦ) and CD4+ T-cells. We found that: (i) Mtb modulated the expression of both C5a receptors, (ii) C5aR inhibited the expansion of CD4+IFN-γ+ lymphocytes stimulated by the M strain but not by H37Rv, (iii) both receptors modulated the Mo/MΦ cytokine expression induced by Mtb. We conclude that C5aR, but not C5L2, plays a role in T helper cell polarization induced by Mtb and that this effect is strain- and donor-dependent. We speculate that the epidemiologically successful M strain takes advantage of this C5aR-mediated inhibition of Th1 polarization to survive within the host.

Differential development of CD4 and CD8 cytotoxic T cells (CTL) in PBMC across the leprosy spectrum IL-6 with IFN-gamma or IL-2 generate CTL in multibacillary patients

In the present study we evaluated the contribution of CD4 and CD8 T cells on the antigen-specific cytotoxic activity induced by whole Mycobacterium leprae in leprosy patients and normal controls (N) as well as the modulation of this activity by some cytokines. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from N or from leprosy patients were stimulated with antigen in the presence or absence of cytokines for 7 days. M. leprae-stimulated PBMC were depleted of CD4 or CD8 antigen-bearing cells and employed as effector cells in a 4-hr [31Cr]-release assay against autologous M. leprae-pulsed macrophages. Our results demonstrate that both CD4 and CD8 T cells contribute to M. leprae-induced cytotoxic activity, with differences observed in paucibacillary (PB) and multibacillary (MB) patients. CD8-mediated cytotoxic activity is higher than that of CD4 cells in PB patients, while in MB patients CD4 cytotoxicity is predominant. Our data also demonstrate that the generation of CD4 and CD8 cytotoxic T lymphocytes (CTL) can be modulated differentially by interleukin-4 (IL-4), IL-6, gamma interferon (IFN-gamma), or IL-2. Although MB patients developed the lowest CTL response, cytokines such as IL-6 plus IL-2 or IFN-gamma were able to generate both CD4 and CD8 cytotoxic T cells from MB patients. In PB patients, IL-6 plus IFN-gamma displayed the highest stimulation on CD8 effector cells. Thus, an important role may be assigned to IL-6, together with IL-2 or IFN-gamma, in the differentiation of M. leprae-specific CTL effector cells.

Evaluacion de la produccion de citoquinas en enfermos de lepra / Evaluation of cytokine production in leprosy patients

El objetivo de este estudio fue evaluar la producción de citoquinas por células mononucleares periféricas (CMP) obtenidas de pacientes con lepra, cuando estas células son estimuladas con ConA, PPD o Myconacterium leprae. Medimos IL-2, IL-4, IFN- y e IL-6 en sobrenadantes libres de células, por enzimoinmunoensayos. Nuestros resultados no sugieren una clara associación entre una forma clínica de lepra y un perfil de secreción de citoquinas de tipo Th1 o Th2 en las CMP de los pacientes con lepra.

Suppression of T cell proliferation induced by concanavalin A in hemophilia patients

Se valoró la función supresora inducida por Concanavalina A (Con A) en 48 pacientes con hemofilia severa. Cuando se adicionaron cantidades variavles de células inducidas por Con A a un número constante de células T autólogas estimuladas por PHA, se pudieron diferenciar dos grupos de pacientes: en el grupo A (60%) así como en los controles normales, los valores de supresión obtenidos fueron superiores al agregar mayor número de células inducidas por Con A; en el grupo B el agregado en cantidades crecientes de células inducidas por Con A no produjo supresión de la proliferación de células T estimuladas con PHA. El efecto observado en el grupo B pudo ser corregido con inhibidores del metabolismo exidativo del ácido araquidónico presentes durante la etapa de inducción. Los perfiles de supresión definidos no guardaron correlación con la serología para HIV-1 o HBV. Al valorar la evolución clínica, teniendo en cuenta los síntomas y signos del complejo relacionado al SIDA, ésta tendió a ser mejor en el grupo B de pacientes. Se sugiere que la disminución de la actividad supresora inducida por Con A observada en el grupo B es el resultado de un proceso regulatorio normal que involucra productos del metabolismo oxidativo del ácido araquidónico

Inmunosupresión en lepra / Immunosuppression in leprosy

Son varios los trabajos que tratan de demostrar que en la formal lepromatosa (LL) de la lepra, existirían mecanismos supresores de la respuesta inmune. Al emplear un método de inducción inespecífico, como el sistema de la Concavalina A (ConA), observamos que los pacientes LL tenían disminuida la función supresora, valorada sobre un sistema de proliferación celular T; dicha función tendía a normalizarse durante el episodio de eritema nudoso lepromatoso (ENL). En este sistema demonstramos además, que las células CD8+ (Leu 2a+) eram capaces de interferir en la generación de supresión. Observamos además, que un alto porcentaje de pacientes LL tenían una supresión espontánea elevada; en este tipo de supresión hallados. Por otra parte, hemos demostrado que en este sistema tendría un papel importante el sistema supresor de los monocitos, a través de la liberación de factores solubles (PGE2). Al evaluar la capacidad que tiene el M. leprae para inducir especificamente supresión in vitro la proliferación célular T, hallamos que en los pacientes LL el M. leprae no inducía supresión. Paralelamente, determinamos en sangre periférica, el número de células que tenían el antígeno Leu8+. Observamos que este antígeno estaba marcadamente disminuido, en la fracción de células T, en los pacientes LL y tendía a normalizarse durante el receptores para IL-2 (Tac) durante la etapa de inducción era similar tanto en los TT com LL. La capacidad de las células para proliferar frente a los mitógenos empleados...

