RESUMO
a raiva é uma das mais antigas e devastadoras doenças, tipicamente com um índice de mortalidade de 100% dos casos. O diagnóstico da raiva antemortem em humanos é importante para definir os procedimentos de controle da infecção e evitar maior exposição das equipes de saúde e de outras pessoas que podem ter tido contato com a saliva do paciente; para determinar epidemiologicamente seoutros indivíduos foram expostos à mesma fonte; para monitorar a progressão da doença, medianteintervenções terapêuticas experimentares; para evitar a infecção cruzada durante transplantes de órgãos e, caso negativa, para examinar outros diagnósticos diferenciais. A obtenção de quatro amostras é o recomendadopara testes antemortem de raiva em humanos (por meio da saliva, do soro, de biópsia de pele da nuca e do fluido cerebroespinhal), nos quais os anticorpos, os antígenos virais e os ácidos nucleicos são detectados empregando métodos de neutralização, imunofluorescência direta e indireta e transcrição reversa de PCR. O momento chave para obtenção de resultados conclusivos, nas quatro amostras analisadas por todas as técnicas, é aproximadamente de 24 a 48 horas. A PCR em tempo real parece ser umatécnica promissora para acelerar os resultados da detecção no ácido nucleico e quantificar, com maior precisão, as cargas virais nas amostras dos pacientes. Não existe, porém, primer ou probe universal que possa detectar a ampla diversidade dos lissavirus descrita até o momento, o que reduz drasticamente a sensibilidade do teste. O objetivo deste estudo foi traçar o desenho de um ensaio sensível e específico de PCR em tempo real capaz de detectar e quantificar uma ampla variedade dos vírus de raiva em amostras antemortem e postmortem em tecidos e fluidos corporais de humanos e animais. MÉTODOS: Mais de2.500 sequências completas de nucleoproteínas de RABV representativas de um espectro global devariantes obtidas das bases de dados do GenBank e do CDC foram analisadas para ...