Papel de los linfocitos Leu 8(+) en la indicción de la supresión específica en pacientes con enfermedad de Hansen / Role of lymphocyte Leu 8(+) in the induction of specific supression in patients with Hansen's disease

Se valoró la capacidad del M. leprae para inducir supresión de la proliferación celular T, en las diferentes formas clínicass de la enfermedad de Hansen así como en controles normales (inmunizados con BCG). La función supresora se evaluó con un ensayo de dos etapas, utilizando células mononucleares de sangre periférica (PBMC). En la primera etapa se indujo supresión, incubando durante 5 días PBMC con M. leprae gamma-irradiado (Células supresoras, S) o C, se trataron con Mitomicina C y se enfrentaron con células autólogas que se matuvieron congeladas a -80-C. Como mitogénos para evaluar la supresión, se utilizó fitohemagluinina (PHA) y Concanavalina A (Con A). Los resultados indicam que la capacidad del M. leprae para inducir supresión es baja en los pacientes lepromatosos, no así en las demás formas clínicas y en los controles normales. Recientemente inductoras de supresión, que tienen el fenotipo Leu 8+ en la etapa de inducción. Evaluamos las células Leu 8+ en pacientes leprosos y controles normales. Encontramos que las células Leu 8+ estaban descendidas en los pacientes lepromatosos, solamente en la fracción de células T. Este descenso se halló en ambas subpoblaciones, CD4+ y CD8+. Sugerimos que la falla del M. leprae para inducir supresión de la proliferación T en los pacientes lepromatosos, está relacionada al bajo número de células inductoras de supresión (CD4+, Leu8+) en sangre periférica

Cell-mediated immunity in alcoholic liver cirrhosis

Se efectuaron estudios de inmunidad mediada por células en 25 pacientes con cirrosis hepática alcohólica (CA) activa e inactiva. Fueron observadas diversas alteraciones inmunológicas: aumento de los linfocitos B y disminución de los linfocitos T. Sólo en los enfermos con CA activa la relación H/S era más baja que los valores normales. Los linfocitos NK (Leu 7 +) y la función citotóxica natural killer estaban aumentados; sin embargo el índice NK/Leu 7 estaba disminuido. En los enfermos con CA activa la proliferación blástica a la PHA estaba descendida. Se observó un déficit de la función supresora inducida por Con A en los pacientes con CA. En los cocultivos alogeneicos de linfocitos supresores de los pacientes y células efectoras normales, se observó un descenso de la función supresora T-T con respecto a los cultivos autólogos normales. No se encontraron diferencias cuando los linfocitos de normales fueron inducidos con Con A y se cocultivaron con linfocitos efectores de los enfermos. Estos resultados indican que los linfocitos de los pacientes con CA presentan anomalías en la inducción de supresión por Con A

Alteraciones inmunológicas en pacientes con púrpura trombocitopenica idiopática crónica / Immunological changes in patients with chronic idiopathic thrombocytopenic purpura

En este trabajo se valoró la inmunidad mediada por células y los niveles de inmunocomplejos circulantes en 30 pacientes con púrpura trombocitopénica idiopática crónica (PTI). Se hallaron diversas alteraciones inmunológicas: los pacientes con PTI tenían valores relativos de linfocitos B aumentados y disminuidos los de linfocitos T. La transformación blástica inducida por PHA estaba disminuida al igual que la función supresora T-T inespecífica inducida por Con A. Se rencontró una correlación directa entre los recuentos plaquetarios y la función supresora (r=0,61, p<0,01). El nivel de IgG asociada a la membrana plaquetaria era más alto en aquellos pacientes con marcada depresión de la actividad supresora. Estos resultados no estaban relacionados a la edad y sexo de los pacientes ni al tratamiento o evaluación de la enfermedad

Alteraciones inmunologicas en pacientes con SIDA e individuos pertenecientes al grupo de alto riesgo en la Argentina / Immunologic changes in patients with AIDS and subjects from a group of high risk in Argentina

Se realizaron estudios inmunológicos en 10 pacientes con SIDA y 18 individuos homo o bixesuales pertenecientes a uno de los grupos principales de alto riesgo de SIDA (SAR), 6 de los cuales presentaban síntomas asociados al complejo SIDA (SAR-CL). La serología para HIV fue positiva en los pacientes con SIDA y en 2/12 SAR estudiados. La reactividad contra antígenos de la cápside viral (anti-VCA) del virus de Epstein-Barr fue similar a la de la población normal. Sólo se observaron títulos elevado de anti-citomegalovirus (anti-CMV) en pacientes con aislamiento viral positivo para CMV. En cuanto a la reactividad contra Toxoplasma gondii, un microorganismo encontrado con frecuencia en SAR y SIDA, los títulos de anticuerpos de clase IgG fueron muy superiores a los de la población control. En los pacientes con sida se observó: linfopenia con marcada depleción del compartimento CD4 positivo; descenso de la respuesta a fitohemaglutinina (PHA) y de la actividad NK; elevación del nivel de complejos inmunes circulantes (CIC) y de inmunoglobulina G sérica (IgG). En cuanto al grupo SAR, los 6 individuos con síntomas SAR-CL, también presentaron bajas respuestas a la PHA y niveles altos de IgG. Tanto en SAR con manifestaciones clínicas como en SAR con manifestaciones clínicas como en asintomáticos, SAR-SMC, la inversión de la relación CD4/CD8 se daba en base al incremento relativo de linfocitos CD8 positivos. Los niveles de CIC eran elevados en todos los grupos y la actividad NK de los SAR se mantuvo dentro de límites normales, pese al elevado número de células precursoras o potencialmente activas en citotoxicidad NK (Leu7+). Estos resultados coinciden con los publicados por autores de otros países y confirman que en la Argentina las características de presentación de la infección por HIV son similares a las de otros países occidentales

Hepatitis cronicas: su caracterización mediante auto anticuerpos, marcadores virales B y estudio funcional de las subpoblaciones linfocitarias / Chronic hepatits: its characterization by autoantibodies B virus markers and functional study of lymphocyte subpopulations

En este trabajo se describen las alteraciones clínicas e inmunológicas halladas en 51 pacientes con hepatitis crónica (HC): 15 pacientes (19,4%) con HBsAg+, 20 con auto anticuerpos (AAC) (39,2%) y 16 de origen desconocido (31,3%). Mediante estudios histológicos se encontró que la HC relacionada con el VHB (HCB) fue activa en el 40% de los casos, con colestasis moderada o ausente sin desarrollo de insuficiencia hepática (después de 42 semanas), la mortalidad fue del 6,6% y sólo un 6,6% requirió tratamiento con esteroides. Estos hallazgos contrastaron con los encontrados en HCA relacionada con AAC (ACI): predominancia de mujeres (85%), actividad (80%), colestasis (90%), insuficiencia hepática en el 35% de los pacientes, requiriéndose tratamiento con esteroides en el 65% de los casos; la mortalidad fue del 25%. La HC criptogenética predominó en los hombres con una alta incidencia de cirrosis (69%) e hipertensión portal, (62,5%), siendo esta última la causa principal de complicaciones y muerte (12,5%). La positividad de HBeAg se correlacionó estrechamente con los casos activos no cirróticos mientras el anti-e lo hizo con la cirrosis inactiva (100%). La única diferencia entre los pacientes HBsAG+ y los HBsAG- con anticuerpos contra VHB fue la evolución prolongada en estos últimos (101 vs 29 meses) sugiriendo la pérdida de HBsAg durante este lapso. El grupo de HCL se dividió en: a) grupo juvenil, edad promedio 16 años, constantemente activa, dependiente de esteroides y asociada con enfermedades autoinmunes (colitis ulcerosa, acidosis tubular renal), y b) grupo post-menopáusico, edad promedio 60,5 años, con una forma menos activa, lo que sugeriría una diátesis autoinmune gatillada por factores desconocidos...

Citotoxicidad inducida por el suero de pacientes con SIDA y alto riesgo de SIDA (SAR) contra células infectadas por el virus de Epstein-Barr / Cytotoxicity induced by serum of patients with AIDS and high risk of AIDS against infected cells by Epstein-Barr virus

En el suero de pacientes con síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) y sujetos de alto riesgo de SIDA (SAR), se estudió la relación entre la actividad de anticuerpos anti-VCA, la presencia de complejos inmunes circulantes (CIC) y la capacidad de inducir la citotoxicidad dependiente de anticuerpo (CDA) de linfocitos normales contra líneas celulares infectadas con EBV. Se observó que los sueros de estos pacientes indujeron la CDA de linfocitos mononucleares (LM) normales contra células linfoblastoideas infectadas con EBV (P3HRIK y Raji). El título de anti-VCA en los pacientes con SIDA y SAR no difirió del grupo control normal. El contenido de IgG sérica y el nivel de CIC precipitable con PEG-PEG-pp) fue superior al normal. No se encontró relación entre PEG-pp y el nivel de CIC determinado por fijación de C1q (C1q-F). La CDA está favorecida por la presencia de CIC que actúan como puente entre receptores Fc (RFc) de las células P3HRIK y Raji y los LM efectores. De esta manera factores presentes en el suero de pacientes con SIDA y SAR pueden cooperar con LM normales no sensibilizados en la destrucción de células infectadas por EBV a través de la CDA clásica y la CDA mediada por los puentes RFc-RFc